細胞生物學實驗

1、. 細胞生物學教案 邵鄰相 PAGE ：.；PAGE 9第五章 物質(zhì)的跨膜運輸與 信號傳送一教學目的：1深化了解被動運輸、自動運輸和內(nèi)吞外排的概念，以及物質(zhì)跨膜運輸?shù)闹匾饬x；2 了解細胞信號傳送的主要特點，掌握甾類激素信號通路、cAMP信號通路、磷脂酰肌醇信號通路和EGF受體信號通路的主要環(huán)節(jié)。二重點：跨膜運輸?shù)姆绞胶图毎ㄓ嵉男盘柾?。三難點：跨膜運輸?shù)臋C制。四授課方式與教學方法：講授、討論、多媒體輔助教學。五教學內(nèi)容: 細胞膜是細胞與細胞外環(huán)境之間的一種選擇性通透屏障，物質(zhì)的跨膜運輸對細胞的生存和生長至關重要。多細胞生物是一個忙碌而有序的細胞社會，這種社會性的維持不僅依賴于細胞的物質(zhì)代謝

2、與能量代謝，還有賴于細胞通訊與信號傳送，以協(xié)調(diào)細胞的行為。物質(zhì)的跨膜運輸一.被動運輸passive transport定義：經(jīng)過簡單分散或協(xié)助分散實現(xiàn)物質(zhì)由高濃度向低濃度方向的跨膜轉(zhuǎn)運。轉(zhuǎn)運的動力物質(zhì)的濃度梯度，不需求細胞提供能量。類型：簡單分散simple diffusion、協(xié)助分散facilitated diffusion膜轉(zhuǎn)運蛋白：1.載體蛋白carrier proteins通透酶permease性質(zhì)；介導被動運輸與自動運輸。2.通道蛋白 channel proteins 具有離子選擇性，轉(zhuǎn)運速率高； 離子通道是門控的；只介導被動運輸 膜轉(zhuǎn)運蛋白 通道蛋白(被動運輸)膜轉(zhuǎn)運蛋白 載體蛋

3、白 單運輸 (被動運輸+自動運輸) 共運輸協(xié)同運輸 對向運輸細胞膜上的運輸?shù)鞍祝?載體蛋白：經(jīng)過構象變化運輸物質(zhì) 通道蛋白：構成通道、運輸物質(zhì)載體蛋白:膜上一類轉(zhuǎn)運蛋白，可特異的、可逆的與某物質(zhì)結(jié)合，經(jīng)過構象變化將物質(zhì)從膜的一側(cè)運到另一側(cè)。 又稱通透酶，與運輸物質(zhì)的結(jié)合與酶的動力學類似。 通道蛋白:構成親水的通道，允許一定大小和一定電荷的離子經(jīng)過。因運轉(zhuǎn)的幾乎都是離子，又稱離子通道.通道蛋白構成通道：繼續(xù)開放如水通道延續(xù)開放閘門通道配體閘門通道：配體與受體結(jié)合，通道開放。電壓閘門通道：膜電位變化，啟動通道開放。壓力激活通道：壓力變化,啟動通道開放。離子閘門通道：特定離子濃度變化，啟動通道。神經(jīng)

4、肌肉興奮，不到秒鐘的時間內(nèi)完成，這一過程包括四種通道依次例如：神經(jīng)肌肉興奮，不到秒鐘的時間內(nèi)完成，這一過程包括四種通道依次開放：A、刺激神經(jīng)激動神經(jīng)末梢，膜去極化，電壓閘門通道鈣離子通道開放，鈣離子進入神經(jīng)末梢，刺激乙酰膽堿ACH分泌到突觸間隙中；B、ACH與突觸后肌細胞膜上的受體結(jié)合，配體閘門鈉離子通道開放，鈉離子進入肌細胞，肌細胞膜去極化；C、肌細胞膜上電壓閘門鈉離子通道開放，更多的鈉離子進入肌細胞，肌細胞膜進一步去極化，產(chǎn)生動作電位，分散到肌細胞膜；D、肌漿網(wǎng)上的離子閘門通道鈣離子通道開放，鈣離子進入細胞質(zhì)，引起肌肉收縮。二.自動運輸active transport定義：是由載體蛋白所介

5、導的物質(zhì)逆濃度梯度或電化學梯度由濃度低的一側(cè)向濃度高的一側(cè)進展跨膜轉(zhuǎn)運的方式。細胞耗能。由ATP直接提供能量和間接提供能量及光能驅(qū)動.被動與自動運輸?shù)谋容^ 自動運輸類型：三種根本類型由ATP直接提供能量的自動運輸鈉鉀泵 鈣泵Ca2+-ATP酶質(zhì)子泵：P-型質(zhì)子泵、V-型質(zhì)子泵、H+-ATP酶協(xié)同運輸cotransport由Na+-K+泵或H+-泵與載體蛋白協(xié)同作用，靠間接耗費ATP所完成的自動運輸方式物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運與膜電位進展自動運輸?shù)奈镔|(zhì)：各種離子如鈉離子、鉀離子、氯離子、碳酸根離子、鈣離子等。葡萄糖、氨基酸等帶電荷極性分子。進展自動運輸?shù)妮d體又稱“離子泵鈉鉀泵膜上運輸鈉和鉀離子的載體稱“鈉

6、鉀泵或“鈉鉀ATP酶。鈉鉀泵的組成：大亞基100000DN：外側(cè)：1、鉀結(jié)合位點；2、鳥苯苷結(jié)合位點內(nèi)側(cè)：1、鈉結(jié)合點；2、ATP結(jié)合點小亞基45000DN：與大亞基結(jié)合，作用不明?！扳c鉀泵的自動運輸機制即：3Na+結(jié)合到結(jié)合位點上 酶磷酸化 酶構象變化 3 Na+釋放到細胞外 2K+結(jié)合到位點上 酶去磷酸化 2K+釋放到細胞內(nèi)，酶構象恢復原始形狀。Na+-K+泵的作用產(chǎn)生和維持膜電位；為葡萄糖、氨基酸的自動運輸發(fā)明條件；維持細胞的浸透壓，例如：當腎小管細胞間隙鈉過高時會導致細胞內(nèi)水分外滲，細胞內(nèi)缺水，人會感到口渴而飲水多。鈣泵 ,又稱Ca2+-ATP酶位于質(zhì)膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的跨膜蛋白,將Ca2+

7、輸出細胞或泵入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中儲存,以維持細胞內(nèi)低濃度的游離Ca2+.鈣泵任務與ATP的水解相偶聯(lián),每耗費一個ATP分子轉(zhuǎn)運兩個Ca2+ .鈣調(diào)蛋白是鈣泵的激活因子. 鈣調(diào)蛋白(CaM)是Ca2+應對蛋白,由148個氨基酸殘基組成,含4個構造域,每個構造域可以與一個Ca2+. CaM本身無活性, Ca2+與CaM結(jié)合后構成Ca2+ - CaM復合體,再與靶酶結(jié)合將其活化. 質(zhì)子泵,又稱H+-ATP酶位于植物細胞、真菌和細菌質(zhì)膜上的跨膜蛋白,將H+泵出細胞建立跨膜的H+電化學梯度，驅(qū)動轉(zhuǎn)運溶質(zhì)進入細胞。P-型質(zhì)子泵：位于真核細胞的質(zhì)膜上，轉(zhuǎn)運H+過程中涉及磷酸化和去磷酸化。V-型質(zhì)子泵：位于動物細胞溶

8、酶體膜和植物液泡膜上，轉(zhuǎn)運H+過程中不涉及磷酸化的中間體。提高細胞質(zhì)中的pH和細胞器內(nèi)的酸度。 HYPERLINK F:ATP_SynthesisATP的合成.mov t _parent H HYPERLINK F:ATP_SynthesisATP的合成.mov t _parent + HYPERLINK F:ATP_SynthesisATP的合成.mov t _parent -ATP HYPERLINK F:ATP_SynthesisATP的合成.mov t _parent 酶：位于線粒體的內(nèi)膜，植物類囊體膜和細菌質(zhì)膜上，利用 HYPERLINK F:Electron_Transport%2

9、0呼吸鏈中電子的運輸.mov t _parent 膜上 HYPERLINK F:Electron_Transport%20呼吸鏈中電子的運輸.mov t _parent H HYPERLINK F:Electron_Transport%20呼吸鏈中電子的運輸.mov t _parent + HYPERLINK F:Electron_Transport%20呼吸鏈中電子的運輸.mov t _parent 梯度合成ATP。協(xié)同運輸cotransport由Na+-K+泵或H+-泵與載體蛋白協(xié)同作用， 靠間接耗費ATP所完成的自動運輸方式 自動運輸?shù)哪芰坎皇怯葾TP直接提供，而是由儲存在膜上離子梯度中

10、的能量來驅(qū)動的。這類運輸進展時，一種物質(zhì)的運輸必需依賴另一種物質(zhì)的同時運輸，故稱為協(xié)同運輸。協(xié)同運輸兩種物質(zhì)同時相向轉(zhuǎn)運，稱對向運輸逆向協(xié)同運輸。如Na+-K+；Na+H+；Cl-HCl3-兩種物質(zhì)同時同向轉(zhuǎn)運，稱共運輸同向協(xié)同運輸。如Na+-G；Na+-aa濃度差+電位差電化學梯度動物細胞中，Na+的電化學梯度通常是驅(qū)動另一種分子主運輸?shù)哪芰?，如Na+ 梯度驅(qū)動G、aa的自動運輸三、胞吞作用endocytosis與胞吐作用exocytosis作用：完成大分子與顆粒性物質(zhì)的跨膜運輸，又稱膜泡運輸或批量運輸bulk transport。屬于自動運輸。胞吞作用胞吐作用胞吞作用胞飲作用pinocyt

11、osis與吞噬作用phagocytosis。胞飲作用與吞噬作用主要有三點區(qū)別特征內(nèi)吞泡的大小轉(zhuǎn)運方式內(nèi)吞泡構成機制胞飲作用小于150nm延續(xù)發(fā)生的過程需求籠形蛋白構成包被及接合素蛋白銜接吞噬作用大于250nm需受體介導的信號觸發(fā)過程需求微絲及結(jié)合蛋白的參與受體介導的內(nèi)吞作用及包被的組裝包內(nèi)體及其分選作用胞內(nèi)體：是動物細胞內(nèi)由膜包圍的細胞器，其作用是傳輸由胞吞作用新攝入的物質(zhì)到溶酶體被降解。胞內(nèi)體上有質(zhì)子泵。胞吐作用胞吐作用：是將細胞內(nèi)的分泌泡或其他某些膜泡中的物質(zhì)經(jīng)過細胞膜運出細胞的過程。組成型的外排途徑constitutive exocytosis pathway一切真核細胞延續(xù)分泌過程用于

12、質(zhì)膜更新膜脂、膜蛋白、胞外基質(zhì)組分、營養(yǎng)或信號分子default pathway：除某些有特殊標志的駐留蛋白和調(diào)理型分泌泡外，其他蛋白的轉(zhuǎn)運途徑：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體分泌泡細胞外表 調(diào)理型外排途徑regulated exocytosis pathway特化的分泌細胞儲存刺激釋放產(chǎn)生的分泌物如激素、粘液或消化酶具有共同的分選機制，分選信號存在于蛋白本身，分選主要由高爾基體TGN上的受體類蛋白來決議 膜流：動態(tài)過程對質(zhì)膜更新和維持細胞的生存與生長是必要的囊泡與靶膜的識別與交融胞吞作用途徑 膜上糖蛋白或糖脂識別 與膜接觸 膜內(nèi)陷包圍物質(zhì)膜交融去封口 囊泡 進入細胞胞內(nèi)體：是動物細胞內(nèi)由膜包圍的細胞器，

13、其作用是傳輸由胞吞作用新攝入的物質(zhì)到溶酶體被降解。胞內(nèi)體上有質(zhì)子泵。第二節(jié) 細胞通訊與信號傳送一、細胞通訊與細胞識別 一細胞通訊cell communication一個細胞發(fā)出的信息經(jīng)過介質(zhì)傳送到另一個細胞產(chǎn)生相應的反響。細胞間的通訊對于多細胞生物體的發(fā)生和組織的構建，協(xié)調(diào)細胞的功能，控制細胞的生長、分裂、分化和凋亡是必需的。細胞通訊方式：分泌化學信號進展通訊 內(nèi)分泌endocrine激素分泌后作用較遠的靶細胞，其傳送介質(zhì)為血液。旁分泌paracrine激素分泌釋放后作用于臨近的靶細胞，其傳送介質(zhì)為細胞間液。自分泌autocrine激素分泌釋放后仍作用于本身細胞，其傳送介質(zhì)為胞液；化學突觸ch

14、emical synapse接觸性依賴的通訊細胞間直接接觸，信號分子與受體都是細胞的跨膜蛋白間隙銜接實現(xiàn)代謝偶聯(lián)或電偶聯(lián)二細胞識別cell recognition 概念：細胞經(jīng)過其外表的受體與胞外信號物質(zhì)分子配體選擇性地相互作用，進而導致胞內(nèi)一系列生理生化變化，最終表現(xiàn)為細胞整體的生物學效應的過程。 信號通路signaling pathway細胞識別是經(jīng)過各種不同的信號通路實現(xiàn)的。細胞接受外界信號，經(jīng)過一整套特定的機制，將胞外信號轉(zhuǎn)導為胞內(nèi)信號，最終調(diào)理特定基因的表達，引起細胞的應對反響，這種反響系列稱之為細胞信號通路。三細胞的信號分子與受體信號分子signal molecule親脂性信號分子

15、親水性信號分子氣體性信號分子(NO) 受體receptor受體是細胞膜或細胞內(nèi)的功能性糖蛋白，可特異地識別配體并與之結(jié)合，引起相應的生物效應。多為糖蛋白細胞內(nèi)受體：為胞外親脂性信號分子所激活激素激活的基因調(diào)控蛋白胞內(nèi)受體超家族此型受體主要包括類固醇激素受體，如糖皮質(zhì)激素受體GR、雌激素受體ER、孕激素受體PR、雄激素受體AR、鹽皮質(zhì)激素受體MR等； 維生素D3受體VDR以及甲狀腺激素受體TR。 這些激素進入細胞以后，能與特異性受體結(jié)合構成活性復合物，然后作用于染色體DNA，調(diào)理基因表達，從而影響細胞的物質(zhì)代謝和生理活動。 細胞外表受體:為胞外親水性信號分子所激活 細胞外表受體分屬三大家族： 離

16、子通道偶聯(lián)的受體ion-channel-linked receptorG-蛋白偶聯(lián)的受體G-protein-linked receptor酶偶連的受體enzyme-linked receptor受體的功能：介導物質(zhì)跨膜運輸(受體介導的內(nèi)吞作用)信號轉(zhuǎn)導：受體的激活activation級聯(lián)反響；受體失敏desensitization封鎖反響、減量調(diào)理down-regulation降低反響。第二信使second messengercAMP、cGMP、三磷酸肌醇IP3，二?；视虳G分子開關molecular switches細胞內(nèi)信號傳送中起舉足輕重作用的一類蛋白質(zhì)，經(jīng)過磷酸化或結(jié)合GTP而活化，

17、開啟信號通路，經(jīng)過去磷酸化或結(jié)合GDP而失活，封鎖信號經(jīng)過。二、經(jīng)過細胞內(nèi)受體介導的信號傳送親脂性的小分子經(jīng)過與細胞內(nèi)受體結(jié)合傳送信號。細胞內(nèi)受體本質(zhì)是激素激活的基因調(diào)控蛋白，構成細胞內(nèi)受體家族。甾類激素介導的信號通路 兩步反響階段： 初級反響階段：直接活化少數(shù)特殊基因轉(zhuǎn)錄的，發(fā)生迅速；次級反響：初級反響產(chǎn)物再活化其它基因產(chǎn)生延遲的放大作用。 一氧化氮介導的信號通路三、經(jīng)過細胞外表受體介導的信號跨膜傳送親水性的化學信號分子普通不能直接進入細胞，而是經(jīng)過與細胞外表特異受體的結(jié)合，進展信號傳導，進而對靶細胞產(chǎn)生效應。根據(jù)信號轉(zhuǎn)導機制和受體蛋白類型的不同，細胞外表受體分為三大家族：一離子通道偶聯(lián)的受

18、體介導的信號跨膜傳送受體本身為離子通道，信號神經(jīng)遞質(zhì)與受體識別結(jié)合，開閉通道，離子流動，改動細胞膜的興奮性。特點：受體/離子通道復合體，四次/六次跨膜蛋白跨膜信號轉(zhuǎn)導無需中間步驟主要存在于神經(jīng)細胞或其他可興奮細胞間的突觸信號傳送有選擇性：配體的特異性選擇和運輸離子的選擇性G-蛋白偶聯(lián)的受體介導的信號跨膜傳送由G蛋白介導,將信息傳送給第二信使,引起一系列胞內(nèi)生物效應。G蛋白：鳥苷酸結(jié)合蛋白的總稱，其共同特征是： 由gba三個亞單位組成；位于細胞膜受體與效應器之間的轉(zhuǎn)導蛋白；具有結(jié)合GDP或GTP的才干，有GTP酶活性；可激活效應蛋白，實現(xiàn)信息轉(zhuǎn)導功能。cAMP信號通路 磷脂酰肌醇信號G-蛋白偶聯(lián)

19、受體又稱蛇型受體。此型受體通常由單一的多肽鏈或均一的亞基組成，其肽鏈可分為細胞外區(qū)、跨膜區(qū)、細胞內(nèi)區(qū)三個區(qū)?？缒^(qū)由7個螺旋構造組成；多肽鏈的N-端位于細胞外區(qū)，而C-端位于細胞內(nèi)區(qū)；在第五及第六跨膜螺旋構造之間的細胞內(nèi)環(huán)部分第三內(nèi)環(huán)區(qū)，是與G蛋白偶聯(lián)的區(qū)域。 大多數(shù)常見的神經(jīng)遞質(zhì)受體和激素受體是屬于G蛋白偶聯(lián)型受體。 細胞外表其它與酶偶聯(lián)的受體本身是酶，具有TPK活性，主要是一些生長因子的受體，與配體結(jié)合即活化，使靶蛋白的酪氨酸殘基磷酸化，引起細胞反響。通常與酶銜接的細胞外表受體又稱催化性受體，目前知的這類受體都是跨膜蛋白，當胞外配基與受體結(jié)合即激活受體胞內(nèi)段的酶活性。至少包括5類：受體酪氨

20、酸激酶 受體蛋白酪氨酸殘基自磷酸化。受體絲氨酸/蘇氨酸激酶HYPERLINK TGFb_Signaling 腫瘤壞死因子Beta作用途徑.mov如TGF的作用受體酪氨酸磷酸酯酶受體蛋白酪氨酸殘基去磷酸化受體鳥苷酸環(huán)化酶ANPs-signals合成cGMP酪氨酸蛋白激酶聯(lián)絡的受體 cAMP信號通路反響鏈：激素G-蛋白偶聯(lián)受體G-蛋白腺苷酸環(huán)化酶cAMP cAMP依賴的蛋白激酶A基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄 組分及其分析 G-蛋白偶聯(lián)受體 G-蛋白活化與調(diào)理G蛋白的效應蛋白酶主要有腺苷酸環(huán)化酶AC和磷脂酶CPLC。前者可催化第二信使cAMP的產(chǎn)生，后者可催化第二信使DG和IP3的產(chǎn)生，從而將配體的信號傳送

21、到細胞內(nèi)。 1、CAMP信號途徑信號與受體結(jié)合，受體活化，構象改動，暴露與G蛋白的結(jié)合部位。配體受體復合物與G蛋白結(jié)合，G活化，Gs構象改動，結(jié)合GTPGs-GTP復合物與分別，暴露與AC的結(jié)合部位。Gs-GTP與 AC結(jié)合，AC活化，分解ATP為CAMPGs分解GTP為 GDP，構型改動，與 AC分別，AC失活，Gs與結(jié)合，恢復靜息形狀。 GPLR的失敏：例：腎上腺素受體被激活后，10-15秒cAMP驟增，然后在不到1min內(nèi)反響速降，以致消逝。受體活性快速喪失速發(fā)相失敏desensitization；機制：受體磷酸化 受體與Gs解偶聯(lián)，cAMP反響停頓并被PDE降解。兩種Ser/Thr磷酸

22、化激酶： PKA 和腎上腺素受體激酶 ARK， 擔任受體磷酸化；胞內(nèi)協(xié)作因子撲獲蛋白 arrestin結(jié)合磷酸化的受體，抑制其功能活性 arrestin 已克隆、定位11q13。 反響減弱遲發(fā)相減量調(diào)理down-regulation機制：受體-配體復合物內(nèi)吞，導致外表受體數(shù)量減少，發(fā)現(xiàn) arrestin可直接與Clathrin結(jié)合，在內(nèi)吞中起adeptors作用； 受體減量調(diào)理與內(nèi)吞后受體的分選有關。磷脂酰肌醇信號通路“雙信使系統(tǒng)反響鏈：胞外信號分子G-蛋白偶聯(lián)受體激活細胞質(zhì)膜上的 IP3胞內(nèi)Ca2+濃度升高Ca2+結(jié)合蛋白(CaM)細胞反響 磷脂酶C(PLC) 使細胞質(zhì)膜上的PIP2 水解

23、DG激活PKC蛋白磷酸化或促Na+/H+交換使胞內(nèi)pH升高PIP2：4，5-二磷酸磷脂酰肌醇 PKC 蛋白激酶CIP3： 1，4，5-三磷酸肌醇DG：二?；视褪荏w酪氨酸激酶及RTK-Ras蛋白信號通路受體酪氨酸激酶receptor tyrosine kinases，RTKs包括6個亞族信號轉(zhuǎn)導：配體受體受體二聚化受體的自磷酸化激活RTK胞內(nèi)信號蛋白啟動信號傳導RTK- Ras信號通路：配體RTK adaptor GRFRasRafMAPKKKMAPKKMAPK進入細胞核其它激酶或基因調(diào)控蛋白轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化修鈽。G蛋白偶聯(lián)受體介導的MAPK的激活 RTKs的失敏desensitization

24、G蛋白偶聯(lián)受體介導的MAPK的激活MAPKMitogen-activated protein kinase又稱ERKextracelular signal-regulated kinase真核細胞廣泛存在的Ser/Thr蛋白激酶。 MAPK的底物：膜蛋白受體、酶、胞漿蛋白、核骨架蛋白、及多種核內(nèi)或胞漿內(nèi)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子在細胞增殖和分化中具有重要調(diào)控作用。PTX敏感性G蛋白Gi，Go的亞基依賴于Ras激活MAPK，詳細機制還有待深化研討；PKC、PLC與G蛋白偶聯(lián)受體介導的MAPK激活PKC和PLC 參與G蛋白偶聯(lián)受體激活MAPK ： G蛋白偶聯(lián)受體激活G蛋白； G蛋白亞基或 亞基激活PLC，促進

25、膜磷脂代謝； 磷脂代謝產(chǎn)物 DAG + IP3 激活PKC； PKC 經(jīng)過Ras 或 Raf 激活MAPK ；由于PKC對鈣的依賴性不同，所以G蛋白偶聯(lián)受體 MAPK途徑對鈣要 求不同；PKA對G蛋白偶聯(lián)受體 MAPK途徑的負調(diào)控迄今未發(fā)現(xiàn)和制備出MAPK組成型突變dominant negative mutant，提示細胞難于忍受MAPK的繼續(xù)激活MAPK的去活是細胞維持正常生長代謝所必需。主要機制：特異性的Tyr/Thr磷脂酶可選擇性地使MAPK去磷酸化，封鎖MAPK信號。cAMP ， MAPK ；cAMP直接激活cAMP依賴的PKA；PKA能夠經(jīng)過RTK或經(jīng)過抑制Raf-Ras相互作用起負調(diào)控作用。RTKs的失敏：催化性受體的效應器位于受體本身，因此失敏即酶活性速發(fā)抑制。機制：受體的磷酸化修飾。EGF受體Thr654的磷酸化導致RTK活性的抑制，假設該位點產(chǎn)生Ala突變，那么阻止活性抑制，后又發(fā)現(xiàn)C端的Ser1046/7也是磷酸化位點。磷酸化位點所在的C端恰好是SH2蛋白的結(jié)合部位。引起受體磷酸化的激酶：PKC作用于Thr654；CaMK2Ca2+和CaM依賴的激酶2作用于Ser1046/7還發(fā)現(xiàn)：EGF受體是CDK的靶蛋白，提示和周期調(diào)控有關。RTK晶體構造研討闡明， RTK激活后構成穩(wěn)定的非抑制性構象；磷酸化修飾后，構成抑制性構象，引起失敏。RTK失