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植物染色體組型分析一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)和掌握核型分析的方法。2.進(jìn)一步了解染色體形態(tài)特征、在細(xì)胞分裂中的聯(lián)會(huì)形象以及染色體組、核型及染色體數(shù)目、結(jié)構(gòu)變異與生物進(jìn)化的關(guān)系。二、實(shí)驗(yàn)原理
因?yàn)楹诵头治瞿苊鞔_識(shí)別各個(gè)染色體的特征,通過(guò)核型分析可以了解不同物種、同一物種不同亞種、或不同品種甚至同一品種不同個(gè)體之間染色體結(jié)構(gòu)的差異,有助于基因定位及其它遺傳分析。三、實(shí)驗(yàn)材料蠶豆(2n=2x=12)根尖有絲分裂中期照片四、實(shí)驗(yàn)器具、試劑不銹鋼尺,小剪刀,小鑷子,繪圖紙,粘劑,座標(biāo)紙等。五、實(shí)驗(yàn)方法1.準(zhǔn)備染色體標(biāo)本的相片
將制作的細(xì)胞輪廓清楚,染色體集中而不重疊,主、次縊痕和隨體清晰,染色體長(zhǎng)度適中而不彎曲的染色體標(biāo)本,通過(guò)顯微攝影(或描繪)、沖洗、放大成染色體相片。2.染色體測(cè)量
目測(cè)相片上每條染色體長(zhǎng)度,按長(zhǎng)短順序初步編號(hào),寫(xiě)在每條染色體相片背面,用鋼尺逐個(gè)測(cè)量每條染色體長(zhǎng)度(總長(zhǎng)、長(zhǎng)臂長(zhǎng)、短臂長(zhǎng)),換算出各條染色體的相對(duì)長(zhǎng)度、臂比及著絲粒位置,有隨體的染色體,其隨體長(zhǎng)度和次縊痕長(zhǎng)度可計(jì)入全長(zhǎng),也可不計(jì)入,但必須加以說(shuō)明。將測(cè)量和計(jì)算的數(shù)據(jù)分別記錄如表1-1和表1-2。臂比值著絲點(diǎn)位置表示符號(hào)1.00正中部著絲點(diǎn)M1.01~1.70中部著絲點(diǎn)區(qū)m1.71~3.0亞中部著絲點(diǎn)區(qū)sm3.01~7.00亞端部著絲點(diǎn)區(qū)st7.01~∞端部著絲點(diǎn)區(qū)t∞端部著絲點(diǎn)T染色體臂比值、著絲點(diǎn)位置與染色體類型序號(hào)(條)實(shí)測(cè)長(zhǎng)度mm序號(hào)(條)實(shí)測(cè)長(zhǎng)度mm長(zhǎng)臂短臂臂比長(zhǎng)臂短臂臂比123456789101112表1-1核型分析實(shí)測(cè)記錄表表1-2核型分析計(jì)算表序號(hào)(條)實(shí)測(cè)長(zhǎng)度(mm)相對(duì)長(zhǎng)度(%)臂比染色體類型長(zhǎng)臂短臂全長(zhǎng)長(zhǎng)臂短臂全長(zhǎng)123456789101112總和3.
配對(duì);剪下每條染色體,根據(jù)隨體有無(wú)及大小、臂比是否相等、染色體長(zhǎng)度是否相等來(lái)配對(duì)。
4.
排列:染色體長(zhǎng)的在前;帶有隨體的染色體排在最后(大隨體在前、小隨體在后)。
5.
剪貼:將上述已經(jīng)排列的同源染色體按先后順序粘貼在實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙上。粘貼時(shí),應(yīng)使著絲點(diǎn)處于同一水平線上,并一律短臂在上、長(zhǎng)臂在下,構(gòu)成核型圖。1.
6.繪制核型模式圖
根據(jù)前面的計(jì)算結(jié)果和排列的核型圖,用繪圖紙和座標(biāo)紙(座標(biāo)紙放在繪圖紙下面)繪制核型模式圖。橫座標(biāo)為染色體序號(hào),縱座標(biāo)為染色體(臂)的相對(duì)長(zhǎng)度,“0”為長(zhǎng)、短臂的分界線,長(zhǎng)臂在下,短臂在上。按短臂長(zhǎng)度從長(zhǎng)到短排列。7.分類:依據(jù)下表:1.
臂比(長(zhǎng)臂/短臂)形態(tài)特征1-1.
71.71-3.03.01-7.0>7.01m中著絲粒染色體sm近中著絲粒染色體st近端著絲粒染色體t端著絲粒染色體六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)
對(duì)染色體圖片進(jìn)行測(cè)量及核型
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