《基礎(chǔ)分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)題及參考答案

基礎(chǔ)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題及參考答案一、 填空題1. 核酸分子中糖環(huán)與堿基之間為 型的 糖苷 鍵，核苷與核苷之間通過 磷酸二酯 鍵連接成多聚體。2. DNA變性后，紫外吸收 增加 ，粘度 下降 ，浮力密度 升高 ，生物活性 喪失 。3. DNA雙螺旋直徑為 2 nm，每隔 3.4 nm上升一圈，相當(dāng)于10個堿基對。4. Z-DNA為 左 手螺旋。5. hn-RNA是真核生物 mRNA 的前體。6. 用Sanger的鏈末端終止法測定DNA一級結(jié)構(gòu)時，鏈終止劑是 雙脫氧核苷三磷酸 。7. 維系DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力主要有 氫鍵 和 堿基堆積力 。8. 在堿性條件下， 核糖 核酸比 脫氧核糖 核酸更容易降解，其原因是因為 核糖 核酸的每個核苷酸上 -OH 的緣故。9. DNA復(fù)制時，連續(xù)合成的鏈稱為 前導(dǎo) 鏈；不連續(xù)合成的鏈稱為 隨從鏈。10. DNA合成的原料是 四種脫氧核糖核苷三磷酸 ；復(fù)制中所需要的引物是RNA 。11. DNA合成時，先由引物酶合成 RNA引物 ，再由 DNA聚合酶 在其3端合成DNA鏈，然后由 DNA聚合酶 切除引物并填補空隙，最后由 DNA連接酶 連接成完整的鏈。12. 細(xì)菌的DNA連接酶以 NAD 為能量來源，動物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶以 ATP 為能源。13. 大腸桿菌RNA聚合酶的全酶由 2 組成，其核心酶的組成為 2 。14. RNA轉(zhuǎn)錄過程中識別轉(zhuǎn)錄啟動子的是 因子，協(xié)助識別轉(zhuǎn)錄終止部位的是 因子。15. 真核細(xì)胞mRNA合成后的成熟過程包括 戴帽 、 加尾 、 剪接、 甲基化修飾 。16. 遺傳信息由RNA傳遞到 DNA 的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄，由 逆轉(zhuǎn)錄酶 催化。17. 反密碼子第 1 位堿基和密碼子第 3 堿基的配對允許有一定的擺動，稱為變偶性。18. 在原核細(xì)胞翻譯起始時，小亞基16SrRNA的3端與mRNA5端的 SD序列 之間互補配對，確定讀碼框架，fMet-tRNAf占據(jù)核糖體的 P位點 位置。19. 細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從 N 端到 C 端，而閱讀mRNA的方向是從 5 端到 3 端。20. 在形成氨酰- tRNA時，由氨基酸的 羧 基與tRNA3末端的 羥 基形成酯鍵。為保證蛋白質(zhì)合成的正確性，氨酰tRNA合成酶除了對特定氨基酸有很強的 專一性 之外，還能將“錯誤”氨基酸從氨酰化-tRNA復(fù)合物上 水解 下來。21. 轉(zhuǎn)肽酶催化生成的化學(xué)鍵是 肽鍵 ，該酶還具有 酯酶 活性。22. 肽鏈延伸包括：進(jìn)位、 成肽 、和 移位 。23. 翻譯延長階段的進(jìn)位，是指 氨酰- tRNA 進(jìn)入 A 位。翻譯延長階段的轉(zhuǎn)位是指 mRNA 與 核糖體 做相對運動。24. 體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)形成正確的構(gòu)象需要 分子伴侶 的幫助，某些蛋白質(zhì)的折疊還需要 二硫鍵 互換酶和 脯氨酰肽酰 異構(gòu)酶的催化。25. 正調(diào)控和負(fù)調(diào)控是基因表達(dá)的兩種最基本的調(diào)節(jié)形式，其中原核細(xì)胞常用 負(fù)調(diào)控模式，而真核細(xì)胞常用 正調(diào)控 模式。26. 在原核細(xì)胞中，由同一調(diào)控區(qū)控制的一群功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成一個基因表達(dá)調(diào)控單位，稱為 啟動子 ，其調(diào)控區(qū)包括 啟動 基因和 操縱 基因。27. 有些基因的表達(dá)較少受環(huán)境的影響，在一個生物體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)，因此被稱為 管家基因 ；另有一些基因表達(dá)極易受環(huán)境的影響，在特定環(huán)境信號刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，這種基因是可 誘導(dǎo) 的基因，相反，如果基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制，這種基因是可 阻遏 的基因。28. 在基因重組技術(shù)中，切割DNA用 限制性核酸內(nèi)切酶 ，連接DNA用 DNA連接酶 。29. 除噬菌體外， 質(zhì)粒 和 病毒 也是分子克隆的常用載體。30. 用動物病毒DNA改造的基因載體有 腺病毒載體 和 反轉(zhuǎn)錄病載體 。用于植物基因工程的常用載體是 Ti質(zhì)粒 。31. 將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌稱 轉(zhuǎn)化 ，將噬菌體DNA轉(zhuǎn)入細(xì)菌稱 轉(zhuǎn)導(dǎo) 。32. Southern印跡法、Northern印跡法和Western印跡法是分別用于研究 DNA 、 RNA 和 蛋白質(zhì) 轉(zhuǎn)移和鑒定的幾種常規(guī)技術(shù)。二、 選擇題1.有關(guān)核酸的雜交 （A,C,D）A.DNA變性的方法常用加熱和堿變性 B.相同來源的核酸才能通過變性而雜交C.不同來源的核酸復(fù)性時，若全部或部分堿基互補就可以雜交D.雜交可以發(fā)生在DNA與DNA之間，RNA與DNA，RNA與RNA之間E.把待測DNA標(biāo)記成探針進(jìn)行雜交2.DNA的復(fù)性速度與以下哪些有關(guān)（E）A.溫度 B.分子內(nèi)的重復(fù)序列 C.pH D.變性DNA的起始濃度 E.以上全部3.某DNA分子中腺嘌呤的含量為15%，則胞嘧啶的含量應(yīng)為(D)A15% B30% C40% D35% E70%4.DNA變性是指(D)A分子中磷酸二酯鍵斷裂 B多核苷酸鏈解聚 CDNA分子由超螺旋雙螺旋 D互補堿基之間氫鍵斷裂 EDNA分子中堿基丟失5.寡聚dT-纖維素柱層析用于(D)A. 從總DNA中分離純化質(zhì)粒DNA B. 從總核蛋白中分離DNPC. 除去雜蛋白 D. 從總RNA中純化mRNA6.關(guān)于雙螺旋結(jié)構(gòu)學(xué)說的敘述哪一項是錯誤的(C)A.由兩條反向平行的脫氧多核苷酸鏈組成 B.堿基在螺旋兩側(cè)，磷酸與脫氧核糖在外圍C.兩條鏈間的堿基配對非常嚴(yán)格，A與T間形成三個氫鍵，G與C間形成兩個氫鍵D.堿基對平面垂直于中心軸，堿基對之間的作用力為范德華力E.螺旋每轉(zhuǎn)一圈包含10個堿基對7.下列關(guān)于雙鏈DNA堿基含量關(guān)系，哪一個是錯誤的(B)AA=T，G=C BA+T=G+C CA+G=C+T DA+C=G+T8.下列是幾種DNA分子的堿基組成比例。哪一種的Tm值最高(A)AA+T=15% BG+C=25% CG+C=40% DA+T=80%9DNA復(fù)制時，下列哪一種酶是不需要的(E)ADNA指導(dǎo)的DNA聚合酶 BDNA連接酶 C拓樸異構(gòu)酶 D解鏈酶 E限制性內(nèi)切酶10.DNA復(fù)制中的引物是(C)A由DNA為模板合成的DNA片段 B由RNA為模板合成的RNA片段 C由DNA為模板合成的RNA片段 D由RNA為模板合成的RNA片段 E引物仍存在于復(fù)制完成的DNA鏈中11.DNA復(fù)制時，子鏈的合成是(C)A.一條鏈53，另一條鏈35 B兩條鏈均為35 C兩條鏈均為53 D兩條鏈均為連續(xù)合成 E兩條鏈均為不連續(xù)合成12.在E.coli細(xì)胞中DNA聚合酶的作用主要是(C)A. DNA復(fù)制 B. E.coliDNA合成的起始 C. 切除RNA引物 D. 岡崎片段的連接13.需要DNA連接酶參與的過程有(A)ADNA復(fù)制 BDNA體外重組 CDNA損傷的切除修復(fù) DRNA逆轉(zhuǎn)錄14.DNA損傷的光修復(fù)作用是一種高度專一的修復(fù)方式，它只作用于紫外線引起的(A)A.嘧啶二聚體 B. 嘌呤二聚體 C.嘧啶-嘌呤二聚體 D.為兩個單獨的嘧啶堿基15.真核細(xì)胞RNA聚合酶催化合成的是(B)A18SRNA BmRNA CtRNA D5SRNA ErRNA16.轉(zhuǎn)錄指下列哪一過程(B)A. 以RNA為模板合成DNA B. 以DNA為模板合成RNA C. 以RNA為模板合成蛋白質(zhì) D. 以DNA為模板合成DNA17.hnRNA是(B)A.存在于細(xì)胞核內(nèi)的tRNA前體 B.存在于細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體 C.存在于細(xì)胞核內(nèi)的rRNA前體 D.存在于細(xì)胞核內(nèi)的snRNA前體18.基因有兩條鏈,與mRNA序列相同(T代替U)的鏈叫做(A)A. 有義鏈 B. 反義鏈 C. 重鏈 D. cDNA鏈19.下列關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄酶的敘述哪一個是錯誤的(D)A.它以RNA為模板指導(dǎo)DNA的合成 B.它也可以DNA為模板指導(dǎo)DNA的合成 C.它具有RNase H活性 D.逆轉(zhuǎn)錄酶的作用不需要引物20.多肽鏈的氨基酸序列取決于(D)AtRNA B. 18S rRNA C. 28S rRNA DmRNA E. 氨基酰-mRNA合成酶21.密碼GGC的對應(yīng)反密碼子是（A）AGCC B. CCG C. CCC D. CGC E. GGC22.關(guān)于密碼子，錯誤的敘述是(C)A每一密碼子代表一種氨基酸 B. 某些密碼子不代表氨基酸C一種氨基酸只有一種密碼子 D. 甲硫氨酸只有一種密碼子E. 密碼子有種族特異性 23.一個N端為丙氨酸的20肽，其開放的閱讀框架至少應(yīng)該由多少個核苷酸殘基組成？(C)A60個 B. 63個 C. 66個 D. 57個 E. 69個24.氨基酰- tRNA中，tRNA與氨基酸的結(jié)合鍵是(E)A鹽鍵 B. 磷酸二酯鍵 C. 肽鍵 D. 糖苷鍵 E. 酯鍵25.原核生物和真核生物翻譯起始不同之處(B)A真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA與核糖體結(jié)合B真核生物帽子結(jié)合蛋白是翻譯起始因子之一 CIF 比eIF種類多D原核生物和真核生物使用不同起始密碼E原核生物有TATAAT作為翻譯起始序列，真核生物則是TATA26.關(guān)于核蛋白體轉(zhuǎn)肽酶，錯誤的敘述是(C)A轉(zhuǎn)肽不需要GTP B. 轉(zhuǎn)肽不需要ATP C活性中心在小亞基 D. 活性中心在大亞基 E活性中心與rRNA有關(guān)27.一個氨基酸參入多肽鏈，需要(B)A兩個ATP分子 B一個ATP分子，兩個GTP分子C一個ATP分子，一個GTP分子 D兩個ATP分子，一個GTP分子E兩個GTP分子28.信號肽段的作用是(C)A指導(dǎo)DNA合成的啟動 B指導(dǎo)多肽鏈糖基化 C引導(dǎo)多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D指導(dǎo)RNA合成的啟動 E指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的啟動29.多肽鏈合成后，其Ser可(B)A乙?；?B糖基化 C磷酸化 D甲基化 E硫酸化30.蛋白質(zhì)合成后加工不包括(D)A蛋白質(zhì)的磷酸化 B信號肽的切除 C蛋白質(zhì)的糖基化D酶的構(gòu)像變化 E蛋白質(zhì)的乙?；?1.以下哪一種抑制劑只能抑制真核生物的蛋白質(zhì)合成(C)A氯霉素 B. 紅霉素 C放線菌酮 D嘌呤霉素 E四環(huán)素32一個操縱子通常含有（B）A.一個啟動序列和一個編碼基因 B.一個啟動序列和數(shù)個編碼基因C.數(shù)個啟動序列和一個編碼基因 D.數(shù)個啟動序列和數(shù)個編碼基因E兩個啟動序列和數(shù)個編碼基因33有關(guān)操縱子學(xué)說的論述，正確的是（B）A.操縱子調(diào)控系統(tǒng)是真核生物基因調(diào)控的主要方式B.操縱子調(diào)控系統(tǒng)是原核生物基因調(diào)控的主要方式C.操縱子調(diào)控系統(tǒng)由調(diào)節(jié)基因、操縱基因、啟動子和結(jié)構(gòu)基因組成D.誘導(dǎo)物與阻遏蛋白結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄 E.誘導(dǎo)物與啟動子結(jié)合而啟動轉(zhuǎn)錄34轉(zhuǎn)錄因子是（C）A.調(diào)節(jié)DNA結(jié)合活性的小分子代謝效應(yīng)物 B.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄延伸速度的蛋白質(zhì)C.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄起始速度的蛋白質(zhì) D.調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分解速度的蛋白質(zhì)E.促進(jìn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工的蛋白質(zhì)35阻遏蛋白（阻抑蛋白）識別操縱子中的（C）A.啟動基因 B.結(jié)構(gòu)基因 C.操縱基因 D.內(nèi)含子 E.調(diào)節(jié)基因 36.在下列哪種情況下，乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高（A）A.高乳糖，低葡萄糖 B.高乳糖，高葡萄糖 C.低乳糖，低葡萄糖D.低乳糖，高葡萄糖 E.不一定37.順式作用元件是指（E）A.基因的5側(cè)翼序列 B.基因的3側(cè)翼序列 C.基因的5和3側(cè)翼序列D.基因的5和3側(cè)翼序列以外的序列 E.具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的特異DNA序列38.反式作用因子是指（E）A.具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白 B.具有抑制功能的調(diào)節(jié)蛋白 C.對自身基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白 D.對另一基因具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白 E.對另一基因有調(diào)節(jié)功能的蛋白質(zhì)因子39.下列關(guān)于限制性內(nèi)切酶的敘述哪一項是錯誤的（C）A.它能識別DNA特定的堿基順序，并在特定的位點切斷DNAB.切割點附近的堿基順序一般呈回文結(jié)構(gòu) C.它能專一性降解經(jīng)甲基化修飾的DNAD.是重組DNA的重要工具酶 E.主要從細(xì)菌中獲得40.基因工程中，不常用到的酶是（C）A.限制性核酸內(nèi)切酶 B.DNA聚合酶 C.DNA解鏈酶 D.DNA連接酶 E.反轉(zhuǎn)錄酶41下列哪項不能作為表達(dá)載體導(dǎo)入真核細(xì)胞的方法？（D）A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染 B.電穿孔 C.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染 D.氯化鈣轉(zhuǎn)染 E.顯微注射42.重組體的篩選方法有（A）A.抗藥標(biāo)志篩選 B.標(biāo)記補救 C.分子雜交 D.免疫化學(xué) E.酶聯(lián)免疫檢測43.cDNA是指（D）A.在體內(nèi)合成的與病毒DNA或RNA互補的DNA B.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的DNAC.在體外經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的RNAD.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNAE.在體內(nèi)經(jīng)轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補的RNA44建cDNA文庫時，首先需分離細(xì)胞的（C）A.染色體DNA B.線粒體DNA C.總mRNA D.tRNA E.rRNA三、三、 判斷題()1.生物體內(nèi)，天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。()2.RNA分子可以發(fā)生熱變性，并有增色效應(yīng)。()3.水分子可以插入天然DNA分子雙螺旋空隙中。()4.從結(jié)構(gòu)基因中的DNA序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。()5.提高鹽濃度可使DNA分子的熔點（Tm）升高。()6.RNA的局部螺旋區(qū)中，兩條鏈之間的方向也是反向平行的。()7.在E.coli細(xì)胞和真核細(xì)胞中都是由DNA聚合酶切除RNA引物。 ()8.逆轉(zhuǎn)錄酶催化RNA指導(dǎo)的DNA合成不需要RNA引物。()9.RNA病毒不含DNA基因組，根據(jù)中心法則它必須先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，才能復(fù)制和增殖。()10.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的RNA聚合酶都能夠直接識別啟動子。()11.大腸桿菌染色體DNA由兩條鏈組成，其中一條鏈充當(dāng)模板鏈，另外一條鏈充當(dāng)編碼鏈。()12由于遺傳密碼的通用性，用原核生物表達(dá)真核基因不存在技術(shù)障礙。表達(dá)出的蛋白質(zhì)通常是有功能的。()13.氨酰-tRNA合成酶可以通過合成反應(yīng)的逆反應(yīng)切除誤載的氨基酸。()14.所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸連接在tRNA末端核糖的3-羥基上。()15.在核糖體上形成肽鏈所需的能量，由水解GTP來提供。()16.生物合成蛋白質(zhì)時，A 位的氨基酸轉(zhuǎn)移到P位，使P位的肽鏈延長，A 位空載的-tRNA隨后便脫落。()17.蛋白質(zhì)能夠折疊成何種三維結(jié)構(gòu)，主要是由分子伴侶決定的。()18.高等真核生物的大部分DNA是不為蛋白質(zhì)編碼的。()19.大多數(shù)管家基因編碼低豐度的mRNA.()20.乳糖可以誘導(dǎo)乳糖操縱子的表達(dá)，所以乳糖對乳糖操縱子的調(diào)控屬于正調(diào)控系統(tǒng)。()21.某些蛋白質(zhì)既可以作為阻遏蛋白又可以作為激活蛋白參與基因表達(dá)的調(diào)控。()22.準(zhǔn)備用原核生物表達(dá)真核基因時，最好通過cDNA獲取目的基因。()23.用原核生物表達(dá)真核生物的糖蛋白，其表達(dá)產(chǎn)物不會有正常的生物學(xué)功能。()24.Ti質(zhì)?？梢噪S土壤農(nóng)桿菌進(jìn)入植物細(xì)胞。()25.用噬菌體作克隆載體時，外源DNA片斷越小，克隆的成功率越高。()26.基因克隆選擇的宿主細(xì)胞必須無限制性核酸內(nèi)切酶。()27.采用藍(lán)白斑選擇法時，藍(lán)色菌落或噬菌斑是含有重組載體的克隆。()28若1個氨基酸有3個遺傳密碼，則這3個遺傳密碼的前兩個核苷酸通常是相同的。四、名詞解釋（每題2分，共20分）1.增色效應(yīng)(hyperchromic effect)； 核酸從雙鏈變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時，在260nm處的吸光度增加，稱 “增色效應(yīng)”。2. 分子雜交（molecular hybridization）； 不同的DNA片段之間，DNA片段與RNA片段之間，如果彼此間的核苷酸排列順序互補也可以復(fù)性，形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補堿基配對而使不完全互補的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。3. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）； 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是擴(kuò)增樣品中的DNA量和富集眾多DNA分子中的一個特定的DNA序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中，使用與目的DNA序列互補的寡核苷酸作為引物，進(jìn)行多輪的DNA合成。其中包括DNA變性，引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。4. DNA的變性與復(fù)性（denaturation and renaturation of DNA）； DNA的變性是指DNA雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成單鏈并不涉及共價鍵的斷裂。DNA的復(fù)性是指變性DNA在適當(dāng)條件下，又可使兩條彼此分開的鏈重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)。5. Tm； 通常把加熱變性DNA使增色效應(yīng)達(dá)到最大增量一半時的的溫度稱為該DNA的熔點或熔解溫度，用Tm表示。6. 內(nèi)含子與外顯子內(nèi)含子是指結(jié)構(gòu)基因中存在于外顯子之間的非編碼序列，也是基因中不表達(dá)的序列，屬插入序列。外顯子是指基因中編碼蛋白質(zhì)的序列。7.半保留復(fù)制； DNA復(fù)制的一種方式。每條鏈都可用作合成互補鏈的模板，合成出兩分子的雙鏈DNA，每個分子都是由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。8.岡崎片段； 相對比較短的DNA鏈（大約1000核苷酸殘基），是在DNA的滯后鏈的不連續(xù)合成期間生成的片段，這是Reiji Okazaki在DNA合成實驗中添加放射性的脫氧核苷酸前體觀察到的。9.復(fù)制體； 一種多蛋白復(fù)合體，包含DNA聚合酶，引發(fā)酶，解旋酶，單鏈結(jié)合蛋白和其它輔助因子。復(fù)制體位于每個復(fù)制叉處，進(jìn)行染色體DNA復(fù)制的聚合反應(yīng)。10.編碼鏈； 雙鏈DNA中，不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄的那一條DNA鏈，其核苷酸序列與轉(zhuǎn)錄生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T）。11.內(nèi)含子； 在轉(zhuǎn)錄后的加工中，從最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物除去的內(nèi)部的核苷酸序列。術(shù)語內(nèi)含子也指DNA中編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。12.外顯子（exon）既存在于最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。術(shù)語外顯子也指DNA中編碼相應(yīng)RNA的區(qū)域。13.遺傳密碼； DNA編碼鏈或mRNA上的核苷酸，以3個為一組（三聯(lián)體）決定1個氨基酸的種類，稱為三聯(lián)體密碼。mRNA的三聯(lián)體密碼是連續(xù)排列的，因此，mRNA的核苷酸序列可以決定蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。14.擺動假說； mRNA上的密碼子與tRNA上的反密碼子相互辯認(rèn)，大多數(shù)情況是遵從堿基配對規(guī)律的。但也可出現(xiàn)不嚴(yán)格的配對，這種現(xiàn)象就是遺傳密碼的擺動性，tRNA分子上有相當(dāng)多的稀有堿基，例如次黃嘌呤（inosine,I）常出現(xiàn)于三聯(lián)體反密碼子的5端第一位，它和mRNA密碼子第3位的A、C、U都可以配對。15.SD序列； 位于mRNA分子AUG起始密碼子上游約813個核苷酸處，由46個核苷酸組成的富含嘌呤的序列，以-AG-GA-為核心。SD序列同16S rRNA近3-末端的序列互補，在核糖體與mRNA的結(jié)合過程中起重要作用。16.信號肽； 是未成熟的分泌性蛋白質(zhì)中可被細(xì)胞轉(zhuǎn)運系統(tǒng)識別的特征性氨基酸序列。有堿性N-末端區(qū)、疏水核心區(qū)及加工區(qū)三個區(qū)段。蛋白質(zhì)被轉(zhuǎn)運到細(xì)胞的一定部位后，信號肽即被切除。17.多聚核糖體是由1個mRNA分子與一定數(shù)目的單個核糖體結(jié)合而成的串珠狀排列。每個核糖體可以獨立完成一條肽鏈的合成，所以多個核糖體上可以同時進(jìn)行多條肽鏈的合成，可以加速蛋白質(zhì)的合成速度，提高模板mRNA的利用率。18.操縱子； 原核生物的幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起，轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA，然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過程的酶，或共同完成某種功能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動子，操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位，稱操縱子。19.啟動子； 是RNA聚合酶結(jié)合位點周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件，包括至少一個轉(zhuǎn)錄起始點。在真核基因中增強子和啟動子常交錯覆蓋或連續(xù)。有時，將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無法區(qū)分的啟動子、增強子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱啟動子。20.增強子； 是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件，最早是在SV40病毒中發(fā)現(xiàn)的長約200bp的一段DNA，可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高100倍，其后在多種真核生物，甚至在原核生物中都發(fā)現(xiàn)了增強子。增強子通常占100200bp長度，也和啟動子一樣由若干組件構(gòu)成，基本核心組件常為812bp，可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。21.衰減子； 在原核生物的Trp操縱子結(jié)構(gòu)中，第一個結(jié)構(gòu)基因與啟動子P之間有一個區(qū)域含Trp密碼子，稱衰減子。當(dāng)環(huán)境中Trp濃度很高時，它可通過編碼并翻譯，使正在轉(zhuǎn)錄的mRNA形成終止信號，從而終止Trp操縱子的表達(dá)。這種轉(zhuǎn)錄衰減實質(zhì)上是轉(zhuǎn)錄與一個前導(dǎo)肽翻譯過程的偶聯(lián)，它是原核生物特有的一種基因調(diào)控機(jī)制。22.反式作用因子； 大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達(dá)后，通過與特異的順式作用元件相互作用（DNA-蛋白質(zhì)相互作用），或通過與基它調(diào)節(jié)因子的相互作用（蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用），反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄，故稱反式作用蛋白或反式作用因子。23.順式調(diào)控元件：指可影響自身基因表達(dá)活性的真核DNA序列。根據(jù)順式作用元件在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式，分為啟動子、增強子及沉默子等。24.降解物基因活化蛋白；也就是cAMP受體蛋白（cAMP receptor protein,CRP），它與cAMP的復(fù)合物可以促進(jìn)某些原核操縱子（如乳糖操縱子）的轉(zhuǎn)錄。25.克隆技術(shù)； “克隆”作為名詞指相同的分子或細(xì)胞構(gòu)成的群體，或一個共同的祖先通過無性繁殖所得到的群體，作為動詞指獲取“克隆”的過程?？寺〖夹g(shù)特指獲取“克隆”的過程，包括分子克隆，細(xì)胞克隆等技術(shù)。26.限制性核酸內(nèi)切酶； 就是識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類核酸內(nèi)切酶。限制性核酸內(nèi)切酶存在于細(xì)菌體內(nèi)，與相伴存在的甲基化酶共同構(gòu)成細(xì)菌的限制、修飾體系，限制外源DNA，保護(hù)自身DNA，對保持細(xì)菌遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定具有重要意義。限制性核酸內(nèi)切酶分為三類，其中的類酶能特異性在一定的核苷酸序列處切割雙鏈DNA，因而在基因工程中得到廣泛的應(yīng)用。27.基因組DNA文庫； 利用限制性核酸內(nèi)切酶將染色體DNA切割成一定大小的片段，將這些片段分子與適當(dāng)?shù)目寺≥d體拼接成重組DNA分子，繼而轉(zhuǎn)入受體菌，使每個細(xì)菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子。不同細(xì)菌中的重組DNA分子可能包含不同的染色體DNA片段，這樣，只要得到的轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的重組DNA分子種類足夠多，則全部轉(zhuǎn)化細(xì)菌所攜帶的各種染色體片段就代表了染色體的整個基因組。存在于轉(zhuǎn)化細(xì)菌內(nèi)，由克隆載體所攜帶的所有基因組DNA片段的集合稱基因組DNA文庫?；蚪MDNA文庫涵蓋了基因組的全部基因信息。28. cDNA文庫以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫?；蚪M含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá)，而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時期的細(xì)胞其基因表達(dá)的種類和強度也不盡相同，所以cDNA文庫具有組織細(xì)胞特異性。cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多，能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。另外，對真核細(xì)胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同，基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因，而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接，去除了內(nèi)含子的cDNA。一般來說，從cDNA文庫獲得的基因，因不含內(nèi)含子而片段較小，更適合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在將hnRNA加工成mRNA的酶系統(tǒng)，若用原核生物表達(dá)真核基因，則目的基因一定要通過cDNA獲取。五、分析計算題1.簡述B-DNA的結(jié)構(gòu)特征。（1）兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞形成右手螺旋；（2）嘌呤和嘧啶堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸和核糖在外側(cè)，彼此通過3，5磷酸二酯鍵相連接，形成DNA分子的骨架。堿基平面和縱軸垂直，糖環(huán)的平面則和縱軸平行；（3）雙螺旋的平均直徑為2nm，兩個相鄰的堿基對之間相距的高度，堿基堆積距離為0.34nm，兩個核苷酸之間的夾角為36度；（4）兩條核苷酸鏈依靠彼此堿基之間形成的氫鍵相聯(lián)系而結(jié)合在一起；（5）堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。2.何謂Tm？影響Tm大小的因素有哪些？在實驗中如何計算Tm值？DNA的變性從開始解鏈到完全解鏈，是在一個相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成的，在這一范圍內(nèi)，紫外線吸收值的增加量達(dá)到最大增加量的50%時的溫度為DNA的解鏈溫度（溶解溫度，melting temperature,Tm）。Tm值大小主要與GC含量有關(guān)，GC含量越高，Tm值越大；另外核酸分子越大，Tm值也越大，溶液pH值大于11.3，核酸完全變性，小于5.0則核酸容易脫嘌呤。降低溶液的離子強度會使Tm值下降，尿素等變性劑也會使Tm值下降。在實驗中，Tm值計算公式：Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡核苷酸：Tm=4（G+C）+2（A+T）。3.如果人體有1014個細(xì)胞，每個體細(xì)胞的DNA含量為6.4109個堿基對。試計算人體DNA的總長度是多少？是太陽-地球之間距離（2.2109公里）的多少倍？已知雙鏈DNA每1000個核苷酸重110-18g，求人體的DNA的總質(zhì)量。每個體細(xì)胞的DNA的總長度為：6.41090.34nm = 2.176109 nm= 2.176m，3.人體內(nèi)所有體細(xì)胞的DNA的總長度為：2.176m1014 = 2.1761011km這個長度與太陽-地球之間距離（2.2109公里）相比為：2.1761011/2.2109 = 99倍，每個核苷酸重110-18g/1000=10-21g，所以，總DNA 6.4102310-21=6.4102=640g4.什么是DNA變性？DNA變性后理化性有何變化？DNA雙鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過程成變性。引起DNA變性的因素很多，如高溫、超聲波、強酸、強堿、有機(jī)溶劑和某些化學(xué)試劑（如尿素，酰胺)等都能引起變性。DNA變性后的理化性質(zhì)變化主要有：（1）天然DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無規(guī)則線團(tuán)，生物學(xué)活性喪失；（2）天然的線型DNA分子直徑與長度之比可達(dá)1：10，其水溶液具有很大的黏度。變性后，發(fā)生了螺旋-線團(tuán)轉(zhuǎn)變，黏度顯著降低；（3）在氯化銫溶液中進(jìn)行密度梯度離心，變性后的DNA浮力密大大增加；（4）沉降系數(shù)S增加；（5）DNA變性后，堿基的有序堆積被破壞，堿基被暴露出來，因此，紫外吸收值明顯增加，產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。（6）DNA分子具旋光性，旋光方向為右旋。由于DNA分子的高度不對稱性，因此旋光性很強，其a=150。當(dāng)DNA分子變性時，比旋光值就大大下降。5.什么是核酸雜交？有何應(yīng)用價值？熱變性后的DNA片段在進(jìn)行復(fù)性時，不同來源的變性核酸（DNA或RNA）只要有一定數(shù)量的堿基互補（不必全部堿基互補），就可形成雜化的雙鏈結(jié)構(gòu)。此種使不完全互補的單鏈在復(fù)性的條件下結(jié)合成雙鏈的技術(shù)稱為核酸雜交。用被標(biāo)記的已知堿基序列的單鏈核酸小分子作為探針，可確定待檢測的DNA，RNA分子中是否有與探針同源的堿基序列。用此原理，制作探針，再通過雜交，可用于細(xì)菌，病毒，腫瘤和分子病的診斷（基因診斷）。也可用于基因定位，目的基因篩選，基因表達(dá)狀況的分析等研究工作。6.若使15N標(biāo)記的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基中生長三代，提取DNA，并用平衡沉降法測定DNA密度，其14N-DNA分子與14N15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？15N標(biāo)記的大腸桿菌利用培養(yǎng)基中的14N合成DNA，第一代DNA雙鏈都是14N15N雜合DNA分子。第二代分別是以第一代中的14N和15N鏈作為母鏈合成新的DNA，所以14NDNA分子與14N15N雜合DNA分子之比為1：1。第三代中的14N和15N母鏈的分子之比是3：1，所以14NDNA分子與14N15N雜合DNA分子之比應(yīng)為3：1。7.真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？真核生物的DNA聚合酶有、五種，均具有5 3聚合酶活性，DNA聚合酶、和有35外切酶活性，DNA聚合酶和無外切酶活性。DNA聚合酶用于合成引物，DNA聚合酶用于合成細(xì)胞核DNA，DNA聚合酶和主要起修復(fù)作用，DNA聚合酶用于線粒體DNA的合成。8.真核細(xì)胞中有幾種RNA聚合酶？它們的主要功能是什么？真核生物的RNA聚合酶，按照對-鵝膏蕈堿的敏感性不同進(jìn)行分類：RNA聚合酶基本不受-鵝膏蕈堿的抑制，在大于10-3mol/L時才有輕微的抑制。RNA聚合酶對-鵝膏蕈堿最為敏感，在10-8mol/L以下就會被抑制。RNA聚合酶對-鵝膏蕈堿的敏感性介于聚合酶和聚合酶之間，在10-5mol/L到10-4mol/L才會有抑制現(xiàn)象。RNA聚合酶存在于核仁中，其功能是合成5.8S rRNA、18 S rRNA和28 S rRNA。RNA聚合酶存在于核質(zhì)中，其功能是合成mRNA、snRNA。RNA聚合酶也存在于核質(zhì)中，其功能是合成tRNA和5 S rRNA及轉(zhuǎn)錄Alu序列。9.真核生物三類啟動子各有何結(jié)構(gòu)特點？真核生物三類啟動子分別由RNA聚合酶I、II、III進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。類別I啟動子包括核心啟動子和上游控制元件兩部分，需要UBF1和SL1因子參與作用。類別II啟動子包括四類控制元件：基本啟動子、起始子、上游元件和應(yīng)答元件。識別這些元件的反式作用因子由通用轉(zhuǎn)錄因子、上游轉(zhuǎn)錄因子和可誘導(dǎo)的因子。類別III啟動子有兩類：上游啟動子和基因內(nèi)啟動子，分別由裝配因子和起始因子促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成和轉(zhuǎn)錄。10論述遺傳密碼的特點。（1）遺傳密碼為三聯(lián)體：模板從mRNA5端的起始密碼子開始，到3端的終止密碼稱為開放讀碼框架。在框架內(nèi)每3個堿基組成1個密碼子，決定1個氨基酸。（2）遺傳密碼的種類：遺傳密碼共64個，其中61個密碼子分別代表各種氨基酸。3個為肽鏈合成的終止信號。位于5端的AUG，除了代表甲硫蛋氨酸外，還是肽鏈合成的起始信號。（3）遺傳密碼的連續(xù)性：對mRNA分子上密碼子的閱讀方法叫讀碼。正確讀碼是每3個相鄰堿基一組，不間斷地連續(xù)讀下去，直到出現(xiàn)終止密碼為止。mRNA上堿基的插入和缺失，可導(dǎo)致框移突變。（4）遺傳密碼的簡并性：有61個密碼子代表20種氨基酸，每個密碼子只代表一種氨基酸，而多數(shù)氨基酸都有24個密碼子，這種由幾個密碼子編碼同一氨基酸的現(xiàn)象稱為簡并性。從密碼表上可看出密碼子的第3位堿基通常是簡并的。（5）遺傳密碼的擺動性：指密碼子與反密碼子配對不遵從堿基配對規(guī)律，此不嚴(yán)格的配對關(guān)系稱為擺動性。如丙氨酰- tRNA反密碼子的第1位堿基I可以與密碼子第3位的A、C或U配對。遺傳密碼的擺動性使一種tRNA可以識別幾種代表同一種氨基酸的密碼子。（6）遺傳密碼的通用性：從細(xì)菌到人的遺傳密碼都市通用的，但近年發(fā)現(xiàn)哺乳類動物線粒體的蛋白質(zhì)合成體系中有個別例外。如UAG不代表終止密碼子，而代表色氨酸；CUA不代表亮氨酸，而代表蘇氨酸。（7）遺傳密碼的防錯系統(tǒng)：由于遺傳密碼的簡并性，有4個密碼的氨基酸，其第三位的堿基被替換，仍編碼同一種氨基酸，從遺傳密碼表可以看出，只要遺傳密碼的第二位是U，則第一位和第三位不論怎么變化，其編碼的氨基酸總是疏水性的，如第二位是C，則其編碼的氨基酸是非極性的或極性不帶電荷的，若第二位為A或G，則編碼的氨基酸R基是親水性的，第一位是A或C，第二位是A或G，則編碼的氨基酸R基是堿性的，若前兩位是AG則編碼的氨基酸R基是酸性的。這些規(guī)律使某些核苷酸的替換可以不引起肽鏈中氨基酸的變化，或被替換的氨基酸理化性質(zhì)相似。這便是密碼的防錯系統(tǒng)。11.如果mRNA上的閱讀框已被確定，它將只編碼一種多肽的氨基酸順序。從一蛋白質(zhì)的已知氨基酸順序，是否能確定唯一的一種mRNA的核苷酸序列？為什么？由于1個密碼子只能編碼一種氨基酸，在mRNA的開放閱讀框確定后，用遺傳密碼可以推出其相應(yīng)蛋白質(zhì)的氨基酸序列。由于mRNA是由DNA轉(zhuǎn)錄而來的，如果基因（DNA）編碼區(qū)的序列已知，也可由此推出相應(yīng)表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列。但是，由于除甲硫氨酸和色氨酸外的18種氨基酸均有一種以上的密碼子，由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推斷相應(yīng)mRNA的核苷酸序列時，我們會面臨多種選擇。比如，由7個氨基酸的序列推測其可能的mRNA編碼區(qū)序列，若其中有5個氨基酸有2個密碼，則能夠與其相對應(yīng)的核苷酸序列會有25種，即有32種。12.如果E.Coli 染色體DNA的75%可用來編碼蛋白質(zhì)，假定蛋白質(zhì)的平均相對分子質(zhì)量為60000，以三個堿基編碼一個氨基酸計算，（1）若該染色體DNA大約能編碼2000種蛋白質(zhì)，求該染色體DNA的長度？（2）該染色體DNA的相對分子質(zhì)量大約是多少？（氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量是120，核苷酸對的平均相對分子質(zhì)量是640）。（1）因為蛋白質(zhì)的平均相對分子質(zhì)量為60000，氨基酸殘基的平均相對分子質(zhì)量為120，則蛋白質(zhì)的平均氨基酸殘基的個數(shù)為60000/120=500個，編碼2000種蛋白至少需要20005003個密碼子，而DNA堿基的75%用來編碼這2000 個蛋白，則該染色體DNA的長度為：20005003/75%=4000000bp。若該DNA為B-DNA，每個bp使螺旋軸延伸0.34nm，則其長度應(yīng)為：0.344000000=1360000nm；（2）該染色體DNA的相對分子質(zhì)量大約是6404000000= 2560000000=2.56109 Da。13.原核生物與真核生物翻譯起始階段有何異同？相同之處：（1）都需生成翻譯起始復(fù)合物；（2）都需多種起始因子參加；（3）翻譯起始的第一步都需核糖體的大、小亞基先分開；（4）都需要mRNA和氨酰- tRNA結(jié)合到核糖體的小亞基上；（5）mRNA在小亞基上就位都需一定的結(jié)構(gòu)成分協(xié)助。（6）小亞基結(jié)合mRNA和起始者tRNA后，才能與大亞基結(jié)合。（7）都需要消耗能量。不同之處：（1）真核生物核糖體是80S（40S+60S）；eIF種類多（10多種）；起始氨酰- tRNA是met- tRNA（不需甲酰化），mRNA沒有SD序列；mRNA在小亞基上就位需5端帽子結(jié)構(gòu)和帽結(jié)合蛋白以及eIF2；mRNA先于met-tRNA結(jié)合到小亞基上。（2）原核生物核糖體是70S（30S+50S）；IF種類少（3種）；起始氨酰- tRNA是fmet- tRNA（需甲?；恍鑃D序列與16S-tRNA配對結(jié)合，rps-1辯認(rèn)識別序列；小亞基與起始氨酰-tRNA結(jié)合后，才與mRNA結(jié)合。14.簡述信號肽假說的基本內(nèi)容。蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送原理，有幾種不同的學(xué)說，信號肽假說是目前被普遍接受的學(xué)說之一。分泌性蛋白質(zhì)的初級產(chǎn)物N-端多有信號肽結(jié)構(gòu)，信號肽一旦合成（蛋白質(zhì)合成未終止），即被胞漿的信號肽識別蛋白（SRP）結(jié)合，SRP與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的內(nèi)側(cè)面的受體即對接蛋白（DP）結(jié)合，組成一個輸送系統(tǒng)，促使膜通道開放，信號肽帶動合成中的蛋白質(zhì)沿通道穿過膜，信號肽在沿通道折回時被膜上的信號肽酶切除，蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體經(jīng)進(jìn)一步修飾（如糖基化）后，即可被分選到細(xì)胞的不同部位。15.肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？蛋白質(zhì)合成后的加工修飾內(nèi)容有：（1）肽鏈的剪切：如切除N端的Met，切除信號肽，切除蛋白質(zhì)前體中的特定肽段。（2）氨基酸側(cè)鏈的修飾，如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3）二硫鍵的形成。（4）與輔基的結(jié)合。16.簡述操縱子的基本結(jié)構(gòu)。操縱子的調(diào)控區(qū)有一個操縱序列，一個啟動序列及一個CAP位點，調(diào)控區(qū)下游有幾個結(jié)構(gòu)基因，還有一個調(diào)節(jié)基因編碼阻遏蛋白，阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合，使操縱子受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。若cAMP 與CAP結(jié)合，形成的復(fù)合物與CAP位點結(jié)合，可增大操縱子的轉(zhuǎn)錄活性。阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)和CAP的正性調(diào)節(jié)共同調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)，操縱子機(jī)制在原核基因表達(dá)調(diào)控中具有較善遍的意義，因其多是幾個功能相關(guān)基因串聯(lián)于同一操縱子上，故在同一啟動序列控制下，可轉(zhuǎn)錄出能為多種蛋白質(zhì)編碼的mRNA，即多順反子mRNA。17.舉例說明基因表達(dá)的誘導(dǎo)與阻遏，正調(diào)控與負(fù)調(diào)控。在特定的環(huán)境信號刺激下，相應(yīng)的基因被激活，基因表達(dá)產(chǎn)物增加，則這種基因是可誘導(dǎo)的?？烧T導(dǎo)基因在特定的環(huán)境中表達(dá)增強的過程稱為誘導(dǎo)。例如有DNA損傷時，修復(fù)酶基因就會在細(xì)菌內(nèi)被誘導(dǎo)激活，使修復(fù)酶的活性增加。相反，如果基因?qū)Νh(huán)境信號應(yīng)答時被抑制則這種基因是可阻遏的，可阻遏基因表達(dá)產(chǎn)物水平降低的過程稱為阻遏，例如，當(dāng)培養(yǎng)液中色氨酸供應(yīng)充分時，在細(xì)菌內(nèi)編碼色氨酸合成相關(guān)酶的基因表達(dá)會被抑制。如果某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是表達(dá)的，加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因表達(dá)活性便被關(guān)閉，這樣的控制為負(fù)調(diào)控。例如，乳糖操縱子。相反，若某種基因在沒有調(diào)節(jié)蛋白存在時是關(guān)閉的，加入某種調(diào)節(jié)蛋白后基因活性就被開啟，這種控制稱為正調(diào)控。例如代謝物阻遏。18.概述原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點。原核基因表達(dá)調(diào)控與真核存在很多共同之處，但因原核生物沒有細(xì)胞核和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其基因組結(jié)構(gòu)要比真核生物簡單，基因表達(dá)的調(diào)控因此而比較簡單。雖然原核基因的表達(dá)也受轉(zhuǎn)錄起始、轉(zhuǎn)錄終止、翻譯調(diào)控及RNA、蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性等多級調(diào)控，但其表達(dá)開、關(guān)的關(guān)鍵機(jī)制主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄起始。其特點包括以下3方面：（1）因子決定RNA聚合酶的識別特異性：原核生物只有一種RNA聚合酶，核心酶催化轉(zhuǎn)錄的延長，亞基識別特異啟動序列，即不同的因子協(xié)助啟動不同基因的轉(zhuǎn)錄。（2）操縱子模型的普遍性：除個別基因外，原核生物絕大數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇地連續(xù)排列在染色體上，共同組成一個轉(zhuǎn)錄單位即操縱子，如乳糖操縱子等。一個操縱子含一個啟動序列及數(shù)個編碼基因。在同一個啟動序列控制下，轉(zhuǎn)錄出多順反子mRNA。（3）阻遏蛋白與阻遏機(jī)制的普遍性：在很多原核操縱子系統(tǒng)，特異的阻遏蛋白是控制啟動序列活性的重要因素。當(dāng)阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合或解離時，結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄被阻遏或去阻遏。19.概述真核生物基因組的特點。（1）基因組結(jié)構(gòu)龐大：哺乳動物基因組DNA由約bp的核苷酸組成。大約有3萬個左右的基因，90%以上的DNA不為蛋白質(zhì)編碼。真核細(xì)胞DNA與組蛋白結(jié)合形成復(fù)雜的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制更加復(fù)雜。（2）單順反子：真核基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子，即一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈。許多蛋白質(zhì)由幾條不同的多肽鏈組成，因此存在多個基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。（3）重復(fù)序列：重復(fù)序列在真核DNA中普遍存在，重復(fù)序列長短不一，短的在10個核苷酸以下，長的達(dá)數(shù)百，乃至上千個核苷酸。據(jù)重復(fù)頻率不同分為高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列及單拷貝序列。（4）基因的不連續(xù)性：結(jié)構(gòu)基因的兩側(cè)有不被轉(zhuǎn)錄的非編碼序列，往往是基因表達(dá)的調(diào)控區(qū)。在編碼基因內(nèi)部有一些不為蛋白質(zhì)編碼的間隔序列，稱內(nèi)含子，而編碼序列稱外顯子，因此真核基因是不連續(xù)的。20.概述真核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點。同原核生物一樣，真核基因表達(dá)調(diào)控的最基本環(huán)節(jié)也是轉(zhuǎn)錄起始，而且某些機(jī)制是相同的，但也存在明顯差別：（1）RNA聚合酶：真核有3種RNA聚合酶，分別負(fù)責(zé)3種RNA轉(zhuǎn)錄。（2）活性染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化：當(dāng)基因被激活時，可觀察到染色體相應(yīng)區(qū)域發(fā)生結(jié)構(gòu)和性質(zhì)變化。包括對核酸酶敏感，DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化，DNA堿基修飾變化和組蛋白變化。（3）正調(diào)節(jié)占主導(dǎo)地位：真核RNA聚合酶對啟動子的親和力極小或根本沒有實質(zhì)性的親和力，二者的結(jié)合必須依賴一種或多種激活蛋白。盡管發(fā)現(xiàn)少量基因存在負(fù)性順式作用元件，但普遍存在的是正性調(diào)節(jié)機(jī)制。（4）轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進(jìn)行：真核細(xì)胞有胞核及胞質(zhì)等區(qū)間分布，轉(zhuǎn)錄與翻譯在不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中進(jìn)行。（5）轉(zhuǎn)錄后加工：真核基因的內(nèi)含子和外顯子均被轉(zhuǎn)錄，內(nèi)含子在轉(zhuǎn)錄后要被剪接去除，使外顯子連接在一起，形成成熟的mRNA。不同剪接方式可形成不同的mRNA，翻譯出不同的多肽鏈。因此，轉(zhuǎn)錄后加工是真核基因表達(dá)調(diào)控的另一重要環(huán)節(jié)。21.簡答真核生物基因表達(dá)的調(diào)控方式。（1）DNA水平的調(diào)控：a.基因丟失，即DNA片段或部分染色體的丟失，如蛔蟲胚胎發(fā)育過程有27%的DNA丟失。b.基因擴(kuò)增，即特定基因在特定階段的選擇性擴(kuò)增，如非洲爪蟾卵母細(xì)胞中的rDNA是體細(xì)胞的4000倍 。c.DNA序列的重排，如哺乳動物免疫球蛋白各編碼區(qū)的連接。d.染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的變化，通過異