高中生物選修一專題二微生物實驗室培養(yǎng)知識點填空+答案

1、、課題背景選修一生物技術(shù)實踐專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實驗室培養(yǎng)1 .研究和應(yīng)用微生物的前提是2 .在實驗室培養(yǎng)微生物,一方面需要,另一方面而Q1 .概念：人們根據(jù)微生物對的不同需求,配制出供其的營養(yǎng)基質(zhì)稱為培養(yǎng)基.2 .種類：根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為、和半固體培養(yǎng)基.3 .瓊脂：是一種從紅藻中提取的,在C以上熔化,在C以下凝固,在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn).瓊脂是制備培養(yǎng)基時最常用的劑.4 .營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、和無機鹽,另外還需要滿足微生物生長對、以及的要求.例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加,培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至,培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至或,培

2、養(yǎng)厭氧微生物時那么需要提供的條件.5 .牛肉膏,蛋白月東來源于,含有、和等營養(yǎng).三、無菌技術(shù)1 .獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是預(yù)防的入侵.2 .無菌技術(shù)圍繞著展開,主要包括以下幾個方面：(1)對實驗操作的、操作者的衣著和進行清潔和.(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、和等進行.(3)為預(yù)防周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在附近進行.(4)實驗操作時應(yīng)預(yù)防已經(jīng)滅菌處理的材料用具與相接觸.3 .無菌技術(shù)的目的：(1)預(yù)防,(2)預(yù)防.4.消毒和滅菌火菌概念使用較為_物體的物理或化學方法殺死或的局部微生物使用微生物(包括_的理化因素殺死物體和)的(不包括_和)_常用方法(1)_消毒法(在C煮(1).火菌：直接

3、在酒精燈火焰的min);灼燒,如、接種針或其他用(2)min或在_消毒法在C煮min;_c煮_具；2火菌在C加熱h).消毒法如用適用于、的物品.擦拭雙手、用消毒水源；紫外線如吸管、培養(yǎng)皿和用具；照射前,適量噴灑或溶(3)火菌：壓力為kpa,溫液等消毒液.)度為C條件下,維持minO4紫外線消毒法：可以殺死或中的微生物.一制備牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基的步驟：1 .計算：依據(jù)是培養(yǎng)基的比例,計算配制某一體積如100ml的培養(yǎng)基時,各種成分的用量.2 .稱量：牛肉膏比擬,可用玻棒挑取到上,同其一塊稱量.牛肉膏和蛋白月東易吸潮,稱取時動作要,稱后及時.3 .溶化：和稱量紙+少量的水'取出一加和

4、一加注意：不斷用玻璃棒攪拌,預(yù)防而導(dǎo)致.當完全熔化后一補加蒸儲水至100mLo調(diào)節(jié)后再進行滅菌.培養(yǎng)基：滅菌4 .滅菌i培養(yǎng)皿：火國、5 .倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至左右時,在附近倒平板.二純化大腸桿菌1 .微生物的接種技術(shù)最常用的是和,除此之外還包括和等方法.雖然這些技術(shù)方法各不相同,但是,其核心都是要預(yù)防,保證.平板劃線法：通過接種環(huán)在培養(yǎng)基外表的操作,將聚集的菌種逐步到培養(yǎng)基的外表.稀釋涂布平板法：將進行一系列的,然后將不同的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表,進行培養(yǎng).兩種接種方法都是為了將聚集在一起的微生物,在劃線培養(yǎng)后或者在的菌液涂布后,可以別離得到由繁殖而來的肉眼可見的單個.2 .菌

5、落：概念：.菌落特征包括.3 .系列稀釋操作：(P19)1、2、3注意：移液管需要經(jīng)過.操作時,和應(yīng)在離火焰處.4 .涂布平板操作：將涂布器末端浸在體積分數(shù)為的酒精；取少量滴加到培養(yǎng)基外表；將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,冷卻S;涂布時可轉(zhuǎn)動,使菌液分布均勻.5 .培養(yǎng)基滅菌合格與否的方法：將接種后的培養(yǎng)基和一個的培養(yǎng)基都放入中,培養(yǎng)12h和24h后,分別記錄觀察.P20培養(yǎng)12h和24h后,觀察到的實驗結(jié)果相同嗎？如果不同,請分析產(chǎn)生差異的原因.如果你在培養(yǎng)基上觀察到了不同形態(tài)的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎?6 .如何記錄實驗結(jié)果？(三)菌種的保藏：(1)臨時保藏：將菌種接種

6、到試管的,在溫度下培養(yǎng),當長成后,將試管放入冰箱中保藏,以后每個月,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上.適用范圍：對于的菌種,可以采用臨時保藏的方法.缺點是：保存時間,菌種容易被或產(chǎn)生變異.(2)長期保存菌種的方法：法,在mL的甘油瓶中,裝入mL甘油后將mL轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油后,放在冷凍箱中保存.P15旁欄思考題：無菌技術(shù)除了用來預(yù)防實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的？P16旁欄思考題：請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌.如果需要,請選擇適宜的方法.(1)培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實驗操作者的雙手(1)、(2)需要;(3)需要.P17倒平板操作的討論1

7、.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50c左右時,才能用來倒平板.你用什么方法來估計培養(yǎng)基的溫度?2 .為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?3 .平板冷凝后,為什么要將平板倒置?4 .在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么？P18平板劃線操作的討論1 .為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2 .在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線？O3 .在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行.結(jié)合

8、平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進行無菌操作？OP20課后練習題1、2、3專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用答案課題1微生物的實驗室培養(yǎng)一、1、預(yù)防雜菌入侵,獲得純潔的培養(yǎng)物.2、為培養(yǎng)的微生物提供適宜的營養(yǎng)和環(huán)境條件,保證無處不在的其他微生物無法混入.1 .營養(yǎng)基質(zhì)生長繁殖2 .液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基水3、多糖9844固態(tài)固體凝固4、碳源氮源PH特殊營養(yǎng)物質(zhì)氧氣維生素酸性中性微堿性無氧5、動物原料糖維生素有機氮三、1 .外來雜菌2 、如何預(yù)防雜菌空間手消毒接種用具培養(yǎng)基滅菌酒精燈火焰周圍的物品3 、實驗室的培養(yǎng)物被其他外來的微生物污染操作者自身被微生物感染4 .溫和外表或內(nèi)部芽抱和

9、抱子強烈內(nèi)外所有芽抱和抱子5 .煮沸消毒1005-6巴氏70-75308015化學藥劑酒精氯氣石碳酸煤酚皂物體外表空氣灼燒滅菌接種環(huán)金屬干熱滅菌160-1701-2耐高溫需保持枯燥玻璃器皿金屬高壓蒸汽滅菌10012115-30四、一1 .配方2 .粘稠稱量紙迅速蓋上瓶蓋3 .牛肉膏加熱稱量紙蛋白陳氯化鈉瓊脂瓊脂糊底燒杯破裂瓊脂PH4、高壓蒸汽滅菌干熱滅菌5、50酒精燈火焰二1 .平板劃線法稀釋涂布法斜面接種穿刺接種雜菌的污染培養(yǎng)物的純度瓊脂固體連續(xù)劃線稀釋菌液梯度稀釋稀釋度別離數(shù)次稀釋度足夠高一個細胞菌落2 .在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以別離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體菌落的形狀,大小

10、,隆起程度和顏色等3、滅菌試管口移液管1-2cm4、70%菌液8-10S培養(yǎng)皿5、未接種37C恒溫箱不同三1固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)適宜的2甘油管藏法31滅菌1菌落4C3-6新鮮充分混勻-20C頻繁使用不長污染P15無菌技術(shù)還能有效預(yù)防操作者自身被微生物感染.P16滅菌消毒P171、可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行2、通過灼燒滅菌,預(yù)防瓶口的微生物污染培養(yǎng)基.3、平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,將平板倒置,既可以預(yù)防皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,又可以預(yù)防使培養(yǎng)基中的水分過快地地揮發(fā).4、空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物.P181、操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了預(yù)防接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落.劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,預(yù)防細菌污染環(huán)