基因工程的原理及技術(shù)終稿

策劃：漢水丑生組織：漢水丑生、飛鴻翼、掌上的沙、暖風(fēng)、handsome、足教、一哲2007-2012六年高考題知識(shí)點(diǎn)分類匯編漢水丑生群大型活動(dòng)之三【新】漢水丑生（侯偉新疆烏魯木齊新世紀(jì)外國(guó)語(yǔ)學(xué)校）組織者：【川】飛鴻翼（洪翼四川省瀘州市納溪中學(xué)）【魯】暖風(fēng)（王文芳山東省陽(yáng)谷第三中學(xué)）

【魯】掌上的沙（袁慶軍山東鄆城高級(jí)中學(xué)）【渝】足教（王永洪重慶市大足中學(xué)）

【粵】handsome（賀海生廣東汕尾陸豐龍山中學(xué)）【陜】一哲（楊明輝陜西寶雞市天王高中）基因工程的原理及技術(shù)魯【夢(mèng)】（孟祥偉山東昌樂及第中學(xué)）（2012山東）35、（8分）【生物—現(xiàn)代生物科技專題】毛角蛋白II型中間絲（KIFII）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFII基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖（1）過程①中最常用的運(yùn)載工具是________，所需要的酶是限制酶和_____________。（2）在過程②中，用________________________

處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中，將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是________________。質(zhì)粒DNA連接酶胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）維持培養(yǎng)基（液）的PH“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）在過程③中，用______________________處理以獲得更多的卵（母）細(xì)胞。成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行_______處理。（4）從重組細(xì)胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術(shù)是______________。在胚胎移植前，通過____________技術(shù)可獲得較多胚胎。促性腺激素（或促濾泡素，孕馬血清）；

去核(早期)胚胎培養(yǎng)胚胎分割“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥渴炀氄莆栈蚬こ毯团咛スこ痰幕局R(shí)就能解答本題.（1）運(yùn)載工具（體）包括質(zhì)粒、噬菌體衍生物及動(dòng)植物病毒,其中質(zhì)粒是主要運(yùn)載體;所需工具酶是限制酶和DNA連接酶。（2）分散皮膚組織塊成單個(gè)細(xì)胞使用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定。（3）要得到更多的卵（母）細(xì)胞需用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理；成熟卵（母）細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要了來(lái)自供體核。（4）把重組細(xì)胞培養(yǎng)到早期胚胎叫早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎。（2012天津）7.（13分）生物分子間的特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體”獲得DNA片段信息的過程圖。據(jù)圖回答：（1）過程①酶作用的部位是_____________鍵，此過程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)DNA，過程②酶作用的部位是___________鍵。（2）①、②兩過程利用了酶的__________特性?！窘馕觥浚?）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯鍵，蛋白酶作用的部位是肽鍵。（2）①②過程利用了各種酶催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)的特性，即專一性。肽鍵磷酸二酯鍵專一“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）若將得到的DNA片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要過程③的測(cè)序結(jié)果與__________________酶的識(shí)別序列進(jìn)行對(duì)比，以確定選用何種酶。（4）如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為RNA酶聚合，則其識(shí)別、結(jié)合DNA序列位基因的_________________________?！窘馕觥浚?）DNA要構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割，再與質(zhì)粒重組。（4）RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合在基因的啟動(dòng)子上，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。啟動(dòng)子（或轉(zhuǎn)錄起始區(qū)）限制性核酸內(nèi)切酶“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）蛋白酶能特異性的酶解蛋白質(zhì)，分子雜交手段也是利用各物質(zhì)分子結(jié)合的特異性，抑制成熟基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA與催化成熟酶基因的mRNA堿基互補(bǔ)結(jié)合，也具有特異性，光和色素易溶于有機(jī)溶劑，與酒精并不是特異性的溶解，所以選ACD。（5）以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有（多選）A.分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提取rRNAB.用無(wú)水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素C．通過分子雜交手段，用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位D．將抑制成熟基因?qū)敕?，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合，終止后者翻譯，延遲果實(shí)成熟。ACD（2012天津）8.（20分）黃曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達(dá)AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。(1)AFB1屬于________類致癌因子。(2)AFB1能結(jié)合在DNA的G上．使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚'，在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為，經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)開_____________?；瘜W(xué)

【解析】】黃曲霉霉毒素B1（AFB1）存在于于被黃曲曲霉菌污污染的飼飼料中，，它可以以通過食食物鏈進(jìn)進(jìn)入動(dòng)物物體內(nèi)并并蓄積，，引起瘤瘤變。某某些微生生物能表表達(dá)AFB1解毒酶．．將該酶酶添加在在飼料中中可以降降解AFB1，清除其其毒性。。(1)黃曲霉毒毒素B1（AFB1）是化學(xué)學(xué)物質(zhì)，，AFB1屬于化學(xué)學(xué)類致癌癌因子。。(2)AFB1能結(jié)合在在DNA的G上．使該該位點(diǎn)受受損傷變變?yōu)镚‘，在DNA復(fù)制中，，G’會(huì)與A配對(duì)。現(xiàn)現(xiàn)有受損損傷部位位的序列列為經(jīng)兩次復(fù)復(fù)制后，，該序列列突變?yōu)闉?3）下圖為為采用基基因工程程技術(shù)生生產(chǎn)AFB1解毒酶的的流程圖圖據(jù)圖回答答問題：：①在甲甲、乙條條件下培培養(yǎng)含AFB1解毒酶基基因的菌菌株．經(jīng)經(jīng)測(cè)定．．甲菌液液細(xì)胞密密度小、、細(xì)胞含含解毒酶酶：乙菌菌液細(xì)胞胞密度大大、細(xì)胞胞不含解解毒酶．．過程l應(yīng)選擇____________菌液的細(xì)細(xì)胞提取取總RNA，理由是是___________________________________________________________________________________________________________________②過程程Ⅱ中，根據(jù)據(jù)圖示，，可以看看出與引引物結(jié)合合的模版版是________________________________________③檢測(cè)測(cè)酵母菌菌工程菌菌是否合合成了AFB1解毒酶，，應(yīng)采用用_____________________方法。甲甲菌液細(xì)細(xì)胞的AFB1基因的表表達(dá)已轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄形成成mRNA，而在已已菌夜細(xì)細(xì)胞中該該基因未未轉(zhuǎn)錄AFB1解毒酶基基因的cDNA抗原-抗體雜交交“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）①在在甲、乙乙條件下下培養(yǎng)含含AFB1解毒酶基基因的菌菌株．經(jīng)經(jīng)測(cè)定．．甲菌液液細(xì)胞密密度小、、細(xì)胞含含解毒酶酶：乙菌菌液細(xì)胞胞密度大大、細(xì)胞胞不含解解毒酶．．過程l應(yīng)選擇擇甲菌菌液的的細(xì)胞胞提取取總RNA，理由由是因因?yàn)榧准拙阂杭?xì)胞胞含解解毒酶酶，意意味著著完成成了基基因的的表達(dá)達(dá)，所所以應(yīng)應(yīng)選擇擇甲菌菌液的的細(xì)胞胞提取取總RNA②過程Ⅱ中，根根據(jù)圖圖示，，可以以看出出與引引物結(jié)結(jié)合的的模版版是cDNA.③檢測(cè)酵酵母菌菌工程程菌是是否合合成了了AFB1解毒酶酶，檢檢測(cè)對(duì)對(duì)象為為蛋白白質(zhì)，，應(yīng)采采用抗抗原-抗體雜雜交方方法。。(4）選取取不含含AFB1的飼料料和某某種實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物為為材料料，探探究該該AFB1解毒酶酶在飼飼料中中的解解毒效效果。。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)設(shè)計(jì)計(jì)及測(cè)測(cè)定結(jié)結(jié)果見見下表表：[來(lái)源:中國(guó)教教育出出版網(wǎng)網(wǎng)]據(jù)表回回答問問題：：①本本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)的兩兩個(gè)自自變量量，分分別為為________________________。②本本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)中．．反映映AFB1解毒酶酶的解解毒效效果的的對(duì)照照組是_________________。③經(jīng)經(jīng)測(cè)定定，某某污染染飼料料中AFB1含量為為100μg/kg，則每每千克克飼料料應(yīng)添添加______克AFB1解毒酶酶．解解毒效效果最最好．．同時(shí)時(shí)節(jié)的的了成成本。。AFB1的添加加量和和AFB1解毒酶酶的添添加量量B組（或或B組+A組）5“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）①本本實(shí)實(shí)驗(yàn)的的兩個(gè)個(gè)自變變量，，分別別為AFB1的有無(wú)無(wú)和AFB1解毒酶酶的含含量。。②本本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)中．．反映映AFB1解毒酶酶的解解毒效效果的的對(duì)照照組是是B組。③經(jīng)經(jīng)測(cè)定定，某某污染染飼料料中AFB1含量為為100μg/kg，則每每千克克飼料料應(yīng)添添加5克AFB1解毒酶酶．AFB1的殘留留量最最少，，解毒毒效果果最好好．繼繼續(xù)添添加AFB1解毒酶酶解解解毒效效果不不變，，因此此節(jié)約約了成成本。。（5）采用用蛋白白質(zhì)工工程進(jìn)進(jìn)一步步改造造該酶酶的基基本途途徑是是：從從提高高每的的活性性出發(fā)發(fā)，設(shè)設(shè)計(jì)預(yù)預(yù)期的的蛋白白質(zhì)結(jié)結(jié)構(gòu)，，推測(cè)測(cè)應(yīng)有有的氨氨基酸酸序列列，找找到相相對(duì)應(yīng)應(yīng)的___________________?！窘馕觥浚?）采用用蛋白白質(zhì)工工程進(jìn)進(jìn)一步步改造造該酶酶的基基本途途徑是是：從從提高高酶的的活性性出發(fā)發(fā)，設(shè)設(shè)計(jì)預(yù)預(yù)期的的蛋白白質(zhì)結(jié)結(jié)構(gòu)，，推測(cè)測(cè)應(yīng)有有的氨氨基酸酸序列列，找找到相相對(duì)應(yīng)應(yīng)的脫脫氧核核苷酸酸序列列。脫氧核核苷酸酸序列列（2012浙江））6.天然的的玫瑰瑰沒有有藍(lán)色色花，，這是是由于于缺少少控制制藍(lán)色色色素素合成成的基基因B，而開藍(lán)色色花的矮牽牽牛中存在在序列已知知的基因B?，F(xiàn)用基因因工程技術(shù)術(shù)培育藍(lán)玫玫瑰，下列列操作正確確的是()A.提取矮牽牛牛藍(lán)色花的的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄錄獲得互補(bǔ)補(bǔ)的DNA，再擴(kuò)增基基因BB.利用限制性性核酸內(nèi)切切酶從開藍(lán)藍(lán)色花矮牽牽牛的基因因文庫(kù)中獲獲取基因BC.利用DNA聚合酶將基基因B與質(zhì)粒連接接后導(dǎo)入玫玫瑰細(xì)胞D.將基因B直接導(dǎo)入大大腸桿菌，，然后感染染并轉(zhuǎn)入玫玫瑰細(xì)胞A【解析】提提取矮牽牛牛藍(lán)色花的的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄得得到DNA，然后擴(kuò)增增，可獲得得大量的基基因B，A正確；從基基因文庫(kù)中中獲取目的的基因，只只要根據(jù)目目的基因的的相關(guān)信息息和基因文文庫(kù)中的信信息進(jìn)行篩篩選對(duì)比即即可，不需需要用限制制酶進(jìn)行切切割，B錯(cuò)誤；目的的基因與質(zhì)質(zhì)粒的連接接需要用DNA連接酶，而而不是DNA聚合酶，C錯(cuò)誤；目的的基因需要要和運(yùn)載體體連接后形形成重組質(zhì)質(zhì)粒再導(dǎo)入入，而且應(yīng)應(yīng)該用農(nóng)桿桿菌進(jìn)行感感染，而不不是大腸桿桿菌，D錯(cuò)誤。（2012新課標(biāo)卷））40、[生物—選修3現(xiàn)代生物科科技專題]（15分）根據(jù)基因工工程的有關(guān)關(guān)知識(shí)，回回答下列問問題：（1）限制性內(nèi)內(nèi)切酶切割割ＤＮＡ分分子后產(chǎn)生生的片段，，其末端類類型有和。黏性末端平末端（2）質(zhì)粒運(yùn)載載體用EcoRⅠⅠ切割后產(chǎn)生生的片段如如下：為使運(yùn)載體體與目的基基因相連，，含有目的的基因的DNA除可用EcoRⅠⅠ切割外，還還可用另一一種限制性性內(nèi)切酶切切割，該酶酶必須具有有的特點(diǎn)是是。切割產(chǎn)生的的DNA片段末端與與EcoRⅠⅠ切割產(chǎn)生的的相同（3）按其來(lái)源源不同，基基因工程中中所使用的的DNA連接酶有兩兩類，即DNA連接酶和DNA連接酶。大腸桿菌T4（5）基因工程程中除質(zhì)粒粒外，和也可作為運(yùn)運(yùn)載體。（4）反轉(zhuǎn)錄作作用的模板板是，產(chǎn)物是。若要在體外外獲得大量量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)產(chǎn)物，常采采用技術(shù)。（6）若用重組組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化化大腸桿菌菌，一般情情況下，不不能直接用用未處理的的大腸桿菌菌作為受體體細(xì)胞，原原因是mRNA（或RNA）cDNA（或DNA）噬菌體未處理的大大腸桿菌吸吸收質(zhì)粒（（外源DNA）的能力極極弱PCR動(dòng)植物病毒毒等(六)回答答下列有關(guān)關(guān)遺傳信息息傳遞和表表達(dá)的問題題。(10分)（2012上海）55．如圖圖18所示示，若用兩兩種識(shí)別切切割序列完完全不同的的限制酶E和F從基基因組DNA上切下下目的基因因，并將之之取代質(zhì)粒粒pZHZ1(3.7kb，，1kb=1000對(duì)堿基)上相應(yīng)的的E-F區(qū)區(qū)域(0.2kb)，那么么所形成的的重組質(zhì)粒粒pZHZ2_______。

A．．既能被E也能被F切開B．．能被E但但不能被F切開C．既不能能被E也不不能被F切切開D．能能被F但不不能被E切切開A“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。【解析】用限制酶從從基因組DNA上切切下目的基基因，并取取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對(duì)對(duì)堿基)上上相應(yīng)的E-F區(qū)域域(0.2kb)，用DNA連接酶酶連接后形形成重組質(zhì)質(zhì)粒，則在在重組質(zhì)粒粒中仍然含含有限制酶酶E和限制制酶F的切切割位點(diǎn)，，形成的重重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故故本題選A?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012上海）56．已知知在質(zhì)粒pZHZl中，限制制酶G切割割位點(diǎn)距限限制酶E切切割位點(diǎn)0．8kb，限制酶酶H切割位位點(diǎn)距限制制酶F切割割位點(diǎn)O．．5kb。。若分別用用限制酶G和H酶切切兩份重組組質(zhì)粒pZHZ2樣樣品，據(jù)據(jù)表4所列列酶切結(jié)果果判斷目的的基因的大大小為kb；并將將目的基因因內(nèi)部的限限制酶G和和H切割位位點(diǎn)標(biāo)注在在圖19中中。1.2【解析】根據(jù)題中信信息，原來(lái)來(lái)質(zhì)粒長(zhǎng)度度為3.7kb切去去EF之間間的還有3.5kb，插入目目的基因后后構(gòu)成重組組質(zhì)粒，重重組質(zhì)粒長(zhǎng)長(zhǎng)度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，，可推導(dǎo)出出目的基因因長(zhǎng)度為1.2kb。重組質(zhì)質(zhì)粒中G的的切割位點(diǎn)點(diǎn)距E的切切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用用限制酶G切割后產(chǎn)產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片片段，說(shuō)明明在重組質(zhì)質(zhì)粒中除了了圖中標(biāo)示示出來(lái)的G酶識(shí)別位位點(diǎn)外，還還有一個(gè)G酶識(shí)別位位點(diǎn)；H的的酶切位點(diǎn)點(diǎn)距F0.5kb，，用H單獨(dú)獨(dú)酶切產(chǎn)生生1.2kb和3.5kb兩兩種片段，，說(shuō)明在重重組質(zhì)粒中中含有另外外一個(gè)H的的酶切位點(diǎn)點(diǎn)，根據(jù)題題中信息提提示“將目目的基因內(nèi)內(nèi)部的限制制酶G和H的識(shí)別位位點(diǎn)標(biāo)注在在圖19中中”，可確確定在EF之間分別別含有G和和H的一個(gè)個(gè)識(shí)別位點(diǎn)點(diǎn)?？蓴喽ǘ℅的識(shí)別別位點(diǎn)，在在舉例E點(diǎn)點(diǎn)右側(cè)0.8kb處處，H的識(shí)識(shí)別位點(diǎn)在在距F左側(cè)側(cè)0.7kb處。（2012上海）57．若想想在山羊的的乳汁中收收獲上述目目的基因的的表達(dá)產(chǎn)物物，則需將將重組質(zhì)粒粒pZHZ2導(dǎo)入至至山羊的______細(xì)胞中。若若pZHZ2進(jìn)入細(xì)細(xì)胞后插入入在一條染染色體DNA上，那那么獲得轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因純合合子山羊的的方式是。受精卵【解析】將目的基因因?qū)雱?dòng)物物細(xì)胞中，，通常以受受精卵作為為受體細(xì)胞胞，當(dāng)受精精卵發(fā)育成成山羊后，，在雌性山山羊的乳汁汁中可以提提取到目的的基因的表表達(dá)產(chǎn)物。。重組質(zhì)粒粒插入在一一條染色體體DNA上上，可通過過雌雄轉(zhuǎn)基基因山羊雜雜交的方法法來(lái)獲取轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因純合合子山羊。。轉(zhuǎn)基因山羊羊間交配“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012廣東）28．（16分）子葉葉黃色（Y，野生型型）和綠色色（y，突突變型）是是孟德爾研研究的豌豆豆相對(duì)性狀狀之一。野野生型豌豆豆成熟后，，子葉由綠綠色變?yōu)辄S黃色。(1)在黑黑暗條件下下，野生型型和突變型型豌豆的葉葉片總?cè)~綠綠素含量的的變化見圖圖10。其其中，反映映突變型豌豌豆葉片總總?cè)~綠素含含量變化的的曲線是______。A（2）Y基因和y基因的翻譯產(chǎn)物分別別是SGRY蛋白和SGRy蛋白，其部部分氨基酸序列見見圖11。據(jù)圖11推測(cè)，Y基因突變?yōu)闉閥基因的原因因是發(fā)生了了堿基對(duì)的的_____和_______。進(jìn)一步研研究發(fā)現(xiàn)，，SGRY蛋白和SGRy蛋白都能進(jìn)進(jìn)入葉綠體體?？赏茰y(cè)測(cè)，位點(diǎn)_______的突變導(dǎo)致了了該蛋白的功功能異常，從從而使該蛋白白調(diào)控葉綠素素降解的能力力減弱，最終終使突變型豌豌豆子葉和葉葉片維持“常常綠”。（2012廣東）28．．（16分））子葉黃色（（Y，野生型型）和綠色（（y，突變型型）是孟德爾爾研究的豌豆豆相對(duì)性狀之之一。野生型型豌豆成熟后后，子葉由綠綠色變?yōu)辄S色色。替換增加③“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（3）水稻Y基因發(fā)生突變變，也出現(xiàn)了了類似的“常常綠”突變植植株y2，其葉片衰老老后仍為綠色色。為驗(yàn)證水水稻Y基因的功能，，設(shè)計(jì)了以下下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完完善。（一）培育轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植株：：Ⅰ．植株甲：用用含有空載體體的農(nóng)桿菌感感染__________的細(xì)胞，培育育并獲得純合合植株。Ⅱ．植株乙：______________________________，培育并獲得得含有目的基基因的純合植植株。（2012廣東）28．（16分）子葉黃黃色（Y，野野生型）和綠綠色（y，突突變型）是孟孟德爾研究的的豌豆相對(duì)性性狀之一。野野生型豌豆成成熟后，子葉葉由綠色變?yōu)闉辄S色。突變植株y2用含有Y基因因的農(nóng)桿菌感感染純合突變變植株y2（3）水稻Y基因發(fā)生突變變，也出現(xiàn)了了類似的“常常綠”突變植植株y2，其葉片衰老老后仍為綠色色。為驗(yàn)證水水稻Y基因的功能，，設(shè)計(jì)了以下下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完完善。（二）預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植株的的表現(xiàn)型：植株甲：________維持“常綠””；植株乙：________________。（三）推測(cè)結(jié)結(jié)論：__________________________。（2012廣東）28．．（16分））子葉黃色（（Y，野生型型）和綠色（（y，突變型型）是孟德爾爾研究的豌豆豆相對(duì)性狀之之一。野生型型豌豆成熟后后，子葉由綠綠色變?yōu)辄S色色。能不能維持“常常綠”Y基因能使子子葉由綠色變變?yōu)辄S色【解析】（1）根據(jù)題題干所給信息息“野生型豌豌豆成熟后，，子葉由綠色色變?yōu)辄S色””，可推測(cè)出出野生型豌豆豆成熟后，子子葉發(fā)育成的的葉片中葉綠綠素含量降低低。分析圖10，B從第第六天開始總總?cè)~綠素含量量明顯下降，，因此B代表表野生型豌豆豆，A為突變變型豌豆。（2）根據(jù)圖圖11可以看看出，突變型型的SGRy蛋白和野生生型的SGRY有3處變變異，①處氨氨基酸由T變變成S，②處處氨基酸由N變成K，可可以確定是基基因相應(yīng)的堿堿基對(duì)發(fā)生了了替換，③處處多了一個(gè)氨氨基酸，所以以可以確定是是發(fā)生了堿基基對(duì)的增添；；從圖11中中可以看出SGRY蛋白白的第12和和38個(gè)氨基基酸所在的區(qū)區(qū)域的功能是是引導(dǎo)該蛋白白進(jìn)入葉綠體體，根據(jù)題意意，SGRy和SGRY都能進(jìn)入葉葉綠體，說(shuō)明明①、②處的的變異沒有改改變其功能；；所以突變型型的SGRy蛋白功能的的改變就是由由③處變異引引起的?！窘馕觥浚?）本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)通過具體情情境考查對(duì)照照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能能力。欲通過過轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)驗(yàn)證Y基因因“能使子葉葉由綠色變?yōu)闉辄S色”的功功能，首先應(yīng)應(yīng)培育純合的的常綠突變植植株y2，然然后用含有Y基因的農(nóng)桿桿菌感染純合合的常綠突變變植株y2，，培育出含有有目的基因的的純合植株觀觀察其葉片顏顏色變化。為為了排除農(nóng)桿桿菌感染對(duì)植植株的影響，，應(yīng)用含有空空載體的農(nóng)桿桿菌感染常綠綠突變植株y2作為對(duì)照照。（2012江蘇）32.（9分）圖1表示含有目的的基因D的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和和部分堿基序序列，圖2表示一種質(zhì)粒粒的結(jié)構(gòu)和部部分堿基序列列?，F(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸酸內(nèi)切酶，它它們識(shí)別的堿堿基序列和酶酶切位點(diǎn)分別別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請(qǐng)回答下列列問題(1)圖1的一條脫氧核核苷酸鏈中相相鄰兩個(gè)堿基基之間依次由由連接。(2)若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的的末端是末端，其產(chǎn)物物長(zhǎng)度為。脫氧核糖、磷磷酸、脫氧核核糖平537bp、790bp、661bp“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012江蘇）32.（9分）圖1表示含有目的的基因D的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和和部分堿基序序列，圖2表示一種質(zhì)粒粒的結(jié)構(gòu)和部部分堿基序列列。現(xiàn)有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸酸內(nèi)切酶，它它們識(shí)別的堿堿基序列和酶酶切位點(diǎn)分別別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請(qǐng)回答下列列問題(3)若圖1中虛線方框內(nèi)內(nèi)的堿基對(duì)被被T-A堿基對(duì)替換，，那么基因D就突變?yōu)榛蛞騞。從雜合子中中分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制制酶SmaI完全切割，產(chǎn)產(chǎn)物中共有種不同長(zhǎng)度的的DNA片段。4“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的的基因D通過同種限制制酶處理后進(jìn)進(jìn)行連接，形形成重組質(zhì)粒粒，那么應(yīng)選選用的限制酶酶是。在導(dǎo)入重組組質(zhì)粒后，為為了篩選出含含重組質(zhì)粒的的大腸桿菌，，一般需要用用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行行培養(yǎng)。經(jīng)檢檢測(cè)，部分含含有重組質(zhì)粒粒的大腸桿菌菌菌株中目的的基因D不能正確表達(dá)達(dá)，其最可能能的原因是。BamHI抗生素B同種限制酶切切割形成的末末端相同，部部分目的基因因D與質(zhì)粒反向鏈鏈接【解析】（1）DNA單鏈中相鄰兩兩個(gè)堿基之間間通過“脫氧氧核糖—磷酸—脫氧核糖”連連接。（2）SmaI識(shí)別的序列為為GGGCCC，切割后會(huì)產(chǎn)產(chǎn)生平末端；；圖1所示的DNA分子中含有兩兩個(gè)SmaI的識(shí)別位點(diǎn)，，第一個(gè)識(shí)別別位點(diǎn)在左端端534bp序列向右三個(gè)個(gè)堿基對(duì)的位位置；第二個(gè)個(gè)識(shí)別位點(diǎn)在在右端658bp序列向左三個(gè)個(gè)堿基對(duì)的位位置，從這兩兩個(gè)位點(diǎn)切割割后產(chǎn)生的DNA片段長(zhǎng)度分別別為534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段長(zhǎng)度分別別為537bp、790bp和661bp。（3）在雜合子體體內(nèi)含有基因因D和基因d，基因D的序列中含有有兩個(gè)識(shí)別位位點(diǎn)，經(jīng)過SmaI完全切割會(huì)產(chǎn)產(chǎn)生537bp、790bp和661bp三種不同長(zhǎng)度度的片段，基基因d的序列中含有有一個(gè)識(shí)別位位點(diǎn)，經(jīng)過切切割后會(huì)產(chǎn)生生1327bp和661bp兩種長(zhǎng)度的片片段，綜上，，雜合子中分分離到該基因因的DNA片段經(jīng)過切割割后會(huì)產(chǎn)生4種不同長(zhǎng)度的的片段。（4）能夠獲取目目的基因并切切開質(zhì)粒的限限制酶有識(shí)別別序列為GGATCC的BamHI和識(shí)別序列為為GATC的MboI，若使用MboI會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)質(zhì)粒中的抗生生素A抗性基因和抗抗生素B抗性性基基因因，，所所以以要要用用BamHI來(lái)切切割割目目的的基基因因和和質(zhì)質(zhì)粒粒，，切切割割后后保保留留了了完完整整的的抗抗生生素素B抗性性基基因因，，便便于于篩篩選選出出含含有有重重組組質(zhì)質(zhì)粒粒的的大大腸腸桿桿菌菌。。因因?yàn)闉槟磕康牡幕蛞蚝秃瓦\(yùn)運(yùn)載載體體是是用用同同種種限限制制酶酶切切割割的的，，目目的的基基因因兩兩端端的的末末端端和和質(zhì)質(zhì)粒粒切切割割后后的的兩兩個(gè)個(gè)末末端端都都能能進(jìn)進(jìn)行行互互補(bǔ)補(bǔ)，，可可能能出出現(xiàn)現(xiàn)目目的的基基因因反反向向連連接接在在運(yùn)運(yùn)載載體體上上的的情情況況，，導(dǎo)導(dǎo)致致基基因因D不能能正正確確表表達(dá)達(dá)。。（2012福建建））32．現(xiàn)現(xiàn)代代生生物物科科技技專專題題肺細(xì)細(xì)胞胞中中的的let-7基因因表表達(dá)達(dá)減減弱弱，，癌癌基基因因RAS表達(dá)達(dá)增增強(qiáng)強(qiáng)，，會(huì)會(huì)引引發(fā)發(fā)肺肺癌癌。。研研究究人人員員利利用用基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)將將let-7基因因?qū)?dǎo)入入肺肺癌癌細(xì)細(xì)胞胞實(shí)實(shí)現(xiàn)現(xiàn)表表達(dá)達(dá)，，發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)肺肺癌癌細(xì)細(xì)胞胞的的增增殖殖受受到到抑抑制制。。該該基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)基基本本流流程程如如圖圖１１。。（１１））進(jìn)進(jìn)行行過過程程①①時(shí)時(shí)，，需需用用__________酶切切開開載載體體以以插插入入let-7基因因。。載載體體應(yīng)應(yīng)有有RNA聚合合酶酶識(shí)識(shí)別別和和結(jié)結(jié)合合的的部部位位，，以以驅(qū)驅(qū)動(dòng)動(dòng)let-7基因因轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄，，該該部部位位稱稱為為。限制制性性核核酸酸內(nèi)內(nèi)切切酶酶（（或或限限制制））_啟動(dòng)動(dòng)子子“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012福建建））32．現(xiàn)現(xiàn)代代生生物物科科技技專專題題肺細(xì)細(xì)胞胞中中的的let-7基因因表表達(dá)達(dá)減減弱弱，，癌癌基基因因RAS表達(dá)達(dá)增增強(qiáng)強(qiáng)，，會(huì)會(huì)引引發(fā)發(fā)肺肺癌癌。。研研究究人人員員利利用用基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)將將let-7基因因?qū)?dǎo)入入肺肺癌癌細(xì)細(xì)胞胞實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)表表達(dá)達(dá)，，發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)肺肺癌癌細(xì)細(xì)胞胞的的增增殖殖受受到到抑抑制制。。該該基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)基基本本流流程程如如圖圖１１。。（２２））進(jìn)進(jìn)行行過過程程②②時(shí)時(shí)，，需需用用酶處處理理貼貼附附在在培培養(yǎng)養(yǎng)皿皿壁壁上上的的細(xì)細(xì)胞胞，，以以利利于于傳傳代代培培養(yǎng)養(yǎng)。。胰蛋蛋白白“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（３３））研研究究發(fā)發(fā)現(xiàn)現(xiàn)，，let-7基因因能能影影響響癌癌基基因因RAS的表達(dá)，，其影響響機(jī)理如如圖２。。據(jù)圖分分析，可可從細(xì)胞胞中提取取進(jìn)行分子子雜交，，以直接接檢測(cè)let-7基因是否否轉(zhuǎn)錄。。肺癌細(xì)細(xì)胞增殖殖受到抑抑制，可可能是由由于細(xì)胞胞（RASmRNA/RAS蛋白）含含量減少少引起的的。RNARAS蛋白“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）過程①①表示基基因表達(dá)達(dá)載體的的構(gòu)建，，在該過過程中需需要用限限制酶對(duì)對(duì)載體進(jìn)進(jìn)行切割割以便于于目的基基因的插插入（限限制性核核酸內(nèi)切切酶，簡(jiǎn)簡(jiǎn)稱限制制酶，寫寫其他的的不得分分）；啟啟動(dòng)子是是一段特特殊的DNA序列，是是RNA聚合酶結(jié)結(jié)合和識(shí)識(shí)別的位位點(diǎn)，RNA聚合酶結(jié)結(jié)合到該該位點(diǎn)，，可驅(qū)動(dòng)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過過程。（2）過程②②表示動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞胞培養(yǎng)，，培養(yǎng)過過程中出出現(xiàn)接觸觸抑制后后可以用用胰蛋白白酶處理理，使之之分散成成單個(gè)的的細(xì)胞，，之后分分裝到其其他培養(yǎng)養(yǎng)瓶里面面進(jìn)行傳傳代培養(yǎng)養(yǎng)。（3）判斷目目的基因因是否在在受體細(xì)細(xì)胞中轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄，可可用分子子雜交技技術(shù)來(lái)進(jìn)進(jìn)行，從從細(xì)胞中中提取mRNA和用放射射性同位位素或者者熒光標(biāo)標(biāo)記的目目的基因因單鏈DNA片段進(jìn)行行雜交。。根據(jù)題題中信息息“肺組組織細(xì)胞胞中的let-7基因表達(dá)達(dá)減弱，，癌基因因RAS表達(dá)就增增強(qiáng)，引引發(fā)肺癌癌”導(dǎo)入入let7基因后，，肺癌細(xì)細(xì)胞受到到抑制，，說(shuō)明RAS基因表達(dá)達(dá)減弱，，導(dǎo)致細(xì)細(xì)胞中的的RAS蛋白質(zhì)含含量減少少進(jìn)而導(dǎo)導(dǎo)致癌細(xì)細(xì)胞受抑抑制。（2012安徽）31．（24分）甲型血友病是由X染色體上的隱性基因?qū)е碌倪z傳?。℉對(duì)h為顯性）。圖1中兩個(gè)家系都有血友病發(fā)病史，Ⅲ2和Ⅲ3婚后生下一個(gè)性染色體組成是XXY的非血友病兒子（IV2），家系中的其他成員性染色體組成均正常。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）根據(jù)圖圖1，（填“能能”或““不能””）確定定IV2兩條X染色體的的來(lái)源；；III4與正常女女子結(jié)婚婚，推斷斷其女兒兒患血友友病的概概率是。0不能“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2）兩個(gè)家家系的甲甲型血友友病均由由凝血因因子Ⅷ（簡(jiǎn)稱F8，即抗血血友病球球蛋白））基因堿堿基對(duì)缺缺失所致致。為探探明IV2的病因，，對(duì)家系系的第Ⅲ、IV代成員F8基因的特特異片段段進(jìn)行了了PCR擴(kuò)增，其其產(chǎn)物電電泳結(jié)果果如圖2所示，結(jié)結(jié)合圖1，推斷Ⅲ3的基因型型是。請(qǐng)用圖圖解和必必要的文文字說(shuō)明明IV2非血友病病XXY的形成原原因。XHXh“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。圖解如下下：在Ⅲ3形成卵細(xì)細(xì)胞過程程中的減減數(shù)第二二次分裂裂后期，，帶有基基因H的姐妹染染色單體體移向細(xì)細(xì)胞同一一極，形形成XHXH的細(xì)胞，，XHXH卵細(xì)胞與與正常精精子結(jié)合合形成XHXHY受精卵（3）現(xiàn)III3再次懷孕，產(chǎn)前診斷顯示胎兒（IV3）細(xì)胞的染色體為46，XY；F8基因的PCR檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。由此建議III3

?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（4）補(bǔ)給F8可治療甲甲型血友友病。采采用凝膠膠色譜法法從血液液中分離離純化F8時(shí)，在凝凝膠裝填填色譜柱柱后，需需要用緩緩沖液處處理較長(zhǎng)長(zhǎng)時(shí)間，，其目的的是；若F8比某些雜雜蛋白先先收集到到，說(shuō)明明F8的相對(duì)分分子質(zhì)量量較這些些雜蛋白白。洗滌平衡衡凝膠，，并使凝凝膠裝填填緊密終止妊娠娠大“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（6）為獲得得更多的的轉(zhuǎn)基因因母豬，，可以采采用體細(xì)細(xì)胞克隆隆技術(shù)，，將純合合轉(zhuǎn)基因因母豬的的體細(xì)胞胞核注入入，構(gòu)成重重組胚胎胎進(jìn)行繁繁殖。（5）利用轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因豬豬乳腺生生物反應(yīng)應(yīng)器可生生產(chǎn)F8。要使乳乳腺細(xì)胞胞合成F8，構(gòu)建表表達(dá)載體體時(shí)，必必須將F8基因cDNA與豬乳腺腺蛋白基基因的等調(diào)控組組件重組組在一起起。F8基因cDNA可通過克克隆篩選選獲得，，該cDNA比染色體體上的F8基因短，，原因是是該cDNA沒有。內(nèi)含子啟動(dòng)子去核的卵卵母細(xì)胞胞“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）因?yàn)棰?的染色體組成可能是XHXH，也可能是XHXhY，所以不能確定，Ⅲ4的基因型為XHY，所以后代女性中沒有患病個(gè)體。（2）由圖可知第一條帶是顯性，第二條帶是隱性，所以Ⅲ3基因型為XHXh，圖解如下：在III3形成卵細(xì)胞過程中的減數(shù)第二次分裂后期，帶有基因H的姐妹染色單體移向細(xì)胞的同一極，形成XHXH卵細(xì)胞，XHXH卵細(xì)胞與正常精子結(jié)合形成XHXHY受精卵?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細(xì)細(xì)胞XHXh結(jié)合而成成XHXhY“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細(xì)細(xì)胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細(xì)細(xì)胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細(xì)細(xì)胞XH結(jié)合而成成XHXhY或或說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生異常常的XhY精子和Ⅲ3產(chǎn)生正常常的卵細(xì)細(xì)胞XH結(jié)合而成成XHXhY或說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細(xì)細(xì)胞XHXh結(jié)合而成XHXhY說(shuō)明：Ⅲ2產(chǎn)生正常常的Y精子和Ⅲ3產(chǎn)生異常常的卵細(xì)細(xì)胞XHXh結(jié)合而成XHXhY“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記?！窘馕觥浚?）由題可知，IV3是血友病患者，所以建議III3終止妊娠。（4）采用凝膠色譜法從血液中分離純化F8時(shí)，在凝膠裝填色譜柱后，需要用緩沖液處理較長(zhǎng)時(shí)間，其目的是洗滌平衡凝膠，并使凝膠裝填緊密；若F8比某些雜蛋白先收集到，說(shuō)明F8的相對(duì)分子質(zhì)量較這些雜蛋白較大。（5）要使乳腺細(xì)胞合成F8，構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，必須將F8基因cDNA與豬乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子和終止子等調(diào)控組件重組在一起。F8基因cDNA可通過克隆篩選獲得，該cDNA比染色體上的F8基因短，原因是該cDNA沒有內(nèi)含子。（6）為獲得更多的轉(zhuǎn)基因母豬，可以采用體細(xì)胞克隆技術(shù)，將純合轉(zhuǎn)基因母豬的體細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞，構(gòu)成重組胚胎進(jìn)行繁殖。“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（2012北京）5．高中中生物學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)中中，在接接種時(shí)不不進(jìn)行嚴(yán)嚴(yán)格無(wú)菌菌操作對(duì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)結(jié)果影響響最大的的一項(xiàng)是是（））A．將少少許干酵酵母加入入到新鮮鮮的葡萄萄汁中B．將毛毛霉菌液液接種在在切成小小塊的鮮鮮豆腐上上C．將轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因植植物葉片片接種到到無(wú)菌培培養(yǎng)基上上D．將土土壤浸出出液涂布布在無(wú)菌菌的選擇擇培養(yǎng)基基上【解析】植物組織織培養(yǎng)中中的外植植體必須須在嚴(yán)格格的無(wú)菌菌環(huán)境中中進(jìn)行培培養(yǎng)，而而且操作作的各環(huán)環(huán)節(jié)都要要注意嚴(yán)嚴(yán)格滅菌菌，必須須無(wú)菌操操作，C對(duì)；葡萄萄酒的制制作原理理是利用用酵母菌菌無(wú)氧發(fā)發(fā)酵時(shí)產(chǎn)產(chǎn)生酒精精，在無(wú)無(wú)氧條件件下，大大部分微微生物都都不能生生存，隨隨著發(fā)酵酵的進(jìn)行行，酒精精度增大大，也有有殺菌的的作用；；而制作作腐乳時(shí)時(shí)，主要要是將毛毛霉等微微生物接接種在豆豆腐上，，此過程程的加鹽鹽、加鹵鹵湯等操操作均有有一定的的殺菌作作用；選選擇培養(yǎng)養(yǎng)基只能能允許目目的菌生生長(zhǎng)，會(huì)會(huì)抑制其其他雜菌菌生長(zhǎng)，，因此不不是嚴(yán)格格無(wú)菌操操作時(shí)A、B、D選項(xiàng)的情情況下比比C選項(xiàng)的受受影響要要小。C（2012海南）31.【【生物——選修3：現(xiàn)代代生物科科技專題題】（15分））已知甲種種農(nóng)作物物因受到到乙種昆昆蟲危害害而減產(chǎn)產(chǎn)，乙種種昆蟲食食用某種種原核生生物分泌泌的丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)后死亡亡。因此此，可將將丙種蛋蛋白質(zhì)基基因轉(zhuǎn)入入到甲種種農(nóng)作物物體內(nèi)，，使甲種種農(nóng)作物物獲得抗抗乙種昆昆蟲危害害的能力力?；卮鹣铝辛袉栴}：：（1）為為了獲得得丙種蛋白質(zhì)質(zhì)的基因因，在已已知丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)氨基酸酸序列的的基礎(chǔ)上上，推測(cè)測(cè)出丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)的_______序列，，據(jù)此可可利用________方法法合成目目的基因因。獲得得丙種蛋白質(zhì)質(zhì)的基因因還可用用_______、____________方法法。（2）在在利用上上述丙中中蛋白質(zhì)質(zhì)基因和和質(zhì)粒載載體構(gòu)建建重組質(zhì)質(zhì)粒的過過程中，，常需使使用__________酶酶和__________。。PCR化學(xué)基因基因文庫(kù)庫(kù)DNA連接酶限制（2012海南）31.【【生物——選修3：現(xiàn)代代生物科科技專題題】（15分））已知甲種種農(nóng)作物物因受到到乙種昆昆蟲危害害而減產(chǎn)產(chǎn)，乙種種昆蟲食食用某種種原核生生物分泌泌的丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)后死亡亡。因此此，可將將丙種蛋蛋白質(zhì)基基因轉(zhuǎn)入入到甲種種農(nóng)作物物體內(nèi)，，使甲種種農(nóng)作物物獲得抗抗乙種昆昆蟲危害害的能力力?；卮鹣铝辛袉栴}：：（3）將將含有重重組質(zhì)粒粒的農(nóng)桿桿菌與甲甲種農(nóng)作作物的愈愈傷組織織共培養(yǎng)養(yǎng)，篩選選出含有有丙種蛋蛋白質(zhì)的的愈傷組組織，由由該愈傷傷組織培培養(yǎng)成的的再生植植株可抵抵抗_____________的的危害。。（4）若若用含有有重組質(zhì)質(zhì)粒的農(nóng)農(nóng)桿菌直直接感染染甲種農(nóng)農(nóng)作物植植株葉片片傷口，，則該植植株的種種子_________（填填“含有有”或““不含””）丙種種蛋白質(zhì)質(zhì)基因。。乙種昆蟲蟲不含【解析】（1）在已知知蛋白質(zhì)質(zhì)的氨基基酸序列列的情況況下，可可根據(jù)氨氨基酸和和堿基的的對(duì)應(yīng)關(guān)關(guān)系，推推出合成成該蛋白白質(zhì)的基基因序列列，然后后用DNA合成儀通通過化學(xué)學(xué)方法來(lái)來(lái)合成目目的基因因。此外外也可以以從基因因文庫(kù)中中獲取目目的基因因，也可可通過PCR方法獲獲取目目的基基因。。（2）構(gòu)建建重組組質(zhì)粒粒時(shí)，，需要要用限限制酶酶將運(yùn)運(yùn)載體體切開開，并并用DNA連接酶酶將目目的基基因連連接到到運(yùn)載載體上上，從從而構(gòu)構(gòu)建基基因表表達(dá)載載體。。（3）愈傷傷組織織中含含有丙丙蛋白白，說(shuō)說(shuō)明丙丙蛋白白的基基因得得到了了表達(dá)達(dá)，在在培養(yǎng)養(yǎng)成的的植株株體內(nèi)內(nèi)也含含有丙丙蛋白白，乙乙昆蟲蟲食用用丙蛋蛋白后后會(huì)死死亡，，則該該植株株可抵抵抗乙乙昆蟲蟲的危危害。。（4）直接接用含含有重重組質(zhì)質(zhì)粒的的農(nóng)桿桿菌直直接感感染甲甲種農(nóng)農(nóng)作物物植株株葉片片傷口口，僅僅僅在在該葉葉片內(nèi)內(nèi)部分分細(xì)胞胞中能能合成成丙蛋蛋白，，該植植株的的種子子和其其他的的營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)器官官均不不含有有重組組質(zhì)粒粒，也也就不不含有有丙中中蛋白白質(zhì)的的基因因。（2011重慶））31.（16分）擬擬南芥芥是遺遺傳學(xué)學(xué)研究究的模模式植植物，，某突突變體體可用用于驗(yàn)驗(yàn)證相相關(guān)的的基因因的功功能。。野生生型擬擬南芥芥的種種皮為為深褐褐色（（TT），某某突變變體的的種皮皮為黃黃色（（tt）,下圖是是利用用該突突變體體驗(yàn)證證油菜菜種皮皮顏色色基因因(Tn)功能的的流程程示意意圖。?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）與擬擬南芥芥t基因的的mRNA相比，，若油油菜Tn基因的的mRNA中UGA變?yōu)椋粒粒牵粒?，其其末端端序列列成為為“－－ＡＧＧＣＧＧＣＧＧＡＣＣＣＡＡＧＡＡＣＵＵＣＵＵＡＡＡ”，，則Tn比ｔ多多編碼碼個(gè)氨基基酸（（起始始密碼碼子位位置相相同，，ＵＧＧＡ、、ＵＡＡＡ為為終止止密碼碼子））。（2）圖中中①應(yīng)應(yīng)為。若②②不能能在含含抗生生素Kan的培養(yǎng)養(yǎng)基上上生長(zhǎng)長(zhǎng)，則則原因因是。若③③的種種皮顏顏色為為，則說(shuō)說(shuō)明油油菜Tn基因與與擬南南芥T基因的的功能能相同同。2重組質(zhì)質(zhì)粒重組質(zhì)質(zhì)粒未未導(dǎo)入入深褐色色（3））假設(shè)設(shè)該油油菜Tn基因連連接到到擬南南芥染染色體體并替替換其其中一一個(gè)t基因因，則則③中中進(jìn)行行減數(shù)數(shù)分裂裂的細(xì)細(xì)胞在在聯(lián)會(huì)會(huì)時(shí)的的基因因型為_____；同時(shí)時(shí)，③③的葉葉片卷卷曲（（葉片片正常常對(duì)葉葉片卷卷曲為為顯性性，且且與種種皮性性狀獨(dú)獨(dú)立遺遺傳）），用用它與與種皮皮深褐褐色、、葉片片正常常的雙雙雜合合體擬擬南芥芥雜交交，其其后代代中所所占比比列最最小的的個(gè)體體表現(xiàn)現(xiàn)______________取③的的莖尖尖培養(yǎng)養(yǎng)成16顆顆植珠珠，其其性狀狀通常常________（填填“不變”或“改變”）。（4））所得得的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥與與野生生型擬擬南芥芥______（填填“是”或者“不是”）同一一個(gè)物物種。。TnTntt黃色正正常、、黃黃色卷卷曲不變是“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，不得以任何形式用于商業(yè)目的。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。【解析】通過對(duì)對(duì)基因因工程程和遺遺傳知知識(shí)的的相結(jié)結(jié)合來(lái)來(lái)考察察學(xué)生生對(duì)該該部分分知識(shí)識(shí)的掌掌握，，屬中中檔題題，較較難。。油菜菜Tn基因的的mRNA中UGA變?yōu)锳GA，而末末端序序列為為“—AGCGCGACCAGACUCUAA—””，在擬擬南芥芥中的的UGA本是終終止密密碼子子不編編碼氨氨基酸酸，而而在油油菜中中變?yōu)闉锳GA可編碼碼一個(gè)個(gè)氨基基酸，，而CUC還可編編碼一一個(gè)氨氨基酸酸，直直到UAA終止密密碼子子不編編碼氨氨基酸酸。假設(shè)油油菜Tn基因連連接到到擬南南芥染染色體體并替替換其其是一一個(gè)t基因，，注意意擬南南芥是是指實(shí)實(shí)驗(yàn)有有的突突變體體tt，所以以③轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥基基因型型為Tnt，減數(shù)數(shù)分裂裂聯(lián)會(huì)會(huì)時(shí)形形成四四分體體是由由于染染色體體進(jìn)行行了復(fù)復(fù)制，，基因因也進(jìn)進(jìn)行了了復(fù)制制，因因而基基因型型為TnTntt。設(shè)③③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥的葉葉片卷卷曲與與正常常葉是是由B、b基因控控制，，正常常葉為為顯性性，而而對(duì)該該性狀狀與種種皮性性狀為為獨(dú)立立遺傳傳，則則這兩兩對(duì)性性狀遵遵循基基因的的分離離與自自由組組合定定律。。則：：③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥（Tntbb）雙雙雜雜合擬擬南芥芥（TtBb）進(jìn)行逐逐對(duì)分分析：：TntTt→1/4TnT、1/4Tnt、1/4Tt、1/4tt由于Tn和T的功能能相同同，所所以表表示為為：3/4T_（深褐褐色））、1/4tt（黃色色）BbBb→1/2Bb（正常常葉））、1/2bb（卷曲曲葉））所以后后代中中有四四種表表現(xiàn)型型：3/8種皮深深褐色色正常常葉；；3/8種皮深深褐色色卷曲曲葉；；1/8種皮黃黃色正正常葉葉；1/8種皮黃黃色卷卷曲葉葉。取③轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)基因因擬南南芥的的莖尖尖培養(yǎng)養(yǎng)為植植物組組織為為無(wú)性性繁殖殖，所所以后后代性性狀一一般不不變。。（排排除基基因突突變））由上可可知所所得③③轉(zhuǎn)基基因擬擬南芥芥Tnt和野生生型擬擬南芥芥TT兩個(gè)品品種相相當(dāng)于于發(fā)生生基因因突變變，沒沒有隔隔離，，能雜雜交產(chǎn)產(chǎn)生可可育后后代，，因此此是同同一個(gè)個(gè)種。。（2011江蘇））14．．關(guān)于于現(xiàn)代代生物物技術(shù)術(shù)應(yīng)用用的敘敘述,錯(cuò)誤的是（（）A．蛋白質(zhì)質(zhì)工程可合合成自然界界中不存在在的蛋白質(zhì)質(zhì)B．體細(xì)胞胞雜交技術(shù)術(shù)可用于克克隆動(dòng)物和和制備單克克隆抗體C．植物組組織培養(yǎng)技技術(shù)可用于于植物莖尖尖脫毒D．動(dòng)物細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)技技術(shù)可用于于轉(zhuǎn)基因動(dòng)動(dòng)物的培養(yǎng)養(yǎng)B（2011福建）32.[現(xiàn)代生物科科技專題]一對(duì)表現(xiàn)型型正常的夫夫婦，生了了一個(gè)鐮刀刀型細(xì)胞貧貧血癥（常常染色體隱隱性遺傳病?。┗純?。。在他們欲欲生育第二二胎時(shí)，發(fā)發(fā)現(xiàn)妻子的的雙側(cè)輸卵卵管完全堵堵塞，不能能完成體內(nèi)內(nèi)受精。醫(yī)醫(yī)生為該夫夫婦實(shí)施了了體外受精精和產(chǎn)前基基因診斷，，過程如右右圖。②受精卵早期胚胎子宮羊水中的胎兒細(xì)胞妻子卵子丈夫精子③擴(kuò)增產(chǎn)物酶切產(chǎn)物抽取、分離PCRMstⅡ父、母、患兒酶切產(chǎn)物父母患兒胎兒④電泳條帶加樣孔基因分析電泳帶譜“漢水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。請(qǐng)回答：（1）過程程①是指在在體外進(jìn)行行__________的處處理，從而而使精子與與卵細(xì)胞結(jié)合形成受受精卵；過過程②稱為為_________。（2）在對(duì)對(duì)胎兒進(jìn)行行鐮刀型細(xì)胞貧血癥癥的產(chǎn)前基基因診斷時(shí)時(shí)，要先從從羊水中的的胎兒細(xì)胞胞提取物質(zhì)質(zhì)③_______進(jìn)行PCR擴(kuò)增。。然后用MstⅡ?qū)U(kuò)增產(chǎn)產(chǎn)物進(jìn)行切切割，產(chǎn)生生多個(gè)片段段的酶切產(chǎn)產(chǎn)物。據(jù)此此判斷，MstⅡ是一種________酶。。（3）不同同長(zhǎng)度的酶酶切產(chǎn)物在在電泳時(shí)移移動(dòng)的速率率不同，形形成不同的的電泳條帶帶。該家庭庭成員的鐮鐮刀型細(xì)胞胞貧血癥基基因分析的的電泳帶譜譜如④，據(jù)據(jù)此判斷胎胎兒為______（正常/患者/攜攜帶者）。。限制酶DNA精子獲能胚胎移植正常（2011北京）31.T-DNA可隨機(jī)插入植物基因因組內(nèi)，導(dǎo)導(dǎo)致被插入基因因發(fā)生突變變。用此方法誘誘導(dǎo)擬南芥芥產(chǎn)生突變體的的過程如下下：種植野生型型擬南芥，，待植株形成花蕾時(shí)時(shí)，將地上部分浸入入農(nóng)桿菌（（其中的T-DNA上帶有抗除除草劑基因））懸浮液中中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。。在適宜條條件下培養(yǎng)，收收獲種子（（稱為T1代）。T-DNA被插入的基因片段環(huán)狀DNA示意圖A、B、C、D表示能與T-DNA鏈互補(bǔ)、長(zhǎng)度相等的單鏈DNA片段；箭頭指示DNA合成方向（2011北京）31.T-DNA可隨機(jī)插入植物基因因組內(nèi)，導(dǎo)導(dǎo)致被插入基因因發(fā)生突變變。用此方法誘誘導(dǎo)擬南芥芥產(chǎn)生突變體的的過程如下下：種植野生型型擬南芥，，待植株形成花蕾時(shí)時(shí)，將地上部分浸入入農(nóng)桿菌（（其中的T-DNA上帶帶有抗除草劑基因））懸浮液中中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。。在適宜條條件下培養(yǎng)，收收獲種子（（稱為T1代）?！皾h水丑生的生物同行”超級(jí)群大型公益活動(dòng)：歷年高考題PPT版制作。本課件為公益作品，版權(quán)所有，未經(jīng)允許不得擅自修改或用于任何形式的商業(yè)用途。2012年1月15日，漢水丑生標(biāo)記。（1）為促促進(jìn)植株側(cè)側(cè)枝發(fā)育以以形成更多多的花蕾，，需要去除除_____，因?yàn)楹蠛笳弋a(chǎn)生的的_______會(huì)會(huì)抑制側(cè)芽芽的生長(zhǎng)。。（2）為篩篩選出已轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化的個(gè)體體，需將T1代播種在含含_______的的培養(yǎng)基上上生長(zhǎng)，成成熟后自交交，收獲種種子（稱為為T2代）。（3）為篩篩選出具有有抗鹽性狀狀的突變體體，需將T2代播種在含含____的的培養(yǎng)基上上，獲得所所需個(gè)體。。（4）經(jīng)過過多代種植植獲得能穩(wěn)穩(wěn)定遺傳的的抗鹽突變變體。為確確定抗鹽性性狀是否由由單基因突突變引起，，需將該突突變體與________植株進(jìn)行雜雜交，再自自交_____代后后統(tǒng)計(jì)性狀狀分離比。。（5）若上上述T-DNA的插插入造成了了基因功能能喪失，從從該突變體體的表現(xiàn)型型可以推測(cè)測(cè)野生型基基因的存在在導(dǎo)致植物物的抗鹽性性_______。。生長(zhǎng)素除草劑頂芽鹽野生型1降低（6）根據(jù)據(jù)T-DNA的已知知序列，利利用PCR技術(shù)可以以擴(kuò)增出被被插入的基基因片段。。其過程是是：提取__植株的DNA，用限限制酶處理理后，再用用_________將獲得的DNA片段段連接成環(huán)環(huán)（如右圖圖）以此為為模板，從從圖中A、、B、C、、D四種單單鏈DNA片斷中選選取______作作為引物進(jìn)進(jìn)行擴(kuò)增，，得到的片片斷將用于于獲取該基基因的全序序列信息。。DNA連接酶突變體B、C（2011廣東）27.登革熱病毒毒感染蚊子子后，可在在蚊子唾液液腺中大量量繁殖，蚊蚊子在叮咬咬人時(shí)將病病毒傳染給給人，可引引起病人發(fā)發(fā)熱、出