病理制片和染色技術(shù)

1、幫助臨床查明死因（原因不明的死亡）幫助臨床查明死因（原因不明的死亡）手術(shù)后病變標(biāo)本，以明確診斷（臨床活手術(shù)后病變標(biāo)本，以明確診斷（臨床活檢）檢）提供教學(xué)、科研的資料提供教學(xué)、科研的資料 任何組織切片必須依靠切片機(jī)將組任何組織切片必須依靠切片機(jī)將組織切成薄片（厚度以織切成薄片（厚度以m計(jì)），再進(jìn)行染計(jì)），再進(jìn)行染色而得到結(jié)果。在切成薄片以前必須設(shè)法色而得到結(jié)果。在切成薄片以前必須設(shè)法使組織內(nèi)部滲入足夠的支持物質(zhì)，使組織使組織內(nèi)部滲入足夠的支持物質(zhì)，使組織保持一定的硬度，然后使用切片機(jī)進(jìn)行切保持一定的硬度，然后使用切片機(jī)進(jìn)行切片。滲透到組織中的支持劑（物質(zhì)）有多片。滲透到組織中的支持劑（物質(zhì)）有多

2、種，如石臘、明膠、火棉膠和塑料等。冰種，如石臘、明膠、火棉膠和塑料等。冰凍組織切片法是直接利用快速冷凍法進(jìn)行凍組織切片法是直接利用快速冷凍法進(jìn)行切片切片。 不用切片機(jī)，不經(jīng)過(guò)切片手續(xù)不用切片機(jī)，不經(jīng)過(guò)切片手續(xù)而制成組織切片的方法，包括整體而制成組織切片的方法，包括整體封藏法、浮片法、壓碎法和組織直封藏法、浮片法、壓碎法和組織直接印片法。這些方法操作簡(jiǎn)單而快，接印片法。這些方法操作簡(jiǎn)單而快，可根據(jù)制片的需要進(jìn)行選擇使用?？筛鶕?jù)制片的需要進(jìn)行選擇使用。組織切片法制作過(guò)程中的各種操作組織切片法制作過(guò)程中的各種操作 取材是根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的和要求取材是根據(jù)實(shí)驗(yàn)的目的和要求及病變程度而合理取得組織材料。及病

3、變程度而合理取得組織材料。固定是用化學(xué)藥品把組織原來(lái)的結(jié)固定是用化學(xué)藥品把組織原來(lái)的結(jié)構(gòu)保存下來(lái)，以便觀察研究之用，構(gòu)保存下來(lái)，以便觀察研究之用，固定劑同時(shí)具有硬化細(xì)胞組織的作固定劑同時(shí)具有硬化細(xì)胞組織的作用，使制片便于進(jìn)行。用，使制片便于進(jìn)行。 洗滌是把滲入組織中的固洗滌是把滲入組織中的固定劑洗去，防止染色中的結(jié)晶產(chǎn)定劑洗去，防止染色中的結(jié)晶產(chǎn)生。脫水是驅(qū)除組織中的水分，生。脫水是驅(qū)除組織中的水分，以利于透明和浸蠟。以利于透明和浸蠟。脫水后的組織中水分已被透明可代脫水后的組織中水分已被透明可代替，而有利于浸蠟。替，而有利于浸蠟。浸蠟的目的是使組織有一定的硬度浸蠟的目的是使組織有一定的硬度而有

4、利于切片和細(xì)胞組織保持一定而有利于切片和細(xì)胞組織保持一定的生活時(shí)狀態(tài)。的生活時(shí)狀態(tài)。 用石蠟和其他包埋劑將組用石蠟和其他包埋劑將組織包繞一定的形狀以便于切片?？棸@一定的形狀以便于切片。將包埋好的組織塊用切片機(jī)切將包埋好的組織塊用切片機(jī)切成一定的厚度（以成一定的厚度（以m計(jì)）。計(jì)）。將已切妥的切片在溫水中展平整后用將已切妥的切片在溫水中展平整后用載玻片貼上，稍晾趕后再烤片。載玻片貼上，稍晾趕后再烤片。染色可使細(xì)胞和組織被染上不同的顏染色可使細(xì)胞和組織被染上不同的顏色而產(chǎn)生一定的折射率，便于顯微鏡色而產(chǎn)生一定的折射率，便于顯微鏡觀察。觀察。 切片染色后用膠類物質(zhì)將其切片染色后用膠類物質(zhì)將其封固，

5、以利于長(zhǎng)期保存。封固，以利于長(zhǎng)期保存。 1.標(biāo)本切開(kāi)或取厚塊標(biāo)本切開(kāi)或取厚塊組織固組織固定定固定后處理固定后處理（石臘切片法）石臘切片法）脫水脫水透明透明浸蠟浸蠟包埋包埋切片切片粘片粘片脫蠟脫蠟各級(jí)乙醇各級(jí)乙醇水洗水洗常常規(guī)染色或特殊染色規(guī)染色或特殊染色脫水脫水透明透明樹(shù)膠封片樹(shù)膠封片 在制作組織切片的過(guò)程中，在制作組織切片的過(guò)程中，首先將組織充分固定后才能進(jìn)行首先將組織充分固定后才能進(jìn)行制片，尤其對(duì)石蠟切片，這是不制片，尤其對(duì)石蠟切片，這是不可少的重要步驟?？缮俚闹匾襟E。 就是使要觀察的組織構(gòu)造就是使要觀察的組織構(gòu)造盡量接近于它生前的正常狀態(tài)。盡量接近于它生前的正常狀態(tài)。 1）迅速防止組織

6、，細(xì)胞的死后變化，防）迅速防止組織，細(xì)胞的死后變化，防止自溶與腐敗，以保持組織和細(xì)胞與正止自溶與腐敗，以保持組織和細(xì)胞與正常生活時(shí)的形態(tài)相似。常生活時(shí)的形態(tài)相似。 2）使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等）使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等各種成分轉(zhuǎn)變成不溶性物質(zhì)，以保持它各種成分轉(zhuǎn)變成不溶性物質(zhì)，以保持它原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。 3）使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來(lái)，）使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來(lái)，而產(chǎn)生不同的折射率，造成光學(xué)上的差而產(chǎn)生不同的折射率，造成光學(xué)上的差異，以便染色后易于鑒別和觀察。異，以便染色后易于鑒別和觀察。 程序程序 項(xiàng)項(xiàng) 目目 時(shí)間分配時(shí)間分配123

7、4567891011121375%乙醇乙醇85%乙醇乙醇95 %乙醇乙醇95 %乙醇乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯石蠟石蠟56565858石蠟石蠟565658 58 石蠟石蠟56565858時(shí)間長(zhǎng)短均可時(shí)間長(zhǎng)短均可51051051025252530 min30 min-1-130 min-1-11-21-21-21-22-42-4 程序程序 項(xiàng)項(xiàng) 目目 時(shí)間分配時(shí)間分配1234567891011121375%乙醇乙醇85%乙醇乙醇95 %乙醇乙醇95 %乙醇乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯二甲苯石蠟石蠟56565858石蠟石蠟565658 58 石蠟石蠟56565858時(shí)間長(zhǎng)短均可時(shí)間長(zhǎng)短均可25252520 min30 min30 min15 min10 min10 min1 11-21-21-21-2 程序程序 項(xiàng)項(xiàng) 目目 時(shí)間分配時(shí)間分配1234567891011121385%乙醇乙醇95%乙醇乙醇95 %乙醇乙醇95 %乙醇乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇無(wú)