第五章尿液檢驗(yàn)臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)

1、第五章尿液檢驗(yàn)臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)l尿糖一般是指尿液中的葡萄糖。尿糖一般是指尿液中的葡萄糖。l正常人尿液中有微量葡萄糖，定性試驗(yàn)正常人尿液中有微量葡萄糖，定性試驗(yàn)為陰性。為陰性。l糖尿：血糖超過腎糖閾（），糖尿：血糖超過腎糖閾（）， 或腎小管重吸收能力下降，或腎小管重吸收能力下降， 尿糖陽性。尿糖陽性。l檢查糖尿病的代謝情況。檢查糖尿病的代謝情況。l檢測與評(píng)價(jià)糖尿病的治療。檢測與評(píng)價(jià)糖尿病的治療。l1班氏定性法班氏定性法l2干化學(xué)法干化學(xué)法 l3薄層層析法薄層層析法l穩(wěn)定穩(wěn)定l缺乏特異性缺乏特異性l葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法l敏感、半定量敏感、半定量l還原物質(zhì)可致假陰性還原物質(zhì)可致假陰性陽性標(biāo)準(zhǔn)葡

2、萄糖含量(mmol/L)班氏法氧化酶試帶法5.51.675.6-11.2 1.67-2.7828 5.0-1428-56 14-2857-112 28-56112 56-112l空腹及餐后空腹及餐后2h尿尿l陰性陰性l1.標(biāo)本留取標(biāo)本留取l2.容器清潔容器清潔l3.及時(shí)送檢及時(shí)送檢l4.干擾因素及處理干擾因素及處理l5.判斷結(jié)果判斷結(jié)果l6.過篩指標(biāo)過篩指標(biāo)lVit C ：班氏，試帶：班氏，試帶l高比重尿及高酮體尿高比重尿及高酮體尿l蛋白尿蛋白尿l其他還原糖類其他還原糖類l1.血糖增高性糖尿：糖尿病血糖增高性糖尿：糖尿病 其他內(nèi)分泌異常其他內(nèi)分泌異常 應(yīng)激狀態(tài)應(yīng)激狀態(tài) 飲食因素飲食因素l2.血

3、糖正常性糖尿：腎性糖尿血糖正常性糖尿：腎性糖尿l3.其他糖尿其他糖尿l酮體（酮體（ketone bodies）是脂肪氧化代謝）是脂肪氧化代謝過程中的中間代謝產(chǎn)物，包括乙酰乙酸、過程中的中間代謝產(chǎn)物，包括乙酰乙酸、-羥丁酸、丙酮。在健康人中，少量的羥丁酸、丙酮。在健康人中，少量的酮體以酮體以78%的的-羥丁酸、羥丁酸、20%的乙酰乙的乙酰乙酸和酸和2%的丙酮的比例存在于血液中。的丙酮的比例存在于血液中。l當(dāng)肝臟內(nèi)酮體產(chǎn)生的速度超過肝外組織當(dāng)肝臟內(nèi)酮體產(chǎn)生的速度超過肝外組織利用的速度時(shí)，血中酮體增加，可出現(xiàn)利用的速度時(shí)，血中酮體增加，可出現(xiàn)酮血癥（酮血癥（ketonemia），過多的酮體從尿），過

4、多的酮體從尿中排出稱酮尿（中排出稱酮尿（ketonuria）。）。l1朗格（朗格（Lange）法）法l2改良改良Rothera（粉劑）法（粉劑）法l3干化學(xué)法干化學(xué)法 l4其他其他l乙酰乙酸或丙酮在堿性條件下與亞硝基乙酰乙酸或丙酮在堿性條件下與亞硝基鐵氫化鈉生成紫紅色化合物。鐵氫化鈉生成紫紅色化合物。 l對(duì)對(duì)-羥丁酸不反應(yīng)。羥丁酸不反應(yīng)。l易受其他物質(zhì)的干擾。易受其他物質(zhì)的干擾。l與乙酰乙酸反應(yīng)與乙酰乙酸反應(yīng)l與乙酰乙酸和丙酮都起反應(yīng)與乙酰乙酸和丙酮都起反應(yīng)l敏感、方便、快速敏感、方便、快速l-羥丁酸定性試驗(yàn)羥丁酸定性試驗(yàn)l對(duì)酮血癥的早期診斷意義較大對(duì)酮血癥的早期診斷意義較大l較繁瑣較繁瑣l陰

5、性陰性l1.尿液新鮮尿液新鮮l2.正確分析結(jié)果正確分析結(jié)果l尿液酮體檢驗(yàn)主要用于糖代謝障礙和脂尿液酮體檢驗(yàn)主要用于糖代謝障礙和脂肪不完全氧化的判斷與評(píng)價(jià)。肪不完全氧化的判斷與評(píng)價(jià)。l1糖尿病酮癥酸中毒糖尿病酮癥酸中毒 l2其他：饑餓、過分節(jié)食其他：饑餓、過分節(jié)食l法法l膽紅素與氯化鋇反應(yīng)，形成鋇鹽沉淀吸附膽紅素，膽紅素與氯化鋇反應(yīng)，形成鋇鹽沉淀吸附膽紅素，滴加酸性三氯化鐵試劑，使膽紅素氧化為膽綠素滴加酸性三氯化鐵試劑，使膽紅素氧化為膽綠素顯綠色。顯綠色。l操作較為復(fù)雜，但準(zhǔn)確性高。操作較為復(fù)雜，但準(zhǔn)確性高。l2.干化學(xué)試帶法干化學(xué)試帶法l結(jié)合膽紅素在強(qiáng)酸性介質(zhì)中，與結(jié)合膽紅素在強(qiáng)酸性介質(zhì)中，與

6、2,4-二氯苯胺重氮二氯苯胺重氮鹽起偶氮聯(lián)反應(yīng)而呈紫紅色。鹽起偶氮聯(lián)反應(yīng)而呈紫紅色。l敏感度不高、但操作簡便、快速及半定量的作用，敏感度不高、但操作簡便、快速及半定量的作用，可用目視或儀器檢測等優(yōu)點(diǎn)，已得到臨床廣泛應(yīng)可用目視或儀器檢測等優(yōu)點(diǎn)，已得到臨床廣泛應(yīng)用。用。l陰性陰性l1.標(biāo)本要新鮮、避光。標(biāo)本要新鮮、避光。l法法可滴加硫酸銨試劑可滴加硫酸銨試劑1-2滴，以促使沉淀形成，滴，以促使沉淀形成，保證膽紅素最大限度被吸附。保證膽紅素最大限度被吸附。l3.注意藥物的干擾注意藥物的干擾 ：尿中含大量水楊酸和阿司匹：尿中含大量水楊酸和阿司匹林時(shí)易產(chǎn)生紫紅色反應(yīng)而干擾林時(shí)易產(chǎn)生紫紅色反應(yīng)而干擾Har

7、rison法的結(jié)果法的結(jié)果觀察。觀察。Vit C和亞硝酸鹽能抑制偶氮反應(yīng)而使試帶和亞硝酸鹽能抑制偶氮反應(yīng)而使試帶法為假陰性；而大劑量氯丙嗪和高濃度的鹽酸苯法為假陰性；而大劑量氯丙嗪和高濃度的鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物在酸性條件下則使試帶法呈偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物在酸性條件下則使試帶法呈假陽性。假陽性。l4試帶法結(jié)果可疑者，最好用試帶法結(jié)果可疑者，最好用Harrison法加以驗(yàn)法加以驗(yàn)證。證。l1.肝細(xì)胞性黃疸肝細(xì)胞性黃疸l2.阻塞性黃疸阻塞性黃疸l3.先天性高膽紅素血癥先天性高膽紅素血癥l1.改良改良Ehrlich法法 尿膽原在酸性條件下與對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng)生尿膽原在酸性條件下與對(duì)二甲氨基苯甲醛反

8、應(yīng)生成櫻紅色化合物。操作簡便，但結(jié)果受膽紅素、成櫻紅色化合物。操作簡便，但結(jié)果受膽紅素、葉膽色素原以及某些藥物的干擾。葉膽色素原以及某些藥物的干擾。l2.干化學(xué)法干化學(xué)法l試帶有兩種：一種同干化學(xué)法，另一種是利用尿試帶有兩種：一種同干化學(xué)法，另一種是利用尿膽原與重氮化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，根據(jù)產(chǎn)生紅色的膽原與重氮化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，根據(jù)產(chǎn)生紅色的深淺判斷尿膽原含量。深淺判斷尿膽原含量。l試帶法簡單快速，可以半定量，不受尿中膽紅素試帶法簡單快速，可以半定量，不受尿中膽紅素的影響。的影響。l陰性或弱陽性陰性或弱陽性l120稀釋后陰性稀釋后陰性l1.標(biāo)本采集與送檢標(biāo)本采集與送檢l2.假陽性尿的鑒別假陽性尿的

9、鑒別 l3.假陰性假陰性l4.溫度溫度l5.結(jié)果觀察結(jié)果觀察l1.鑒別黃疸鑒別黃疸l2.反映肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo)反映肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo)l3.藥物影響藥物影響l尿血紅蛋白來源：血管內(nèi)溶血尿血紅蛋白來源：血管內(nèi)溶血 腎及上尿路出血腎及上尿路出血l隱血試驗(yàn)：肉眼無變化，化學(xué)定性陽性隱血試驗(yàn)：肉眼無變化，化學(xué)定性陽性l1.濕化學(xué)法濕化學(xué)法l血紅蛋白所含的血紅素有類似過氧化物酶活性，能催化一種供血紅蛋白所含的血紅素有類似過氧化物酶活性，能催化一種供氫（電子）體脫氫，使供氫體分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化而顯色。氫（電子）體脫氫，使供氫體分子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化而顯色。l2.干化學(xué)試帶法干化學(xué)試帶法l與濕化學(xué)法原理相同。簡便

10、、快速，敏感度高。與濕化學(xué)法原理相同。簡便、快速，敏感度高。l上述方法干擾因素很多，特異性差。上述方法干擾因素很多，特異性差。VitC等其它還原性物質(zhì)可等其它還原性物質(zhì)可抑制酶活性使反應(yīng)呈假陰性；高濃度的葡萄糖和蛋白質(zhì)會(huì)降低抑制酶活性使反應(yīng)呈假陰性；高濃度的葡萄糖和蛋白質(zhì)會(huì)降低反應(yīng)的敏感性；一些鐵劑、碘化合物等氧化物可使反應(yīng)呈假陽反應(yīng)的敏感性；一些鐵劑、碘化合物等氧化物可使反應(yīng)呈假陽性。這些試劑與肌紅蛋白也起反應(yīng)。因而性。這些試劑與肌紅蛋白也起反應(yīng)。因而,需加以鑒別。需加以鑒別。 l3.單克隆抗體免疫膠體金法單克隆抗體免疫膠體金法l采用抗人血紅蛋白單克隆抗體進(jìn)行隱血檢測。采用抗人血紅蛋白單克隆

11、抗體進(jìn)行隱血檢測。l敏感度更高，特異性強(qiáng)，簡便、快速；但目前費(fèi)用較高。敏感度更高，特異性強(qiáng)，簡便、快速；但目前費(fèi)用較高。l陰性陰性l1.尿液要及時(shí)測定尿液要及時(shí)測定l2.保證試劑、試帶質(zhì)量保證試劑、試帶質(zhì)量l3.控制干擾因素：控制干擾因素：VitC、標(biāo)本污染、標(biāo)本污染l4.綜合分析結(jié)果綜合分析結(jié)果l1.輔助診斷泌尿系統(tǒng)疾病輔助診斷泌尿系統(tǒng)疾病l2.輔助診斷腎前性溶血性疾病輔助診斷腎前性溶血性疾病l尿中含有硝酸鹽還原酶的病原菌可將硝尿中含有硝酸鹽還原酶的病原菌可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。酸鹽還原為亞硝酸鹽。l常見菌：大腸桿菌、克雷伯桿菌、變形常見菌：大腸桿菌、克雷伯桿菌、變形桿菌。桿菌。lGris

12、s原理：亞硝酸鹽先于對(duì)氨基苯磺酸原理：亞硝酸鹽先于對(duì)氨基苯磺酸或氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與或氨基苯磺酰胺反應(yīng)生成重氮鹽，再與-萘胺結(jié)合形成紅色偶氮化合物。萘胺結(jié)合形成紅色偶氮化合物。l感染的病原微生物的種類感染的病原微生物的種類l尿液滯留時(shí)間尿液滯留時(shí)間l硝酸鹽的存在硝酸鹽的存在l1.濕化學(xué)法：方便、快速。濕化學(xué)法：方便、快速。l2.干化學(xué)法：主要用于檢出大腸桿菌。干化學(xué)法：主要用于檢出大腸桿菌。l（二）參考值：陰性（二）參考值：陰性l1.防止假陽性干擾防止假陽性干擾l2.控制假陰性：晨尿、尿量、抗生素等。控制假陰性：晨尿、尿量、抗生素等。l3.綜合分析結(jié)果綜合分析結(jié)果l泌尿系感染的過篩

13、實(shí)驗(yàn)泌尿系感染的過篩實(shí)驗(yàn)l陰性不能排除感染陰性不能排除感染l尿中本尿中本-周蛋白定性檢查周蛋白定性檢查l尿液肌紅蛋白定性檢查尿液肌紅蛋白定性檢查l尿液清蛋白定量測定尿液清蛋白定量測定l尿總蛋白定量測定尿總蛋白定量測定l尿尿2-微球蛋白定量測定微球蛋白定量測定l尿免疫球蛋白定量測定尿免疫球蛋白定量測定l本周蛋白本周蛋白(Bence-Jones protein，BJP)是是免疫球蛋白輕鏈，能通過腎小球?yàn)V過膜。免疫球蛋白輕鏈，能通過腎小球?yàn)V過膜。又稱為凝溶蛋白。又稱為凝溶蛋白。l免疫球蛋白輕鏈在血液中的濃度增高，免疫球蛋白輕鏈在血液中的濃度增高，超過了腎近曲小管重吸收閾值時(shí)，可出超過了腎近曲小管重吸

14、收閾值時(shí)，可出現(xiàn)本周蛋白尿?，F(xiàn)本周蛋白尿。l1.熱沉淀法：在熱沉淀法：在40時(shí)開始混濁，時(shí)開始混濁，60時(shí)時(shí)凝固，繼續(xù)加熱至凝固，繼續(xù)加熱至90-100時(shí)溶解，當(dāng)時(shí)溶解，當(dāng)溫度恢復(fù)為溫度恢復(fù)為4060時(shí)又凝固。時(shí)又凝固。 l2.對(duì)甲苯磺酸沉淀法：對(duì)對(duì)甲苯磺酸沉淀法：對(duì)-甲苯磺酸能沉甲苯磺酸能沉淀相對(duì)分子質(zhì)量較小的本周蛋白，而對(duì)淀相對(duì)分子質(zhì)量較小的本周蛋白，而對(duì)相對(duì)分子質(zhì)量較大的清蛋白和球蛋白不相對(duì)分子質(zhì)量較大的清蛋白和球蛋白不起反應(yīng)。起反應(yīng)。 l3.電泳法或免疫法電泳法或免疫法l陰性陰性l1.標(biāo)本要新鮮，以去除其他蛋白質(zhì)的干擾。標(biāo)本要新鮮，以去除其他蛋白質(zhì)的干擾。 l2.嚴(yán)格控制嚴(yán)格控制pH

15、。l3.如尿中出現(xiàn)其他球蛋白如尿中出現(xiàn)其他球蛋白(大于大于5.0g/L)可可出現(xiàn)假陽性，需進(jìn)行確證試驗(yàn)。出現(xiàn)假陽性，需進(jìn)行確證試驗(yàn)。 l4.電泳法或免疫法：濃縮。電泳法或免疫法：濃縮。l5.使用利福平類抗結(jié)核藥時(shí)，可出現(xiàn)。使用利福平類抗結(jié)核藥時(shí)，可出現(xiàn)。l1.輔助診斷：輔助診斷：MM、巨球蛋白血癥、巨球蛋白血癥l2.預(yù)后觀察：腎功能不全預(yù)后觀察：腎功能不全lMb有種屬特異性有種屬特異性l自由透過腎小球膜自由透過腎小球膜l類過氧化物酶活性類過氧化物酶活性l可被可被100%的硫酸銨沉淀的硫酸銨沉淀l不被不被80%的硫酸銨沉淀的硫酸銨沉淀l化學(xué)法：隱血實(shí)驗(yàn)化學(xué)法：隱血實(shí)驗(yàn)l分光光度法：吸收光譜分光光

16、度法：吸收光譜l單克隆抗體免疫法：最敏感、特異單克隆抗體免疫法：最敏感、特異l陰性陰性l1.標(biāo)本新鮮標(biāo)本新鮮l2.緩慢加入硫酸銨，輕微振蕩緩慢加入硫酸銨，輕微振蕩l1.大面積外傷大面積外傷l2.缺氧、缺血缺氧、缺血l3.其他其他l測定方法及評(píng)價(jià)：免疫分析法、化學(xué)定測定方法及評(píng)價(jià)：免疫分析法、化學(xué)定量量l參考值：晨尿參考值：晨尿 隨機(jī)尿隨機(jī)尿1.270.78mmolCr 或或 11.216.93mg /gCr 24h尿尿l1.注意非特異性濁度的控制注意非特異性濁度的控制l2.注意抗原抗體的比例注意抗原抗體的比例l3.每次更換試劑后應(yīng)重新制作標(biāo)準(zhǔn)曲線每次更換試劑后應(yīng)重新制作標(biāo)準(zhǔn)曲線l1.早期腎損害

17、的篩檢早期腎損害的篩檢 l2.過敏性紫癜的腎功能監(jiān)測過敏性紫癜的腎功能監(jiān)測 l3.腎小球腎炎的病情觀察腎小球腎炎的病情觀察l4.其他其他l測定方法及評(píng)價(jià)：雙縮脲法測定方法及評(píng)價(jià)：雙縮脲法 染料結(jié)合法染料結(jié)合法 比濁法比濁法 免疫比濁法或放射比濁免疫比濁法或放射比濁法法l蛋白質(zhì)中的肽鍵（蛋白質(zhì)中的肽鍵（-CONH-）在堿性溶液）在堿性溶液中能與中能與Cu2+作用而產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物，作用而產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物，l其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)。而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)。l40-150mg/24hl麗春紅麗春紅S法法 l考

18、馬斯亮藍(lán)法考馬斯亮藍(lán)法l方法選擇方法選擇l標(biāo)本要求標(biāo)本要求l尿液濃縮尿液濃縮l消除尿液顏色的干擾消除尿液顏色的干擾 l測定方法及評(píng)價(jià)：免疫測定方法及評(píng)價(jià)：免疫l參考值：參考值：2MG 2MG排泄率排泄率0.2mg /(gCr) 2MG排泄率排泄率3mg /Ll質(zhì)量控制：標(biāo)本處理、試劑質(zhì)量控制：標(biāo)本處理、試劑l臨床意義：臨床意義：1.腎小球?yàn)V過功能受損的敏感腎小球?yàn)V過功能受損的敏感指標(biāo)。指標(biāo)。 2.腎小管疾病的早期診斷指標(biāo)。腎小管疾病的早期診斷指標(biāo)。 3.鑒別上、下尿路感染。鑒別上、下尿路感染。 4.觀察腎移植排斥反應(yīng)。觀察腎移植排斥反應(yīng)。l血漿血漿l尿路感染局部免疫反應(yīng)產(chǎn)生尿路感染局部免疫反應(yīng)

19、產(chǎn)生l腎臟疾病腎臟疾病l測定方法及評(píng)價(jià)：晨尿或測定方法及評(píng)價(jià)：晨尿或24h尿液尿液 免疫學(xué)方法免疫學(xué)方法l參考值：參考值：l臨床意義：診斷腎小球性蛋白尿臨床意義：診斷腎小球性蛋白尿 評(píng)價(jià)腎小球的損害程度評(píng)價(jià)腎小球的損害程度 腎炎型腎病腎炎型腎病lNAG、GGT、AAP、AMY、TRl尿酶活性計(jì)算：肌酐換算尿酶活性計(jì)算：肌酐換算 8h尿量計(jì)算尿量計(jì)算 酶清除率酶清除率l腎小管損傷的標(biāo)志物腎小管損傷的標(biāo)志物l測定方法及評(píng)價(jià)：比色法測定方法及評(píng)價(jià)：比色法 熒光光度法熒光光度法 電泳法電泳法l參考值：比色法參考值：比色法30U/L尿尿l質(zhì)量控制；標(biāo)本、試劑質(zhì)量控制；標(biāo)本、試劑l腎臟病變：腎小管損害腎臟

20、病變：腎小管損害l腎移植排異反應(yīng)：早發(fā)現(xiàn)腎移植排異反應(yīng)：早發(fā)現(xiàn)l上、下尿路感染的鑒別上、下尿路感染的鑒別l連續(xù)檢測法連續(xù)檢測法l腎臟受損的早期診斷：腎小管炎癥腎臟受損的早期診斷：腎小管炎癥l腎小球腎炎的療效觀察腎小球腎炎的療效觀察l腎癌的標(biāo)志物腎癌的標(biāo)志物l腎移植排異反應(yīng)觀察指標(biāo)腎移植排異反應(yīng)觀察指標(biāo)l速率法速率法l各種腎臟疾病診斷的輔助指標(biāo)各種腎臟疾病診斷的輔助指標(biāo)l腎移植術(shù)后排異反應(yīng)的觀察腎移植術(shù)后排異反應(yīng)的觀察l腎毒性損害的早期診斷腎毒性損害的早期診斷l(xiāng)急性胰腺炎急性胰腺炎l慢性胰腺炎慢性胰腺炎l其他其他l測定方法：連續(xù)檢測法、免疫法測定方法：連續(xù)檢測法、免疫法l參考值：陰性參考值：陰性

21、l質(zhì)量控制：采樣時(shí)間質(zhì)量控制：采樣時(shí)間 抗原抗體比例抗原抗體比例 結(jié)果判斷結(jié)果判斷l(xiāng)臨床意義：急性胰腺炎陽性臨床意義：急性胰腺炎陽性 胰腺癌陰性胰腺癌陰性l一、尿葡萄糖定量測定一、尿葡萄糖定量測定 l二、乳糜尿定性檢查二、乳糜尿定性檢查 l三、尿絨毛膜促性腺激素檢查三、尿絨毛膜促性腺激素檢查 l四、尿含鐵血黃素定性檢查四、尿含鐵血黃素定性檢查 l五、尿卟啉定性檢查五、尿卟啉定性檢查 l六、尿苯丙酮酸定性檢查六、尿苯丙酮酸定性檢查 l測定方法及評(píng)價(jià)：己糖激酶法測定方法及評(píng)價(jià)：己糖激酶法 鄰甲苯胺法鄰甲苯胺法 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法l質(zhì)量控制：立即檢測質(zhì)量控制：立即檢測l參考值參考值 2.8mmol/d(0.5g/d)l臨床意義臨床意義l乳糜尿含有大量脂肪顆粒，與蛋白質(zhì)組乳糜尿含有大量脂肪顆粒，與蛋白質(zhì)組成的乳糜狀渾濁尿。脂肪可溶于乙醚，成的乳糜狀渾濁尿。脂肪可溶于乙醚，加乙醚萃取后乳糜尿變澄清，即為乳糜加乙醚萃取后乳糜尿變澄清，即為乳糜試驗(yàn)陽性。乳糜尿中脂肪小滴可用脂溶試驗(yàn)陽性。乳糜尿中脂肪小滴可用脂溶性染料使之著色，在顯微鏡下觀察識(shí)別。性染料使之著色，在顯微鏡下觀察識(shí)別。 l乳糜尿常