乳腺浸潤性導(dǎo)管癌耐藥基因蛋白表達(dá)與化療方案的相關(guān)性研究

1、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌耐藥基因蛋白表達(dá)與化療方案的相關(guān)性研究         11-02-13 14:49:00     編輯：studa20【摘要】  目的：了解乳腺浸潤性導(dǎo)管癌對不同化療方案的敏感性及與耐藥基因蛋白表達(dá)的關(guān)系。方法：用免疫組化法檢測同一乳腺癌病例新輔助化療前后耐藥基因蛋白谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶(GST-)、拓?fù)洚悩?gòu)酶(ToPo)、熱休克蛋白(HSP)和P-糖蛋白(P-gp)的表達(dá)情況，并與3種化療方案，即環(huán)磷酰胺+阿霉素+5-氟尿嘧啶(CAF)、環(huán)磷酰胺+

2、氨甲喋呤+5-氟尿嘧啶(CMF)、紫杉醇+阿霉素(TA)方案作相關(guān)性分析。結(jié)果：CAF方案對乳腺浸潤性導(dǎo)管癌耐藥表型影響最大，該組28例中11例GST-由陰性轉(zhuǎn)為陽性表達(dá)，7例化療后ToPo表達(dá)轉(zhuǎn)陰，化療前后差異顯著(P<0.05);CMF方案31例中，GST- 5例由陰性轉(zhuǎn)為陽性表達(dá)，5例化療后ToPo表達(dá)轉(zhuǎn)陰;TA方案對乳腺癌耐藥表型影響最小，但該方案24例有8例經(jīng)化療后P-gp由陽性轉(zhuǎn)為陰性表達(dá)。結(jié)論：乳腺浸潤性導(dǎo)管癌耐藥基因表達(dá)受不同化療方案的影響。 【關(guān)鍵詞】  乳腺癌;藥物耐受性;基因       

3、;          ABSTRACT Objective: To understand the sensitivity of breast invasive ductal carcinoma to different chemotherapy plan and the relationship between the sensitivity and the expression of resistance gene. Methods: Collecting 83 fresh biopsy sp

4、ecimens of breast cancer, observed the expression of GST-, ToPo, HSP and P-gp of the same case before and after the chemotherapy, and made the correlation analysis of the expression and three chemotherapy plans such as CAF, CMF and TA plan. Results: The effect of CAF plan to the expression of resist

5、ance gene of breast invasive ductal carcinoma was the most important. In this group which having 28 cases the expression of GST- of 11 cases changed from negative to positive, the expression of ToPoof 7 cases changed from positive to negative after the chemotherapy and there is significant differenc

6、e before and after the chemotherapy was significant(P<0.05). In CMF plan group which having 28 cases the expression of GST- of 5 cases changed from negative to positive, the expression of ToPoof 5 cases changed from positive to negative after the chemotherapy. TA plan affect the expression of res

7、istance gene of breast invasive ductal carcinoma minimally, but in this group which having 24 cases the expression of P-gp of 8 cases changed from positive to negative. Conclusion: Different chemotherapy plan can affect the expression of resistance gene of breast invasive ductal carcinoma.KEY WORDS

8、breast carcinoma; drug resistance; gene化療是乳腺癌綜合治療的重要手段，但腫瘤的耐藥常導(dǎo)致化療失敗，為避免化療的盲目性，有必要探索癌細(xì)胞對化療耐藥的更深層原因。本文選取乳腺癌發(fā)病率最高的浸潤性導(dǎo)管癌83例，比較同一患者新輔助化療前后乳腺癌耐藥基因谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST-)、拓?fù)洚悩?gòu)酶(ToPo)、熱休克蛋白(HSP)和P-糖蛋白(P-gp)的表達(dá)變化，以探討不同化療方案對耐藥基因表達(dá)的影響。1 材料和方法1.1 材料收集河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院20072008年行乳腺癌活檢患者標(biāo)本113例，選取經(jīng)病理證實(shí)為浸潤性導(dǎo)管癌83例作為研究對象?；颊呋顧z后均行

9、乳腺癌新輔助化療及改良根治或保乳手術(shù)?；煼桨阜謩e為環(huán)磷酰胺+阿霉素+5-氟尿嘧啶(CAF)、環(huán)磷酰胺+氨甲喋呤+5-氟尿嘧啶(CMF)、紫杉醇+阿霉素(TA)，各13個(gè)療程。所有病例按化療方案分成3組，即CAF組、CMF組、A組?；顧z及手術(shù)標(biāo)本均經(jīng)甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)制成4m厚切片，分別進(jìn)行HE染色和免疫組化染色。1.2 方法采用免疫組化染色SP法，鼠抗人P-gp單克隆抗體，兔抗人GST-單克隆抗體，鼠抗人ToPo單克隆抗體，鼠抗人HSP多克隆抗體均為美國Zymed公司產(chǎn)品，S-P試劑盒由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司提供。操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，用PBS代替一抗作陰性對照，用已知陽性直腸

10、癌組織作陽性對照。1.3 結(jié)果判斷HSP以細(xì)胞漿或細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。P-gp和GST-主要根據(jù)其分布范圍和顯色程度，即陽性細(xì)胞數(shù)比例分為4級。陰性(-)：無棕色反應(yīng)，細(xì)胞背景一致不著色或陽性細(xì)胞數(shù)小于5%;弱陽性(+)：5%25%的癌細(xì)胞胞漿著棕黃色;中陽性(+)：25%50%癌細(xì)胞胞漿著棕黃色;強(qiáng)陽性(+)50%以上的癌細(xì)胞胞漿著深棕色。ToPo主要根據(jù)其分布范圍即陽性細(xì)胞數(shù)比例分為4級，陰性(-)：細(xì)胞核無棕色反應(yīng)或陽性細(xì)胞數(shù)小于1%;弱陽性(+)：1%25%的癌細(xì)胞胞核著棕黃色;中陽性(+)：25%50%的癌細(xì)胞胞核著棕黃色;強(qiáng)陽性(+)：50%以上的癌細(xì)胞胞核著棕黃色。1

11、.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。2 結(jié)果2.1 GST-的表達(dá)GST-表達(dá)于胞漿，部分病例陽性細(xì)胞分布不均勻(圖1A、B)，經(jīng)化療后CAF組11例GST-轉(zhuǎn)陽，化療前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CMF組31例5例由陰性轉(zhuǎn)為彌漫性陽性表達(dá)，TA組4例轉(zhuǎn)陰，但化療前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。2.2 ToPo的表達(dá)ToPo表達(dá)于細(xì)胞核，陽性細(xì)胞分布均勻(圖2A、B)。化療后CAF組有7例轉(zhuǎn)陰，化療前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而CMF組31例有5例轉(zhuǎn)陰，TA組有1例轉(zhuǎn)為陽性表達(dá)，但化療前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。2.3 HSP的表達(dá)HSP細(xì)胞漿中呈棕黃色為陽性(圖3A、B)。CAF組有5例轉(zhuǎn)陽，CMF組13例陽性中有2例轉(zhuǎn)陰，化療后TA組24例有3例轉(zhuǎn)陽，但化療前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。2.4 P-gp的表達(dá)P-gp表達(dá)于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿，不同病例細(xì)