大腸桿菌微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)報(bào)告及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(共4頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實(shí)驗(yàn)1 微生物的分離、培養(yǎng)及計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理純化分離：人為提供適宜的菌落生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、Ph等）。用平板劃線法，通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞菌落。篩選：轉(zhuǎn)基因大腸桿菌有抗氨芐青霉素基因，所以在含有氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基中可以正常繁殖長成菌落。而普通的大腸桿菌沒有抗氨芐青霉素基因，咋含有氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基中不能繁殖。由此可進(jìn)行大腸桿菌的篩選。梯度稀釋并計(jì)數(shù)：通過濃度梯度稀釋把液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的大腸桿菌稀釋到一定濃度，用稀釋涂布平板法，然后將

2、不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。由此可計(jì)數(shù)計(jì)算大腸桿菌的數(shù)量。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 通過制備LB固體培養(yǎng)基，對平板進(jìn)行劃線等，學(xué)會(huì)使用固體LB平板。2. 通過用液體培養(yǎng)基，學(xué)會(huì)對微生物進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。3. 通過稀釋，學(xué)會(huì)用計(jì)數(shù)器對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)材料和藥品待分離的大腸桿菌菌液、高壓蒸汽滅菌鍋、LB固體培養(yǎng)基、LB液體培養(yǎng)基、接種環(huán)、玻璃涂布器、培養(yǎng)皿、恒溫培養(yǎng)箱、搖床、酒精燈、無菌水、移液槍、EP管實(shí)驗(yàn)步驟（用簡單的流程圖表示）篩選出普通大腸桿菌后，轉(zhuǎn)接入液體LB培養(yǎng)基平板劃線（第

3、一次含AMP,第二次不含AMP）制備LB固體培養(yǎng)基（計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板）稀釋涂布平板法（分別涂10-4、10-5）濃度梯度稀釋：（10-4、10-5）擴(kuò)大培養(yǎng)37搖床震動(dòng)培養(yǎng)計(jì)數(shù)，觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的記錄與分析（如照片、表格等） 稀釋倍數(shù)104105大腸桿菌單個(gè)菌落個(gè)數(shù)837799111812平均數(shù)86.313.7濃度1.726×1070.274×107實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論結(jié)果：稀釋了105計(jì)算出來的結(jié)果約為1.726×107ml/cm3稀釋了104計(jì)算出來的結(jié)果約為0.274×107ml/cm3全組數(shù)據(jù)計(jì)算出來結(jié)果為2.233&

4、#215;107ml/cm3討論： 在稀釋倍數(shù)為104的試驗(yàn)中大腸桿菌菌落較少，原因可能是在稀釋過程操作中，震蕩不夠，而且由于不小心灑了半管104稀釋液，所以取液接種的時(shí)候底層的大腸桿菌數(shù)量偏少了。也有可能是靠近酒精燈附近使得溫度升高殺死了一部分細(xì)菌或者降低了活性。 從實(shí)驗(yàn)圖片中可以看出，涂布過程中由于操作失誤導(dǎo)致固體培養(yǎng)基上不平滑，有多處破損，細(xì)菌在破損處的生長大多是不規(guī)則的連續(xù)緊挨在一起的，所以不便于菌落的計(jì)數(shù)，也會(huì)影響最終實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。課后提問使用稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法，計(jì)算出來的細(xì)菌數(shù)量與實(shí)際相比是偏大還是偏小呢？誤差有多大？ 有沒有誤差更小的更準(zhǔn)確的方法來計(jì)數(shù)？微生物的分離、培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 實(shí)驗(yàn)

5、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)個(gè)人參與參考標(biāo)準(zhǔn)分值維度1：解題參與報(bào)告中有充足證據(jù)體現(xiàn)了該學(xué)生在實(shí)驗(yàn)的執(zhí)行、交流等環(huán)節(jié)的高度參與。15報(bào)告中有一些證據(jù)體現(xiàn)了該學(xué)生在實(shí)驗(yàn)的執(zhí)行、交流等環(huán)節(jié)的參與。10報(bào)告中沒有證據(jù)體現(xiàn)該學(xué)生在實(shí)驗(yàn)的執(zhí)行、交流等環(huán)節(jié)的參與。0項(xiàng)目執(zhí)行參考標(biāo)準(zhǔn)分值維度1：完成度項(xiàng)目得到充分執(zhí)行（可根據(jù)實(shí)際情況做出合理調(diào)整）；15項(xiàng)目計(jì)劃基本執(zhí)行完畢；10項(xiàng)目計(jì)劃未得到有效開展；0維度2：真實(shí)性留存全部可靠的原始數(shù)據(jù)記錄及工作記錄；15原始數(shù)據(jù)記錄或工作記錄稍有遺漏；10無原始數(shù)據(jù)、工作記錄，或嚴(yán)重遺漏。（出現(xiàn)此情況，項(xiàng)目執(zhí)行0分）0維度3：數(shù)據(jù)全面性收集了足夠全面的數(shù)據(jù)以解決提出的問題；15收集的數(shù)據(jù)能

6、夠解決提出的大部分問題；10收集的數(shù)據(jù)基本不能解決問題；0維度4：數(shù)據(jù)信效度對數(shù)據(jù)做了合理充分的分析；15對數(shù)據(jù)做了一些分析；10未對數(shù)據(jù)做分析。0維度5：安全性、規(guī)劃合理實(shí)驗(yàn)操作安全、規(guī)范，安排有條理、效率高。15實(shí)驗(yàn)操作安全、規(guī)范。10實(shí)驗(yàn)操作存在安全隱患。（出現(xiàn)此情況，項(xiàng)目執(zhí)行0分）0分析反思參考標(biāo)準(zhǔn)分值維度1：分析數(shù)據(jù)，得出結(jié)論明確處理、分析所得數(shù)據(jù)，得出能夠解決所研究問題的結(jié)論；15處理、分析所得數(shù)據(jù)，得出能夠部分解決所研究問題的結(jié)論；10處理、分析數(shù)據(jù)不當(dāng)，導(dǎo)致結(jié)論存在明顯科學(xué)性錯(cuò)誤；0維度2：結(jié)論所得結(jié)論描述清晰，有可靠的數(shù)據(jù)支持，很好的解決了問題；15所得結(jié)論存在一些漏洞，但是能夠基本解決問題；10所得結(jié)論與所研究問題無關(guān)，或存在明顯科學(xué)性錯(cuò)誤。0交流參考標(biāo)準(zhǔn)分值維度1：完整性項(xiàng)目成果結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)容完整，對研究的問題、原理、執(zhí)行過程、分析過程、結(jié)論、反思等內(nèi)容表達(dá)清楚；15項(xiàng)目成果內(nèi)容完整，對項(xiàng)目的問題、原理、設(shè)計(jì)、執(zhí)行、分析、反思等內(nèi)容都有表達(dá)；10項(xiàng)目成果內(nèi)容不完整，或表達(dá)不清。0