消毒劑效力及有效期驗證方案.doc

WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 1 of 8 TEST METHOD VALIDATION PROTOCOL 分析方法驗證方案分析方法驗證方案 方案編號方案編號 版本號版本號 Protocol No Version V TMP 07 077 分析方法名稱分析方法名稱 TEST METHOD QUALIFICATION OF DISINFECTANT EFFECTIVENESS AND STABILITY 消毒劑效力及有效期確認(rèn)方案消毒劑效力及有效期確認(rèn)方案 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 2 of 8 PROTOCOL APPROVAL PAGE 方案批準(zhǔn)頁方案批準(zhǔn)頁 PROTOCOL PREPARATION 方案準(zhǔn)備方案準(zhǔn)備 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 SIGNATURE 簽名簽名DATE 日期日期 QC Microbial Analyst QC Microbial Analyst PROTOCOL REVIEW 方案復(fù)核方案復(fù)核 QC Senior Analyst QC Manager QAValidation Officer PROTOCOL APPROVAL 方案批準(zhǔn)方案批準(zhǔn) Senior QO Manager WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 3 of 8 PROTOCOL REVISION HISTORY PAGE 方案修訂歷史記錄頁方案修訂歷史記錄頁 REVISION NUMBER 修訂次數(shù)修訂次數(shù) VERSION 版本號版本號 REVISION CONTENT 修訂內(nèi)容修訂內(nèi)容 01Original 原稿 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 4 of 8 1 目的 PURPOSE 5 2 范圍 SCOPE 5 3 引言 INTRODUCTION 5 4 參考資料 REFENRENCE 6 5 驗證方法 TEST METHOD 6 5 1 所用儀器和物料 6 5 2 測試工作菌種 6 5 3 實驗程序 6 6 接受標(biāo)準(zhǔn) 8 6 1 消毒效力接受標(biāo)準(zhǔn) 8 6 2 中和效力控制及其接受標(biāo)準(zhǔn) 8 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 5 of 8 1 目的目的 PURPOSE 驗證惠氏蘇州工廠目前使用的幾種消毒劑 Process LpHse 酸性 Process Vesphene se 堿 性 Ethanol 酒精溶液 快活溶液 在不銹鋼 橡膠 瓷磚 玻璃 塑料門簾 墻面等不 同材質(zhì)上的消毒效力 同時驗證消毒劑的使用有效期 2 范圍范圍 SCOPE 本驗證需要驗證的消毒劑有 Process LpHse 酸性 Process Vesphene se 堿性 Ethanol 酒精溶液 快活溶液 FORWARD disinfectant 四種 表 1 各消毒劑使用時涉及的材質(zhì) 消毒劑消毒劑類型類型適用對象適用對象所涉及的材質(zhì)所涉及的材質(zhì) Process LpHse 酸性 酚類消毒劑 廣譜 中效 生產(chǎn)設(shè)備 器具 車間 地面 墻壁 天花板 不銹鋼 橡膠 瓷磚 玻璃 塑料門簾 墻面 Process Vesphene se 堿性 酚類消毒劑 廣譜 中效 車間設(shè)備 器具 操作 間地漏 不銹鋼 橡膠 瓷磚 玻璃 塑料門簾 墻面 Ethanol 酒精溶 液 醇類消毒劑 中效 生產(chǎn)設(shè)備 器具 微生 物實驗室 不銹鋼 橡膠 瓷磚 玻璃 塑料門簾 墻面 快活溶液 季銨鹽類消毒 劑 低效 車間地面 墻壁 天 花板 非控制區(qū)域 車間公用區(qū) 不銹鋼 橡膠 瓷磚 玻璃 塑料門簾 墻面 3 引言引言 INTRODUCTION 本驗證的原理是 在某種材質(zhì)表面接種 0 1ml 104 105CFU 的菌種 室溫下自然風(fēng)干后 將消毒劑直接噴在材質(zhì)表面 等消毒劑作用一段時間后 檢驗沒有被殺滅的細(xì)菌數(shù) 根據(jù) 細(xì)菌被殺滅的數(shù)量 來判斷消毒劑的殺菌效果 實際消毒操作時 消毒劑噴到要消毒物體 表面后 再通過人為的涂擦等操作使消毒劑與物體表面充分接觸 同時 此操作也會機(jī)械 去除掉一部分微生物 在該驗證中 消毒劑是噴到材質(zhì)表面 這種方法要比實際消毒時的 效果差 因此驗證的結(jié)果更能體現(xiàn)實際的消毒效果 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 6 of 8 4 參考資料參考資料 REFENRENCE Disinfectant Effectiveness Study 812 Analytical Report 0807 1 0 SOPTS 35 V5 5 驗證方法驗證方法 TEST METHOD 5 1 所用儀器和物料 所用培養(yǎng)皿 移液管 容器均在 121 度下滅菌 30 分鐘后使用 無菌一次性培養(yǎng)皿 移液管 生物安全柜 BHC 1300 A B3生物安全柜 工作窗口吸入風(fēng)速為 0 5m s 滅菌鍋 培養(yǎng)箱 25 度和 32 度各一個 5 2 測試工作菌種 大腸埃希菌 CMCC B 44102 菌種斜面 金黃色葡萄球菌 CMCC B 26003 菌種斜面 白色念珠菌 CMCC98001 菌種斜面 環(huán)境菌種科氏葡萄球菌斜面 六 九 十月環(huán)境檢測沉降菌平板上連續(xù)檢出科 氏葡萄球菌 特選此菌為環(huán)境菌種 需驗證的消毒劑應(yīng)質(zhì)量合格并在有效期即將結(jié)束時開始驗證試驗 實驗所用的儀器設(shè)備均 在校正合格期限內(nèi) 5 3 實驗程序 5 3 1 消毒劑的配置 消毒劑按照相關(guān)的程序進(jìn)行稀釋 配置好的消毒劑溶液儲存在實際操作時使用 的噴壺中 在有效期內(nèi) 7 天 每天模擬日常使用方法使用 第 8 天開始驗證試 驗 消毒劑配置方法及消毒反應(yīng)時間見表 2 5 3 2 材質(zhì)的準(zhǔn)備 所需的材質(zhì)均是在實際操作中消毒劑所消毒的表面材質(zhì) 準(zhǔn)備的材質(zhì)需為無菌 材質(zhì) 在實驗過程中 每個實驗組需 3 塊同種材質(zhì)同時進(jìn)行 Comment s1 多少時間 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 7 of 8 表 2 消毒劑配置方法及消毒反應(yīng)時間 消毒劑消毒劑稀釋比例稀釋比例反應(yīng)時間反應(yīng)時間菌種菌種 Process LpHse 酸性1 256 v v 3 5 10minutes 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌 科氏葡萄球菌 Process Vesphene se 堿性 1 128 v v 3 5 10minutes 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌 科氏葡萄球菌 Ethanol 酒精溶液75 2 3 5minutes 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌 科氏葡萄球菌 快活溶液1 10 v v 3 5 10minutes 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌 科氏葡萄球菌 5 3 3 菌懸液的制備 取大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌及環(huán)境菌種科氏葡萄球菌的營養(yǎng) 瓊脂斜面培養(yǎng)物 接種至營養(yǎng)瓊脂斜面上 在 35 37 培養(yǎng) 20 22 小時 再接 種上述菌種的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中 在 35 37 培養(yǎng) 18 24 小時 上述營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物用 0 9 無菌生理鹽水溶液逐級 10 倍稀釋 制成每 0 1 ml 含菌落數(shù) 104 105CFU 的菌懸液 5 3 4 實驗操作 準(zhǔn)備 3 塊待測表面材質(zhì)于生物安全柜內(nèi) 分別吸取 0 1 ml 104 105CFU 接種于 3 塊待測表面材質(zhì)上 讓其在生物安全柜中自然風(fēng)干后待測 將配置好的的消毒 裝入噴壺中 均勻地噴灑在材質(zhì)的表面后立即開始計時 按表 2 等計時結(jié)束后 迅速把該材質(zhì)放入 100ml 的 D E 中和液中 充分振蕩 1min 后經(jīng) 0 45 微米的濾 膜過濾 用 100ml 次的 D E 中和液沖洗 3 次 取濾膜放在 D E 中和瓊脂平板上 培養(yǎng) 培養(yǎng)條件 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌及 環(huán)境菌種科氏 葡萄球菌在 30 35 至少 3 天 重復(fù)以上實驗操作 3 次 完成驗證實驗 WYETH PHARMACEUTICAL CO LTD 惠氏制藥有限公司惠氏制藥有限公司 Qualification of Disinfectant Effectiveness and Stability TMP 07 077 Page 8 of 8 5 3 5 陰性控制實驗 100ml 的 D E 中和液經(jīng) 0 45 micron 的濾膜后 取濾膜放在 D E 中和瓊脂平板上 培養(yǎng) 培養(yǎng)條件 細(xì)菌 30 35 至少 3 天 5 3 6 陽性控制實驗 準(zhǔn)備 3 塊無菌的待測表面材質(zhì)于生物安全柜內(nèi) 分別吸取 0 1 ml 10 100CFU 陽 性菌接種于 3 塊待測表面材質(zhì)上 讓其在生物安全柜中自然風(fēng)干后 將每種帶 菌的材質(zhì)放入 100ml 無菌的緩沖溶液中 充分振蕩 1min 經(jīng) 0 45 微米的濾膜過 濾 用 100ml 次的 D E 中和液沖洗 3 次 取濾膜放置于 D E 中和瓊脂平板上培 養(yǎng) 培養(yǎng)條件 大腸埃希菌 金黃色葡萄球菌 白色念珠菌及環(huán)境菌種科氏葡 萄球菌在 30 35 至少 3 天 6 接受標(biāo)準(zhǔn)接受標(biāo)準(zhǔn) 6 1 消毒效力接受標(biāo)準(zhǔn) 計算 Log Reduction 評價該種消毒劑對該菌種的殺滅效果 Log Reduction Log Average of Organisms in Control Plates Log Average of Organisms in Test Plates 接受標(biāo)準(zhǔn) Log Reduction 3 6 2 中和效力控制及其接受標(biāo)準(zhǔn) 吸 5ml 已配制好的消毒劑 經(jīng) 0 45 微米的濾膜過濾后 用 100ml 次中和液沖洗 3 次 加入 1ml 菌懸液 10 100cfu 置濾膜上 用 100ml 次中和液沖洗 1 次 取濾膜放在 D