青蒿素含量測定方法改進(jìn)及黃花蒿植物質(zhì)量評價

1、青蒿素含量測定方法改進(jìn)及黃花蒿植物質(zhì)量評價         【摘要】 目的建立一種快捷準(zhǔn)確的測定黃花蒿中青蒿素含量的方法，用以指導(dǎo)青蒿素生產(chǎn)原料的收購及青蒿素生產(chǎn)過程中質(zhì)量監(jiān)控。方法改進(jìn)的紫外分光光度法，檢測波長292 nm，青蒿素含量計(jì)算公式：M（mg/g）=（A樣品×V×r×2）/（A標(biāo)準(zhǔn)×3）。結(jié)果青蒿素對照品在0.02 0.        【摘要】  目的建立一種快捷準(zhǔn)確的測定黃

2、花蒿中青蒿素含量的方法，用以指導(dǎo)青蒿素生產(chǎn)原料的收購及青蒿素生產(chǎn)過程中質(zhì)量監(jiān)控。方法改進(jìn)的紫外分光光度法，檢測波長292 nm，青蒿素含量計(jì)算公式：M（mg/g）=（A樣品×V×r×2）/（A標(biāo)準(zhǔn)×3）。結(jié)果青蒿素對照品在0.02 0.14 mg/ml范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，r=0.999 8（n=7），平均回收率為99.81%（n=7）。重慶市酉陽縣等7份不同產(chǎn)地黃花蒿樣品中青蒿素含量范圍為6.7110.19 mg/g。測定結(jié)果與傳統(tǒng)的分析方法無顯著差異。結(jié)論 采用改進(jìn)的紫外分光光度法進(jìn)行青蒿素含量測定簡單易行，線性及重復(fù)性良好，可以取代傳統(tǒng)的分析方

3、法作為青蒿素生產(chǎn)過程中含量測定的新方法。 【關(guān)鍵詞】  黃花蒿 青蒿素 紫外分光光度法 質(zhì)量控制Key words：Artemisia annua L.;  Arteannuin;  Ultraviolet spectrophotometry;  Quality control    黃花蒿又名青蒿，為菊科植物黃花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分，具有清熱解暑、除蒸、截瘧等功效1。20世紀(jì)70年代我國學(xué)者從黃花蒿中分離得到一種新型的抗瘧成分青蒿素2（arteannuin），對腦型瘧、惡性瘧、間日瘧，具有高

4、效、速效、低毒、使用安全的特點(diǎn)，是目前國際上防治瘧疾的首選藥物，并已成為WHO推薦的抗瘧藥物。重慶地區(qū)擁有豐富的優(yōu)質(zhì)黃花蒿種質(zhì)資源，是全國最重要的青蒿素原料藥的產(chǎn)地之一。為了進(jìn)一步充分利用本地黃花蒿資源，我們采用改進(jìn)的紫外分光光度法對重慶不同產(chǎn)地的黃花蒿中青蒿素進(jìn)行含量測定，為該地區(qū)的黃花蒿質(zhì)量評價和進(jìn)一步加速開發(fā)利用提供參考依據(jù)；同時，我們對原有青蒿素含量測定的方法進(jìn)行了改進(jìn)，建立了一種簡便、快捷、準(zhǔn)確的青蒿素含量測定方法，用以指導(dǎo)青蒿素生產(chǎn)原料的收購及生產(chǎn)質(zhì)量的控制。1  儀器與試藥1.1  儀器UV-3600型紫外可見近紅外分光光度計(jì)（日本島津公司）；微型植物試樣粉碎

5、機(jī)（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）；AE240型天秤梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；KQ-250B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；SZ-93型自動雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）；W2018型恒溫水浴鍋（上海中生科技有限公司）。1.2  試劑甲醇，石油醚（3060），95%乙醇，氫氧化鈉，水為二次蒸餾水，以上均為分析純。1.3  對照品 青蒿素對照品（供含量測定用，批號100202200402）由中國藥品生物制品檢定所提供。1.4  藥材不同產(chǎn)地黃花蒿樣品于20060810采自重慶市

6、酉陽縣等地（表1），經(jīng)鑒定為菊科植物黃花蒿Artemisia annua L.的干燥地上部分。2  方法與結(jié)果2.1  供試品溶液的制備將黃花蒿葉干燥后，粉碎過篩（過100目篩），制成黃花蒿樣品粉末。精密稱取黃花蒿樣品粉末1.0g于250 ml具塞錐形瓶中，精密量取石油醚（3060）60 ml，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）15 min，立即用流水冷卻至室溫；將超聲后的石油醚提取液搖勻，濾過，倒入量筒，記錄石油醚的體積V。精密量取黃花蒿提取液0.4 ml于10 ml的具塞刻度試管中，放入不再加熱的沸水中揮干，得到含青蒿素的浸膏，加入2 ml的95%乙醇，溶解殘

7、渣，用0.2%氫氧化鈉溶液定容至10 ml，搖勻，置(50±1)恒溫水浴中微溫30 min，取出，流水冷卻至室溫，待液面回復(fù)至刻度，用0.22 m微孔濾膜濾過，即得。2.2  對照品溶液的制備精密稱取80干燥至恒重的青蒿素對照品100 mg，置100 ml量瓶中，加入95%乙醇稀釋至刻度，得到1 mg/ml的青蒿素對照品母液，4冰箱保存?zhèn)溆谩＞芰咳∏噍锼貙φ掌纺敢?0.0 ml于100 ml量瓶中，以95%乙醇補(bǔ)充至20 ml，用0.2%氫氧化鈉溶液定容至100 ml，搖勻，置(50±1)恒溫水浴中微溫30 min，取出，流水冷卻至室溫，待液面回復(fù)至刻度，用0.

8、22 m微孔濾膜濾過，即得。2.3  空白溶液的制備取20 ml 95%乙醇置于100 ml量瓶中，用0.2%氫氧化鈉溶液定容至100 ml，搖勻，置(50±1)恒溫水浴中微溫30 min，取出，流水冷卻至室溫，待液面回復(fù)至刻度，用0.22 m微孔濾膜濾過，即得。2.4  標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密量取青蒿素對照品母液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml于10 ml量瓶中，以95%乙醇溶液補(bǔ)充至2 ml，補(bǔ)加0.2%NaOH溶液至刻度，混勻，即得0.00，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.12，0.14 mg/ml對照品溶液系列，置（50±1）恒溫水浴