基因工程的應(yīng)用

第48次基因工程的應(yīng)用，蛋白質(zhì)工程的興起，Bt毒蛋白質(zhì)基因，蛋白質(zhì)組學抑制基因，淀粉樣蛋白抑制基因，病毒外殼蛋白基因，病毒復(fù)制酶基因，滲透壓調(diào)節(jié)基因，冷凍蛋白質(zhì)基因，蛋白質(zhì)，外來生長激素基因的表達產(chǎn)物、體外基因治療、某細胞、轉(zhuǎn)移基因、腺苷脫氨酶基因不足而患先天性體液免疫缺陷癥的美國少女。 首先把患者的白血球取出體外培養(yǎng)，用某種病毒把正常的腺苷淀粉酶基因轉(zhuǎn)移到人工培養(yǎng)的白血球中，這些轉(zhuǎn)基因白血球回到患者體內(nèi)，經(jīng)過多次治療，患者的免疫功能正常了。 (1)基因工程技術(shù)應(yīng)用于治療該病，在本例中，載體是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _作為目標基因的受體細胞。 將一種病毒、腺苷脫氨酶基因、白血球、(2)轉(zhuǎn)基因白血球多次輸血到患者體內(nèi)后，免疫能力變得正常的是人的腺苷脫氨酶基因與胰島素基因相比，主要的差異是與大腸桿菌基因相比，其主要特征是： (4)該病的治療方法是在基因工程的運用中，該治療方法的原理是： 腺苷脫氨酶(或抗體)、轉(zhuǎn)錄、翻譯、脫氧核苷酸序列順序不同(或遺傳信息不同或堿基數(shù)量和序列順序不同)，編碼區(qū)有間隔，不連續(xù)(或編碼區(qū)有外顯子和內(nèi)含子)，基因治療， 將健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募毎麑崿F(xiàn)治療目的【分析】主題主要考察了遺傳和基因工程知識，了解真核細胞和原核細胞的基因結(jié)構(gòu)特征，掌握基因工程的基本內(nèi)容，特別是基因工程操作的基本程序。 本題是基因工程技術(shù)在醫(yī)學臨床上的應(yīng)用基因治療。 其基本過程是用基因工程的方法，將健康的外來基因?qū)胗谢蛉毕莸幕颊呒毎?，使其正常表達，從而達到治療相關(guān)疾病的目的。 試驗點二蛋白質(zhì)工程【回扣教材】1 .概念：以與蛋白質(zhì)分子的關(guān)系為基礎(chǔ)，改造或改造蛋白質(zhì)分子， _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，氨基酸序列，脫氧核苷酸序列，【典型的精析】【例2】蛋白質(zhì)工程學中需要直接操作的對象是() a .氨基酸結(jié)構(gòu)b .蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)c .肽鏈結(jié)構(gòu)d .基因結(jié)構(gòu)【調(diào)查類型】。 蛋白質(zhì)工程學是根據(jù)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)規(guī)律和生物功能的關(guān)系，通過基因修飾和基因合成，改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)，制造新的蛋白質(zhì)，滿足人的生產(chǎn)和生活需求。 因此，最終，必須改造基因。 【方法的總結(jié)】正確把握蛋白質(zhì)工程學的概念是解決本問題的關(guān)鍵。 d，試驗點三DNA的粗提取和鑒定【回扣教材】1.DNA的粗提取原理DNA的粗提取，利用DNA和RNA，蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等物理化學性質(zhì)的差異，提取_，去除其他成分。DNA、(1)基于DNA的溶解性粗提取DNA的原理： DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在濃度不同的NaCl溶液中，其濃度不同，但通常用2mol/LNaCl溶液溶解細胞中的_ _ _ _ _ _，雜質(zhì)容易沉淀； 0.14摩爾/lnacl溶液的DNA溶解度會變得 酒精是常用的有機溶劑，DNA雖然不溶于酒精(特別是95%的冷卻醇)，但是利用細胞中有幾個_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步分離出來。 利用溶解度、DNA、最小、DNA析出、蛋白質(zhì)、(2)酶、高溫、DNA對洗滌劑的耐受性原理粗提取DNA。 由于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 用6080的高溫處理材料可以達到粗提取DNA的目的，雖然細胞膜能崩潰，但對DNA沒有影響，所以使用該試劑可以使細胞破裂，更好地提取DNA。 如上所述，不同濃度的物質(zhì)可以用于提取DNA .在6080下的物質(zhì)。 蛋白質(zhì)酶、蛋白質(zhì)改性、洗滌劑、NaCl溶液、醇、蛋白質(zhì)酶、高溫、洗滌劑、2.DNA判定的原理是：利用不同濃度的NaCl溶液溶解或析出DNA，從細胞中利用可以純化的酒精進一步分離DNA和蛋白質(zhì)，鑒定達到純化目的最后用二苯胺試劑提取的物質(zhì)是否是DNA。 沸水浴、藍、二苯胺、3 .實驗設(shè)計(1)實驗材料的選擇：不同生物組織的DNA含量不同。 選擇材料時，要遵循材料容易獲取和提取的原則。 (2)破碎細胞，得到含有DNA的濾液：將雞血作為材料，在雞血球液中加入一定量的洋蔥，用玻璃棒攪拌，過濾后能夠收集濾液的洋蔥作為材料時， 請將洋蔥切成細絲，加入一定量的洗滌劑和食鹽(洗滌劑要充分攪拌和研磨，使食鹽溶解，然后過濾收集研磨液)。 DNA含量高，蒸餾水使血球大量吸水而破裂，破壞細胞膜、DNA，破壞細胞壁，使DNA大量溶解于NaCl溶液中，(3)除去濾液中的雜質(zhì)，最初得到的DNA濾液中含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)，需要進一步純化DNA 具體方法為提案1 :濾液NaCl(2mol/L)過濾除去雜質(zhì)加入蒸餾水使NaCl溶液濃度為0.14mol/l使DNA析出加入過濾物得到的2mol/LNaCl溶液DNA-NaCl溶解液提案2 :濾液若肉粉(餡餅1015分鐘靜置過濾DNA濾液而得到的方案3 :濾液6075處理過濾DNA濾液而得到的方案1的原理是方案2的原理是方案3的原理在DNA濃度不同的NaCl溶液中的溶解度不同，蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA，蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同，(4)鑒定為DNA的析出。 濾液與均勻混合，靜置23分鐘，析出的白色絲狀物為。 DNA的鑒定：試管為2根，編號甲、乙各2mol/L的_5mL在甲中加入少量的白色絲狀物使之溶解各4ml加入_中，均勻混合_ _ _ _ _ 5min觀察顏色的變化。、等體積的冷卻酒精、DNA、NaCl溶液、二苯胺、沸水浴、【典型的精析】【例3】(2013江蘇)有同學用洋蔥進行了DNA粗提取和鑒定實驗，操作錯誤是() a .放入洗滌劑后，用力迅速， 充分地將用蛋白酶過濾過的研磨液中的DNAC .醇加入后，用玻璃棒輕輕攪拌，混合d .二苯胺試劑后，用沸水浴加熱【解析】加入洗滌劑和食鹽后，如果不減輕研磨動作，使其變軟，就容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)工序的操作蛋白質(zhì)用蛋白酶水解可以純化研磨液中的DNA。 加入酒精后，用玻璃棒輕輕攪拌防止DNA切斷。 加入二苯胺試劑，用沸水浴加熱，鑒定DNA的存在。a、核、紅、DNA、(2)實驗前老師制作的血球液不是雞的全血，而是作為實驗材料提供給學生們。 主要原因是：主要原因是： (3)在牧區(qū)采集牛、羊、馬的血很方便，使用此材料按照實驗要求完成實驗步驟后，結(jié)果顯示，使用動物的肝臟制作實驗材料，實驗就能順利進行。 (1)雞血紅蛋白細胞中含有核，雞是鳥類，新陳代謝旺盛，紅血球需要供給O2，因此紅血球的數(shù)量多，豐富的DNA，其中DNA的相對含量高，難以提取DNA，其中沒有核，成熟的紅血球，肝臟細胞中有核(2)雞的全血中含有血漿和血球，血漿中沒有DNA，是從血液中除去血漿后濃縮的血球液，提高了DNA的相對含量。 (3)牛、羊、馬是與人相同的哺乳動物，但哺乳動物成熟的紅血球中沒有核，只有血液中的其他血球和淋巴細胞中的少量DNA，實驗中難以提取白色絲狀物(DNA )，肝臟細胞中含有核，如果操作正確，就可以提取DNA。 【方法總結(jié)】本問題有一定的困難，需要基本的生物學常識，可以結(jié)合本實驗的原理正確地分析。 上課48一、練習選修課1 .土壤農(nóng)桿菌將自己的Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA中，使植物形成腫瘤。 T-DNA中含有植物生長素合成酶基因(s )和細胞因子合成酶基因(r )，它們的表達影響相應(yīng)植物激素的含量，控制腫瘤組織的生長和分化。 圖分析顯示，下文描述的符合() b，2 .基因工程概念的是() A.B淋巴細胞和腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有b淋巴細胞中的抗體基因b。 人的干擾素基因重組質(zhì)粒后，導入大腸桿菌，得到產(chǎn)生人干擾素的菌株c。 用紫外線照射藍霉素，改變其DNA，使青霉素高產(chǎn)菌株d .自然界中天然存在的噬菌體感染細菌后，通過篩選該DNA與細菌DNA的集成，基因工程是根據(jù)人們的希望，進行嚴格的設(shè)計， 通過體外DNA重組和基因重組等技術(shù)，給生物賦予新的遺傳特性，并創(chuàng)造出符合人們需求的新的生物類型和生物產(chǎn)品。 b細胞與腫瘤細胞融合，用屬于細胞工程的紫外線照射藍霉素，改變其DNA，篩選青霉素高產(chǎn)株的是人工誘變的自然界中天然存在的噬菌體感染細菌后，該DNA被合并到細菌DNA中，沒有人為加工，屬于基因工程3、在使用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑轉(zhuǎn)基因煙草的過程中，以下操作錯誤的是() a .用限制核酸內(nèi)切酶篩選煙草花葉病毒的核酸b .切斷的抗除草劑基因和載體c .重組DNA分子用煙草原生質(zhì)體d .含有除草劑的培養(yǎng)基篩選基因重組煙草細胞【解析】煙草花葉病毒是使煙草生病的病原微生物，r a，4 .在以下技術(shù)中，根據(jù)DNA分子雜交的原理，用DNA分子探針診斷疾病B淋巴細胞和骨髓瘤細胞雜交快速靈敏地檢測飲用水中病毒含量目的基因和載體結(jié)合， 形成重組DNA分子ab .c .d .基因診斷和基因檢測原理相同，都利用特定的DNA片段與被檢測樣品進行分子雜交，達到了一定的目的，正確的b淋巴細胞和骨髓瘤細胞雜交是動物細胞的融合，目的基因和載體a，5 .以下基因工程和蛋白質(zhì)工程的描述準確地說() a .基因工程在分子水平上操作基因，蛋白質(zhì)工程不操作基因b .基因工程合成天然存在的蛋白質(zhì)， 蛋白質(zhì)工程是天然存在的蛋白質(zhì)c .基因工程在分子水平上操作，蛋白質(zhì)工程在細胞水平(或性狀水平)上d .基因工程與蛋白質(zhì)工程完全不同“解析”蛋白質(zhì)工程通過基因改變或基因合成改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，制造新的蛋白質(zhì)a、c、d錯了。 b，6 .以下基因工程描述準確地說() a .基因工程是以細菌抗性基因為目的的基因b .重組DNA的形成和擴增是在細胞內(nèi)完成的c .基因工程育種是對生物性狀進行定向改造的， 迅速形成新的物種d .限制酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組DNA所需的工具酶，d【分析】基因工程的目的基因來自細菌、動物、植物等，如抗性基因、抗病蟲害基因、抗鹽害基因等抗性基因，動物生長激素基因、植物花青可以是a錯誤的重組DNA的形成和擴增在細胞外的一定條件下完成，b錯誤的基因工程育種能夠定向改造生物性狀，但是是否形成新的種子，需要看到該生物和原種是否引起生殖隔離，c錯誤的限制酶和DNA連接酶是重構(gòu)DNA所必需的7 .增加玉米細胞中賴氨酸含量的最有效方法是() a .富含賴氨酸的蛋白質(zhì)編碼基因是玉米細胞b .玉米細胞中的天冬氨酸激酶基因和二氫吡啶二羧酸合成酶基因c .天冬氨酸激酶基因和二氫吡啶二羧酸合成酶基因改變的個別堿d .根瘤菌