實驗一、微生物學實驗常用技術

1、微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗的微生物學實驗的的任務的任務 v學習研究與應用微生物的主要方法與技術，學習研究與應用微生物的主要方法與技術，掌握適應于從事相關學科的基礎理論研究掌握適應于從事相關學科的基礎理論研究與實際生產應用的微生物學實驗技能。與實際生產應用的微生物學實驗技能。v與微生物學基礎理論課緊密結合，在實驗與微生物學基礎理論課緊密結合，在實驗中更深地理解基礎理論，提高學生的綜合中更深地理解基礎理論，提高學生的綜合能力與創(chuàng)新意識。能力與創(chuàng)新意識。v提高學生分析問題和解決問題的能力。提高學生分析問題和解決問題的能力。微生物學實驗微生物學

2、實驗教學要求教學要求 v注重微生物學基礎實驗技能的掌握與提高，注重微生物學基礎實驗技能的掌握與提高，克服盲目追求新穎而忽視基礎的傾向；克服盲目追求新穎而忽視基礎的傾向；v實驗課前要預習，明確每次實驗的目的與實驗課前要預習，明確每次實驗的目的與基本步驟；基本步驟；v在實驗中要有嚴緊的科學態(tài)度，尊重事實在實驗中要有嚴緊的科學態(tài)度，尊重事實與實驗結果，要善于發(fā)現新現象；與實驗結果，要善于發(fā)現新現象；v樹立密切合作的風氣，包括學生與老師、樹立密切合作的風氣，包括學生與老師、班與班、組與組、組長與組員之間的密配班與班、組與組、組長與組員之間的密配合。合。微生物學實驗微生物學實驗教學方法教學方法 v以學生

3、自己動手為主，老師在適當時間予以提示；以學生自己動手為主，老師在適當時間予以提示；v對實驗中所出現的一些現象多向學生提出問題，對實驗中所出現的一些現象多向學生提出問題，使它們學會分析結果，并與理論知識有機結合；使它們學會分析結果，并與理論知識有機結合；v根據實驗的進行程度，引導學生更深入思考，逐根據實驗的進行程度，引導學生更深入思考，逐步樹立他們的創(chuàng)新意思；步樹立他們的創(chuàng)新意思；v嚴格要求使操作技能規(guī)范化，老師作示范，強調嚴格要求使操作技能規(guī)范化，老師作示范，強調其要點學生自己練。其要點學生自己練。微生物學實驗微生物學實驗實驗室制度實驗室制度1、每次實驗前必須對實驗內容進行充分預習，以了解實驗

4、的目的、原理和方法，做到心中有數，思每次實驗前必須對實驗內容進行充分預習，以了解實驗的目的、原理和方法，做到心中有數，思路清楚。路清楚。2 2、認真及時做好實驗記錄，對于當時不能得到結果而需要連續(xù)觀察的實驗，則需記下每次觀察的現象、認真及時做好實驗記錄，對于當時不能得到結果而需要連續(xù)觀察的實驗，則需記下每次觀察的現象和結果，以便分析。和結果，以便分析。3 3、實驗室內應保持整潔、勿高聲談話和隨便走動，保持室內安靜。、實驗室內應保持整潔、勿高聲談話和隨便走動，保持室內安靜。4 4、實驗時小心仔細，全部操作應嚴格按操作規(guī)程進行，萬一遇有盛菌試管或瓶不慎打破、皮膚破傷或、實驗時小心仔細，全部操作應嚴

5、格按操作規(guī)程進行，萬一遇有盛菌試管或瓶不慎打破、皮膚破傷或菌液吸入口中等意外情況發(fā)生時，應立即報告指導教師，及時處理，切勿隱瞞。菌液吸入口中等意外情況發(fā)生時，應立即報告指導教師，及時處理，切勿隱瞞。5 5、實驗過程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃藥品接近火焰。如遇火險，應先關掉火源，再用濕布、實驗過程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃藥品接近火焰。如遇火險，應先關掉火源，再用濕布或沙土掩蓋滅火。必要時用滅火機。或沙土掩蓋滅火。必要時用滅火機。6 6、使用顯微鏡或其他貴重儀器時，要求細心操作，特別愛護。對消耗材料和藥品等要力求節(jié)約，用畢、使用顯微鏡或其他貴重儀器時，要求細心操作，特別愛護。對消耗材

6、料和藥品等要力求節(jié)約，用畢后仍放回原處。后仍放回原處。7 7、每次實驗完畢后，必須把所用儀器抹凈放妥，將實驗室收拾整齊。擦凈桌面，如有菌液污染桌面或、每次實驗完畢后，必須把所用儀器抹凈放妥，將實驗室收拾整齊。擦凈桌面，如有菌液污染桌面或其他地方時，可用其他地方時，可用3%3%來蘇爾液或來蘇爾液或5%5%石炭酸液覆蓋其上半小時后擦去。如系芽孢桿菌，應適當延長石炭酸液覆蓋其上半小時后擦去。如系芽孢桿菌，應適當延長消毒時間：凡帶菌之工具消毒時間：凡帶菌之工具( (如吸管、玻璃刮捧等如吸管、玻璃刮捧等) )在洗滌前須浸泡在在洗滌前須浸泡在3%3%來蘇爾液中進行消毒：來蘇爾液中進行消毒：8 8、每次實驗

7、需進行培養(yǎng)的材科，應標明自己的組別及處理方法，放于教師指定的地點進行培養(yǎng)：實驗、每次實驗需進行培養(yǎng)的材科，應標明自己的組別及處理方法，放于教師指定的地點進行培養(yǎng)：實驗室中的菌種和物品等，未經教師許可，不得攜出室外：室中的菌種和物品等，未經教師許可，不得攜出室外：9 9、每次實驗的結果、每次實驗的結果, ,應以實事求是的科學態(tài)度填入報告表格中，力求簡明準確，并連同思考題及時匯應以實事求是的科學態(tài)度填入報告表格中，力求簡明準確，并連同思考題及時匯交教師批閱：交教師批閱：1010、離實驗室前應將手洗凈，注意關閉門窗、燈、火、煤氣等。、離實驗室前應將手洗凈，注意關閉門窗、燈、火、煤氣等。微生物學實驗微

8、生物學實驗教學內容、課時和教學安排教學內容、課時和教學安排 實驗一、微生物學實驗基本操作技術實驗一、微生物學實驗基本操作技術實驗二、培養(yǎng)基的制備、消毒與滅菌實驗二、培養(yǎng)基的制備、消毒與滅菌 實驗三、細菌簡單染色法實驗三、細菌簡單染色法 實驗四、細菌革蘭氏染色法實驗四、細菌革蘭氏染色法 實驗五、細菌芽孢染色法實驗五、細菌芽孢染色法實驗六：細菌莢膜染色法實驗六：細菌莢膜染色法實驗七、放線菌形態(tài)觀察實驗七、放線菌形態(tài)觀察實驗八、酵母菌形態(tài)觀察及死活細胞的鑒別實驗八、酵母菌形態(tài)觀察及死活細胞的鑒別實驗九、酵母菌子囊孢子的觀察實驗九、酵母菌子囊孢子的觀察實驗十、霉菌形態(tài)觀察實驗十、霉菌形態(tài)觀察 實驗十一

9、、微生物大小的測定實驗十一、微生物大小的測定實驗十二、顯微鏡直接計數實驗十二、顯微鏡直接計數實驗十三、微生物的分離、純化與接種培養(yǎng)實驗十三、微生物的分離、純化與接種培養(yǎng) 實驗十四、糖發(fā)酵試驗實驗十四、糖發(fā)酵試驗實驗十五、光電比濁計數法實驗十五、光電比濁計數法實驗十六、水中細菌總數的測定實驗十六、水中細菌總數的測定 實驗十七、化學因素對微生物的影響實驗十七、化學因素對微生物的影響微生物學實驗微生物學實驗成績考核方面的說明及要求成績考核方面的說明及要求 v平時成績平時成績40%40%；包括：；包括： 考勤及課堂紀律考勤及課堂紀律 實驗預習實驗預習 實驗操作實驗操作 實驗報告及思考題實驗報告及思考題

10、v實驗操作考試實驗操作考試30%30%；包括：；包括： 實驗操作規(guī)范程度實驗操作規(guī)范程度 實驗操作熟練程度實驗操作熟練程度 實驗結果及實驗報告實驗結果及實驗報告v抽簽答題抽簽答題30% 30% 。微生物學實驗微生物學實驗實驗預習實驗預習v實驗課教材內容：實驗課教材內容： 原理原理 操作步驟操作步驟 注意事項注意事項 可能出現的問題及解決方法可能出現的問題及解決方法v理論課教材相關內容理論課教材相關內容v參考書相關內容參考書相關內容微生物學實驗微生物學實驗實驗報告實驗報告 采用科研論文格式，分成以下幾個部分：采用科研論文格式，分成以下幾個部分：v原理、目的意義原理、目的意義v材料與方法材料與方法

11、v結果結果v討論討論微生物學實驗微生物學實驗實驗一、微生物學實驗基本操作技術實驗一、微生物學實驗基本操作技術v微生物學實驗常用儀器及用途微生物學實驗常用儀器及用途v微生物學實驗常用器皿及準備微生物學實驗常用器皿及準備v基本無菌操作技術基本無菌操作技術 微生物學實驗微生物學實驗超凈工作臺超凈工作臺微生物學實驗微生物學實驗生物安全柜生物安全柜微生物學實驗微生物學實驗高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋微生物學實驗微生物學實驗電熱干燥箱電熱干燥箱微生物學實驗微生物學實驗CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)箱微生物學實驗微生物學實驗生物反應器和發(fā)酵罐生物反應器和發(fā)酵罐微生物學實驗微生物學實驗水浴鍋水浴鍋微生物學實驗微生物學實驗顯

12、微鏡顯微鏡微生物學實驗微生物學實驗分光光度計分光光度計微生物學實驗微生物學實驗酸度計酸度計微生物學實驗微生物學實驗離心機離心機微生物學實驗微生物學實驗純水機純水機微生物學實驗微生物學實驗制冰機制冰機微生物學實驗微生物學實驗紫外交聯儀和雜交爐紫外交聯儀和雜交爐微生物學實驗微生物學實驗酶標儀和洗板機酶標儀和洗板機微生物學實驗微生物學實驗PCR儀儀微生物學實驗微生物學實驗電泳儀和電泳槽電泳儀和電泳槽微生物學實驗微生物學實驗凝膠成像儀凝膠成像儀微生物學實驗微生物學實驗低溫冰箱低溫冰箱微生物學實驗微生物學實驗液氮罐液氮罐微生物學實驗微生物學實驗漩渦混合儀和振蕩器漩渦混合儀和振蕩器微生物學實驗微生物學實驗

13、真空泵真空泵微生物學實驗微生物學實驗微量加樣器和電動加樣泵微量加樣器和電動加樣泵微生物學實驗微生物學實驗濾器濾器微生物學實驗微生物學實驗微生物學實驗常用的器皿微生物學實驗常用的器皿v 器皿的種類、要求與應用器皿的種類、要求與應用v 玻璃器皿的清洗方法玻璃器皿的清洗方法v 空玻璃器皿的包裝空玻璃器皿的包裝微生物學實驗微生物學實驗一、一、 器皿的種類、要求與應用器皿的種類、要求與應用v試管（試管（test tube)v德漢氏小管（德漢氏小管（Durhan tube）v小塑料離心管（小塑料離心管（Eppendorf tube)v吸管或叫移液管（吸管或叫移液管（pipette)v吸氣器（吸氣器（asp

14、irator or pipette aid ）v微量移液器或叫加樣槍（微量移液器或叫加樣槍（micropipette）v培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿(dish)v三角形燒瓶（三角形燒瓶（flask）與燒杯（）與燒杯（beaker）v注射器（注射器（syringe）和針頭（）和針頭（needle）v載玻片（載玻片（slide）與蓋玻片（）與蓋玻片（coverslip）v滴瓶（滴瓶（dropper bottle）v接種工具接種工具(inoculating tool)微生物學實驗微生物學實驗玻璃器皿的清洗方法玻璃器皿的清洗方法新玻璃器皿的洗滌方法新玻璃器皿的洗滌方法 在酸溶液內浸泡后洗滌在酸溶液內浸泡后洗滌2. 2. 使用過的玻璃器皿的洗滌方法使用過的玻璃器皿的洗滌方法v試管、培養(yǎng)皿、三角燒瓶、燒杯試管、培養(yǎng)皿、三角燒瓶、燒杯v玻璃吸管玻璃吸管v載玻片與蓋玻片載玻片與蓋玻片微生物學實驗微生物學實驗空