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1、基因工程 、選擇題(每小題1、5分,共15分)1. 基因工程的創(chuàng)始人就是()。A A 、Kornberg B W、Gilbert C P 、Berg D S 、Cohen2. 關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì),下列描述中只有()不太恰當(dāng)。A 由作用于同一 DNA序列的兩種酶構(gòu)成B 這一系統(tǒng)中的核酸酶都就是H類限制性內(nèi)切核酸酶C這一系統(tǒng)中的修飾酶主要就是通過(guò)甲基化作用對(duì)DNA進(jìn)行修飾D 不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)3. 在DNA的 3' -5 '鏈上,基因的起始密碼子就是()A ATG( 或 GTG) B AGT C TAG D TGA4.11限制性內(nèi)切核酸酶可以特異性

2、地識(shí)別()。A 雙鏈DNA的特定堿基對(duì)B 雙鏈DNA的特定堿基序列C特定的三聯(lián)密碼D以上都正確5. 末端轉(zhuǎn)移酶就是合成酶類,具有() 活性。A3'5'DNA聚合酶B 5'3'DNA聚合酶C5'3'DNA內(nèi)切酶D5'3'DNA外切酶6. 下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxed plasmid) 性質(zhì)的描述中,()就是不正確的。A質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制,因而有較多的拷貝數(shù)。B可以在氯霉素作用下進(jìn)行擴(kuò)增。C 通常帶有抗藥性標(biāo)記。D同嚴(yán)緊型質(zhì)粒融合后,雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子。7. 關(guān)于cDNA的最正確的說(shuō)法就是()。A

3、 同mRN短補(bǔ)的單鏈 DNAB同mRN短補(bǔ)的雙鏈 DNAC 以mRN的模板合成的雙鏈 DNA D以上都正確8. 關(guān)于T4 DNA Ligase,下列說(shuō)法中哪一項(xiàng)不正確 ?()A 就是最常用的DNA連接酶。B不但能連接粘性末端,還能連接齊平末端。C不但能連接粘性末端。D最適溫度37 °C。9. 下列關(guān)于建立cDNA文庫(kù)的敘述中,() 就是錯(cuò)誤的?A 從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或 RNA B用反轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA勺對(duì)應(yīng)單鏈DNAC以新合成的單鏈 DNA為模板合成雙鏈 DNAD 新合成的雙鏈DNA克隆到載體上,并導(dǎo)入受體細(xì)胞10. 用下列方法進(jìn)行重組體的篩選,只有()說(shuō)明外源基因進(jìn)行了表

4、達(dá)。A Southem blot B Northem blot C Western印跡 D原位菌落雜交、填空題(每空1分,共25分)1. 限制性內(nèi)切核酸酶分為三類,基因工程中應(yīng)用的就是 。2. 為了防止 DNA的自身環(huán)化,可用去雙鏈 DNA_3. 切口平移(nick translation) 法標(biāo)記DNA探針時(shí)應(yīng)用的酶就是_ _。4. 基因工程中的3種主要類型的載體就是 、。5. 野生型的M13不適合用作基因工程載體,主要原因就是 、與。6. 黏粒(cosmid) 就是雜合載體。7. 引物在基因工程中至少有 4個(gè)方面的用途:(1)、(3) 込 。8. Northern 印跡與Southern印

5、跡有兩點(diǎn)根本的區(qū)別:(1)_ = 、,(2)9. PCR反應(yīng)中常用的酶就是_。10、感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞在溫度為_(kāi) 時(shí)吸附DNA,時(shí)攝人外源DNA11、 用堿法分離質(zhì)粒 DNA寸,染色體DNA之所以可以被除去,就是因?yàn)?。12、 除具有較低的分子量外,一個(gè)理想的質(zhì)粒載體必需包括 、三個(gè)部分13、轉(zhuǎn)基因植物操作中常用的載體就是 。14、pcDNA3 1 用于。三、名詞解釋(每小題4分,共20分)1. 目的基因:2. 基因工程:3. 載體:4. Western 印跡:5. 核酸分子雜交:四、簡(jiǎn)答題(每小題10分,共20分)1、基因工程的基本操作程序 ?2、怎樣制備目的基因?基因工程評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)與參考答

6、案一、選擇題 :每小題 1、5分,共 15分;多選不得分。1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空題 : 每空 1 分,共 25 分1.II 類酶。2. 堿性磷酸酶 ; 5'端的磷酸基團(tuán)3. DNA 聚合酶 I。4. 質(zhì)粒DNA;病毒DNA質(zhì)粒與病毒DNA雜合體5. 沒(méi)有合適的限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別位點(diǎn) ; 選擇標(biāo)記6. 質(zhì)粒與 噬菌體7. 合成探針;合成cDNA用于PCR反應(yīng);進(jìn)行序列分析8. 印跡的對(duì)象不同:Northern就是RNA,Southern就是DNA;)電泳條件不同,前者就是變性條件,后者就是非變性電泳9. Tag DNA 聚

7、合酶10.0 C;42 C11. 染色體變性后來(lái)不及復(fù)性12. 復(fù)制起點(diǎn) ; 選擇標(biāo)記 ; 克隆位點(diǎn)13. Ti 質(zhì)粒14. 外源基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞三、名詞解釋 (每小題 4分, 共 20分)1. 在基因工程中被操作的 DNA序列;又稱外源基因(foreign gene/exogenous gene),主要就是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因(structuralgene);它們可以從自然界中已有的物種基因組(genome)中分離出來(lái),也可以用人工的方法合成。2. 按照人們的意愿,進(jìn)行嚴(yán)密的設(shè)計(jì),通過(guò)體外DNA重組與轉(zhuǎn)基因等技術(shù),有目的地改造生物種性,生產(chǎn)生物活性物質(zhì),甚至創(chuàng)造新物 種的技術(shù)。3. 攜

8、帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。4. Western 印跡就是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后從凝膠中轉(zhuǎn)移到固相支持物上 ;然后用特異性的抗體進(jìn)行檢測(cè) ;可說(shuō)明基因就是否進(jìn)行了 表達(dá)。5. 用標(biāo)記的探針檢測(cè)出 DNA或 RNA同源序列的技術(shù);原理就是堿基互補(bǔ);常用的有Southern blot 、Northern blot與原位雜交。四、簡(jiǎn)答題 (20 分)1. 目的基因的制備 ;目的基因與載體連接 ;目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ;目的基因的表達(dá)與檢測(cè)?;蛘?:轉(zhuǎn)、接、切、增、檢 (加以解釋)2. 直接分離法、構(gòu)建基因文庫(kù)分離法、PCR擴(kuò)增法、人工合成法等。(加以解釋)五、實(shí)驗(yàn)與論述題 (20 分) 由于基因已被測(cè)序,可通過(guò)RT-PCR方法克隆該基因; 也或通過(guò)基

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