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文檔簡介
1、 植物細胞全能性概論摘要: 植物細胞的全能性是指植株體內(nèi)任何具有完整的細胞核的細胞都擁有形成一個完整植株所必須的全部遺傳信息,即一套完整的基因組,并具有發(fā)育成完整植株的能力。植物從一個受精卵進展有絲分裂,發(fā)育成具有一定形態(tài)、構(gòu)造和功能的植株。植物的體細胞染色體與受精卵是一致的,也即它們所攜帶的遺傳信息是一樣的,這樣體細胞由于在植物體上所處的位置不同,表現(xiàn)不同的形態(tài),承當一定的功能,這是由于它們受到具體器官或組織所在環(huán)境的束縛,是細胞核中DNA鏈上不同基因按一定順序選擇性地活化和阻止的結(jié)果,但遺傳潛能并未喪失,具有發(fā)育成完整植株的能力。關(guān)鍵詞: 植物 全能性 植物細胞組織培養(yǎng)正文植物細胞全能性的
2、歷史驗證過程1902年,德國植物學家哈伯蘭特預言植物體的任何一個細胞,都有長成完整個體的潛在能力,這種潛在能力就叫植物細胞的“全能性。為了證實這個預言,他用高等植物的葉肉細胞、髓細胞、腺毛、雄蕊毛、氣孔保衛(wèi)細胞、表皮細胞等多種細胞放置在他自己配制的營養(yǎng)物質(zhì)中人工配制的營養(yǎng)物,稱為培養(yǎng)基。這些細胞在培養(yǎng)基上可生存相當長一段時間,但他只發(fā)現(xiàn)有些細胞增大,卻始終沒有看到細胞分裂和增殖。1934年,美國的懷特用無機鹽、糖類和酵母提取物配制成懷特培養(yǎng)基,培養(yǎng)番茄根尖切段,400多天后,在切口處長出了一團愈合傷口的新細胞,這團細胞被稱為愈傷組織。法國的高斯雷特制成了一種固體培養(yǎng)基,使山毛柳、黑楊形成層組織
3、增殖,最后形成了類似藻類的突起物。1946年,中國學者羅士韋培養(yǎng)菟絲子的莖尖,在試管中形成了花。 以后許多科學家為證實這一論斷做了不懈的努力。1958年,Steward等將高度分化的胡蘿卜根的韌皮部組織細胞放在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)根細胞會失去分化細胞的構(gòu)造特征,發(fā)生反復分裂,最終分化成具有根、莖、葉的完整的植株;1964年,Cuba和 Mabesbwari利用毛葉曼陀羅的花藥培育出單倍體植株;1969年Nitch將煙草的單個單倍體孢子培養(yǎng)成了完整的單倍體植株;1970年Steward用懸浮培養(yǎng)的胡蘿卜單個細胞培養(yǎng)成了可育的植株。至此,經(jīng)過科學家們50余年的不斷試驗,植物分化細胞的全能性得到
4、了充分論證,建立在此根底上的組織培養(yǎng)技術(shù)也得到了迅速開展。植物細胞全能性表達的條件一個已經(jīng)分化的細胞要實現(xiàn)起全能性一般要經(jīng)歷兩個過程:一是脫分化,使外植體的細胞轉(zhuǎn)變成胚性細胞,從而獲得不斷分裂的的能力;二是再分化,是胚性細胞分化形成器官。理論上,植物任何細胞都具有全能性,具有再生完整植株的潛能。但在細胞工程實踐中,不是所有體細胞都易再生成完整植株。不同分化程度的細胞其脫分化的能力不同。同時要實現(xiàn)植物細胞全能性必須滿足:1具有較強全能性的細胞從植物組織一支性影響下解脫出來,使其處于獨立發(fā)育的立體條件下;2賦予離體細胞一定刺激,包括營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素、光周期、溫度、濕度、酸堿度等。細胞的脫分化和再
5、分化 在某些特定的條件下,分化細胞的表型不穩(wěn)定,其基因活動模式也發(fā)生可逆性的變化,細胞脫離原狀態(tài)而恢復到分生狀態(tài),這一變化過程叫脫分化。細胞脫分化的結(jié)果,會產(chǎn)生愈傷組織。脫分化細胞失去的分化的特征,在特定條件誘導下,可在此開場新的分化發(fā)育過程,最終形成各種組織、器官或胚狀體等,即再分化。在大多數(shù)情況下,再分化過程是在愈傷組織細胞中發(fā)生,有時那么直接發(fā)生于脫分化的細胞中,無需經(jīng)過愈傷組織。離體條件下的細胞脫分化和再分化的一般過程1誘導期:誘導期是指細胞準備進展分裂的時期。此時距離傷口較近的細胞略有增大,細胞質(zhì)增多,相應液泡縮小,核變大,成球形,并向細胞中央移動;核仁變大,RNA增加,進入分裂準備
6、階段。2分裂期:脫分化完成,再分化開場。3分化期:分化期成為形成期,特征是出現(xiàn)組織分化,如周皮分化和維管組織分化。愈傷組織植物愈傷組織通常是指植物收到機械,動物或微生物傷害后,創(chuàng)傷部位細胞脫分化而不斷增殖形成松散排列、無特定構(gòu)造和動能的飛器官化組織。植物愈傷組織一般為淡黃色或白色,也有綠色或紅色等,老化的愈傷組織多轉(zhuǎn)為黃色或褐色。愈傷組織的形成是成熟細胞脫分化的結(jié)果,愈傷組織形成后,通過器官或體細胞胚胎發(fā)生可實現(xiàn)植株再生。全能性的表達全能性與全能性的表達具有不同的含義,全能性細胞只有在適當條件下才能表達出全能性來。已分化的植物細胞要表達全能性,必須先脫分化,使細胞恢復到胚性階段,而生長素尤其使
7、2,4D對分化有重要作用。但是不同植物的外植體對生長素處理的反響并不完全一樣,有些種的外植體只能產(chǎn)生一些細胞系而無形態(tài)發(fā)生的能力,而有些那么能通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生表達其全能性。此外,所取外植體的部位也很重要。另一種誘發(fā)全能性表達的機理可能是體細胞減數(shù)分裂,其結(jié)果發(fā)生單倍化及別離現(xiàn)象。單倍性細胞在發(fā)生體細胞胚過程中能自發(fā)進展核內(nèi)復制,恢復二倍性。同時,體細胞減數(shù)分裂也是體學習班基因型發(fā)生變異的一種原因。一般認為,細胞的孤立也是誘發(fā)全能性表達的重要因素。這是因為在整體職務中,某此細胞的發(fā)育取決于其周圍組織發(fā)出的一組信號。如果中止這些信號,例如孤立,而給予其他某種信號,有可能轉(zhuǎn)變其發(fā)育方向,乃至表
8、達全能性。全能性使體細胞發(fā)生的某些變異可以遺傳給下一代,它豐富了遺傳學的研究內(nèi)容,是體細胞遺傳學的重要根底;同時,植物體細胞離體培養(yǎng)技術(shù)比擬容易,可以在離體條件下進展基因工程操作,因此全能性的研究也是植物改進的重要根底。全能性只是一種可能性,要使這種可能變?yōu)楝F(xiàn)實必須滿足兩個條件:一是要把這些細胞從植物體其余局部的抑制性影響下解脫出來,也就是說必須使這局部細胞處于離體的條件下;二是要給予它們適當?shù)拇碳ぃ唇o予它們一定的營養(yǎng)物質(zhì),并使它們受到一定激素的作用。植物器官的愈傷組織的誘導和再分化培養(yǎng)本實驗取材是胡蘿卜1、選擇無傷、無病、形狀較規(guī)那么的胡蘿卜,用小刷子在流動的自來水下洗刷胡蘿卜,除凈外表所
9、有的泥屑。用刮皮刀除去表皮1-2mm,橫切成大約40mm厚的切片。以下步驟全部在無菌條件下進展。2、在超凈工作臺上,先用70%的酒精消毒30s,用無菌水沖洗一遍,再用0.1%的升汞消毒710min。在滅菌過程中,要震蕩幾次,消毒后用無菌水沖洗34次。3、取消毒過的胡蘿卜放入已滅菌的帶有濾紙的培養(yǎng)皿中,用無菌解剖刀從兩端各切去10毫米,再將留下的胡蘿卜直根切成一系列10毫米厚的橫切片,再將每一片切成小塊,外植體的大小要盡量一致。4、接種 取下培養(yǎng)瓶的塞子或錫鉑紙,用火灼燒瓶口2 cm處,手持培養(yǎng)瓶呈45º角,用消毒鑷子把2塊外植體轉(zhuǎn)到瓊脂培養(yǎng)基的外表。然后立即將燒過的封口棉塞或錫鉑紙封
10、住瓶口。每兩次轉(zhuǎn)移之間都要用酒精燈灼燒鑷子,防止帶菌,接種后在培養(yǎng)瓶上標明培養(yǎng)物名稱和培養(yǎng)日期。5、將培養(yǎng)物一局部置于25。C溫箱中暗培養(yǎng)。黑暗條件下培養(yǎng)四周左右就會形成一塊較大的愈傷組織。植物細胞全能性展望植物細胞全能性的證實推動了組織培養(yǎng)及其相關(guān)研究領域的迅猛開展。在莖尖和遇上組織培養(yǎng)研究中,我國已經(jīng)有700種以上的植物能離體再生植株,其中通過試管苗實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的植物有蘭花,馬鈴薯等諸多經(jīng)濟作物。為我國農(nóng)業(yè)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟利潤。 雖然許多植物細胞包括重要農(nóng)作物,通過原生質(zhì)體培養(yǎng),單細胞培養(yǎng)、花妖或花粉培養(yǎng)和莖尖等組織器官培養(yǎng)能再生植株,但是當前的植物組織培養(yǎng)還是經(jīng)歷行的工作,植物組織培養(yǎng)鉆無性繁殖,植物育種和植物遺傳操作中的應用越來越多的取決于了解各種相互作用因素的作用機理。植物全能性的表達受到許多外界因素的影響,如外植體的種類與發(fā)育狀態(tài)培養(yǎng)基成分,特別是植物生長調(diào)節(jié)劑,光照與溫度都影響培養(yǎng)物形態(tài)的發(fā)生。進一步解釋全能性表達信號傳道作用分子,有利于促進植物組織培養(yǎng)的開展和應用。內(nèi)容總結(jié)1植物細胞全能性概論摘要: 植物細胞的全能性是指植株體內(nèi)任何具
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