標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 31793-2015 油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn),主要針對油菜莖基潰瘍病菌(Leptosphaeria maculans)的檢測與鑒定提供指導(dǎo)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出口植物及其產(chǎn)品的檢驗檢疫、科研單位以及相關(guān)機構(gòu)對油菜莖基潰瘍病菌進(jìn)行的實驗室檢測工作。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容,首先明確了適用范圍,并介紹了所需材料和試劑,包括但不限于病害樣本采集工具、培養(yǎng)基等實驗用品。接著詳細(xì)描述了樣品處理步驟,如如何正確地從疑似感染植株上采取樣本,以及如何制備適合后續(xù)分析使用的樣本。
對于病原菌的分離與純化過程,標(biāo)準(zhǔn)給出了具體的操作指南,涵蓋了接種方法、培養(yǎng)條件及觀察時間等關(guān)鍵點。此外,還列舉了幾種有效的病原菌鑒定技術(shù),比如形態(tài)學(xué)特征識別、分子生物學(xué)手段(PCR擴增特定DNA片段)等,以確保能夠準(zhǔn)確無誤地鑒別出目標(biāo)病原體。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2015-07-03 頒布
- 2015-11-27 實施



文檔簡介
ICS65020010
B16..
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T31793—2015
油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofLeptosphaeriamaculansFuckelCes.etDeNot.
()
2015-07-03發(fā)布2015-11-27實施
中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T31793—2015
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國檢驗檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局
:、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人吳品珊易建平周國梁杜洪忠
:、、、。
Ⅰ
GB/T31793—2015
油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了油菜莖基潰瘍病菌的檢疫鑒定方法
。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于油菜和油菜莖基潰瘍病菌其他十字花科寄主種子和植株中油菜莖基潰瘍病菌的檢疫
和鑒定
。
2儀器和用具
21儀器
.
電子天平感量生物顯微鏡體視顯微鏡高速冷凍離心機純水儀超凈工作臺高壓滅菌
(0.01g)、、、、、、
鍋制冰機儀凝膠成像系統(tǒng)電泳儀實時熒光儀培養(yǎng)箱冰箱
、、PCR、、、PCR、、。
22用具
.
燒杯三角瓶量筒培養(yǎng)皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片研缽移液器移
、、、、、、、、、、、、、
液器吸頭離心管液氮罐孔徑和的網(wǎng)篩
、、、2.5mm1.5mm。
3試劑和培養(yǎng)基
31試劑
.
次氯酸鈉瓊脂粉馬鈴薯葡萄糖乳酸瓊脂糖無菌雙蒸水液氮蛋白胨磷酸二
1.0%(NaClO),,,,,,,,,
氫鉀硫酸鎂鏈霉素新霉素五氯硝基苯氯四環(huán)素利福平
,,,,,,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,
無水乙醇苯酚溴化乙錠三氯甲烷
NaOAc,KCl,Tris,CTAB,TAE,(ethanol),(phenol),(EB),(chloro-
異丙醇異戊醇蛋白酶Taq聚合酶相對
form),(isopropanol),(isoamylalcohol),K,DNA,dNTP,DNA
分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物特異性引物和實時熒光特異性引物及探針
,PCRPCR。
32培養(yǎng)基
.
馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基酸性馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基具體配方參見附錄
(PDA),(APDA)。A。
4檢疫鑒定方法
41種子檢測
.
未帶有種衣劑的種子解剖鏡下挑取皺縮干癟變色畸形殘缺或有霉變的種子帶有種
,、、、、1g~2g;
衣劑的種子先用自來水浸泡洗去種衣劑或用紗布包裹浸泡搓洗種子自來水沖洗去種衣劑待風(fēng)干后
,,,,
挑取異常種子做分離培養(yǎng)
,。
商用油菜籽樣品取用孔徑和的網(wǎng)篩過篩孔徑篩上物多為豆莢和
1kg,2.5mm1.5mm,2.5mm
莖等植株殘體孔徑篩下物多為碎屑和細(xì)小油菜籽篩上物和篩下物混勻后取制
,1.5mm。,
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