PTEN和survivin在乳腺癌中的表達及其臨床意義

1、PTEN和survivin在乳腺癌中的表達及其臨床意義 作者：陸云飛 李夢陽 曾健 林進令【關(guān)鍵詞】 乳腺癌The Clinical Significance and Expression of PTEN, survivin in Breast CanceAbstract：Objective To study the expression of PTEN, survivin and their clinical significance. Methods The expression of PTEN, survivin, PCNA was evaluated in 60 cases paraf

2、fin embedded of breast cancer and 36 cases of mammary gland hyperplasia by immunohistochemical technique(SP), labeling index (PI) of PCNA was acted as a marker of the cellular proliferating activity. Clinicopathologic elements were analyzed by chi square test(2) and ttest. Results The expression rat

3、e of PTEN was lower in breast cancer patients than that of mammary gland hyperplasia (P<0.05).There was a correlation between the expression of PTEN and the cellular proliferating activity in breast cancer（P<0.05）. The expression of PTEN was significantly inversely correlated with axil

4、lary lymph node metastasis, as well as distant metastasis（P<0.05）, and the expression of PTEN was positively correlated with ER and patients survival rate（P<0.05）. The positive rate of survivin expression in breast cancer was higher than that of mammary gland hyperplasia (P<0.05

5、), and the expression of survivin was positively correlated with the cellular proliferating activity in breast cancer（P<0.05）. There was a inversely correlation between the expression of PTEN and survivin in breast cancer（P<0.05）. Conclusion The expression of PTEN and survivin is corre

6、lated with the cellular proliferating activity in breast cancer. PTEN might be used as a marker in the prognostication of breast cancer. The expression of PTEN was inversely correlated with survivin.Key words：PTEN；survivin；PCNA；Breast cancer摘要：目的 研究PTEN和survivin在乳腺癌組織中的表達及其與乳腺癌細胞增殖活性的相關(guān)性，并探討其與臨床病理的關(guān)

7、系。方法 用免疫組化方法(SP法)對60例乳腺癌和36例乳腺增生癥的石蠟包埋標本進行PTEN 、survivin、 PCNA檢測，其中PCNA指數(shù)作為衡量乳腺癌細胞增殖活性的參數(shù)。結(jié)合病人的臨床病理資料進行2 檢驗和t檢驗。結(jié)果 PTEN在乳腺癌中的高表達率明顯低于乳腺小葉增生（P<0.05）；PTEN的表達與乳腺癌細胞增殖活性顯著相關(guān)（P<0.05）；PTEN的表達水平與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)（P<0.05），與水平和5年生存率呈正相關(guān)（P<0.05）。survivin在乳腺癌中的陽性表達率明顯高于乳腺增生癥（P<

8、0.05）；survivin的表達與乳腺癌細胞增殖活性呈正相關(guān)（P<0.05）。PTEN和survivin在乳腺癌中的表達呈負相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 PTEN和survivin的表達與乳腺癌細胞增殖活性顯著相關(guān)； PTEN可以作為一個判斷乳腺癌預后的指標；PTEN和survivin可能共同參與了乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展。關(guān)鍵詞：PTEN；survivin；PCNA；乳腺癌0 引言 近年來研究表明survivin與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。PTEN和survivin 與細胞增殖、凋亡密切相關(guān)。目前關(guān)于PTEN和survivin的表達與乳腺癌的關(guān)系研究較少，在乳腺癌中PT

9、EN和survivin的關(guān)系目前國內(nèi)尚未見報道。為研究PTEN和survivin在乳腺癌中的表達及其與乳腺癌細胞增殖活性的關(guān)系，并探討其臨床意義，我們進行了以下研究，現(xiàn)報告如下。1 資料與方法1.1 一般資料 全部病例來自19921995年本院外科住院乳腺疾病患者,均經(jīng)組織病理學確診。乳腺癌組60例, 均為女性，年齡3275歲，中位年齡46歲。臨床分期：期16 例，期25 例， 期17 例，期2 例,其中浸潤性導管癌39例，單純癌12例，髓樣癌3例，腺癌6例；良性對照組為同期手術(shù)的36例乳腺增生癥。1.2 主要試劑 PTEN、PCNA單克隆抗體、survivin多克隆抗體、SP免疫組化染色試劑

10、盒、DAB試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。1.3 實驗方法 石蠟標本連續(xù)切片4張，一張行常規(guī)HE染色，另三張分別行PTEN、survivin和PCNA的免疫組化染色，其中PCNA作為衡量乳腺癌細胞增殖活性的指標。免疫組化檢測按鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化酶(StreptavidinPeroxidase,SP)法操作常規(guī)進行。設(shè)立陽性對照和陰性對照，以試劑盒自帶的陽性片免疫組化染色結(jié)果為陽性對照，以PBS替代第一抗體的乳腺癌組織免疫組化染色結(jié)果為陰性對照。1.4 結(jié)果判斷 PTEN、survivin陽性表達的判斷標準為:染色陽性信號位于細胞漿, 呈棕黃色顆粒，細胞染色強度明顯高于背景呈棕黃色者

11、為陽性細胞，見圖1、2。參照文獻標準1, 2，每張切片檢測5個視野(×400),陽性細胞數(shù)<10%為(),10%50%為(+),>50%為(+),在統(tǒng)計分析時，將()、(+)歸入低表達組,(+)歸為高表達組。PCNA染色以胞核染成棕黃色為陽性，見圖3。增殖活性以PCNA標記指數(shù)(PCNALI)代表,隨機計數(shù)500個細胞中陽性細胞數(shù),PCNALI=(陽性細胞數(shù)/計數(shù)的細胞總數(shù))×100%。1.5 統(tǒng)計學方法 運用SPSS軟件進行檢驗和2檢驗，P<0.05差異有顯著性。2 結(jié)果2.1 PTEN基因的表達 PTEN在乳腺癌和乳腺增生癥的表

12、達結(jié)果：乳腺癌組織中PTEN的高表達率明顯低于乳腺增生癥組織,兩者比較差異有顯著性意義(P<0.05)，見表1。表1 PTEN基因在乳腺癌和乳腺增生癥組織中的表達（略）PTEN表達與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系：PTEN表達與腫瘤大小、臨床分期、病理組織學分級、PR無相關(guān)性，表達水平與乳腺癌組織水平呈正相關(guān)(P<0.05), 與5年生存率呈正相關(guān)（P<0.05）,與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)(P<0.05)，與遠處轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)(P<0.05)。 PTEN表達與乳腺癌細胞增殖的關(guān)系，見表2。表2 PTEN表達與乳腺癌細胞增殖的關(guān)系（略）

13、2.2 survivin基因的表達 survivin在乳腺癌和乳腺增生癥的表達結(jié)果：乳腺癌組織中survivin的陽性表達率明顯高于乳腺增生癥組織,兩者比較差異有顯著性意義，見表3。表3 survivin在乳腺癌和乳腺增生癥組織中的表達（略）survivin表達與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系：survivin的表達與腫瘤大小、臨床分期、腫瘤組織學分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、狀況、遠處轉(zhuǎn)移和5年生存率均無明顯關(guān)系（P>0.05）。 survivin表達與乳腺癌細胞增殖的關(guān)系,見表4。表4 survivin表達與乳腺癌細胞增殖的關(guān)系（略）2.3 乳腺癌中 PTEN和survivin表達的相關(guān)性 P

14、TEN低表達組的survivin陽性表達明顯高于PTEN高表達組(P<0.05),說明兩者為負相關(guān)關(guān)系，見表5。表5 乳腺癌組織中 PTEN和survivin表達的相關(guān)性（略）3 討論3.1 PTEN基因在乳腺癌中的表達及其臨床意義 PTEN是1997年繼p53基因之后發(fā)現(xiàn)的人類腫瘤中最常發(fā)生突變的抑癌基因。PTEN在乳腺癌中低表達是乳腺癌常見的分子事件。Perren等3研究發(fā)現(xiàn)PTEN基因在乳腺癌中的缺失率為30%40%; Depowski等1運用免疫組化檢測151例乳腺癌PTEN蛋白表達, 發(fā)現(xiàn)73例(48%)病人有PTEN表達缺失。本組研究顯示， 60例乳腺癌中PTEN低表

15、達率為45%，表明PTEN可能參與乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展。 PTEN是腫瘤細胞浸潤和轉(zhuǎn)移的重要負性調(diào)節(jié)因子4。乳腺癌PTEN蛋白表達與 ER失表達、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)1。本組結(jié)果表明，PTEN蛋白表達水平與乳腺癌組織水平和5年生存率呈正相關(guān),與腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)。因此，我們認為乳腺癌PTEN蛋白低表達病例的腫瘤惡性程度較高,易出現(xiàn)浸潤和轉(zhuǎn)移，預后不佳，PTEN可以作為一個有用的預后判斷指標。 本研究以PCNA指數(shù)作為衡量乳腺癌細胞增殖活性的指標。PCNA是一種細胞周期調(diào)節(jié)蛋白, PCNA指數(shù)越大,表明處于期的細胞越多,細胞增殖活性越強。文獻報告PCNA的表達與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤復發(fā)

16、及遠處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),與預后呈負相關(guān)5。我們的研究發(fā)現(xiàn)，36例乳腺增生癥PCNA表達全部為陰性；60例乳腺癌患者中，PTEN高表達組的PCNA指數(shù)為(22.21±15.86)， PTEN低表達組的PCNA指數(shù)為(42.41±21.26)；兩組差別有顯著意義，PTEN表達與PCNA指數(shù)呈負相關(guān)，說明PTEN表達低的腫瘤細胞具有較高的增殖活性。3.2 survivin與乳腺癌的關(guān)系 survivin是1997年發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白(IAP)家族的新成員，是迄今發(fā)現(xiàn)最強的凋亡抑制因子6。近年來研究提示survivin與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)7。目前有關(guān)survivin在乳腺癌組織中

17、的表達及其生物學意義的研究不多。國內(nèi)僅見個別報告8，國外的相關(guān)研究很少，結(jié)果也有所不同。國內(nèi)辛榕等8報道，乳腺癌組織中survivin陽性表達率為64.9%，其表達與腫瘤細胞增殖和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。本組60例乳腺癌中陽性表達率為76.67%，結(jié)果與Tanaka9和Nasu10相似，survivin的表達與腫瘤大小、臨床分期、腫瘤組織學分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、狀況和遠處轉(zhuǎn)移均無顯著相關(guān)。本組研究還發(fā)現(xiàn)，在60例乳腺癌患者中，有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者30 例，survivin陽性表達率為86.67%; 而無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者30 例，survivin陽性表達率為66.67% ，有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者survivi

18、n陽性表達率明顯高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，雖然兩者之間無顯著性差異，但survivin的表達與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的趨勢是存在的，有必要對此做大樣本的研究。3.3 PTEN和survivin在乳腺癌表達的相關(guān)性 目前的研究已證明,癌基因的致癌作用以及抑癌基因的抑癌作用不僅是某個基因的行為,而是多個基因共同協(xié)作的結(jié)果。有作者發(fā)現(xiàn)在胃癌中PTEN和survivin呈負相關(guān)11，在乳腺癌中PTEN和survivin的關(guān)系目前未見報道。我們的研究表明，PTEN低表達組的survivin陽性表達率明顯高于PTEN高表達組(P<0.05),說明兩者為負相關(guān)關(guān)系，我們認為在乳腺癌中PTEN和sur

19、vivin的表達密切相關(guān)，兩者可能一起參與了乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展。（本文圖見第298頁）（略）【參考文獻】 1 Depowski PL, Rosenthal SI, Ross JS. Loss of expression of the PTEN gene protein product is associated with poor outcome in breast cancerJ. Mod Pathol, 2001, 14(7):672676.2 尚杰,王霞,陳玉龍，等. 大腸癌組織中survivin表達與血管生成、細胞增殖的關(guān)系J. 實用癌癥雜志,2003, 18(5):501502.3

20、Perren A, Weng LP, Boag AH, et al. Immunohistochemical evidence of PTEN expression in primary ductal adenocarcinomas of the breast J. Am J Pathol, 1999,155(4):12531260.4 Tamura M, Gu J, Matsumoto K, et al. Inhibition of cell migration, spreading, and focal adhesion by tumor suppressor PTEN J. Scienc

21、e, 1998,280(5369):16141617.5Lazarris ACH,Chatzingianni EB, Panoussopoulos D, et al. Proliferating cell nuclear antigen and heat shock protein 70 immunolocalization in invasived ductal breast cancer not other specifiedJ. Breast cancer and treatment, 1997,43(1):4351.6Ambrosini G, Adida C Altieri DC. A novel antiapoptosis gene, survivin, expressed in