《人體生理實(shí)驗(yàn)》牛蛙

1、人體生理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制作班級(jí)11應(yīng)用心理姓名張紅學(xué)號(hào)2011326670130實(shí)驗(yàn)日期 2012. 10. 1 2指導(dǎo)教師胡信奎一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? :學(xué)習(xí)蛙類(lèi)動(dòng)物雙毀髓的實(shí)驗(yàn)方法；2 :掌握生理學(xué)實(shí)驗(yàn)手術(shù)常用器械的使用和基本操作方法；3 :學(xué)習(xí)制備具有正常興奮收縮功能的蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的操作； 二、實(shí)驗(yàn)原理：1 :生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)一腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、 興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征；2 :蛙的離體組織、器官保持活性所需的條件比較簡(jiǎn)單，易于控制盒掌握；3 :任氏液是比較接近兩棲動(dòng)物內(nèi)環(huán)境的液體， 可以用來(lái)延長(zhǎng)蛙心臟在體外 跳動(dòng)時(shí)間，保

2、持其它離體組織器官生理活性等；三、實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：對(duì)象：牛蛙設(shè)備：常用手術(shù)器械(手術(shù)剪、手術(shù)鑲、眼科鑲、毀髓針、玻璃分針)、玻璃板、鋅銅弓、培養(yǎng)皿、滴管、任氏液、粗剪刀、蛙板、蛙 釘、粗棉線藥品與試劑：任氏液四、實(shí)驗(yàn)方法：1 .制備離體蛙心(1) 取一只蛙，搗毀腦和脊髓，將蛙仰臥固定于蛙板上。從劍突下將腹部皮膚向上剪開(kāi)，然后剪開(kāi)胸骨，打開(kāi)心包，暴露心臟，分離左、右主 動(dòng)脈。(2) 在左主動(dòng)脈下方穿一根線，此頭端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用,在主動(dòng)脈干 下方穿一根線，在動(dòng)脈圓錐上系以松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心管。(3) 左手持左主動(dòng)脈上方的結(jié)扎線， 用眼科剪在松結(jié)上方左主動(dòng)脈根部剪一小口， 右手將盛有少許任氏液

3、的大小適宜的蛙心管由此切口處插入動(dòng)脈圓錐。 插管頭到達(dá)動(dòng)脈圓錐時(shí)，用鑷子夾住動(dòng)脈圓錐少許，將插管拔出后退，并轉(zhuǎn)向心室中 方向， 鑷子向插管的平行方向提拉，心室收縮期時(shí)將插管插入心室。蛙心插管進(jìn)入心室后管內(nèi)任氏液的液面會(huì)隨心室的收縮而上下波動(dòng)。 蛙心插管進(jìn)入心室后， 用預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊， 扎線系在蛙心插管的側(cè)鉤上打結(jié)并固定。 剪斷主動(dòng)脈左右分支。注意：勿扎住靜竇脈，插管不可插入過(guò)深，以免心室壁堵住下口。(畫(huà)心室圖，見(jiàn) 26 頁(yè))(4) 輕輕提起蛙心插管以略高心臟， 用一線在動(dòng)脈干與腔脈交界處作一結(jié)扎，結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓，以防傷及動(dòng)脈干，在結(jié)扎處外側(cè)剪斷所有組織，將蛙心游離出來(lái)。(5) 用新制任

4、氏液反復(fù)換洗蛙心插管內(nèi)有血的任氏液， 直至蛙心插管內(nèi)無(wú)血液殘留為止。此時(shí)離體蛙心插管制備成功，可供實(shí)驗(yàn)。(6) 將蛙心插管固定在鐵支架上， 用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖， 并將 蛙心夾的線頭通過(guò)滑輪連至張力換能器的應(yīng)變梁上， 調(diào)節(jié)此線張力至1g,插管內(nèi)加灌流液約1 1.5m,并在插管上標(biāo)記灌流液的高度。在 此實(shí)驗(yàn)以后過(guò)程中，灌流液穩(wěn)定于該高度。2 ：制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本：( 1) 剝制后肢標(biāo)本：法一：將雙毀髓的牛蛙背面向上放入蠟盤(pán)中。左手持手術(shù)鑷輕輕提起兩前肢之間背部的皮膚，右手持手術(shù)剪橫向剪開(kāi)皮膚，暴露耳后腺后緣水平的脊柱。用手術(shù)剪橫向剪斷脊柱。左手持手術(shù)鑷提起斷開(kāi)的脊柱后端，右手用手術(shù)剪

5、沿脊柱兩側(cè)剪開(kāi)體壁，再剪斷下腹壁肌肉，自基部剪斷內(nèi)臟。然后用蘸有任氏液的左手捏住斷開(kāi)的脊柱后端，右手向后方撕剝皮膚，同時(shí)棄其頭部及內(nèi)臟。將剝干凈的后肢放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。清洗手及手術(shù)器械上的污物。法二：將雙毀髓的蛙腹面向上放入蠟盤(pán)，左手持手術(shù)鑷輕輕提起腹壁皮膚 ，右手持手術(shù)剪將皮膚剪開(kāi)，再見(jiàn)開(kāi)腹壁肌肉。然后用手術(shù)鑷輕輕提起內(nèi)臟，自基部剪開(kāi)（勿傷脊神經(jīng)） 。左手輕輕托起蛙后肢，使頭部及內(nèi)臟向下，看清支配后肢的脊神經(jīng)發(fā)出部位，于其前方剪斷脊柱。注意：操作過(guò)程中不可將剝皮的標(biāo)本同皮膚、內(nèi)臟等棄物放在一起。2）分離兩后肢：將去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，脊柱端在左側(cè)。用左手拇指及食指壓住標(biāo)本的

6、股部?jī)蓚?cè)肌肉，右手持手術(shù)刀于恥骨聯(lián)合處向下按壓刀刃，切開(kāi)恥骨聯(lián)合。然后用手術(shù)剪剪開(kāi)兩后肢相連的肌肉組織，并縱向剪開(kāi)脊柱（尾桿骨留在一側(cè)） ，使兩后肢完全分離。也可不用手術(shù)刀切開(kāi)恥骨聯(lián)合，而用左手托起標(biāo)本，右手持手術(shù)剪直接剪開(kāi)恥骨聯(lián)合。將分開(kāi)的后肢，一只繼續(xù)剝制標(biāo)本，另一只放入任氏液中備用。注意：操作要十分小心，切勿切斷坐骨神經(jīng)。3）分離坐骨神經(jīng)：將一側(cè)后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外側(cè)翻轉(zhuǎn)，使其足底朝上，用固定針將標(biāo)本固定在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃解剖針沿脊神經(jīng)向后分離坐骨神經(jīng)。股部沿腓腸肌正前方的股二頭肌和半膜肌之間的裂縫， 找出坐骨神經(jīng)。 坐骨神經(jīng)基部 （即與脊神經(jīng)相接的部位）有一梨狀肌蓋

7、住神經(jīng)，用玻璃解剖針輕輕挑起此肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神經(jīng)。剪斷梨狀肌，完全暴露坐骨神經(jīng)與其相連的脊神經(jīng)。再用玻璃解剖針輕輕挑起神經(jīng)，自前向后剪去支配腓腸肌之外的分支，將坐骨神經(jīng)分離至腘窩處。用手術(shù)剪剪去脊柱骨及肌肉，只保留坐骨神經(jīng)發(fā)出部位的一小塊脊柱骨。取下脊柱端的固定針，用手術(shù)鑷輕輕提起脊柱骨的骨片，將神經(jīng)搭在腓腸肌上。4）分離股骨頭：左手捏住股骨，沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周?chē)募∪?，用金冠剪自膝關(guān)節(jié) 向前刮干凈股骨上的肌肉。保留股骨的后 2/3, 剪斷股骨。5）游離腓腸?。河檬中g(shù)鑷在腓腸肌跟腱下穿線，并結(jié)扎。提起結(jié)扎線，剪斷肌腱與脛腓骨的聯(lián)系，游離腓腸肌。剪去膝關(guān)節(jié)下部的后肢，保留腓腸肌與股骨的聯(lián)系，制備完整的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本。標(biāo)本應(yīng) 包括：坐骨神經(jīng)、腓腸肌、股骨頭和一段脊柱骨四部分。（需要畫(huà)上圖，見(jiàn)6 頁(yè)）6）檢驗(yàn)標(biāo)本：左手持手術(shù)鑷輕輕提起標(biāo)本的脊柱骨片，使神經(jīng)離開(kāi)玻璃板，右手持經(jīng)任氏液蘸濕的鋅銅弓，使其兩端接觸神經(jīng)，使腓腸肌發(fā)生收縮，表示標(biāo)本機(jī)正常。右手提起腓腸肌上的結(jié)扎先，輕輕將標(biāo)本放入任氏液中（切勿使神經(jīng)受