機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計申請書

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上 七年制學(xué)生機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計項(xiàng)目申 請 書項(xiàng) 目 名 稱：維生素D對2型糖尿病的影響指導(dǎo)教師： 年級、班級：學(xué)生姓名：聯(lián)系電話：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室2010年11 月一、 立題依據(jù)及意義（國內(nèi)外研究現(xiàn)狀、水平和發(fā)展趨勢；創(chuàng)新之處和主攻關(guān)鍵）糖尿病 （diabetes mellitus）是一種在遺傳和環(huán)境因素長期共同作用下，由于胰島素分泌絕對或者相對不足所導(dǎo)致的漸進(jìn)性蛋白質(zhì)、脂肪、水和電介質(zhì)代謝發(fā)生紊亂的一系列綜合征，其中以高血糖為主要標(biāo)志。隨著人們的生活水平的提高、生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的變化以及人口老齡化，糖尿病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，目前已成為最常見的慢性病之一。而非

2、胰島素依賴性糖尿病的患者約占總數(shù)的90%，多發(fā)生于四十歲以上的人群和老年人，近年其發(fā)病年齡有下降趨勢。如果能夠通過一些方法來降低NIDDM的發(fā)病率，那對人們的健康無疑是一大好處。近年來一些調(diào)查和研究發(fā)現(xiàn)維生素D與糖尿病的發(fā)生存在一些關(guān)系。國際內(nèi)科學(xué)雜志一篇名為Clinical progress in studies on vitamin D and type 2 diabetes的文章指出：研究發(fā)現(xiàn)維生素D與2型糖尿病的發(fā)生關(guān)系密切.低維生素D血癥的人群中2型糖尿病的發(fā)病率明顯增高。芬蘭赫爾辛基國家公共衛(wèi)生研究所的保羅·克內(nèi)克特博士說：人們一直認(rèn)為，維生素含量高可能會增加人們患型糖尿

3、病的風(fēng)險，但我們的研究并沒有發(fā)現(xiàn)這方面的證據(jù)。 克內(nèi)克特博士所進(jìn)行的追蹤研究中，共有人患上型糖尿病。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，當(dāng)獲取的血液樣本排除了年齡、性別和季節(jié)因素后，血液中維生素含量和罹患型糖尿病的關(guān)系與之前的看法截然相反。PubMed中一篇名為The potential to improve diabetes control with vitamin D replacement in African American patients: case report and literature review.文章提到非籍美國黑人患NIDDM的比例較高，同時他們的維生素D缺乏率也很高，而補(bǔ)充維

4、生素D對他們的NIDDM也存在一定的治療作用。但是，以上這些說法是否是放之四海皆準(zhǔn)的呢? 所以，針對這一問題，我們小組設(shè)計了這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，來探索維生素D對NIDDM的發(fā)生究竟有什么作用。我們主要研究維生素D對NIDDM的預(yù)防效果，所以實(shí)驗(yàn)分為三組，對照組，糖尿病組，預(yù)防組。二、技術(shù)路線（動物、藥品、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)方法） 動物：120只健康雄性大鼠藥品：STZ、1,25-(OH)2D3、檸檬酸鹽緩沖液、花生油、肝素、儀器設(shè)備：哺乳動物手術(shù)器械一套、注射器、試管、便攜式血糖儀、流式細(xì)胞儀、胰島素ELISA 檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：1、模型的建立：隨機(jī)選取40只體重在2025g的健康雄性大鼠，連續(xù)5d腹腔注

5、射STZ（40 mg·kg-1），分別于注射STZ的第1、2、3、4、6周末各測一次血糖，以血糖水平持續(xù)高于11.1mmol/L為判斷成模的標(biāo)準(zhǔn)。造模期間死亡動物不計入統(tǒng)計范圍。2、動物分組：正常對照組，連續(xù)5d腹腔注射與糖尿病組等容量檸檬酸鹽緩沖液；糖尿病組，成模大鼠隔日腹腔注射與1,25-(OH)2D3組等容量花生油，共15次；預(yù)防組，先隔日腹腔注射1,25-(OH)2D3（5g·kg-1），共15次，然后再連續(xù)5d腹腔注射STZ（40 mg·kg-1）。3、樣本采集與處理：各組大鼠斷尾取血便攜式血糖儀檢測血糖水平；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后采集血清放射免疫法檢測血清胰島素水

6、平，采集胰腺標(biāo)本免疫組化法觀察胰島細(xì)胞Bax和Bcl-xL蛋白表達(dá)水平。4、統(tǒng)計學(xué)分析：SPSS10.0軟件處理。結(jié)果以±s表示。同組內(nèi)處理前后比較用配對t檢驗(yàn)。組間比較用完全隨機(jī)設(shè)計的方差分析，若結(jié)果有意義再進(jìn)行多個樣本均數(shù)間比較的SNK-q檢驗(yàn)（Bax、Bcl-xL陽性率經(jīng)平方根轉(zhuǎn)化后再進(jìn)行統(tǒng)計分析）。糖尿病發(fā)病率用fisher確切概率法。P0.05表示差異有顯著性，P0.01表示差異有極顯著性。三、預(yù)期結(jié)果（研究的總體安排和進(jìn)度；預(yù)期研究成果）記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，觀察動物血糖，血清胰島素水平和胰島細(xì)胞Bax和Bcl-xL蛋白表達(dá)水平，并作統(tǒng)計學(xué)分析。其中血糖濃度是反映預(yù)防效果的最重要

7、因素，為主要的觀察項(xiàng)目。而胰島細(xì)胞Bax和Bcl-xL蛋白表達(dá)水平則可以一定程度上表現(xiàn)出維生素D對胰島B細(xì)胞的保護(hù)和促進(jìn)損傷的細(xì)胞修復(fù)再生的作用。各個指標(biāo)要綜合來看才能最后下結(jié)論。理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)計：若預(yù)防組的血糖濃度較糖尿病組低，血清胰島素水平和胰島細(xì)胞Bax和Bcl-xL蛋白表達(dá)水平較糖尿病組高,則說明維生素D對NIDDM的發(fā)生有一定的預(yù)防作用。若預(yù)防組的血糖濃度較糖尿病組高，血清胰島素水平和胰島細(xì)胞Bax和Bcl-xL蛋白表達(dá)水平較糖尿病組低,則說明維生素D對NIDDM的發(fā)生有一定的促進(jìn)作用。若結(jié)果沒有統(tǒng)計學(xué)意義，則說明維生素D與NIDDM的發(fā)生關(guān)系不大。 四、討論：糖尿病是一種代謝紊亂

8、綜合癥。它是由于胰島素分泌、活性的缺乏或是胰島素抵抗等原因而導(dǎo)致的以高血糖為特征的疾病。主要臨床癥狀為:多尿、多飲、多食、消瘦(三多一少)。WHO推薦糖尿病分為四種類型。1型糖尿病又稱胰島素依賴型糖尿?。↖DDM），患者病狀通常出現(xiàn)在兒童或青少年時期。是由各種原因引起的自身免疫機(jī)制紊亂所致的胰島B細(xì)胞破壞，是胰島素分泌絕對缺乏，血糖升高。2型糖尿病又稱非胰島素依賴性糖尿?。∟IDDM）目前認(rèn)為，2型糖尿病的發(fā)病不僅與遺傳因素有關(guān)，還與向心性肥胖以及衰老所致的體內(nèi)自由基生成增多密切相關(guān)。2型糖尿病中一部分病人以胰島素抵抗為主，病人多肥胖，因胰島素抵抗，胰島素敏感性下降，初期可能出現(xiàn)血中胰島素增高

9、以補(bǔ)償其胰島素抵抗，隨著病情的發(fā)展，出現(xiàn)胰島素抵抗伴胰島素分泌的絕對不足。胰島素抵抗(Insulin Resistance，IR)是指胰島素作用的靶器官對胰島素作用的敏感性下降，即正常劑量的胰島素產(chǎn)生低于正常生物學(xué)效應(yīng)的一種狀態(tài)。維生素D可能直接地改善胰島素的作用，主要通過刺激胰島素受體的表達(dá)從而增強(qiáng)胰島素對葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的反應(yīng)。其間接作用是通過調(diào)節(jié)細(xì)胞外鈣濃度以保證正常的鈣內(nèi)流來達(dá)成的。骨骼肌和脂肪組織維持一個正常的胰島素敏感性所需要的合適的鈣濃度范圍是很窄的，因此鈣濃度波動可能使得這些重要的周圍組織的胰島素信號傳導(dǎo)發(fā)生障礙，使得胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)子4的活性下降，從而導(dǎo)致胰島素抵抗。研究發(fā)現(xiàn)維生素D與2

10、型糖尿病的發(fā)生關(guān)系密切.低維生素D血癥的人群中2型糖尿病的發(fā)病率明顯增高.其機(jī)制可能是低維生素D抑制胰島素的合成和分泌,加重胰島素抵抗而導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生發(fā)展. 這些效應(yīng)可能是通過對VDR基因的作用以及對鈣磷平衡的影響而介導(dǎo)的，轉(zhuǎn)錄因子過氧化酶增殖物活化受體（PPAR）-在其中也扮演一定角色。適當(dāng)補(bǔ)充維生素D可以增加胰島素的敏感性,降低血糖及減少糖尿病心血管并發(fā)癥. 維生素D有保護(hù)胰島細(xì)胞和促進(jìn)損傷的細(xì)胞修復(fù)再生的作用,可改善胰島素敏感性,減輕炎癥反應(yīng)，這可能源于維生素受體（VDR）介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)作用。 而且維生素D與改善2型糖尿病患者的糖脂代謝、腎臟保護(hù)作用、防治骨質(zhì)疏松癥等方面密切相關(guān)。五、

11、參考文獻(xiàn) 要求不少于10篇1. 2010 Mar;2(1):36-40. doi: 10.1111/j.1753-0407.2009.00057.x. Epub 2009 Oct 5Lack of effect of subtherapeutic vitamin D treatment on glycemic and lipid parameters in Type 2 diabetes: A pilot prospective randomized trial2.Int J Intem Med, 2009,36:82-83 Zhanglili ,Yuanli Clinical progres

12、s in studies on vitamin D and type 2 diabetes3. Looking for links between the sunshine vitamin and diabetes4.PubMed - in process Tenn Med. 2010 Apr;103(4):35-6. 5、維生素D2型糖尿病的"保護(hù)傘" 2009年 第12期 作者: , ,6.、醫(yī)學(xué)學(xué)實(shí)用雜志2007：23-12。王婷，徐珊，非胰島素依賴性糖尿病大樹模型的建立7、 > 作者：沈字玲張能余華榮1,25-二羥維生素D3對鏈脲菌素誘導(dǎo)的小鼠1型糖尿病預(yù)防作用及機(jī)制探討8、 Ezrin蛋白在糖尿病腎病鼠腎小球的表達(dá)及活性維生素D對其的影響作者：楊媛媛，鄒敏書，余 健，聶國明， 羅莉漫，徐