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1、酶聯(lián)免疫反應(yīng)常用底物辣根過氧化物酶HRP底物辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)具有分子量小,標(biāo)記方法簡(jiǎn)單,性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),是臨床檢驗(yàn)試劑中常用的酶。該產(chǎn)品廣泛用于各類生化檢測(cè)項(xiàng)目及免疫類(ELISA)試劑盒。中華試劑網(wǎng)辣根過氧化物酶的底物種類豐富,可滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。 HRP的發(fā)色底物辣根過氧化物酶發(fā)色底物為過氧化物和供氫體(DH2),其真正底物是H2O2,但人們習(xí)慣把供氫體稱為底物或統(tǒng)稱供氫體底物。在ELISA中常用的供氫體有以下幾種:1、OPD是ELISA技術(shù)中應(yīng)用較多的供氫體,酶作用后顯黃色(最大吸收波長(zhǎng)為492 nm),其靈敏度高,測(cè)定方便。2、

2、TMB是近年來常用的一種供氫底物,經(jīng)酶作用后顯天藍(lán)色,目測(cè)對(duì)比度鮮明,加酸終止酶反應(yīng)后變黃色(最大吸收波長(zhǎng)為450 nm),易比色定量測(cè)定。3、DBA供氫底物,其反應(yīng)產(chǎn)物為不能溶解的棕色吩嗪衍生物,可用不同光鏡觀察。此種多聚物能被還原和螯合四氯化碳,形成具有電子密度的產(chǎn)物,便于用電鏡觀察。中文名稱英文名稱反應(yīng)產(chǎn)物CAS包裝鄰苯二胺o-Phenylenediamine, OPD, 99.5%黃色、可溶性95-54-5100 g500 g 3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99%藍(lán)色(黃色)、可

3、溶性54827-17-71 g5 g3,3'-二氨基聯(lián)苯胺3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99%棕色、不溶性91-95-225 g100 g聯(lián)苯胺Benzidine, 95%藍(lán)色、不溶性92-87-525 g250 g四甲基聯(lián)苯胺硫酸鹽N-(3-Sulfopropyl)-3,3',5,5-tetramethylbenzidine,sodium salt, TMB-PS, 99%藍(lán)色、可溶性102062-36-25 g25 g5-氨基水楊酸5-Aminosalicylic acid, 98.5%棕色、可溶性89-57-625 g100 g500 g

4、2,2'-二氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)銨鹽Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt綠色、可溶性30931-67-01 g3-氨基-9-乙基咔唑3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC紅色、可溶性132-32-15 g25 g4-氯-1萘酚Chloro-1-naphthol藍(lán)色、可溶性604-44-425 g 小貼士:氧化物、硫化物、氟化物及疊氮化物等可抑制HRP的活性,故勿用這類試劑作為防腐劑。 HRP的發(fā)光底物魯米諾(3-氨基鄰苯二甲酰肼,Luminol)或其衍生物如異魯米諾(4-氨基

5、鄰苯二甲酰肼,Isoluminol),是一類重要的發(fā)光試劑。用HRP標(biāo)記抗體,進(jìn)行免疫反應(yīng)后,利用魯米諾作為發(fā)光底物,在HRP和起動(dòng)發(fā)光試劑(NaOH+H2O2)作用下,魯米諾發(fā)光,發(fā)光強(qiáng)度依賴于酶免疫反應(yīng)物中酶的濃度。反應(yīng)過程如下圖所示:產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS純度包裝328061魯米諾Luminol521-31-398%1 g5 g25 g分子式:C8H7N3O2分子量:433.63熔點(diǎn):194-195    儲(chǔ)存條件: 2-8°C  產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS號(hào)純度包裝A5300異魯米諾Isoluminol3682-1

6、4-298%1 g10 g分子式:C8H7N3O2分子量:177.16熔點(diǎn):194-195    儲(chǔ)存條件: 2-8°C 配套產(chǎn)品 中文名稱英文名稱CAS號(hào)純度包裝4-碘苯酚4-Iodophenol540-38-599%5 g25 g100 g四苯基硼酸鈉Sodium tetraphenylborate143-66-899.5%(ACS)25 g100 g500 g牛血清白蛋白Bovine serum albumin Fraction V, BSA9048-46-85 g25 g100 g十二烷基硫酸鈉Dodecyl sulfate sodiu

7、m salt, SDS151-21-399%100 g500 g脫氧膽酸鈉Sodium deoxycholate302-95-498%25 g100 g500 g苯甲基磺酰氟化物Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF329-98-699%25 g100 g亮抑酶肽Leupeptin103476-89-796.5%10 mg50 mg三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl1185-53-199%25 g100 g500 g吐溫80Polysorbate 80

8、9005-65-6250 mL1 L堿性磷酸酶底物堿性磷酸酶(Alkaline phospharase, AP)是一種能夠在堿性情況下將對(duì)應(yīng)底物去磷酸化的酶,廣泛分布于人體的各臟器器官中,以肝臟、骨骼、小腸中存在的量最多。其含量的變化能引起肝炎、肝癌等疾病,是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標(biāo)記酶之一。PNPP(p-Nitrophenyl phosphate disodium salt)是常用的堿性磷酸酶底物,當(dāng)堿性磷酸酶與PNPP反應(yīng)后,形成黃色水溶性反應(yīng)產(chǎn)物,其在&lambda405 nm有光吸收。其反應(yīng)靈敏,顏色鮮明,在診斷試劑盒生產(chǎn)中得到廣泛應(yīng)用。 PNPP產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱

9、CAS包裝2543034-硝基苯磷酸二鈉鹽六水合物p-Nitrophenyl phosphate disodium hexahydrate, 98%333338-18-41 g5 g25 g分 子 式:C6H4NNa2O6P · 6H2O分 子 量:371.14熔    點(diǎn):>300 °C    儲(chǔ)存條件:2-8°CBCIP和NBT是堿性磷酸酶最佳的發(fā)色底物組合之一,產(chǎn)物為深藍(lán)色。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫

10、色的NBT-formazan,從而達(dá)到標(biāo)記作用。 BCIP產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝3385605-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯對(duì)甲苯胺鹽5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate p-toluidine salt, BCIP, 98%6578-06-9100 mg250 mg1 g分 子 式:C8H6BrClNO4P · C7H9N分 子 量:433.63熔    點(diǎn):194-195    儲(chǔ)存條件:2-8°C NBT產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝577118氯化硝基四氮唑

11、蘭Nitrotetrazolium Blue chloride, NBT, 90%298-83-9100 mg1 g分子式:C40H30N10O6 · 2Cl分子量:817.64熔點(diǎn):200°C   儲(chǔ)存條件:2-8°C 其它底物產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱終顏色及水溶性CAS包裝10840294-硝基苯磷酸二鈉Disodium 4-nitrophenylphosphate, 99%黃色、可溶性4264-83-9Inquire209946萘酚AS-BI磷酸鹽Naphthol AS-BI phosphate, NABP, 95%紅色、不溶性1919-

12、91-1100 mg500 mg1 g3000201萘酚-AS-MX-磷酸鹽Naphthol-AS-MX-phosphate, NAMP, 99%紅色、不溶性1596-56-1250 mg 配套產(chǎn)品產(chǎn)品編號(hào)中文名稱英文名稱CAS包裝1418875-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl phosphate, disodium salt sesquihydrate102185-33-1100 mg 250 mgBIB14195-溴-6-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽5-Bromo-6-chloro-3-indoxyl phosphate, disodium salt monohydrate404366-59-2100 mg250 mgI6550003-吲哚酰磷酸酯二鈉鹽3-Indoxyl phosphate, disodium salt3318-43-2500 mg5 g5653604-甲基傘形酮磷酸酯4-Methylumbelliferyl phosphate, free acid3368-04-51

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