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1、開課學(xué)院、試驗室 城環(huán)學(xué)院市政與環(huán)境工程試驗爭辯中心 試驗時間 : 年 月 日課程名稱 試驗項目名 稱 試驗項目類型驗證演示綜合設(shè)計其他指導(dǎo)老師成 績 一、試驗?zāi)康?. 學(xué)習(xí)使用血球計數(shù)板進行微生物計數(shù)的方法。2. 生疏活性污泥中常見的微生物,后生動物的形態(tài)及菌膠團的外形色澤3. 生疏水中常見藻類。二、試驗原理顯微鏡直接計數(shù)法就是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),其原理是:將經(jīng)過適當稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中,在顯微鏡下進行計數(shù)由于計數(shù)室的容積是肯定的 (0.1mm2), 所以可以依據(jù)在顯微鏡下觀看到的微生物數(shù)目來換算 成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。血球計數(shù)板通常是一
2、塊特制的載玻片(如圖3-1),其上由四條槽構(gòu)成三個平臺,中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半,每一邊的平臺上各刻有一個 方格網(wǎng) (如圖3-2 ),方格網(wǎng)中間是邊長為 1皿的計數(shù)室,當蓋上蓋玻片后,載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm,這樣就形成一 圖3-1 a. 正面圖 b. 側(cè)面圖0.1mm3 的計數(shù)室個體積為0.1mm3 的計數(shù)室。 。 計數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格:一種是一個大方格分成25個中方格,而每個中方格又分成 16個小方格 (如圖3-3A),另一種是一個大方格分成16個中方格,而每個中方格 又分成25 個小方格(如圖3-3B)。但無論是哪種規(guī)格的計數(shù)板,每一個大方格中的小方格數(shù)是相同的,
3、即16X25=400小方格。計數(shù)時如接受16中方格X25小方格的計數(shù)板時,就按對角線方位數(shù)取左上、左下、 右上、右下的四個中方格內(nèi)的菌數(shù)。假如是25中方格X16小方格的計數(shù)板,除數(shù)取上述 四個中方格外,還須數(shù)取其中心的一中方格的菌數(shù)位于中方格線上的菌體,一般只計此中格的上方及右方格線上的菌體。16 中方格 X25 小方格計數(shù)板:菌數(shù) (個毫升) =4 個中方格中總菌數(shù) X16X101OOOX 稀釋倍數(shù)4 25 中方格x16小方格計數(shù)板:菌數(shù) (個毫升) = 5 個中方格內(nèi)總菌數(shù) X25XlOXlOOOX 稀釋倍數(shù)5圖3-2 圖3-3三、使用儀器、材料四、試驗步驟(一) 微生物計數(shù)1.在加樣前,
4、先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物,則需清洗后才能進行計數(shù)。2.本試驗以酵母菌液為樣品。將酵母菌液搖勻,用無菌的細口滴管吸取少許,放一滴在血球計數(shù)室上,輕輕蓋上蓋玻片,不能有氣泡,不能讓多余的菌液頂起,多余的菌液讓其自然溢出。3.將血球計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上,先用低倍鏡觀看全貌,找到計數(shù)室所在位置,然后換成高倍鏡進行計數(shù)。假如酵母出芽,芽體太小達到母細胞的一半時,即作兩個菌體計數(shù)。4.計數(shù)時若發(fā)覺菌液太濃或太稀 ,需重新調(diào)整稀釋度后再計數(shù),一般樣品釋釋度要求每個中方格內(nèi)有 20 個左右菌體為好,登記稀釋倍數(shù),以供計算。5.參考前面的計數(shù)公式,計數(shù)菌數(shù)。6.計數(shù)完畢,血球計數(shù)板要馬上清洗潔凈
5、,并用吸水紙吸干,最終用擦鏡紙擦潔凈并放回盒內(nèi)。(二)活性污泥的觀看在生物法處理廢水中,對曝氣池活性污泥的觀看是廢水處理過程中最常用的檢驗手段 之一。通過對活性污泥中微形動物(原生動物、后生動物)及菌膠團的觀看,能準時了解處理請況,以利于準時實行補救措施。1. 取活性污泥法曝氣池混合液一小滴,放在潔凈的載玻片中心。2. 當心地用潔凈的蓋玻片掩蓋,掩蓋后片內(nèi)不能有氣泡形成。3. 將制備好的標本片放在載物臺上,先用低倍鏡觀看污泥中菌膠團的外形、色澤等,然后用高倍鏡觀看污泥中的微形動物,并畫出形態(tài)草圖。(三) 藻類的觀看藻類常消滅在廢水處理的氧化塘中,在給水水源中也經(jīng)常大量消滅。1. 用吸管吸少許含有藻類的水樣,放一滴在載玻片中心,蓋上蓋玻片(片內(nèi)不能有氣泡形成) 即成。2. 將制備好的標本片放
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