藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

標(biāo) 準(zhǔn) 操 作 規(guī) 程標(biāo)標(biāo)題：藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程生效日期 年月日編號：SOP－QC－028－01新訂□編制：修訂□部門審核：頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部原文件號：QA審核：批準(zhǔn)：目的：建立一個藥品微生物限度檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。適用于本企業(yè)生產(chǎn)的所有品種，本企業(yè)所有潔凈生產(chǎn)潔凈工作室等。QC規(guī)程：000年版。種檢查方法QC無菌操作室的管理及使用制度見本文附錄一。2）的3破裂的包裝不得作為樣品，凡已能從藥品、瓶口（外蓋內(nèi)側(cè)及瓶口周圍）長霉、蟲蛀及變質(zhì)的藥品，可直接判為不合格，無需要再抽樣檢驗。供試品的保存：供試品在檢驗之前，應(yīng)保存在陰涼干燥處，以防供試品中的污染禁開啟，包裝已開啟的樣品不得作為供試品。檢查：波長。均勻狀態(tài)取樣。制成供試液后，應(yīng)6標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號.3℃，霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為1ml或為單位。.復(fù)檢菌數(shù)測定不合格者應(yīng)復(fù)檢，控制菌檢查以一次檢出為準(zhǔn)，不再復(fù)試，但應(yīng)保留檢出菌株一個月備查。測定次。復(fù)試報告，以3次測定結(jié)果的算術(shù)平均值報告。.檢驗報告1ml或為單位。測定菌數(shù)報告，以每次測定結(jié)果全部平均值報告。控制菌按檢驗結(jié)果報告，如未檢出控制菌時，報告為“按規(guī)定抽樣檢驗結(jié)果未檢出XX出XX菌，不符合藥品微生物限度標(biāo).培養(yǎng)基、試藥及稀釋劑的相關(guān)內(nèi)容見本文件附錄三。供試品的取樣及注意事項抽取兩瓶或兩盒以上的包裝單位，檢驗時每次應(yīng)分10g或。供試品在檢驗前微生物再繁殖，以免影響檢驗結(jié)果，凡已將原包裝啟開，則無代表性應(yīng)另取樣。供試品稀釋后須品應(yīng)作特殊處理后進(jìn)行檢驗。液體供試品：取供試90ml適量聚ft10g或10ml標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號作為供試液（固體、半固體或黏稠液供試品：稱取供100ml中，用ft并適當(dāng)加溫，但不應(yīng)超非水溶性供試品加入含溶化的無菌司803、聚ft801080m2。腸溶膠囊（片）1，置含無菌磷酸鹽緩沖液00m含抑菌成分的供試品照《中國藥00供試液。.對照用菌液000年版附錄。20。對照菌的加入量個。菌種短期保存法.檢查法檢查前的準(zhǔn)備：用具的洗滌與滅菌。試管：使用過的試管經(jīng)消毒后，將培養(yǎng)基倒出，用清潔液洗刷，用純化水沖洗4－5次，倒立，晾干備用。滅菌前，用棉塞塞上管口，牛皮紙包緊，扎緊。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號菌前，用牛皮紙將缽體和錘包裹。培養(yǎng)皿：使用過的培養(yǎng)皿經(jīng)消毒后，將培養(yǎng)基倒出，用清潔液洗涮，用水養(yǎng)皿，扎緊。將上述包好的用具，放0min生物限度檢查室定點位置，備用。m、l0m至無菌室內(nèi)3i。操作人員用肥皂洗手75%似者，若經(jīng)證實為生霉、長螨即可判定為不合格，無須繼續(xù)檢驗。細(xì)菌、霉菌、酵母菌計數(shù)。.檢查程序（如下列。.操作步驟供試液制備10制備。稀釋及取樣1ml吸管110（20供試液1m1cm處，測管壁注入裝9ml或1︰10，1︰200）的稀釋液。10（20供試液1m2~31ml吸管，按上述操作下一級的稀釋與吸取。注皿與干燥標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號（圖1）10均注入平皿培養(yǎng)基傾注入平皿5ml10基混勻后，置水平臺上待凝。培養(yǎng)基凝固后，使平板干燥，減少平板表面的水分，防止菌00計入培養(yǎng)時間。培養(yǎng)：將上

3~42菌落計數(shù)：

供試液用肉眼直接計數(shù)5~10倍放大鏡檢查漏。2212計數(shù)。

培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程菌落計數(shù)標(biāo) 題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號 頁次報告平板上有片狀菌落或花斑樣菌落蔓延生長以及平板受到污染當(dāng)同一稀釋級使22221515~2~2~4~15~16~17~1菌數(shù)報告規(guī)則間的稀釋級之間的稀釋級作為菌數(shù)計算的依據(jù)。若在1數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，為報告菌數(shù)。若有2值。2時，以兩級的菌落數(shù)均值為報告菌數(shù)；2時，以低稀釋級平均平板菌落乘以稀釋倍數(shù)為報告菌數(shù)。若有32算級間比值。2時，以兩級的菌落數(shù)均值為報告菌數(shù)；2時，以低稀釋平均平板菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為報告菌數(shù)00釋倍數(shù)為報告菌數(shù)，或適當(dāng)增中稀釋數(shù)，重作測定后報告結(jié)果。0~300030300的稀釋級平均平板菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)為報告菌數(shù)。0小時數(shù)為報告菌數(shù)，但若用原液為供試液10稀釋級與原液的平均平板菌落數(shù)相等或大于時，應(yīng)以培養(yǎng)基稀釋法測定。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號培養(yǎng)基稀釋法：取供試液（1100供試液31m5個平皿內(nèi)（2m5m3組數(shù)據(jù)，稀釋級平均菌落數(shù)小110原液供試品稀釋倍數(shù)原液供試品稀釋倍數(shù)—1-113651-2 1-3164 20值—菌落數(shù)16400報告數(shù)書寫113或16000—27602954637750313或38000—28902716027100213或27000—2392023527600213或28000—23619642—19600213或20000—不可計4650513—51300513或51000—不可計30512—30500313或30000—241912—240211或240277——270211或270—0600—6<10注：100個以內(nèi)時，按實測數(shù)書寫報告。1000空白對照平板有菌生長，表明培養(yǎng)基已被污染；10同一稀釋級的兩個平板上生長的菌落數(shù)菌落蔓延生覆蓋整個平板無法計數(shù)；出現(xiàn)以上情況，該次實驗數(shù)據(jù)不得計數(shù)報告。大腸桿菌檢查法；標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號檢驗程序（見附頁）.操作步驟標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號取膽鹽乳糖培養(yǎng)3100個作陽性對照318~24（4835mlMUG培養(yǎng)基管內(nèi)培養(yǎng)524MUG365n紫外光下觀察UGMUG管呈現(xiàn)熒光，MUGMUGMUG呈試劑本色為陰性。無菌生長，判未檢出大腸桿菌。供MG陽性，靛基質(zhì)陽性，判斷檢出大腸桿MG陰性，靛基質(zhì)陰性，判未檢出大腸桿菌。如MUG陽性、靛基質(zhì)陰性，MUG培養(yǎng)基培養(yǎng)物劃線于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂平板或麥康凱瓊脂18~2上述供試液培養(yǎng)物的分離平板無菌落生2~3V~枸櫞酸鹽利用試驗）及革蘭染色、鏡檢，按下表規(guī)定判斷結(jié)果。＋＋曙紅亞甲藍(lán)瓊脂IMVic結(jié)果檢出大腸桿菌－＋－－無菌生長未檢出大腸桿菌未檢出大腸桿菌＋－有菌生長－＋―①檢出大腸桿③－＋有菌生長＋＋―②檢出大腸桿③注：①、②如①出作試驗；③為革蘭氏陰性桿菌。寶靛基質(zhì)試養(yǎng)24陰性。甲基紅試驗培養(yǎng)48色為陽性，呈黃色為陰性。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號~:取可疑菌落或斜面培養(yǎng)物，接種于磷酸鹽葡2ml14枸櫞酸鹽得用試斜面上，一般培養(yǎng)48~7時為陽性，培養(yǎng)基顏色無改變?yōu)殛幮?。革蘭氏染色法、鏡檢：，與80ml混勻靜置48h后，加蒸餾水稀釋（蕃紅）染液：將沙黃10ml2~3次以固定涂片。滴加結(jié)晶紫梁液，染色數(shù)分鐘，水洗，滴加磺液媒染1秒，水洗，吸干，滴加沙黃復(fù)染液1陰性菌呈紅色?；铗龣z查法：筆、載玻片、蓋玻片、酒精燈、培養(yǎng)皿或小搪瓷盤（內(nèi)襯油水。mm以下，一般呈卵圓形或橢圓表、無頭胸、由25呈爪或鉗狀目及彼此長短比例和排列位置因種類而異。螨類與蜘蛛、昆蟲（見下表：標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程特征分類成螨（如腐食醋螨）蜘形綱、蜱螨目蜘蛛蛛形綱、蜘蛛目昆蟲（如書虱）昆蟲綱、嚙蟲目足443觸角無無1體段頭、胸、腹無界限頭、胸、腹無界限頭、胸、腹無界限標(biāo)題標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號直檢法：取供試品先用肉眼觀察，有無疑似活螨的白點或其它顏色的點狀物5，再用滴一滴甘油水的載玻片上，置顯微鏡下觀察。10和食鹽水至瓶口處（的顯微鏡下檢查。普法玻璃漏斗里的燈泡，6cm裝半杯甘油水，放在漏壯舉的下口處，收集爬出來的活螨?；铗训臋z驗方法：倍入大鏡或顯微意檢查活螨卵。3~8液中孵出幼螨，則判斷為檢出活螨卵。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)標(biāo)題藥品微生物限度檢驗方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部編號供試品檢驗報告在供試品中未檢出活螨，但檢出活螨卵時，可按檢出活螨處理。滴有17當(dāng)處理。發(fā)線針的制作10cm的小金屬棒一根度的一半緊貼在金屬棒的一端，用細(xì)棉線將其纏緊，然后粘上加拿大樹脂或油漆，晾干，即得。內(nèi)包裝材料中不易溶解的V，鋁箔等，取100c100ml無菌生理鹽水，浸泡后振搖，制得供試品溶液，照上述方法檢驗，1c100/10c10/10c及活螨。注：本文含有的附件有：無菌操作室的管理及使用制度、設(shè)備、儀器、人員及無菌操作室常用的消毒、滅菌方法、培養(yǎng)基、試藥及稀釋劑、藥品衛(wèi)生檢驗記錄、附錄一：無菌操作室的管理及使用制度拖鞋和消毒用的洗手盆和毛巾等，入室前應(yīng)嚴(yán)格洗手消毒，穿戴無菌衣帽、口罩、拖鞋。吸管筒、酒精和碘酒棉球等。無菌操作衣帽應(yīng)經(jīng)常熱壓滅菌。打開瓊脂平板培養(yǎng)基，放30483個以下。在無菌操作前后作室。冷卻后，方可使用或收還，吸取菌液時，嚴(yán)禁直接用口吸。附錄二：設(shè)備、儀器、人員及無菌操作室常用的消毒、滅菌方法1.常用消毒液的配制g用于擦拭工作臺面和手消毒。即得，用于手或地面的消毒。.75%乙醇棉球配制：取95%的乙醇原液78ml加水22ml混勻即得，而后將脫脂棉花球泡在內(nèi)。用于手的消毒。.2100ml952g械的消毒，注意此液要保存于棕色瓶中。2.玻璃器皿的洗滌2小時左右，濾盡酸液，用清水沖洗干凈，備用。2出傾出廢物，用洗潔精水刷洗，清水沖凈，烘干備用。粉水煮沸，洗凈，清水沖洗，蒸餾水2遍后，晾干備用。滅菌器具的準(zhǔn)備松緊應(yīng)適度防塵，變硬無彈性時應(yīng)重新更換。常規(guī)消毒滅菌法.將待滅菌器具置干燥箱內(nèi)，逐步加1162溫，方可取出，即可達(dá)到完全滅菌的目的。.濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌是采用高壓滅菌同1120b.12230分鐘。附錄三：培養(yǎng)基、試藥及稀釋劑培養(yǎng)基.培養(yǎng)基制備注意事項制備培養(yǎng)基時所用的各種玻璃器皿和分裝容器、棉塞等，皿。高壓滅菌時，應(yīng)將滅菌鍋內(nèi)的冷空氣全部排除后，鍋內(nèi)培養(yǎng)基達(dá)到100℃閉蒸汽閥，否則溫度不足，則滅菌不徹底。pHpHpHNaOHH可比最終要求的約高左右，滅菌后基本合適。3蒸餾水，加熱溶解，分裝，116℃20（蒸餾水，加熱溶解，分裝，116℃（數(shù)）.膽鹽乳糖培養(yǎng)基Bac，116℃0（用于大腸桿菌檢查）裝，116℃20（用于大腸桿菌檢查）.－甲基傘形酮葡萄培養(yǎng)蒸餾水，分裝，115℃0（用于大腸桿菌檢查）.M：取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)100m60℃m205ml及亞甲藍(lán)指示液－，搖勻，傾注平皿即）、水調(diào)節(jié)pH）、磷酸氫二鉀、葡萄、水混合，微溫使溶解，調(diào)pH，121℃，即得。.枸櫞酸鹽培養(yǎng)基5（無水211000mpH值使滅菌后為±15-202m）注：培養(yǎng)基(生物試劑)中國藥品生物制品檢定所生產(chǎn)。試液取供制備培養(yǎng)基用。.無菌對氨基苯甲酸試液取對氯基苯甲酸，加入10ml水的具塞試管中，121℃0供磺胺類藥物檢驗用。.氫氧化鉀試液供作.a－萘酚乙醇溶液取供作.靛基質(zhì)試液稀釋劑20滅菌20指示液得。mol/L～（）1藥品衛(wèi)生檢驗記錄標(biāo)準(zhǔn)號：方法號：編號：R-QC-037-01檢驗號：品名代 號規(guī)格數(shù) 量批號送檢單位檢驗日期年月日 報告日期年 月日檢驗依據(jù)紫外消毒時間時 分至 時分細(xì)菌總數(shù)： 取樣量：取樣品10g加入100ml稀釋液中，每一濃度吸10ml名稱 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 30~35℃培養(yǎng)時批號

48h+2h稀釋倍數(shù)碟號1碟號2平均菌落數(shù)

10-1

10-2 10-3

判定總數(shù)：霉菌總： 取樣量：取樣品10g加入100ml稀釋液中，每一濃度吸1ml。培養(yǎng)基稀釋倍數(shù)碟號1碟號2平均菌落數(shù)

名稱批號10-1

虎紅瓊脂培養(yǎng)基10-2

10-3

培養(yǎng)溫度25~28℃培養(yǎng)時間陰性對照