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文檔簡介
1、實驗8 生長素、ABA植物激素的部位和濃度效應(yīng)植物激素對根/芽生長的影響 1了解Auxin/ABA的生理效應(yīng); 2. 了解不同器官對植物激素敏感性的差異 3. 綜合分析 實驗原理 植物激素生理效應(yīng)的特異性 Auxin及人工合成的類似物質(zhì)如萘乙酸(NAA)等對植物生長的調(diào)節(jié)作用, ABA抑制生長和種子萌發(fā) Auxin的劑量效應(yīng) 在不同濃度下對植物生長的效應(yīng)也不同。一般來說,低濃度的Auxin促進生長,高濃度時則抑制生長。 Auxin不同器官的敏感性差異 不同的植物器官對Auxin的反應(yīng)也不同,通常根比芽、莖對Auxin更敏感。不同濃度的生長素對根部的影響不同濃度的生長素對根部的影響10-11 1
2、0-9 10-7 10-5 10-3 10-1 Auxin濃度不同營養(yǎng)器官對不同濃度IAA的反應(yīng)10-4根莖芽10-1010-8ABA對種子的萌發(fā)抑制作用對種子的萌發(fā)抑制作用ABA對氣孔的影響對氣孔的影響材料、設(shè)備儀器及試劑材料、設(shè)備儀器及試劑生長素實驗 材料:小麥種子 儀器:溫箱、培養(yǎng)皿、移液管、直尺、濾紙、鑷子、鉛筆 藥品: NAA 母液母液(10 mg/L NAA),0.1%升汞ABA實驗 材料:油菜種子 儀器:培養(yǎng)皿、濾紙、鑷子、移液管、鉛筆、燒杯 藥品:ABA 母液母液( 0.1 mM ABA ) 0.1%升汞(一)1. 配置濃度梯度:取潔凈大皿5套,編號。在1號皿中加入NAA母液(
3、10mg/L) NAA1mL,加9mL蒸餾水混勻后即成為1 mg/L 萘乙酸溶液。然后從其中吸取1mL放入2號皿中,加9mL蒸餾水混勻后即成為0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀釋到4號皿(最后從第4號培養(yǎng)皿中取出1mL棄去),第5號皿則加入9mL蒸餾水作對照。 2. 排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌動的小麥種子10粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上,使芽尖朝上并使胚的部位朝向同一側(cè),蓋上皿蓋后,放在25的溫箱中暗培養(yǎng)2d。(二)1. 取潔凈小皿5套,編號。在1號培養(yǎng)皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 mL,然后從其中吸取0.2 mL放入2號培養(yǎng)皿中,加1.8 mL蒸
4、餾水混勻后即成為0.01 mM 。如此依次稀釋到4號皿(最后從第4號皿中取0.2 mL棄去),第5號皿中則加入1.8 mL蒸餾水作對照 2. 排種子:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油菜籽20粒,放入皿中后用鑷子種子分布均勻,蓋上皿蓋后,放在25的溫箱中暗培養(yǎng)2d。實驗步驟1 ml NAA母液母液9 ml H2O1 ml 1 ml 1 ml 舍棄舍棄1 ml9 ml H2O1 mg/L0.1 mg/L0.01 mg/L0.001 mg/L0 mg/L 2 ml ABA母液母液1.8 ml H2O0.1 mM 1.8 ml H2O0.2 ml 0.2 ml 0.2 ml 舍棄舍棄0.2
5、 ml 0.01 mM0.001 mM0.0001 mM0 mM 1. 配置梯度濃度NAA:取潔凈大皿5套,編號。在1號皿中加入10mg/L NAA1mL,加9mL蒸餾水混勻后即成為1 mg/L 萘乙酸溶液。然后從其中吸取1mL放入2號皿中,加9mL蒸餾水混勻后即成為0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀釋到4號皿(最后從第4號培養(yǎng)皿中取出1mL棄去),第5號皿則加入9mL蒸餾水作對照。 2. 種子排列:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取已萌動的小麥種子10粒,用鑷子將其整齊地排在皿直徑上,使芽尖朝上并使胚的部位朝向同一側(cè),蓋上皿蓋后,放在25的溫箱中暗培養(yǎng)2d。1 ml NAA母液
6、母液9 ml H2O1 ml 1 ml 1 ml 舍棄舍棄1 ml9 ml H2O1 mg/L0.1 mg/L0.01 mg/L0.001 mg/L0 mg/L 2 ml ABA母液母液1.8 ml H2O0.1 mM 1.8 ml H2O0.2 ml 0.2 ml 0.2 ml 舍棄舍棄0.2 ml 0.01 mM0.001 mM0.0001 mM0 mM 1.配置梯度濃度ABA:取潔凈小皿5套,編號。在1號培養(yǎng)皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 mL,然后從其中吸取0.2 mL放入2號培養(yǎng)皿中,加1.8 mL蒸餾水混勻后即成為0.01 mM 。如此依次稀釋到4號皿(最后從第4號皿中取0.
7、2 mL棄去),第5號皿中則加入1.8 mL蒸餾水作對照 2. 種子排列:在各皿中放入一張與皿底大小一致的濾紙,選取油菜種子20粒,放入皿中后用鑷子種子分布均勻,蓋上皿蓋后,放在25的溫箱中暗培養(yǎng)2d。結(jié)果記錄與分析(一)結(jié)果記錄與分析(一) 分析: NAA濃度效應(yīng) 器官對NAA的敏感性 對數(shù)據(jù)作統(tǒng)計分析(修過生物統(tǒng)計課程的)培養(yǎng)培養(yǎng)2d后后NAA濃度濃度( mg/L ) 調(diào)查調(diào)查10.10.010.0010(CK)根數(shù)(平均值SE)根長(平均值SE)芽長(平均值SE)幼根增或減幼芽增或減 生長素實驗生長素實驗結(jié)果記錄與分析(二)結(jié)果記錄與分析(二)ABA實驗(培養(yǎng)2d后觀測) 調(diào)查發(fā)芽率調(diào)查發(fā)芽率:胚芽(根):胚芽(根)種子半徑(露白)種子半徑(露白) 作圖作圖: 將將ABA 濃度作橫座標,以相對發(fā)芽率濃度作橫座標,以相對發(fā)芽率(設(shè)對照發(fā)芽率為(設(shè)對照發(fā)芽率為100%)為縱座標。)為縱座標。 分析不同濃度的分析不同濃度的ABA對種子發(fā)芽率的影響對種子發(fā)芽率的影響.注意事項 潔凈的培養(yǎng)皿 選用活力
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