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文檔簡介
1、生物化學(xué)試題及答案(14)第十四章基因重組與基因工程 測(cè)試題 “、名詞解釋:1. 基因工程(genetic engineering) 。2. 接合作用(conjugation) 。3. 轉(zhuǎn)化作用(transforation) 。4. 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction) 。5. 轉(zhuǎn)座(transposition ) 。6. 轉(zhuǎn)座子(transposons )。7. 同源重組(homologous recombination ) 。8. 基本重組(general recombination ) 。9. DNA 克隆 ( DNA cloning ) 。10. 復(fù)制子 ( replicon ) 。1
2、1. 限制性核酸內(nèi)切酶(restriction endonuclease ) 。12.13.14.15.16.17.18.19.回文結(jié)構(gòu)( palindrome ) 。配伍末端( compatible end ) 。目的 DNA ( target DNA ) ?;パa(bǔ) DNA (complementary DNA ; cDNA ) ??寺≥d體(cloning vector ) 。表達(dá)載體(expression vector )。質(zhì)粒 (plasmid )。a 一互補(bǔ) (alpha complementation )。20. 基因組 DNA 文庫 ( genomic DNA library ) 。
3、21. 標(biāo)志補(bǔ)救(marker rescue )。22. 轉(zhuǎn)染 ( transfection ) 。23. 基因組 DNA ( genomic DNA ) 。24. 感受態(tài)細(xì)胞( competent cell ) 。25. 聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction ) 。26. cDNA 文庫 (cDNA library ) 。27. 保守性轉(zhuǎn)座(conservative transposition ) 。28. 復(fù)制性轉(zhuǎn)座(duplicative transposition ) 。29. 溶菌生長途徑(lysis pathway ) 。30. 溶源生長途徑(lysog
4、enic pathway) 。二、填空題:31. 自然界的常見基因轉(zhuǎn)移方式有 、 、 、 。32. 不同 DNA 分子間發(fā)生的共價(jià)連接稱為有 、 兩種方式。33. 某些基因可以從一個(gè)位置移動(dòng)到另一個(gè)位置,這些可移動(dòng)的DNA 序列包括和34. 由 _和 _介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座。cDNA 的 ,轉(zhuǎn)座酶可特異_。_和 , 其切口有端和35. 反轉(zhuǎn)錄病毒整合酶可特異地識(shí)別整合反轉(zhuǎn)錄病毒的識(shí)別轉(zhuǎn)座子的,發(fā)生特異性整合。36. 基因工程的載體必須具備的條件有 、 37. 限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別的核苷酸序列的個(gè)數(shù)為_端。38. 基因工程常用的載體 DNA分子有、.和。39. 一個(gè)完整的 DNA 克隆過
5、程應(yīng)包括 、。40. 目的基因獲取的途徑或來源有 、。41. 基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有 、。42. 基因克隆的原核表達(dá)體系的E,coli表達(dá)體系的表達(dá)載體應(yīng)符合的標(biāo)準(zhǔn)有: 、 、 O43. 基因克隆真核生物表達(dá)體系常見的有 、表達(dá)體系。44. 根據(jù)重組體DNA的性質(zhì)不同,將重組體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的方式有45. M13噬菌體基因間隔區(qū)插入E,coli的一段調(diào)節(jié)基因及的N端一個(gè)氨基酸殘基的編碼基因,其編碼產(chǎn)物為 的a片段,突變型lac- E,coli可表達(dá)該酶的3片段。當(dāng)宿主 細(xì)胞與克隆載體同時(shí)表達(dá)兩個(gè)片段時(shí),宿主細(xì)胞可使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物,即稱為O46. 如果M13的外源
6、基因被插入到lac Z基因內(nèi),則在含有 X gal的培養(yǎng)基上生長時(shí)會(huì) 出現(xiàn) 色菌落,如果在lac Z基因內(nèi)無外源基因插入,在同樣的條件下呈現(xiàn) 色菌落。47. 典型的插入序列是由 序列和一個(gè) 編碼基因構(gòu)成。48. 插入序列發(fā)生的轉(zhuǎn)座有 和 兩種形式。49. 當(dāng)細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí), 就可以從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移到另一細(xì)胞(細(xì)菌),這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為 作用。50. 重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有 、。 三、選擇題:A型題51. 關(guān)于接合作用正確的是A.與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí),染色體 DNA從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞(細(xì)菌)B.細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí),某
7、些較大質(zhì)粒DNA從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞(細(xì)菌)C.細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí),噬菌體 DNA從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移至另一 細(xì)胞(細(xì)菌)D.細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí),所有類型的質(zhì)粒DNA從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞(細(xì)菌)E.細(xì)胞與細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相互接觸時(shí),所有類型的噬菌體DNA從一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞(細(xì)菌)52 .下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性?A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)染C.轉(zhuǎn)位D.轉(zhuǎn)導(dǎo)E.接合53 .微切割技術(shù)使目的基因可來源于下列那種物資?A .真核細(xì)胞染色體 DNAB .人工合成 DNA .C. CDNAD. G一文庫E. C一文庫54 .基因工
8、程的特點(diǎn)是:B.在分子水平上操作,在細(xì)胞水平A.在分子水平上操作,在分子水平上表達(dá)上表達(dá)D 在細(xì)胞水平上操作,在細(xì)胞水平C.在細(xì)胞水平上操作,在分子水平上表達(dá)上表達(dá)E.以上均可以DNA 和載體 DNA 的酶是:B. DNA聚合酶ID. DNA聚合酶出B Southern 印跡D.親和層析B Southern 印跡D.親和層析55 . 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用的連接外源性A DNA 連接酶C. DNA聚合酶nE.反轉(zhuǎn)錄酶56用來鑒定DNA 的技術(shù)是:A Northern 印跡C Western 印跡E.離子交換層析57用來鑒定DNA 的技術(shù)是:A Northern 印跡C Western 印跡E.離子交換層
9、析58重組DNA 技術(shù)中常用的工具酶下列那項(xiàng)不是:A.限制性核酸內(nèi)切酶B . DNA連接酶C. DNA聚合酶ID . RNA聚合酶E.反轉(zhuǎn)錄酶59 . F-細(xì)胞與F+細(xì)胞混合培養(yǎng),產(chǎn)生 F+細(xì)胞的過程為:A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.接合D,突變E.轉(zhuǎn)位60 DNA 致癌病毒感染宿主細(xì)胞后,使之發(fā)生癌變是因?yàn)榘l(fā)生了:A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.接合D.轉(zhuǎn)座E.轉(zhuǎn)位61 關(guān)于基因工程的敘述,不正確的是:A .根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇目的基因B.選擇一個(gè)適合的載體C.把目的基因和載體分別用限制性核酸內(nèi)切酶切開D.連接酶只連接目的基因和載體E.把重組體轉(zhuǎn)化到細(xì)胞中去的過程不是絕對(duì)的62限制性核酸內(nèi)切酶不具有那項(xiàng)特點(diǎn):A .僅
10、存在原核細(xì)胞中B.用于重組DNA技術(shù)中的為I類酶C.能識(shí)別雙鏈 DNA中特定的堿基順序D.具有一定的外切酶活性E.辨認(rèn)的核甘酸序列常具有回文結(jié)構(gòu)63限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別DNA 中核苷酸序列的個(gè)數(shù)為:A 4、 5、 6B 5、 6、 7C6、 7、 8D 4、 6、 8E4864如果某限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的堿基序列為6 個(gè),則 24Kb 的一段隨機(jī)的DNA 序列可出現(xiàn)的切口數(shù)為:B 5 次D 7 次A 4 次C 6 次26 / 16E 8 次65關(guān)于限制性核酸內(nèi)切酶的敘述,下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的:A.限制性核酸內(nèi)切酶分為三類,用于基因工程的為n酶B.限制性核酸內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生粘性末端或平端C.識(shí)別的
11、核甘酸序列個(gè)數(shù)可以是6個(gè)或8個(gè)E.識(shí)別的DNA為單鏈66關(guān)于基因工程的敘述,下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的?A .基因工程也稱基因克隆B .C.重組體DNA轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞E.需對(duì)重組DNA進(jìn)行純化.篩選67有關(guān)質(zhì)粒的敘述,下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的?A.小型環(huán)狀雙鏈DNA 分子C.能在宿主細(xì)胞中獨(dú)立自主地進(jìn)行復(fù)制E.只有一種限制性核酸內(nèi)切酶切口68有關(guān)質(zhì)粒的敘述,下列那項(xiàng)是錯(cuò)誤的?A .質(zhì)粒的某些遺傳信息可賦予宿主細(xì)胞C.質(zhì)粒的遺傳表型可作為轉(zhuǎn)化子的篩選依據(jù)I內(nèi)切酶位點(diǎn)E. PBR322含有3半乳糖昔酶的“片段基因69有關(guān)噬菌體的敘述錯(cuò)誤的是:A.常用作克隆載體的噬菌體有入一噬菌體和的載體有入gt系列和EMBL系
12、列D 識(shí)別的序列一般具有回文結(jié)構(gòu)DNA 可作為載體D 需獲得目的基因B 可小到23Kb ,大到數(shù)百個(gè)KbD 常含有耐藥基因B.質(zhì)粒較易轉(zhuǎn)化D PBR322 的分子中僅有一個(gè)E coRM13噬菌體 B.入噬菌體DNA改造成C.入gt系列適用于插入型載體,用于 cDNA克隆 D. EMBL系列適用于置換型載體, 用于基因組DNA 克隆E M13 噬菌體基因間隔區(qū)插入了E coli 的一段調(diào)節(jié)基因和LacZ 的 C 端氨基酸編碼基因70下列那項(xiàng)不是重組DNA 的連接方式A .粘性末端與粘性末端的連接C.粘性末端與平端的連接E.同聚物加尾連接71關(guān)于翻譯,下列那項(xiàng)不正確?A.重組體由目的基因與載體連接
13、組成C.重組體的表達(dá)在細(xì)胞水平E.重組體的表達(dá)體系有真核和原核兩種72關(guān)于基因重組的敘述,錯(cuò)誤的是:A.整段的DNA不能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行交換C.整段的DNA能在不同的物種間進(jìn)行交換復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯E.基因重組可引起自然突變現(xiàn)象73基因重組的方式不包括:A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.轉(zhuǎn)位D.轉(zhuǎn)換E.整合74關(guān)于噬菌體錯(cuò)誤的是;B 平端與平端的連接D 人工接頭連接B.重組體能轉(zhuǎn)化細(xì)胞D 重組體有獨(dú)立繁殖的能力B 整段的DNA 能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行交換D.交換的DNA能在新的位置上進(jìn)行A.入噬菌體DNA進(jìn)入宿主菌后可整合到宿主菌DNA中又可保持獨(dú)立狀態(tài)B. B.依賴本身的酶系進(jìn)行其 DNA的復(fù)制C. C.依賴宿主的酶系進(jìn)行
14、其 DNA的轉(zhuǎn)錄D. D.依賴宿主的酶系表達(dá)其蛋白質(zhì)外殼E. E.當(dāng)入噬菌體從宿主細(xì)胞釋放出來,再感染另外的宿主時(shí),可發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用75 .有關(guān)噬菌體的敘述那項(xiàng)不符合:A.感染大腸桿菌時(shí)僅把 DNA注入大腸桿菌內(nèi)B.有溶源和裂解兩種生活方式C.溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉(zhuǎn)變D.噬菌體是由外殼蛋白和 DNA組裝而成E.當(dāng)從一個(gè)宿主細(xì)胞釋放出來,再感染另外宿主時(shí),一定發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用76 . DNA克隆不包括下列那項(xiàng)步驟?A.選擇一個(gè)適合的載體B.限制性核酸內(nèi)切酶在特異位點(diǎn)裂解質(zhì)粒和目的基因C.用連接酶連接載體 DNA和目的DNA ,形成重組體D.用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選含重組體的細(xì)菌E.重組體用
15、融合法導(dǎo)入細(xì)胞77 .下列那項(xiàng)不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法?A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染B.電穿孔C.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染D.顯微注射E.氯化鈣轉(zhuǎn)染78 .下列那項(xiàng)不能作為基因工程重組體的篩選方法A .抗藥性標(biāo)志選擇B.宿主菌的營養(yǎng)缺陷標(biāo)志補(bǔ)救C.原位雜交D. Southern印跡PCR技術(shù)79 .下列那項(xiàng)不是重組體篩選的免疫化學(xué)方法的工作原理及特點(diǎn):A. 將瓊脂培養(yǎng)板上的轉(zhuǎn)化子菌落經(jīng)蒸汽裂解釋放抗原B. 將固定目的基因編碼蛋白質(zhì)的抗血清聚乙烯薄膜覆蓋在裂解菌落上C. 再使用32P標(biāo)記的DNA探針與薄膜反應(yīng)D. 經(jīng)放射自顯影檢出陽性反應(yīng)菌落E.免疫學(xué)方法特異性強(qiáng).靈敏度高,尤其適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標(biāo)
16、志的基因80 .重組DNA技術(shù)不能應(yīng)用于:A.疾病基因的發(fā)現(xiàn)B.生物制藥C. DNA序列分析D.基因診斷E.基因治療81 .基因重組是指 DNA分子的:A.共價(jià)連接B.氫鍵連接C.離子鍵連接D.交換E.退火82 .下列那種藥物不能用基因工程的方法生產(chǎn)?A.胰島素B.干擾素C.白細(xì)胞介素D.性激素E.促紅細(xì)胞生成素83 . DNA重組技術(shù)不能應(yīng)用于下列哪個(gè)方面?A.產(chǎn)前診斷B.攜帶者測(cè)試C.癥候前診斷D.遺傳病的易感性E.傳染病的傳染性84一種可靠的DNA 診斷學(xué)方法,下列那項(xiàng)是不必符合的?A.能正確擴(kuò)增靶基因C.本底或噪聲低,不干擾 DNA的鑒定E.方法簡便,易于推廣應(yīng)用85關(guān)于轉(zhuǎn)化錯(cuò)誤的是:
17、B 能準(zhǔn)確區(qū)分單個(gè)堿基的差別D 便于完全自動(dòng)化操作A.受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型C.自然界中較大的外源 DNA轉(zhuǎn)化幾率較低 較高E.越大的外源 DNA與染色體整合幾率越低 86關(guān)于同源重組不正確的是:A.同源重組不需要特異的DNA序列C RecB C D 具有內(nèi)切酶和解旋酶活性 的重要步驟B 外源DNA 一定整合進(jìn)受體細(xì)胞基因組D.自然界中較大的外源 DNA轉(zhuǎn)化幾率B 同源重組要求兩分子間序列必須相同D Holliday 中間體的形成,是同源重組E.需要DNA連接酶參與87下列那種酶是重組DNA 技術(shù)中最重要的?A.反轉(zhuǎn)錄酶B.堿性磷酸酶C.末端轉(zhuǎn)移酶D. DNA聚合酶IE DNA 連接酶88在
18、分子生物學(xué)中,基因克隆主要指:A DNA 的復(fù)制B DNA 的轉(zhuǎn)錄C DNA 的剪切D RNA 的轉(zhuǎn)錄E RNA 的剪接89在分子生物學(xué)中,重組A.酶工程C.細(xì)胞工程DNA 又稱為:B.蛋白質(zhì)工程D 基因工程E DNA 工程90基因工程中,不常用到的酶是;A.限制性核酸內(nèi)切酶B DNA 聚合酶C DNA 連接酶D 逆轉(zhuǎn)錄酶E DNA 解鏈酶91限制性核酸內(nèi)切酶酶切后的DNA 末端最常見的是:B 3 突出末端D 粘性末端A.平頭末端C5 突出末端E.缺口末端92能識(shí)別DNA 的特異序列,并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA 的一類酶稱為:B 限制性內(nèi)切核酸酶A DNA 內(nèi)切酶C.非限制性內(nèi)切核酸酶
19、E.非限制性外切核酸酶D 限制性外切核酸酶RNA 互補(bǔ)的DNARNA 互補(bǔ)的RNAB 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA 互補(bǔ)D 在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA 互補(bǔ)93 cDNA 是指:A 在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與的 DNAC.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與的 RNAE.在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA 互補(bǔ)的 DNA94基因工程中通常使用的質(zhì)粒存在于:B PERD BCRA.細(xì)菌染色體C.細(xì)菌染色體外E.以上均不是 95質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)是:A.環(huán)狀雙鏈DNA C.環(huán)狀單鏈RNA E.線狀單鏈DNA 96聚合酶鏈反應(yīng)常??s寫為:A PRCC PDRE PCRB 酵母染色體D 酵母染色體外B 環(huán)狀單鏈DNAD 線狀雙
20、鏈DNA97在已知DNA 序列的情況下,獲取目的基因的最方便的方法是:A.人工化學(xué)合成B.基因組文庫法C cDNA 文庫法D PCR 法E.從染色體DNA直接提取98. E. coRI切割 DNA 雙鏈產(chǎn)生:A.平端B. 5突出的粘性末端C. 3突出的粘性末端D.鈍性末端E.配伍末端99用于PCR 反應(yīng)的酶是:A. DNA連接酶B.堿性磷酸酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性內(nèi)切核酸酶E Taq DNA 聚合酶100. PstI內(nèi)切酶切割目的基因后產(chǎn)生:A.5G J A A T T C 3B.5G T TJ A A C 33C T T A A T G 5C. 5 C T G C A J G 3D. 5C
21、T G J C A G 33 C A A T T T G 53 GT A C G T C 53E.5G A A J T T C 3G A CT G T C 53C T T TA A G 5101.將PstI切割后的目的基因與同樣切割的載體DNA連接是:A.同聚物加尾連接B 人工接頭連接C.平端連接D 粘性末端連接E.非粘性末端連接102限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA 后產(chǎn)生:A 3磷酸末端和5羥基末端 B 5磷酸末端和3羥基末端C3磷酸末端和5磷酸末端 D 3羥基末端和5羥基末端E3 羥基末端5羥基末端和磷酸103基因工程中使目的基因與載體拼接的酶是:A DNA 聚合酶B RNA 聚合酶C DNA
22、 連接酶D RNA 連接酶E.限制性核酸內(nèi)切酶104以質(zhì)粒為載體,將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱為:B.轉(zhuǎn)染D 轉(zhuǎn)位B 抗藥性篩選D 原位雜交篩選B 酶聯(lián)免疫篩選D 原位雜交篩選A.轉(zhuǎn)化C.轉(zhuǎn)導(dǎo)E.感染 105最常用的篩選轉(zhuǎn)化細(xì)菌是否含有質(zhì)粒的方法是:A.營養(yǎng)互補(bǔ)篩選C.免疫化學(xué)篩選E Southern 印跡篩選 106. a互補(bǔ)篩選屬于:A.抗藥性標(biāo)志篩選C.標(biāo)志補(bǔ)救篩選E.免疫化學(xué)篩選107進(jìn)行同聚物加尾法連接目的基因和載體DNA 時(shí),需要那種酶?A DNA 聚合酶B RNA 聚合酶C.引物酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶E.末端轉(zhuǎn)移酶108確切的講,cDNA 文庫包含:A. 一個(gè)物種的全部基因信息B. 一個(gè)
23、物種的全部 RNA信息C. 一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部基因信息D. 一個(gè)生物體組織或細(xì)胞的全部 RNA信息E. 一個(gè)生物體組織或細(xì)胞所表達(dá)mRNA信息109下列描述最能確切表達(dá)質(zhì)粒DNA 作為克隆載體特性的是:A.小型環(huán)狀雙鏈 DNA分子B.攜帶有某些耐藥基因C.在細(xì)胞分裂時(shí)恒定地傳遞給子代細(xì)胞D.具有自我復(fù)制能力E.獲得目的基因110表達(dá)人類蛋白質(zhì)的最理想的細(xì)胞體系是:A. E. coli表達(dá)體系B.原核表達(dá)體系C.酵母表達(dá)體系D,昆蟲表達(dá)體系E.哺乳類細(xì)胞表達(dá)體系B 型題:(111113)A.噬菌體感染宿主菌后核酸進(jìn)入菌體的過程B.外來DNA引起生物類型改變的過程C.溶源菌中的噬菌體全部基
24、因都表達(dá)D.溶源菌中的噬菌體部分調(diào)控區(qū)的基因表達(dá)E.帶有宿主 DNA的噬菌體111 溶源狀態(tài)是:112進(jìn)入裂解周期是:113轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是指:(114116)A.接合作用B.轉(zhuǎn)化作用C.轉(zhuǎn)導(dǎo)作用D.轉(zhuǎn)座作用E.轉(zhuǎn)移作用114 F 因子陰性細(xì)胞與F 因子陽性細(xì)胞形成F 因子陽性細(xì)胞的是:115病毒從被感染的細(xì)胞釋放出來,再次感染另一細(xì)胞時(shí),發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之DNA 轉(zhuǎn)移的是:位點(diǎn)的分散的重復(fù)序列稱為:B 轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座D 同源重組116從一個(gè)染色體位點(diǎn)轉(zhuǎn)移至另一位點(diǎn)的分散的重復(fù)序列稱為:(117120)A.插入序列轉(zhuǎn)座C.位點(diǎn)特異的重組E.溶源117噬菌體DNA 和宿主染色體的特異靶位點(diǎn)整合稱
25、為:118噬菌體的生長方式是:119 Tn3 發(fā)生的 DNA 轉(zhuǎn)移的是:120復(fù)制后的一個(gè)復(fù)制本遷移至新位,另一個(gè)仍保留在原位的是:(121123)A. Rec AB. E. coR IC Ruv CD Lex AE F factor121有蛋白水解酶活性的是:122能使同源重組中單鏈DNA 對(duì)另一雙鏈DNA 的侵入的是:123切割Holliday 中間體的內(nèi)切酶是:(124126)A RepliconB CloningC Inverted repeatsD PalindromeE Transposons124目的基因與載體連接形成:125來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合稱為:126限制性內(nèi)
26、切核酸酶識(shí)別的序列具有:(127129)A.抗藥性篩選B.分子雜交篩選C. RNA反轉(zhuǎn)錄D.免疫學(xué)方法E.體外翻譯127用于鑒定質(zhì)粒是否轉(zhuǎn)化的一般方法是:128用于鑒定轉(zhuǎn)化子細(xì)胞是否含有目的基因的常用方法是:129利用目的基因表達(dá)產(chǎn)物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞的方法是:(130132)A.限制性核酸內(nèi)切酶B. DNA連接酶C.反轉(zhuǎn)錄酶D . Taq DNA聚合酶E.堿性磷酸酶130識(shí)別DNA 回文結(jié)構(gòu)并對(duì)其雙鏈進(jìn)行切割的是:131用于PCR 反應(yīng)的酶是:132將目的基因與載體進(jìn)行拼接的酶是:(133134)A.支原體B.衣原體C.噬菌體D.細(xì)菌E.酵母133常用于原核表達(dá)體系的
27、是:134常用于真核表達(dá)體系的是:(135137)A.轉(zhuǎn)染B.轉(zhuǎn)化C.感染D.轉(zhuǎn)導(dǎo)E.轉(zhuǎn)位135以質(zhì)粒為載體,細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是:136以噬菌體為載體,細(xì)菌為宿主的導(dǎo)入方式是:137以病毒為載體,哺乳動(dòng)物細(xì)胞為宿主的導(dǎo)入方式是:(138139)A .抗藥性篩選B. RNA反轉(zhuǎn)錄C.免疫化學(xué)方法D.體外翻譯E PCR138對(duì)重組體內(nèi)基因進(jìn)行直接篩選的方法是:139通過鑒定基因表達(dá)產(chǎn)物篩選重組體的方法是:(140142)A. RNA聚合酶B.末端轉(zhuǎn)移酶C.堿性磷酸酶D.反轉(zhuǎn)錄酶E.核甘酸酶140能切除DNA 末端磷酸基的是:141能在DNA3 羥基末端進(jìn)行同聚物加尾的是:142合成cDNA 用
28、的是:(143145)A.同聚物加尾連接B.人工接頭連接C.粘性末端連接D.缺口末端連接E.平端連接143.外源基因和載體 DNA經(jīng)過E. coRI切割后的連接屬于:144在外源基因和載體DNA 末端加同聚物后進(jìn)行連接屬于:145 在外源基因和載體DNA 末端添加短核苷酸序列,人為制造粘性末端后進(jìn)行連接屬于:X 型題:146可用于基因工程載體的DNA 分子有:A.染色體 DNAB,病毒 DNAC,細(xì)菌 DNAD,噬菌體 DNAE.質(zhì)粒DNA147重組DNA 技術(shù)的基本過程包括:A.目的基因的獲取C.克隆載體的構(gòu)建E.重組體分子導(dǎo)入受體菌148基因克隆又稱為:A,重組DNAC DNA 克隆E.蛋
29、白質(zhì)復(fù)制B PCR 反應(yīng)D 目的基因與載體的連接B,重組RNAD RNA 克隆149組成PCR 反應(yīng)體系的物質(zhì)包括:A RNA 引物 C RNA 聚合酶 E ddNTPB Taq DNA 聚合酶D DNA 模板150對(duì)于重組體的篩選,屬于直接選擇法的是:A.免疫化學(xué)法B.原位雜交法C. Southern印跡D.補(bǔ)救標(biāo)志篩選E.抗藥性標(biāo)志篩選151對(duì)于重組體的篩選,屬于非直接選擇法的是:A.免疫化學(xué)法B.原位雜交法C. Southern印跡D.補(bǔ)救標(biāo)志篩選E.酶聯(lián)免疫篩選152限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA 時(shí)可產(chǎn)生:A 5粘性末端 B 3粘性末端C.平末端D,單鏈缺口E.粘性末端153基因工程中目
30、的基因的來源有:A.化學(xué)合成B. PCR合成C. CDNA文庫D.基因組文庫E.組織細(xì)胞中染色體 DNA直接提取154基因工程中外源性基因又稱為:A.目的基因B.目的DNAC.目的 RNAD. target DNAE.外源RNA155重組DNA 技術(shù)中常用的工具酶有:A.限制性核酸內(nèi)切酶B. DNA聚合酶IC. DNA連接酶D.反轉(zhuǎn)錄酶E.末端轉(zhuǎn)移酶156使細(xì)胞獲取新的遺傳表型的方式有:A.接合作用B.轉(zhuǎn)化作用C.轉(zhuǎn)導(dǎo)作用D.轉(zhuǎn)座E,以上均可以157作為基因工程的載體必須具備的條件是:A.能獨(dú)立自主復(fù)制B.易轉(zhuǎn)化C.易檢測(cè)(含有抗藥性基因等)D.具有限制性內(nèi)切核酸酶的切口E.易提取獲得158限
31、制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別的核苷酸序列可以是:A 4個(gè)B 5個(gè)C 6 個(gè)D 7 個(gè)E 8 個(gè)159將表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法有:A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染B. DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染C.電穿孔D.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染E.顯微注射160為保證轉(zhuǎn)錄和翻譯的順利進(jìn)行,表達(dá)載體必須具備的DNA 序列應(yīng)包括:A.較強(qiáng)的啟動(dòng)子B.較強(qiáng)的衰減子C.較強(qiáng)的沉默子D.合適的SD序列E.核糖體結(jié)合位點(diǎn)161融合蛋白的結(jié)構(gòu)中包含有:A N 端為原核蛋白質(zhì)B N 端為真核蛋白質(zhì)C C 端為原核蛋白質(zhì)D C 端為真核蛋白質(zhì)E N C 兩端為原核蛋白質(zhì),中間為真核蛋白質(zhì)162可以連接的目的基因與載體的末端有:A.同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的粘性末
32、端B.不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的配伍末端C.不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的不同類型的粘性末端D.同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端E.不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端四、問答題:163什么叫基因克隆?簡述基因克隆的步驟。164限制性內(nèi)切核酸酶有哪些特點(diǎn)?165簡述重組DNA 技術(shù)中目的基因的獲取來源和途徑。166.簡述a互補(bǔ)篩選重組體質(zhì)粒細(xì)菌的原理。167基因工程中重組體篩選的方法有那些?168基因工程E coli 表達(dá)體系的表達(dá)載體必須符合那些標(biāo)準(zhǔn)?169常用的真核表達(dá)體系有哪些?常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法有哪些?170已知有一mRNA 分子,你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)?簡述其過程。171一種可
33、靠的DNA 診斷學(xué)方法必須符合哪些標(biāo)準(zhǔn)?172作為基因工程的載體必須具備哪些條件?173什么叫基因重組?簡述沙門氏菌是怎樣逃避宿主免疫監(jiān)視的? 參考答案 :一、名詞解釋:1. 基因工程(gentic engineering )是指將DNA 重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克?。╣ene cloning ) 。克隆某一基因或DNA 片段過程中,將外源DNA 插入載體分子所形成的復(fù)制子是雜合分子-嵌合 DNA( DNA chimerase) ,所以又稱為重組 DNA ( recombinant DNA ) 。2. 當(dāng)細(xì)胞(細(xì)菌)與細(xì)胞(細(xì)菌)相互接觸時(shí),質(zhì)粒DNA 就可以從
34、一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移到另一個(gè)細(xì)胞(細(xì)菌),這種類型的DNA 轉(zhuǎn)移稱為接合作用。3. 由外源性DNA 導(dǎo)入宿主細(xì)胞,并引起生物類型改變的過程或使宿主細(xì)胞獲得新的遺傳表型 稱為轉(zhuǎn)化作用。4. 當(dāng)病毒從被感染的(供體)細(xì)胞釋放出來,再次感染另一(受體)細(xì)胞時(shí),發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA 轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用?;驇в兴拗鱀NA 的噬菌體或病毒,再感染另外的宿主的過程中發(fā)生的DNA 轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。5. 轉(zhuǎn)座即是指一個(gè)或一組基因從一個(gè)位置轉(zhuǎn)倒基因組的另一個(gè)位置。可移動(dòng)的DNA 序列包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。故由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移或重排稱轉(zhuǎn)座。6. 轉(zhuǎn)座子是可以從一個(gè)染
35、色體位點(diǎn)轉(zhuǎn)移至另一個(gè)位點(diǎn)的分散的重復(fù)序列。轉(zhuǎn)座子也包括含有兩個(gè)反向重復(fù)序列的側(cè)翼,內(nèi)有轉(zhuǎn)座酶基因,并含有抗生素耐藥基因等其他基因7.8.9.10.11. 。7 發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組(general recombination ) 。同源重組不需要特異DNA 列,而是依賴兩分子間序列的相同或類似性。8 發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組(general recombination ) 。9 是指含有單一DNA 重組體的無性系?;蛑笇NA 重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中,建立無性系的過程。因此,又稱為基因克隆(gene cloning) 。10 外源 DNA 插入
36、載體DNA 分子所形成的具有自我復(fù)制能力的DNA 分子稱為復(fù)制子( replicon ) 。11. . 限制性內(nèi)切核酸酶(Restriction endonuclease)是指能識(shí)別 DNA的特異序列,并在識(shí) 別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA 的一類內(nèi)切酶。12. DNA 的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對(duì)稱結(jié)構(gòu)即回文結(jié)構(gòu)Palindrome( 或正讀反讀序列相同的 DNA 序列) 。13. 不同限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)不同,但切割后產(chǎn)生相同類型的粘性末端,稱為配伍末端。14. DNA重組技術(shù)中是我們所需要的DNA序列或基因,就稱為目的基因(target gene威目的 DNA (target DNA ) 。1
37、5. 以 mRNA 為 模 板 , 利 用 反 轉(zhuǎn) 錄 酶 合 成 與 mRNA 互 補(bǔ) 的 DNA 稱 為 cDNA ( complementary DNA ) 。16. 克隆載體( cloning vector ) 是攜帶目的基因,實(shí)現(xiàn)目的基因的無性繁殖或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA 分子。17. 為使插入的目的基因可轉(zhuǎn)錄進(jìn)而翻譯成多肽鏈,而特意設(shè)計(jì)的克隆載體又稱為表達(dá)載體(expression vector) 。即具有轉(zhuǎn)錄和翻譯所必須的DNA 序列的載體。18. 存在于細(xì)菌染色體以外的環(huán)狀DNA 分子。19. M13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E. Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ ( 3
38、-半乳糖甘酶基因)的N-端146個(gè)aa殘基編碼基因,其產(chǎn)物為3 -半乳糖昔酶的a -片段。而突變型Lac E. coli 可表達(dá)3 -半乳糖昔酶的3 一片段(酶的 C-端),單獨(dú)的“-片段及3 -片段均無3 -半乳糖昔 酶的活性,當(dāng)含有 LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac E. coli細(xì)菌時(shí),a -片段及-片段共同表達(dá),宿主 Lac E. coli細(xì)菌才有3 -半乳糖甘酶活性,使特異的作用物變?yōu)樘m色化合 物,(生長的細(xì)菌為蘭色)即”-互補(bǔ)。20. 把生物體全部的DNA 提純后,用限制性內(nèi)切核酸酶,隨機(jī)切割成許多片段,將所有片段均重組入同一類載體上,得到許多重組DNA 分子,繼而全部轉(zhuǎn)入受體菌擴(kuò)
39、增,使每個(gè)細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA 分子的多個(gè)拷貝,這樣生長的全部細(xì)菌所攜帶的所有基因組DNA 片段,即為整個(gè)基因組。21. 如克隆基因能夠在宿主菌表達(dá),且表達(dá)產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補(bǔ),那么就可以利 用營養(yǎng)突變菌株進(jìn)行篩選,即標(biāo)志補(bǔ)救。22. 將表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程或方法。23. 一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息,或整套基因的全部 DNA 片段。24. 具備接受外源DNA 的能力的經(jīng)過特殊方法處理的受體菌。25. PCR (polymerase chain reaction ) 是一種 DNA 迅速大量擴(kuò)增的方法,短時(shí)間內(nèi)獲得大量DNA。有利目的基因的獲得。26. 以 mRNA 為
40、模板, 利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA 互補(bǔ)的 DNA 稱為 cDNA , 單鏈的 cDNA再復(fù)制成雙鏈cDNA 片段,與適當(dāng)?shù)妮d體連接后,轉(zhuǎn)入受體菌,所建立的文庫稱為cDNA文庫。27. 插入序列從原位遷至新位的轉(zhuǎn)座方式。28. 插入序列復(fù)制后,其中的一個(gè)復(fù)制本遷至新位,另一個(gè)保留在原位的轉(zhuǎn)座方式。29. 噬菌體DNA 注入菌體內(nèi)后,在宿主內(nèi)迅速增殖,產(chǎn)生病毒顆粒,并溶解細(xì)菌。30. 噬菌體DNA 注入菌體內(nèi)與細(xì)菌染色體重組成為細(xì)菌染色體的一部分。二、填空題:31. 接合作用;轉(zhuǎn)化子用;轉(zhuǎn)導(dǎo)作用;轉(zhuǎn)座。32. 基因重組;位點(diǎn)特異的重組;同源重組。33. 插入序列;轉(zhuǎn)座子。34. 插入序列;轉(zhuǎn)座子
41、。35. 長末端重復(fù)序列;反向末端重復(fù)序列。36. 能獨(dú)立復(fù)制;便于檢測(cè);可導(dǎo)入宿主細(xì)胞。37. 4 個(gè); 6 個(gè); 8 個(gè);粘;平。38. 質(zhì)粒 DNA ;噬菌體DNA ;病毒 DNA。39. 目的基因的獲取;基因載體的選擇與構(gòu)建;目的基因與載體的拼接;重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞;篩選與鑒定出陽性克隆。40. 化學(xué)合成法;基因組 DNA ; cDNA ;聚合酶鏈反應(yīng)。41. 抗藥性標(biāo)志選擇;標(biāo)志補(bǔ)救;分子雜交。42. 含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志;具有強(qiáng)的啟動(dòng)子;含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列;含有合理設(shè)計(jì)的多接頭克隆位點(diǎn)。43. 酵母;昆蟲;哺乳動(dòng)物細(xì)胞。44. 轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)染;感染。45. LacZ; 146
42、; 3半乳糖甘酶;“互補(bǔ)。46.47.48.49.白;藍(lán)。反向重復(fù);轉(zhuǎn)座酶。保守性轉(zhuǎn)座;復(fù)制性轉(zhuǎn)座。質(zhì)粒 DNA ;接合作用。50.限制性核酸內(nèi)切酶;DNA連接酶;DNA聚合酶I ;反轉(zhuǎn)錄酶。三、選擇題:型題62688551 B 52 D69 E8086 B9763708753C 71 5481E 88 A9864728955A 56 B 5773D 9065D 7482E 91 99102 B103104 A105106107B 型題:111112115 C 116117 C118E 11912025B 126 D127 A128B 12913035B 136 A 137 C 138 A13
43、9 C140 C型題:146 B D E 147 AC DA 58 D 59759210811312113166E 7683B 93100109122132141 B 142 DE 148 A C 149 AC 60 A 61779411067E 7884C 95101114123 C133 D143 C 1447996124134145D151 AE 152 AB C E153 A B C D EBC D E156 A B160A C D161 A DB D E 150154 A B DB C155 AC 157 A B C 158 A C E 159 A B C D E162 A B C
44、D四、問答題:163基因克隆(gene cloning )是指含有單一DNA 重組體的無性系?;蛑笇NA 重組體引進(jìn)受體細(xì)胞中,建立無性系的過程。一個(gè)完整的基因克隆過程包括:A.目的基因和載體的選擇-分。B.限制性內(nèi)切酶處理的基因和載體 -切。C.目的基因與載體的 連接-接。D.重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞-轉(zhuǎn)。E.篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞 -篩。164.限制性內(nèi)切核酸酶分為三類,重組 DNA技術(shù)的限制性內(nèi)切核酸酶為H類。其特點(diǎn)為: 識(shí)別 DNA 位點(diǎn)的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對(duì)稱即回文結(jié)構(gòu)( Palindrome) 。 一些酶切割后產(chǎn)生粘性末端(Sticky end or Cohesive end ) 。另一些酶切
45、割后產(chǎn)生平端或鈍性末端(blunt end)。.不同的限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別DNA中的核甘酸長短不一,為4. 6或8 個(gè)。165的基因的獲取:主要有以下幾種途徑:.化學(xué)合成法:已知某種基因的核甘酸序列或根據(jù)某種基因產(chǎn)物的aa 序列推導(dǎo)出該多肽鏈編碼的核苷酸序列,再利用DNA 合成儀合成。.基因組 DNA : 一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息,或整套基因的全部 DNA 片段。 從基因組DNA 文庫中獲得。 cDNA 文庫。 聚合酶鏈反應(yīng)PCR (polymerasechain reaction ) 。166 . 13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E. Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ ( 3 -半乳糖甘酶基因)的 N-端146個(gè)aa殘基編碼基因,其產(chǎn)物為3 -半乳糖昔酶的“-片段。而突變型Lac E. coli可 表達(dá)3 -半乳糖昔酶的3 一片段(酶的 C-端),單獨(dú)的“-片段及3 -片段均無3 -半乳糖昔酶 的活性,當(dāng)含有 LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac E. coli細(xì)菌時(shí),a -片段及-片段共同 表達(dá),宿主Lac E.coli細(xì)菌才有3 -半乳糖甘酶活性,使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物,(生長的細(xì)菌為蘭色
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