園藝植物病理學(xué)

1、園藝植物病理學(xué)實習部分實習一、植物病害標本的采集和制作實習二、園藝植物病害的調(diào)查與損失估計實習三、園藝植物病害的診斷教學(xué)實習的目的是讓學(xué)生將課本上學(xué)習到的理論知識應(yīng)用到具體實踐中，提高同學(xué)們解決實際生產(chǎn)問題的能力，特別是鑒定病害標本的能力。教學(xué)實習將為開展科研和技術(shù)推廣工作打下一定的理論基礎(chǔ)。因此，實驗實習時應(yīng)切實注意以下各點：一、實驗實習前，必須認真對實驗實習指導(dǎo)內(nèi)容進行認真預(yù)習，明確目的要求、方法和步驟，熟悉主要操作環(huán)節(jié)，做好準備工作。二、準備好實驗用具3H-4H繪圖鋼筆、橡皮、直尺或三角板、繪圖紙、報告紙、記錄本。三、實習小組在實習前應(yīng)仔細清點實習用具、材料，填寫儀器使用卡片，如有不符或

2、損壞，應(yīng)及時報告指導(dǎo)教師。四、嚴格遵守操作規(guī)程，服從教師指導(dǎo)，認真完成實驗實習規(guī)定的操作和觀察項目，培養(yǎng)嚴肅認真、一絲不茍的科學(xué)態(tài)度和工作作風。五、在實驗實習場所，必須保持安靜；愛護儀器，珍惜標本，節(jié)約藥物，實驗實習用品、材料等用后要及時整理，放歸原處，不得亂拿亂用或隨意丟棄，如有損壞按規(guī)定處理。六、注意安全，嚴防著火、觸電和藥物中毒。七、認真記錄實驗實習結(jié)果，寫好實驗實習報告（用統(tǒng)一規(guī)定的實驗實報告紙）或完成其他作業(yè)，按時交批，由指導(dǎo)人員進行考核、評定成績。作業(yè)力求簡明扼要，清晰正確，反對單純抄襲、臨摹參考書。如實驗實習報告不符合要求，必須退回重做。缺實驗、實習時，應(yīng)申請補做。八、每次實驗實

3、習結(jié)束時，由指導(dǎo)人員檢查后，方可離開現(xiàn)場實習一 植物病害標本的采集和制作 植物病害標本是植物病害及其分布的實物性記載。有了病害標本，就可以在室外觀察的基礎(chǔ)上，在室內(nèi)進一步對病害進行研究。尤其是對于系統(tǒng)地學(xué)習植物病原真菌來說，提供大量的實物標本更是不可缺少的。所以，植物病害標本的采集、制作和鑒定，是病理實驗室不可忽視的基本建設(shè)工作。一、目的要求學(xué)習采集和制作植物病害標本的方法；通過標本采集能識別當?shù)貓@藝植物主要病害種類及癥狀特征和發(fā)生情況，為積累病害標本和開展植保工作奠定基礎(chǔ)。二、儀器及用品標本夾、標本紙、采集箱、剪刀、小刀、紙袋、塑料袋、標簽、麻繩、記載本、鑷子、體視顯微鏡、擴大鏡、標本瓶、大

4、燒杯、酒精、蒸餾水、量杯等。三、實習地點野外及實驗室。四、實習內(nèi)容和方法(一)標本的采集1、采集標本的要求根據(jù)標本使用的目的，決定采集的數(shù)量和部位。為了提高標本的使用價值，對標本采集提出以下幾點要求：（1）癥狀應(yīng)具有典型性，標本應(yīng)有典型的病狀和病癥，最好有不同階段和不同部位的癥狀。這樣才能使標本起到幫助人們正確識別病害的作用。例如蘋果腐爛病在不同時期的癥狀更是截然不同，即形成孢子角、潰瘍、裂皮、“小黑爛點”等各種癥狀。所以采集不同階段的癥狀，對正確識別病害也是很重要的。（2）真菌病害標本應(yīng)采集有子實體的。對于真菌病害來說，鑒定病原物是正確診斷病害的重要條件之一，因此要求真菌病害標本必須有病菌的

5、子實體。（3）每種標本上的病害種類應(yīng)力求單純。如果一份標本上同時有幾種病害，就會混淆視線，影響鑒定，這樣就沒有適用價值。（4）采集時應(yīng)進行必要的記載，以輔助標本不足。記載的內(nèi)容應(yīng)包括：寄主名稱、發(fā)病情況、環(huán)境條件、以及采集日期、地點、采集人姓名等。附表植物病害采集記錄采集號： 采集時間： 年 月 日寄主名稱： 病原名稱： 采集起點： 發(fā)病情況：發(fā)病率（%）：環(huán)境條件:采集人： 鑒定人：（5）寄主的鑒定也很重要，有些病害如銹病，不知道寄主是無法鑒定的。對于不認識的寄主植物。應(yīng)將寄主鑒定所必需的部分，如枝、葉、花及果實等部分都采集齊全。2、采集標本應(yīng)注意以下幾點（1）適于干制的標本，應(yīng)隨采隨壓于標

6、本夾中，尤其容易干燥卷縮的標本如水稻、小麥的葉片，最好立即夾在厚書本中，否則葉片失水卷縮后無法展平。（2）柔軟多汁或腐爛的標本，應(yīng)用紙袋或標本紙包好，然后置于標本箱中，以免污染和擠壞標本，妨礙鑒定。（3）黑粉病類標本由于病菌孢子極易散落，所以采集時應(yīng)用紙袋或標本紙包好后，再置于采集夾中或采集箱中，以免混雜妨礙鑒定。（4）每種標本采集的數(shù)量不宜過少，以便在制作和應(yīng)用中留有余地。 3、采集標本的用具（1）標本夾：是用來翻曬、壓制標本的木夾。由兩個對稱的一些木條平行釘成的柵狀板組成。（2）采集箱：在野外用于臨時收存新采的果實等柔軟多計的標本。是由鐵皮制成的扁園箱，內(nèi)側(cè)較平，外側(cè)較鼓，箱門設(shè)在外側(cè)，箱

7、上設(shè)有背帶。（3）標本紙：用于吸收標本的水分使標本逐漸干燥，一般用吸水性較好的草紙。此外，采集標本時還要擴大鏡、繩子、采集記錄本和采集標鑒等。有時根據(jù)采集標本的對象不同，還需要修枝剪、高枝剪、手鋸、手鏟等工具。（二）標本的制作1、干標本制作法通常所說的臘葉標本就是經(jīng)過壓制的干標本。把適于壓制的標本如植物的莖、葉以及去掉果肉的果皮等，分層壓在標本夾中，放一層標本紙(每層3-4張)放一層標本，每個標本夾的總厚度以三寸左右厚為宜，用繩子將標本夾壓緊后，經(jīng)日曬使其干燥，干燥愈快愈能保持標本原有的色澤。夏季氣溫較高標本容易發(fā)酵變色，換紙宜勤。一般前三、四天應(yīng)每天換紙一次，以后每二、三天換紙一次，至完全干

8、燥為止。在第一次換紙時，同時將標本整形，使其達到既美觀又便于觀察的要求。壓制干標本，除了自然干燥外，必要時可用人工干燥法，在烘箱中或土炕上進行烘干。其溫度可提高到35-50，進行快速干燥，但換紙要勤，至少兩小時換一次。幼嫩或多汁的標本如花、嫩苗等可夾在兩層脫脂棉中再壓制。2、液浸標本制作法有些標本如多汁的果實、塊莖、塊根及多肉的子囊菌和擔子菌的子實體等，不適于干制，而且有些標本還需要保持原色，須用浸漬法保存在標本瓶中。浸漬液的種類很多，這里介紹常用的幾種：普通防腐性浸漬液：只適于防腐沒有保色的作用。福爾馬林50毫升酒精(95%)300毫升水2000亳升保持綠色標本的浸漬液。(1)醋酸銅浸漬法以

9、結(jié)晶醋酸銅逐漸加到50%的醋酸中，至飽和為止，(大約1000毫升50%醋酸加入15克醋酸銅既可達到飽和程度)然后將飽和溶液稀釋3-4倍后使用。醋酸銅液處理標本分熱處理和冷處理兩種方法。熱處理法是將稀釋后的醋酸銅液加熱至沸、投入標本。標本的綠色最初會被漂去，經(jīng)3、4分鐘至綠色恢復(fù)后，將標本取出，用清水洗凈，保存于5%的福爾馬林液中。由于熱處理標本易使莖、葉變軟，果實破裂，因此，亦可采用冷處理法，即將標本用2-3倍醋酸銅稀釋液冷浸，經(jīng)3小時綠色退掉，再經(jīng)72小時又可恢復(fù)原來的綠色，然后取出用清水洗凈，保存于5%的福爾馬林液中。(2)硫酸銅及亞硫酸浸漬法將標本在5%的硫酸銅溶液中冷浸6-24小時，當

10、綠色恢復(fù)后取出用清水洗凈，保存于亞硫酸溶液中(以含5-6%SO2的亞硫酸溶液15毫升加水1000毫升)。亞硫酸浸漬液也可用下法配制：取無水亞硫酸鈉16克，溶于1000毫升水中，將20毫升濃硫酸慢慢加入上述溶液中即成。或以3%的硫酸銅溶液加熱至80，將綠色標本浸入，不久綠色漸變成褐色，等其綠色恢復(fù)后立即取出用清水洗凈，保存于5%的福爾馬林液中，效果也很好。保持黃色和桔紅色標本的浸漬液用亞硫酸浸漬液保存杏、梨、柿、蘋果、柑桔、紅辣椒等標本效果較好。但亞硫酸過濃，有漂白作用不能保色；亞硫酸過稀達不到防腐作用，因此，對各種標本的適宜濃度需要通過試驗才能確定。在需要用較低濃度時，可加入少量酒精以增加防腐

11、能力。如果溶液中加入少許甘油，可防止標本開裂。亞硫酸浸漬液的濃度，一般用市售的亞硫酸(含SO25-6%的水溶液)配成4-10%的稀釋溶液(4-10%溶液含SO2為0.2%-0.5%)即可。保持紅色標本的浸漬液保存紅色相當因難，因大部分的紅色是水溶性的花青素形成的，而花青素又能溶于水和酒精中。常用的浸漬液為瓦查紅色浸漬液：硝酸亞鈷15克氯化餳10克福爾馬林2.5毫升水2000毫升將標本洗凈后冷浸在上述溶液中(完全浸沒)14天，然后取出保存于下列浸漬液中：福爾馬林10毫升酒精(95%)10毫升亞硫酸(飽和溶液)30-50毫升水1000毫升保持真菌色素的浸漬液真菌色素不溶于水者，可采用以下兩種浸漬液

12、：(1)硫酸鋅福爾馬林溶液硫酸鋅25克福爾馬林(40%)10毫升水1000毫升(2)醋酸汞冰醋酸溶液醋酸汞10克冰醋酸5毫升水1000毫升真菌色素溶于水中者，可采用下述浸漬液：醋酸汞1克中性醋酸鉛10克冰醋酸10毫升酒精(95%)1000毫升標本瓶的封口方法上述保存標本的浸漬液，多由易于揮發(fā)和易于氧化的藥品配制，因此，很容易揮發(fā)或氧化而喪失其作用，所以，只有將標本瓶密封以后才能長久保持藥液的效用。封口的方法如下：(1)暫時封口法以蜂蠟及松香各一份，分別熔化混合，加入少量凡士林調(diào)成膠狀物，涂于瓶蓋邊緣，將蓋壓緊。亦可用明膠四份在水中浸數(shù)小時，將水濾去，加熱溶化，拌入一份石蠟，融化混合后成膠狀物，

13、乘熱使用。(2)永久封口法以明膠及硝石灰各一份混合，加水調(diào)成糊狀物，用于封蓋，干燥后由于明酸鈣的硬化而密封。亦可用明膠28克在水中浸數(shù)小時，將水濾去加熱熔化，再加入0.324克的重鉻酸鉀，并加入適量的熟石膏使其成糊狀，即可用于封口。3、標本的保藏制好的標本，除保存在標本瓶中的浸漬標本外，絕大部分是干制的臘葉標本。保存臘葉標本，一般采用以下兩種方法。一般是把標本裝在標本盒中，主要適用于教學(xué)示范標本和展覽用標本。標本盒為具有玻璃面的紙盒、盒的大小可根據(jù)標本決定，一般以20282-3厘米為宜。裝標本時，先在盒底撒一層樟腦粉，以防止蟲蛀食標本。然后鋪一層適當厚度的棉絮(或棉絮下面鋪適量的紙屑可節(jié)省不少

14、棉絮)，在棉絮上擺好標本，并在左下角或右下角(位置應(yīng)統(tǒng)一)放上標簽，最后蓋上盒蓋，在標本盒的上端和下端側(cè)面中部，各插入一枚大頭針，將標本于以固定。并在下端側(cè)面的右面加以標簽注明標本的名稱。另一種方法，是先將標本封在適當大小的普通油光紙夾中，再將其置于牛皮紙袋或牛皮紙中。牛皮紙袋或牛皮紙夾的大小視標本大小而定，一般以4030厘米為宜。然后在牛皮紙袋或牛皮紙夾面上貼上標簽，標簽上的項目應(yīng)包括，寄主、病害名稱、病原學(xué)名、采集人、鑒定人，采集日期及地點，采集編號等。標本應(yīng)放在專用標本柜中、標本柜應(yīng)能防鼠。其內(nèi)部結(jié)構(gòu)以層式的為好，各層以活動板相隔，每層放一種標本。柜的扣壁內(nèi)側(cè)，應(yīng)留有間距，使上下貫通，以

15、便于熏蒸殺蟲時毒氣上下流通。柜的最下一層應(yīng)作成抽屜式，以便于盛裝熏蒸殺蟲的藥劑，標本室的防蟲工作很重要，除經(jīng)常注意外，應(yīng)定期普遍檢查，發(fā)現(xiàn)標本有蟲應(yīng)徹底消滅。防治標本蟲通常用氯化苦、溴甲烷等藥劑熏蒸，效果很好。標本室應(yīng)設(shè)在陰涼干燥的房間，以防止標本受潮霉變。五、作業(yè)與思考題1.采集標本時應(yīng)注意那些問題?2.采集當?shù)刂饕獔@藝植物病害標本。3.制作干制標本和浸漬標本。4.記敘主要病害標本的癥狀特征。5.制好的植物病害標本如何保存?實習二 園藝植物病害的調(diào)查與損失估計一、 目的要求通過田間病害發(fā)病率、嚴重率、病情指數(shù)、損失率及防治效果的調(diào)查，了解病害在田間的發(fā)生發(fā)展情況，提高分析問題和從事調(diào)查研究的

16、能力。二、 儀器用品擴大鏡、記錄本、鉛筆。三、實習地點學(xué)校實習農(nóng)場或附近當?shù)毓麍@或菜田。四、實習內(nèi)容和方法(一)、一般調(diào)查當一個地區(qū)有關(guān)病害發(fā)生情況的資料很少，可先進行一般調(diào)查，目的在于了解當?shù)夭『Πl(fā)生的一般情況。調(diào)查的面要廣，要有代表性，例如調(diào)查附近果農(nóng)的果樹病害發(fā)生的一般情況。以小組為單位，選擇不同類型的代表性果園。調(diào)查病害種類，統(tǒng)計發(fā)病率。將調(diào)查結(jié)果填入下表。果樹病害的一般情況調(diào)查表調(diào)查地點果樹種類調(diào)查人日期病害 地勢 果園 土壤 水肥 品種 苗木調(diào)查時發(fā)病率備注種類名稱 性質(zhì) 條件來源 生育期(二)、重點調(diào)查（專題調(diào)查）經(jīng)過一般調(diào)查發(fā)現(xiàn)的主要病害，可作為重點調(diào)查的對象，深入了解它的分布

17、、發(fā)病率、損失率、環(huán)境影響和防治效果等。調(diào)查某一具體病害的發(fā)生發(fā)展規(guī)律及防治效果等，其調(diào)查項目、次數(shù)、時間和要求則因調(diào)查目的而異。(三)、調(diào)查研究調(diào)查研究是解決病害中的懷疑問題，如侵染循環(huán)、發(fā)病因子和防治方法等。調(diào)查的區(qū)域不一定要廣，但要深入，除田間觀察外，更要注意訪問和座談。植物病害田間調(diào)查的基本方法及應(yīng)注意的問題：1、調(diào)查的時間和次數(shù)要根據(jù)調(diào)查目的來確定。對于一般發(fā)生的病害和為害情況的調(diào)查，以在病害發(fā)生的盛期為宜；若一次調(diào)查幾種植物或一種植物的幾種病害，則應(yīng)選適中的時期。2、取樣要有代表性應(yīng)根據(jù)病害種類和環(huán)境條件而定。氣流傳播而分布均勻的病害舅黃瓜霜霉病，樣點數(shù)目可以少些，土傳病害如黃瓜枯

18、萎病，樣點要多，幾在地形、土壤耕作不一致的地區(qū)，應(yīng)分別取樣。為了使調(diào)查樣點具有代表性，一般采用如下幾種取樣方法：（1）棋盤式（圖A、B）此法的正確性較大，但所用的時間也較多。（2）對角線法（圖C、D、E）正確性不如棋盤式，但比較省事。（3）分別取樣法（圖F）即在田間每隔若干行取一行（或數(shù)行）調(diào)查。 ACD BEF取樣單位應(yīng)隨植物種類和病害特點而相應(yīng)變化。一般以面積（用于高桿宓植植物）或長度（用于密植條播作物）。取樣數(shù)量是在每一調(diào)查點上取100200株或2030張葉片。葉片病害，根據(jù)分布情況，每點可檢查2030張葉片。葉片取樣，可隨機取樣，也可在一定部位聯(lián)系一定情況來確定取樣單位。3、注意田間記

19、載和統(tǒng)計進行田間調(diào)查，必須根據(jù)調(diào)查的目的和內(nèi)容，對所調(diào)查的實際情況進行認真記載和統(tǒng)計，一般性病害調(diào)查要隨時記載調(diào)查日期、地點、作物種類和品種名稱、病名、發(fā)病程度（發(fā)病率和嚴重率）、病害分布情況、栽培情況等。作物病害調(diào)查記載調(diào)查地點調(diào)查日期 調(diào)查人 作物品種 種子來源 病名發(fā)病和在田間分布情況施肥情況 栽培方式當?shù)販囟群陀晁乐畏椒ê头乐涡Ч數(shù)厝罕娊?jīng)驗(四)、病害調(diào)查的記載方法估計作物損失所用的數(shù)據(jù)，一般有發(fā)病率（%），病情指數(shù)和損失率，也可根據(jù)目測估計。1、發(fā)病百分率(發(fā)病率)：代表發(fā)病多少，用于記載發(fā)病百分率就是等于損失率的病害，計算公式為 發(fā)病樣本數(shù)發(fā)病率（%）= 100調(diào)查樣本總數(shù)2、

20、病情指數(shù)(感染指數(shù))：病情指數(shù)是指嚴重度，是以分級計數(shù)的方法來估計病情的，適宜于多種斑點類病害。根據(jù)病害輕重程度，人為地分為幾個便于計算的級別，而以數(shù)值來代表各級嚴重度，常以“0”級代表無病，以最高值代表最嚴重的發(fā)病程度，然后再以一定的間隔，定出其它級別，級別不需太多，一般35級即可。級間差異要明顯，容易判斷。分級可以葉片、果實、全株或一個田塊做單位，采用哪一種方法，要由病害種類決定，例如黃瓜霜霉病的分級標準：在葉片上隨機取9cm2的面積,計算其中的斑點數(shù)目(斑點不認大小,明顯的聯(lián)合斑都應(yīng)分別計算)共分五級病情指數(shù)計算公式如下 （發(fā)病級值各級病株或病葉數(shù)）病情指數(shù)=樣本總數(shù)最高發(fā)病級值黃瓜霜霉

21、病的分級標準病級發(fā)病程度 代表數(shù)值 調(diào)查株數(shù)一級無病 0 8二級每個單位面積中少于4個病斑 1 15三級每個單位面積中少于4個病斑 2 20四級每個單位面積中有59個病斑 3 40 五級 每個單位面積中有10個以上病斑或葉片枯死 4 30 08+115+220+340+430病情指數(shù)= =63.5（8+15+20+40+30）4至于各級嚴重率與損失率的關(guān)系，亦不能直接計算，應(yīng)通過藥劑保護和人工誘變等對比試驗估計。（三）普遍率和嚴重率：普遍率即病害發(fā)生的普遍程度。通常用病葉占總病葉數(shù)的百分比來表示，但在發(fā)病很不普遍時，也可用病株占總株數(shù)的百分比來表示，但應(yīng)加以說明。嚴重率是表示植物葉片或整株的受害輕重按葉片受害面積或植株受害葉片的多少劃分等級，一般可分五級。例