188 Re┐HAb18F（ab）2 在荷瘤鼠體內(nèi)的藥代動力學.docVIP

188ReHAb18F（ab）2在荷瘤鼠體內(nèi)的藥代動力學【關(guān)鍵詞】188,Re關(guān)鍵詞:188Re；藥代動力學；裸小鼠；單克隆抗體；肝癌摘要:目的研究188Re標記的肝癌單抗片段HAb18F（ab）2在荷肝癌裸鼠體內(nèi)的藥代動力學，求取藥代動力學參數(shù)，建立藥代動力學模型.方法5組裸鼠經(jīng)尾靜脈注入1.85MBq188Re-HAb18F（ab）2，在不同時間點處死裸鼠，測量血及各臟器放射性計數(shù).用3P97藥代動力學軟件處理188Re-HAb18F（ab）2給藥后荷瘤鼠各時間點的血液放射性濃度及各主要臟器的放射性濃度，計算藥代參數(shù).結(jié)果188Re-HAb18F（ab）2在裸鼠體內(nèi)藥代動力學參數(shù)分別為T1/22.29h，Vd1.49L，AUC20.49109Bq・；h・；L-1，CL0.4510-3L・；h-1.188Re-HAb18F（ab）2特異性聚集于腫瘤中，在瘤體中以較高水平維持較長時間，在正常組織中代謝較快，主要從腎臟中排泄.結(jié)論188Re-HAb18F（ab）2在荷肝癌裸鼠體內(nèi)藥代動力學符合線性一室模型.Keywords:188Re；pharmacokinetics；nudemice；monoclonalantibody；hepatomaAbstract:AIMToestablishthepharmacokineticmodelof188Re-HAb18F（ab）2andtoevaluateitspharmacokineticparameters.METHODSThemicewassacrificedatdifferenttimeafter188Re-HAb18F（ab）2i.v.injectedintohepatoma-bearingnudemice.Thebloodandorgansradioactivityweremeasured.Theconcentrationsof188Re-HAb18F（ab）2wereevaluatedwithapharmacokinetic3P97software.RESULTSParametersof188Re-HAb18F（ab）2wereT1/22.29h，Vd1.49L，AUC20.49109Bq・；h・；L-1，CL0.4510-3L・；h-1.188Re-HAb18F（ab）2waslocatedspeciallyinhepatomawithhighselectivereactivityofHAb18F（ab）2.188Re-HAb18F（ab）2wasmainlyeliminatedbykidney.CONCLUSIONPharmacokineticsof188Re-HAb18F（ab）2conformstoal-compartmentmodel.0引言188Re是一種新型放射性核素，其良好的核物理性質(zhì)使其有望成為一種新的治療性核素.現(xiàn)對188Re-HAb18F（ab）2在荷瘤鼠體內(nèi)的藥代動力學進行研究1，證明其是否選擇性在瘤體內(nèi)聚集，建立藥代動力學模型，獲取藥代動力學參數(shù)，為188Re-HAb18F（ab）2臨床治療提供依據(jù).1材料和方法1.1腫瘤動物模型選5周齡BALB/c裸鼠（由本校實驗動物中心提供），于其右下肢根部sc人HCC（hepatocellularcarcinoma，肝細胞肝癌，由中科院上海細胞所細胞庫提供）細胞1107（0.2mL），腫瘤長至直徑1cm左右時待用.1.2McAb及放射性核素標記HAb18為鼠源性抗人肝細胞瘤McAb，IgG1亞型.HAb18IgG用胃蛋白酶消化法消化，經(jīng)Phenyl-sepharoseHP柱（Amershampharmacia）純化，即得純度大于95%的F（ab）2，SDS-PAGE鑒定其相對分子質(zhì)量約為11104.采取188Re直接法標記F（ab）22，即F（ab）2經(jīng)2-硫基乙醇還原后，加入含有穩(wěn)定劑葡庚糖酸鈉的亞錫和188ReO4-，37反應(yīng)23h.紙層析法測定標記率>；90%.1.3荷瘤鼠體內(nèi)分布研究荷瘤裸鼠15只，隨機分為5組，每組3只，每只鼠尾靜脈給188Re-HAb18F（ab）21.85MBq，分別于1，4，18，24和48h各處死1組，取血及各主要臟器，稱重，用-放射免疫計數(shù)儀（國營262廠醫(yī)用核儀器分廠）測定單位重量各臟器中每分鐘閃爍數(shù)值（cpm），求取腫瘤與非腫瘤臟器單位重量的cpm比值（T/NT）及每克臟器中攝入放射性占給藥量的百分比（%ID・；g-1）.1.4藥代動力學研究用3P97藥代動力學軟件計算血及各臟器藥物濃度值，求取藥代動力學參數(shù)，建立藥代動力學模型.2實驗結(jié)果Tab1示各時間點藥物濃度值，表明其生物學分布.血藥濃度經(jīng)3P97軟件計算，顯示其符合線性一室模型，在初值擬合曲線也反映一室模型的擬合效果滿意，F(xiàn)ig1為藥代動力學曲線.血藥動力學參數(shù)見Tab2.各組織半衰期（h）是:腫瘤（32.99），血（2.29），肺（5.67），骨（11.76），肌肉（9.22），小腸（7.47），大腸（15.08），胃（11.49），心臟（2.29），肝（5.67），脾（19.76），腎（11.53）.3討論188Re發(fā)射2110kev射線，155kev射線，半衰期17h，具有良好的核物理性能，有望成為新的治療性核素.188Re從188W-188Re發(fā)生器得到，來源方便，具有很高的放射性比活度，利于單抗標記.動物實驗證實，188Re標記的肝癌單抗片段HAb18F（ab）2具有明顯的抑癌效應(yīng).而有關(guān)188Re-HAb18F（ab）2在動物體內(nèi)的藥代動力學研究未見全面報道3，4.從Tab1中可見，188Re-HAb18F（ab）2在腫瘤中放射性以較高水平維持較長，在18h仍維持較高水平.從T/NT值中可看出，除腎臟外，其余T/NT值均較高，說明其特異性地集中于腫瘤細胞，在其他臟器中代謝較快，有利于減少其對正常組織的損傷.瘤/血比值在48h達到最高，瘤/肝比值在18h達到最高.從Tab1中還可見，腫瘤在給藥后1，4和24h的放射性分別占3.83%，6.48%和9.47%，肝臟的放射性分別占1.64%，2.59%和3.19%，腎臟放射性分別占76.2%，78.8%和76.3%，這提示抗體片段及其代謝物主要經(jīng)過腎臟排泄，胃、肌肉、肺、脾等分布較少5-8.188Re-HAb18F（ab）2在腫瘤組織的半衰期達32.99h，均比其他組織的半衰期長，說明188Re-HAb18F（ab）2選擇性地在腫瘤部位濃聚，且衰減速度慢.這也說明單克隆抗體對腫瘤組織的特異性結(jié)合，而對正常組織的毒副作用小.血藥濃度經(jīng)3P97軟件計算及從Fig1中可見，188Re-HAb18F（ab）2在血中代謝為線性一室模型，說明188Re-HAb18F（ab）2瞬間分布至全身，且藥物濃度保持動態(tài)平衡，藥物恒比規(guī)律從消除器官中消除，血液中藥物濃度與消除速度成正比，藥物的血漿半衰期不變.藥物濃度越高，消除速度越快，藥物濃度越低，消除速度越小9-12.表1188Re-HAb18F（ab）2在1，4，18，24和48h在荷肝癌裸鼠體內(nèi)分布略表2188Re-HAb18F（ab）2在荷瘤鼠體內(nèi)藥代動力學參數(shù)略圖1略188Re-HAb18F（ab）2在血液中的半衰期為2.99h，而在腫瘤中的半衰期為32.99h，放射性在腫瘤組織中減少之前，已從血中代謝一部分，使全身血液循環(huán)血中放射性減少.同時188Re-HAb18F（ab）2血液半衰期為2.29h也遠小于188Re物理半衰期17h，這樣188Re-HAb18F（ab）2可在體內(nèi)經(jīng)血液迅速消除，具有良好的臨床應(yīng)用價值13-15.參考文獻:1JvweidM，SharkeyRM，SwayneLC.Pharmacokinetics，dosimetryandtoxicityofrhenium-188-labeledanti-carcinoem-bryonicantigenmonoclonedantibody.MN-14，ingastroin-testinalcancerJ.JNuclMed，1998；39:34-42.2BianHJ，ChenZN，LouC，MiL，WangJ，YueXL.188Re-la-beledHAb18F（ab）2ofhepatomaradioimmunoimagingJ.Zhongliu（Tumor），2000；20（3）:181-183.3Iznaga-EscobarN.188Re-directlabelingofmonoclonalantibodyforradioimmunotherapyofsolidtumors:Biodistrobution，nor-malorgandosimetry，andtoxicologyJ.NuclMedBiol，1998；25:441-447.4OlivaJ，PimentelG，PeraltaR.RadioimmunoscintigraphyofcolorectalcancerusingtheantiCEAmonoclonalantibodyBW431/26.FinalresultsJ.RevEspMedNucl，1999；18:5-15.5LanQ，HuangQ，ZhuangDL，WuYF，SunZF.StudyonthepharmacokineticsofimmunoradiotherapeuticagentS-MAbSZ39inglioma-bearingnudemiceJ.ZhongguoYaoxueZazhi（ChinPharmJ），1999；34（10）:683-686.6GeZH，LiH，LiuCH，RuanJX.Pharmacokineticsoftricyclop-inatehydrochlorideinmiceJ.ZhongguoYaolixueTongbao（ChinPharmacologicalBulletin），1998；14（4）:322-325.7FritzbergAR.Antibodypretargetedradiotherapy:Anewap-proachandasecondchanceJ.JNuclMed，1998；39:20N-36N.8DuanXD，ChenZN，BianHJ，WenAD，F(xiàn)engQ.Pharma-cokineticsoftechnetium-99mlabeledanti-hepatomamonoclonalantibodyHAb18anditsF（ab）2fragmentinmiceJ.Zhong-guoYaoxueZazhi（ChinPharmJ），2000；35（7）:465-467.9DickmanS.AntibodiesstageacomebackincancertreatmentJ.Science，1998；280:1196-1197.10DeNardoSJ，KukisDL，MiersLA.Yttrium-90-DOTA-peptide-chimericL6radioimmunoconjugate:Efficacyandtoxicityinmicebearingp53mutanthumanbreastcancerxenograftJ.JNuclMed，1998；39:842-849.11KairemoKJ，StrbergS，NikulaTK.Expressio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