植物蛋白飲料中還原糖和蔗糖含量的檢測

1、制定日期：有限公司編號：QAC 001修定日期：三層文件修改版本號：實施日期：題目：檢驗方法植物蛋白飲料中本份頁碼：共4頁制定部門：品控部總還原糖和蔗糖含量的檢測頁碼：4 11、原理樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，其中蔗糖經(jīng)鹽酸水解轉(zhuǎn)化為還原糖，在加熱條件下， 直接滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液，以次甲基藍(lán)作指示劑，根據(jù)樣品液消 耗體積，計算還原糖量(用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液)。根據(jù)水解前、后還原糖的差值，再換算成樣品蔗糖含量。2、試劑(1) 堿性酒石酸銅甲液：稱取 15.00g硫酸銅(CuSO4 5H2O)及0.05g次甲 基藍(lán)，溶于水中并稀釋至1000ml，貯存棕色試劑瓶中。(2) 堿性酒石

2、酸銅乙液：稱取50.00g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶于水中， 再加入4g亞鐵氰化鉀，完全溶解后，用水稀釋至 1000ml，貯存于橡膠 塞玻璃瓶中。(3) 乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀釋至 100ml。(4) 亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)。(5) 鹽酸(1 + 1):量取50ml鹽酸慢慢倒入50ml水中，混勻。(6) 氫氧化鈉溶液(200g/L )。(7) 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取1.0000g經(jīng)過99C干燥至恒重的純葡萄糖， 加水溶解后加入5ml鹽酸，并以水稀釋至1000ml。此溶液每毫升相當(dāng) 于1.0mg葡萄糖。(8) 轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.95

3、g純蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞 三角瓶中，加5ml鹽酸(1+1 )在68-70C水溶中加熱15min，放置室 溫定容至1000ml，每毫升標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于1.0mg轉(zhuǎn)化糖。(9) 甲基紅指示劑：稱取甲基紅0.10g用少量乙醇溶解，稀釋至100ml。3、儀器(1) 酸式滴定管：25ml、50ml。(2) 可調(diào)式電爐(帶石棉板)。4、操作方法(1) 樣品處理吸取25.00- 50.00ml液體樣品，置于250ml容量瓶中，加50ml水， 慢慢加入5ml乙酸鋅溶液及5ml亞鐵氰化鉀溶液，加入至刻度，混勻, 沉淀，靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。(2) 標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液

4、：吸取 5.00ml堿性酒石酸銅甲液及5.00ml乙 液，置于150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管制核定準(zhǔn)審 核制定日期：1999/ 09/ 07楊協(xié)成（廣州）有限公司 三層文件編號：QAC 001修定日期：修改版本號：實施日期：題目：檢驗方法植物蛋白飲料中總還原糖和蔗糖含量的檢測本份頁碼：共4頁制定部門：品控部頁碼：4 2滴加約9ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴 的速度繼續(xù)加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液或轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去 為終點，記錄消耗葡萄糖或轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，同時平行操作四份， 取其平均值，計算每10ml（甲、乙液各5ml）

5、堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖 的質(zhì)量或轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量（mg）。m3=vimi（4 1）式中：m3 10ml （甲、乙液各5ml）堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的 質(zhì)量，mg;V1平均消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積， ml;m11ml葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，1mg ；m4=V2m2（42）式中：m4 10ml（甲、乙液各5ml）堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于轉(zhuǎn)化糖的質(zhì) 量，mg;V2平均消耗轉(zhuǎn)化糖的體積，ml;m21ml轉(zhuǎn)化糖標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量，1mg。（3）樣品還原糖含量的測定 樣品液預(yù)測：吸取5.00ml堿性酒石酸銅甲液及5.00ml乙液，置于150ml錐形瓶 中，加水10ml,加入玻璃珠2

6、粒，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以 先快后慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)， 待溶液顏色變淺時，以每兩秒1滴的速度滴定，直至溶液藍(lán)色剛好 褪去為終點，記錄樣液消耗體積（樣品中還原糖濃度根據(jù)預(yù)測加以 調(diào)節(jié)，以0.1g/100g為宜，即控制樣液消耗體積在10ml左右，否則 誤差大）。 樣品溶液的測定吸取5.00ml堿性酒石酸銅甲液及5.00ml乙液，置于150ml錐形瓶 中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管加比預(yù)測體積少1ml 的樣品溶液，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸繼續(xù)以每秒1滴的速 度滴定，直到藍(lán)色剛好褪去為終點，記錄樣液消耗體積。同法平行 操作四次，取平均消耗體

7、積。 計算制疋核 準(zhǔn)審 核制定日期：1999/ 09/ 07楊協(xié)成（廣州）有限公司 三層文件編號：QAC 001修定日期：修改版本號：實施日期：題目：檢驗方法植物蛋白飲料本份頁碼：共4頁制定部門：品控部中總還原糖和蔗糖含量的檢測頁碼：4 3m3Xi =式中：X1m3(4 3)X 100V5X V3/ 250 X 1000樣品中還原糖的含量（以葡萄糖計）10ml堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各,g/100ml 5ml）相當(dāng) 于還原糖（以葡萄糖計）的質(zhì)量，mg 樣品體積，ml;測定時平均消耗樣品溶液體積，ml; 樣品溶液總體積，ml。V5V 3 -250（4）樣品蔗糖含量的測定 樣品中蔗糖的轉(zhuǎn)化吸取5

8、0ml樣品處理液，置于100ml容量瓶中。加5ml （1 + 1）鹽酸, 在68 70 C水浴中加熱15min,冷卻后加2滴甲基紅指示液，用 200g/L氫氧化鈉中和至中性，加水至刻度，混勻 樣品中轉(zhuǎn)化糖的測定按4 （3）中直接滴定法測定還原糖。 計算X2 =x 100(4 3)m4V6X V4/ 100X 50/250X 1000式中：X2m4式中:XV6V 4 -10025050X%-樣品轉(zhuǎn)化后總還原糖含量，g/100ml -10ml堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各 質(zhì)量，mg-樣品體積，ml;-測定時平均消耗樣品溶液體積，ml; 轉(zhuǎn)化糖總體積，ml;樣品溶液總體積，ml;-用于水解的樣品液體

9、積，5ml）相當(dāng)于還原糖的ml。3=（X2-X1）X 0.95（4 5）樣品中蔗糖含量，g/100ml;-水解處理后還原糖（以葡萄糖計）含量, -水解處理前還原糖含量（以葡萄糖計）0.95還原糖（以葡i萄糖計）換算為蔗糖的系數(shù)。制疋核 準(zhǔn)審 核制定日期：1999/ 09/ 07楊協(xié)成（廣州）有限公司修定日期:修改版本號:g/100ml ; ,g/100ml ;編號：QAC 0012X三層文件實施日期：題目：檢驗方法植物蛋白飲料本份頁碼：共4頁制定部門：品控部中頁碼：4 4總還原糖和蔗糖含量的檢測說明:(1) 本法為直接滴定法，經(jīng)過標(biāo)定的定量的堿性酒石酸銅試劑，可與定量的 還原糖作用，根據(jù)樣品溶

10、液消耗體積，可計算樣品中還原糖含量。(2) 亞甲基藍(lán)本身也是一種氧化劑，其氧化型為藍(lán)色，還原型為無色，它的 氧化能力比堿性酒石酸銅更弱，當(dāng)還原糖將溶液中堿性酒石酸銅耗盡時， 稍微過量一點點的還原糖會將亞甲基藍(lán)還原，變?yōu)闊o色狀態(tài)，指示滴定 終點。其反應(yīng)是可逆的，當(dāng)空氣中的氧與無色亞甲基藍(lán)結(jié)合時又變?yōu)樗{(lán) 色。滴定時要保持沸騰狀態(tài)，使上升蒸汽阻止空氣浸入溶液中。(3) 加入少量亞鐵氰化鉀，可使生成的紅色氧化亞銅沉淀絡(luò)合，形成可溶性 絡(luò)合物，消除觀察紅色沉淀對滴定終點的干擾，使終點變色更明顯。(4) 本法對滴定操作條件要求很嚴(yán)，對堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定，樣品液必須預(yù)測，樣品液測定的操作條件與預(yù)測條件均應(yīng)保持一致。對每一次滴 定所使用的錐形瓶規(guī)格、加熱電爐功率、滴定速度、預(yù)加入大致體積、 終點的確定方法等都盡量一致，以減少誤差，并將滴定所需體積的絕大 部分先加入堿性酒石酸銅試劑中共沸，使其充分反應(yīng)，僅留1ml左右進(jìn)行滴定，并判斷終點。(5) 蔗糖水解條件較低，在本法所列條件下，蔗糖水解，其他還原性雙糖不 水解，原有的單糖不被破壞。(6) 計算蔗糖含量時換算系數(shù)為0.95，蔗糖水解