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文檔簡介
1、.第1節(jié) 基因工程的根本工具知識要點:DNA重組技術(shù)的所需要的三種根本工具自學(xué)探究:一. 限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀1.限制酶存在的位置及種類?常用的兩種限制酶是什么?2.限制酶的作用及特點?3.限制酶怎樣切割DNA才能形成粘性末端和平末端?二. DNA連接酶“分子縫合針1. DNA連接酶的作用?2.目前常用的兩類DNA連接酶的種類及作用特點?3.區(qū)別DNA連接酶、DNA聚合酶、DNA解旋酶、DNA酶?三.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體“分子運輸車1.什么是質(zhì)粒?2.天然的質(zhì)粒能做載體嗎?做載體的質(zhì)粒必須具備哪些 特點?3.為什么限制酶不剪切細(xì)菌本身的DNA?4.常用的“分子運輸車有哪些?疑難點撥:
2、1.理解限制性核酸內(nèi)切酶:例1 以下關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的說法,錯誤的選項是 A限制性核酸內(nèi)切酶廣泛存在于動植物體內(nèi),微生物內(nèi)很少分布B限制性核酸內(nèi)切酶可以被用來切割DNA分子,獲取目的基因C一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列D限制性核酸內(nèi)切酶能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵2.理解DNA連接酶:例2 以下關(guān)于DNA連接酶的作用,表達(dá)正確的選項是 A既能將雙鏈DNA片斷互補的黏性末端之間連接起來,也能將雙鏈DNA的黏性末端之間的氫鍵進(jìn)展連接B將單個核苷酸加到某DNA片斷末端,形成磷酸二脂鍵C連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D將斷開的兩個DNA片斷的骨架連接起來,重新形成
3、磷酸二酯鍵3.理解載體:例3 作為基因的運輸工具載體,必須具備的條件之一及理由是 A.可以在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制,以便提供大量的目的基因 B.具有多個限制酶切點,以便于目的基因的表達(dá) C.具有某些標(biāo)記基因,以便為目的基因的表達(dá)提供條件 D.可以在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存,以便于進(jìn)展挑選穩(wěn)固練習(xí):1以下說法中正確的有 A限制性核酸內(nèi)切酶主要是從真核生物中別離純化出來的 B所有限制性核酸內(nèi)切酶識別的核苷酸序列均由6個核苷酸組成C不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA的位點不同 D有的質(zhì)粒是單鏈DNA2.下圖示限制性核酸內(nèi)切酶切割某DNA分子的過程,從圖中可知,該限制性核酸內(nèi)切酶能識別的堿基
4、序列及切點是 ACTTAAG,切點在C和T之間BCTTAAG,切點在G和A之間 CGAATTC,切點在G和A之間 DGAATTC,切點在C和T之間3.基因工程的操作過程中需要的工具酶有 A限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶B限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體 CDNA連接酶、DNA聚合酶 D限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶4.特定的限制性核酸內(nèi)切酶只能識別特定的核苷酸序列,并在特定的切點上切割DNA分子,這是應(yīng)用了酶的 A高效性 B專一性 C多樣性 D酶作用條件的溫和性5.一個雙鏈DNA經(jīng)一種限制酶切割一次形成的黏性末端個數(shù)為 A1 B2 C0 D2或06.DNA連接酶的作用是A.連接兩個黏性末端
5、之間的氫鍵 B連接兩個黏性末端之間的磷酸二酯鍵 C連接任意兩個DNA分子 DABC都對7質(zhì)粒是基因工程常用的載體,它的特點是 能自主復(fù)制 不能復(fù)制 構(gòu)造簡單 單鏈DNA 環(huán)狀DNA 含有標(biāo)記基因 A B C D8以下不屬于基因工程的常用載體的是 A核DNA B動物病毒 C噬菌體的衍生物 D植物病毒9關(guān)于限制酶和DNA連接酶的理解,正確的選項是 A其化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì) BDNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵 C. 在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶 D. 它們不能被反復(fù)使用10.以下是幾種不同限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后形成的部分片段。答復(fù)以下問題: 1以上DNA片段是由 種限制性核酸內(nèi)切酶切割后產(chǎn)生的。2假設(shè)要把相應(yīng)片段連接起來,應(yīng)選用 填“DNA聚合酶或“DNA連接酶3找出能連接的對應(yīng)片段并寫出連接形成的DNA片段 。11.下圖所示為一種限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子:1這種限制性核酸內(nèi)切酶切點是 間形成 個黏性末端,其特點是 。2此限制性核酸內(nèi)切酶的特點是 。3如是G堿基發(fā)生基因突變,可能發(fā)生的情況 。4這種工具酶主要存在于 中。5假設(shè)用該酶從蘇云金芽孢桿菌中提取到了抗蟲基因,要將該基因?qū)朊藁?xì)胞中獲得抗蟲棉,那么所需運輸工具稱為 ,最常用的是 ,其次還有 和 。答案:1G
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