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1、班級(jí):14生物科學(xué) 學(xué)生:目錄目錄選題背景及意義論文的結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)材料主要研究方法和技術(shù)主要研究?jī)?nèi)容實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析全文總結(jié)致謝選題背景及意義O背景: 豆芽,是我國(guó)人民喜食的一種傳統(tǒng)優(yōu)質(zhì)蔬菜。它白嫩清爽、口味鮮美、外型美觀,而且無(wú)污染,具有保健功能。我國(guó)對(duì)豆芽的生產(chǎn)工藝、食用及藥用功能早在古代就有詳細(xì)記載。明代神醫(yī)李時(shí)珍的巨著本草綱目綠豆條中載: 諸豆生芽皆腥韌不堪食用,唯此豆芽白美獨(dú)異,食之清火益神,利泄減脂,飲譽(yù)美肴者也。選題背景及意義O意義 本實(shí)驗(yàn)以黃豆芽和綠豆芽為樣本,從蛋白質(zhì)、還原性糖、總糖、維生素C含量指標(biāo)以及過(guò)氧化物酶活性和過(guò)氧化物同工酶入手,比較了這兩種豆芽的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
2、,為消費(fèi)者的購(gòu)買(mǎi)和產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)上提供新的依據(jù)。論文的結(jié)構(gòu)和主要內(nèi)容關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)材料O材料: 黃豆芽、 綠豆芽O主要儀器和設(shè)備 電熱恒溫水浴鍋;可見(jiàn)光分光光度計(jì); 生化培養(yǎng)箱 ; 電子萬(wàn)用爐 ;電子天平;離心機(jī);旋渦混合器;垂直板電泳槽及附件;直流穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀。O主要試劑:見(jiàn)下表關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)實(shí)驗(yàn)試劑維生素C的定量測(cè)定1%草酸溶液、2%草酸溶液、維生素C標(biāo)準(zhǔn)液 、氧化型0.02% 2,6-二氯酚靛酚溶液總糖和還原糖含量的測(cè)定蒽酮試劑、標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液(0.1mg/mL)、6mol/L HCl溶液、20% NaOH溶液、6mol/L鹽酸蛋白質(zhì)含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液、考馬斯亮蘭G-250染料試劑
3、、0.05mol/L TrisHCl緩沖液(pH6.8)過(guò)氧化物同工酶分析A(分離膠緩沖液)/100mL 、 B(濃縮膠緩液)/100mL 、C(分離膠貯液)/100mL 、D(濃縮膠貯液) /100mlE 、核黃素/100mlF 、蔗糖/100ml、電極緩沖液/1000ml、封板膠(用時(shí)稀釋10倍)熱煮沸0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液pH7.6 、染色液、前沿指示劑過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定0.1 mol/L磷酸緩沖液pH7.6反應(yīng)混合液主要研究方法和技術(shù)O維生素C的定量測(cè)定:1 制備新鮮的果蔬樣品液2 用染料液滴定維生素C標(biāo)準(zhǔn)液3 滴定樣品液4 計(jì)算主要研究方法和技術(shù)O總糖和還原糖含量的測(cè)定葡萄
4、糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制樣品中還原糖的提取與測(cè)定樣品中總糖的提取、水解和測(cè)定比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并計(jì)算主要研究方法和技術(shù)O蛋白質(zhì)含量的測(cè)定蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制樣品的制備樣品的測(cè)定比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)并計(jì)算主要研究方法和技術(shù)O過(guò)氧化物同工酶分析貯液配制安裝電泳槽制膠樣品的制備點(diǎn)樣電泳剝膠染色記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果主要研究方法和技術(shù)O過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定1 樣品提取液2 比色3 結(jié)果計(jì)算主要研究?jī)?nèi)容(1)2,6-二氯酚靛酚滴定法研究豆芽的維生素C含量(2)蒽酮比色法研究豆芽的還原糖和總糖的含量(3)考馬斯亮藍(lán)比色法研究豆芽的蛋白質(zhì)的含量(4)聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離豆芽的過(guò)氧化物同工酶的(5)比色法研究豆芽的過(guò)氧化物酶的活性實(shí)驗(yàn)結(jié)
5、果及分析O黃豆芽和綠豆芽維生素C的定量測(cè)定結(jié)果: 染料液滴定維生素C標(biāo)準(zhǔn)液實(shí)驗(yàn)表:123維生素C標(biāo)準(zhǔn)液 mg1染液滴定末讀數(shù) ml1.901.911.95染液滴定初讀數(shù) ml0.010.000.02染液凈用量 ml1.891.911.93染液平均用量 ml1.911ml染液對(duì)應(yīng)維生素C的量 mg0.52實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O維生素C的定量測(cè)定結(jié)果: 黃豆芽綠豆芽編號(hào)1212稱(chēng)取重量 g20.0研磨液體積 ml40.0滴定研磨液用量 ml10.0染液用量末讀數(shù) ml0.510.400.840.80染液用量初讀數(shù) ml0.050.000.010.02染液凈用量 ml0.460.400.830.78果蔬中
6、維生素C的含量 mg/100g4.84.28.68.2平均果蔬維生素含量 mg/100g4.58.4黃豆芽中維生素C的含量4.5mg/100g;綠豆芽中維生素C的含量8.4mg/100g實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O總糖和還原糖含量的測(cè)定 葡萄糖溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作 012345標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液/mL00.10.20.30.40.5蒸餾水1.00.90.80.70.60.5 置冰水浴中5min蒽酮試劑4.04.04.04.04.04.0 煮沸10,冷卻后室溫放置10,在620nm處比色葡萄糖溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O總糖和還原糖含量的測(cè)定黃豆芽綠豆芽實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目還原糖總糖還原糖總糖A6200.1000.2480.
7、0810.143稀釋液V ml1濃度c mg/ml0.0070.0180.0060.010 還原糖: 總糖:含量m mg1432.41218質(zhì)量分?jǐn)?shù) %1.43.21.21.8實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析012345100g/mL牛血清白蛋白溶液mL00.20.40.60.81.0蒸餾水mL1.00.80.60.40.20考馬斯亮藍(lán)液mL5.05.05.05.05.05.0O蛋白質(zhì)含量的測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制用量蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O蛋白質(zhì)含量的測(cè)定結(jié)果黃豆芽綠豆芽樣品液體積V ml4.45.1A5951.0860.488由 蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可知果蔬稀釋液蛋白質(zhì)濃度c g/ml159.486.7m
8、=V*c果蔬中蛋白質(zhì)含量m mg/100g859.8442.2黃豆芽蛋白質(zhì)含量859.8mg/100g;綠豆芽蛋白質(zhì)含量442.2 mg/100g 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O過(guò)氧化物同工酶分析指示劑移動(dòng)距離 cm黃豆芽各條帶移動(dòng)距離cmRf綠豆芽各條帶移動(dòng)距離cmRf 6.41.00.160.80.132.10.332.10.332.70.422.50.393.00.473.10.484.20.663.70.58實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O過(guò)氧化物同工酶分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表: 時(shí)間min012345678黃豆芽0.4370.5280.6150.7030.7520.820.8850.
9、9471.01綠豆芽0.090.1140.1360.1570.1690.1830.1970.2090.219過(guò)氧化物酶活性測(cè)定曲線(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析O過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定結(jié)果斜率k過(guò)氧化物酶活力 OD470/min過(guò)氧化物酶比活力 u/(gmin)黃豆芽0.0701112165608綠豆芽0.015825281264實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析實(shí)驗(yàn)中最大的實(shí)驗(yàn)誤差來(lái)自取材上,豆芽的營(yíng)養(yǎng)(蛋白質(zhì)、還原糖和總糖)成分分布不均,其中主要分布在豆芽的子葉上,而豆芽根部含量則比較少。為了使豆芽取材的質(zhì)量達(dá)到整克,就會(huì)出現(xiàn)不能完整采用整個(gè)豆芽,而采取其中的一部分,導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分含量比例不一樣。另一方面,豆
10、芽的含水量也影響豆芽營(yíng)養(yǎng)成分比例,還有豆芽的生長(zhǎng)時(shí)間越長(zhǎng)而豆芽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)因?yàn)楹粑饔枚鴾p少。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析另一個(gè)重要原因是實(shí)驗(yàn)操作,首先是研磨,研磨不充分會(huì)使各成分的提取受到影響,產(chǎn)生很大的誤差。其次是溫度,蛋白質(zhì)的提取需要在冰浴下進(jìn)行,而還原糖和總糖的提取需要合適的溫度(水浴加熱)。酶活性也跟溫度有極大的關(guān)系,在酶的最適溫度下酶活性最大,超過(guò)或低于最適溫度,活性減弱,高溫酶使會(huì)失活。還有PH,空氣的氧化作用等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)當(dāng)中,各種試劑的用量,測(cè)量的讀數(shù),儀器本身的誤差也都對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響。全文總結(jié) 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)2,6-二氯酚靛酚滴定法、蒽酮比色法、考馬斯亮藍(lán)比色法、聚丙烯酰胺凝膠電泳法、比色法研究了黃豆芽和綠豆芽的維生素C含量、還原糖和總糖的含量、蛋白質(zhì)的含量、過(guò)氧化物同工酶的分離、過(guò)氧化物酶的活性
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