實驗三死活細胞鑒別_第1頁
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文檔簡介

1、關于實驗三死活細胞的鑒別第一張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一、實驗目的1.學習并掌握死活細胞鑒別的原理及方法。2.能夠辨別死、活細胞。第二張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二 實驗原理死活細胞鑒別有許多不同的方法,其中最常用方法是臺盼藍染色排除法。其原理是:許多酸性染料不容易穿過活細胞的質(zhì)膜進入胞內(nèi),卻能滲入死亡的細胞內(nèi),使其著色,以此來鑒別死活細胞。第三張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月熒光排除法活細胞具有較強的酯酶活性,可將二丙酸酯熒光素中的熒光素分解出來,從而使細胞發(fā)出強烈的黃綠色熒光,死亡細胞由于酯酶失活,不能分解二丙酸酯熒光素,不能發(fā)出熒光。第四張,PPT共十二

2、頁,創(chuàng)作于2022年6月染色排除法:染成藍色的為死細胞第五張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三、試劑與器材1.材料:血細胞2.試劑:0.4臺盼藍溶液(生理鹽水配制)、PBS。3.器材:顯微鏡、血細胞計數(shù)板、載玻片、滴管等。第六張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月四、實驗內(nèi)容1.血細胞懸液的制備取一定量的新鮮血液加入20等份的PBS。2.染色制片取0.5ml細胞懸液放入干凈試管中,加入12滴臺盼藍染液,混合,2min后制成臨時裝片,鏡檢。第七張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月3.結(jié)果死細胞染成藍色,活細胞不著色。細胞計數(shù):單位視野內(nèi)死細胞個數(shù)、活細胞個數(shù)。第八張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第九張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月細胞活力公式根據(jù)下式求細胞活力: 活細胞率()(細胞總數(shù)-死細胞數(shù))/細胞總數(shù)100第十張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年6月五、注意事項1.計數(shù)時應多選擇幾個視野,以多個視野內(nèi)的平均值作為細胞的存活率。2.以臺盼藍排除法在倒置顯微鏡下計數(shù)死活細胞數(shù)目需注意染色時間。第十一張,PPT共十二頁,創(chuàng)作于2022年

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