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模塊檢測(cè)卷(五)(時(shí)間:60分鐘滿分:100分)1.(5分)(2019中原名校質(zhì)量考評(píng))營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后,微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機(jī)制中的某些酶被破壞,使代謝過(guò)程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物,為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實(shí)驗(yàn)人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程的接種方法為_(kāi),與基本培養(yǎng)基(只含碳源、無(wú)機(jī)鹽、水)相比,待測(cè)培養(yǎng)皿中的特有的成分有_。(2)進(jìn)行過(guò)程培養(yǎng)時(shí),應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上,原因是_。從_培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。采用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)為了進(jìn)一步完成對(duì)初檢的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定,實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行了如下操作:用接種針挑取_(選填“菌落A”或“菌落B”)接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中,28 振蕩培養(yǎng)12天后,離心,取沉淀物用_洗滌3次,并制成菌懸液。吸取1 mL菌懸液加入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,傾注15 mL融化并冷卻至4550 的基本培養(yǎng)基,待其冷凝后用記號(hào)筆在皿底劃分五個(gè)區(qū)域,標(biāo)記為A、B、C、D、E。在劃分的五個(gè)區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末(如下表所示),經(jīng)培養(yǎng)后,觀察生長(zhǎng)圈出現(xiàn)的區(qū)域,從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。組別所含氨基酸A組氨酸蘇氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸蘇氨酸賴氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸賴氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸絲氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸絲氨酸在上述鑒定實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基A、D區(qū)域出現(xiàn)生長(zhǎng)圈,說(shuō)明該營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株屬于_。解析(1)根據(jù)過(guò)程培養(yǎng)的效果圖可以判斷,該過(guò)程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。圖示為實(shí)驗(yàn)人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過(guò)程,據(jù)此可知:與基本培養(yǎng)基(只含碳源、無(wú)機(jī)鹽、水)相比,待測(cè)培養(yǎng)皿中的特有的成分有氨基酸。(2)為了防止將特定營(yíng)養(yǎng)成分帶入基本培養(yǎng)基,進(jìn)行過(guò)程培養(yǎng)時(shí),應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培養(yǎng)基或補(bǔ)充了相應(yīng)的氨基酸的基本培養(yǎng)基中生長(zhǎng),因此應(yīng)從題圖中完全培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。采用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是同種菌株的接種位置相同。(3)為了進(jìn)一步完成對(duì)初檢的營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定,結(jié)合(2)的分析可知:用接種針挑取A菌種并培養(yǎng);離心后菌株存在于沉淀物中,為了防止雜菌污染,需取沉淀物用無(wú)菌水洗滌3次,并制成菌懸液。表中信息顯示:A、D區(qū)域含有、其他區(qū)域不含有的氨基酸是天冬氨酸,而實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有A、D區(qū)域出現(xiàn)生長(zhǎng)圈,說(shuō)明營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型。答案(1)稀釋涂布平板法氨基酸(2)防止將特定營(yíng)養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基完全同種菌株的接種位置相同(3)菌落A無(wú)菌水天冬氨酸缺陷型2.(5分)(2019天津市質(zhì)檢)我國(guó)是世界上最大的蘋果生產(chǎn)和消費(fèi)國(guó),蘋果種植面積和產(chǎn)量均占世界總量的40%以上。蘋果除可直接食用外,還可將其制成飲品,如蘋果汁、蘋果酒、蘋果醋等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)日常生活中可直接用_法生產(chǎn)蘋果汁,為了高效地去除蘋果細(xì)胞的細(xì)胞壁,可用_酶處理蘋果。(2)新鮮的蘋果汁可發(fā)酵制成蘋果酒,其原理是_;家庭制作葡萄酒時(shí)無(wú)須另外添加酵母菌,原因是_。(3)醋酸菌常用于蘋果醋的制作,醋酸菌的呼吸作用類型為_(kāi)。若想對(duì)醋酸菌進(jìn)行計(jì)數(shù),則應(yīng)用_法在培養(yǎng)基上進(jìn)行接種。如果每個(gè)平板均接種了0.1 mL稀釋樣品并進(jìn)行培養(yǎng),接種的4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是210、230、470、190,那么稀釋樣品中醋酸菌的數(shù)量為_(kāi)個(gè)/mL。平板劃線法一般不用于活菌計(jì)數(shù)的原因是_。答案(1)壓榨果膠酶和纖維素(2)酵母菌無(wú)氧呼吸能夠?qū)⑵咸烟寝D(zhuǎn)化為酒精葡萄皮上附有野生型的酵母菌(3)有氧呼吸稀釋涂布平板2 100得到的菌落多數(shù)不是單一菌落,菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)(答“菌落連成片,無(wú)法計(jì)數(shù)”也可)3.(5分)(2019山東棗莊調(diào)研)自從法國(guó)科學(xué)家巴斯德證明食品發(fā)酵是由于微生物的作用以來(lái),人們認(rèn)識(shí)到微生物在發(fā)酵食品的加工中起著極其重要的作用,如今形形色色的發(fā)酵食品在食品業(yè)中占有重要的地位?;卮鹣铝信c微生物發(fā)酵、培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題:(1)果酒制作過(guò)程中嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵,這直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物,通常所指的發(fā)酵條件包括_(多選)。A.溫度控制 B.溶氧控制C.pH控制 D.酶的控制(2)蘋果酒在_(填微生物)的作用下,經(jīng)過(guò)深層發(fā)酵可形成蘋果醋。乳酸菌與釀制果醋的菌種在代謝方式上的主要區(qū)別是_。(3)制作泡菜的過(guò)程中,有機(jī)物的干重將_;泡菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類將_。(4)有位同學(xué)在家制作泡菜時(shí),為避免雜菌污染而向泡菜壇中加入了青霉素,結(jié)果發(fā)酵失敗,原因可能是_。(5)在充足的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水的條件下,乳酸菌仍不能正常生長(zhǎng),還需要在培養(yǎng)基中添加_。應(yīng)用稀釋涂布平板法分離乳酸菌時(shí),涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行,但操作過(guò)程中一定要注意防火,不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,其原因是_。解析(1)酵母菌發(fā)酵需要控制條件:溫度1825 ;溶氧控制,即要先通氣后密封;pH控制,偏酸性;利用酵母菌自身的酶進(jìn)行發(fā)酵,不需要對(duì)酶進(jìn)行控制。(2)蘋果醋制備需要醋酸菌,乳酸菌是厭氧型細(xì)菌,醋酸菌是好氧型細(xì)菌。(3)制作泡菜的過(guò)程中,由于乳酸菌呼吸作用的消耗,有機(jī)物的干重將減少,但壇內(nèi)有機(jī)物的種類將增加。(4)青霉素可以抑制幾乎一切含有細(xì)胞壁的生物的生長(zhǎng)繁殖,殺死乳酸菌,因此制作泡菜時(shí)加入了青霉素,會(huì)造成發(fā)酵失敗。(5)在充足的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水的條件下,乳酸菌仍然不能正常生長(zhǎng),還需要在培養(yǎng)基中添加維生素;涂布平板操作過(guò)程中一定要注意防火,不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精。答案(1)ABC(2)醋酸菌乳酸菌是厭氧型細(xì)菌,醋酸菌是好氧型細(xì)菌(3)減少增加(4)青霉素殺死了乳酸菌(5)維生素避免(或防止)引燃燒杯中的酒精4.(5分)溶藻細(xì)菌對(duì)控制水華有非常重要的作用。研究人員從池塘中采集水樣,加入到無(wú)菌錐形瓶中,用搖床在37 下振蕩培養(yǎng)20 min,使其均勻分散成菌懸液,再通過(guò)分離、純化、鑒定得到了溶藻細(xì)菌?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)分離前需用無(wú)菌移液管從菌懸液中吸取菌液1 mL,進(jìn)行梯度稀釋,其目的是_。再取每個(gè)稀釋梯度的菌懸液0.1 mL用_法涂布到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上,每個(gè)梯度做三組,37 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至長(zhǎng)出菌落。(2)若上述是將1 mL菌懸液梯度稀釋106倍,再涂布接種到細(xì)菌固體培養(yǎng)基上,分別形成了260、280、380個(gè)菌落,則原菌懸液中每毫升有細(xì)菌_個(gè),該方法所得測(cè)量值一般比實(shí)際值偏_,原因是_。(3)水華可為藍(lán)藻暴發(fā)所致。研究人員嘗試?yán)萌茉寮?xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量,相關(guān)實(shí)驗(yàn)的示意圖如下。圖中表示實(shí)驗(yàn)步驟。如果在步驟實(shí)驗(yàn)組的每個(gè)培養(yǎng)皿中做三個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn),可采取的做法是:_。為完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案,應(yīng)增設(shè)對(duì)照組,可采取的做法是:_。藍(lán)藻通常呈藍(lán)綠色,觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)褪色空斑,說(shuō)明藍(lán)藻_。答案(1)使水樣中的各種微生物細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)稀釋涂布平板(2)2.7109低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(3)在每個(gè)培養(yǎng)皿中,選擇三個(gè)不同位置,各滴加等量菌液在每個(gè)培養(yǎng)皿中,選擇三個(gè)不同位置,各滴加等量的、不含溶藻細(xì)菌的細(xì)菌培養(yǎng)液被溶藻細(xì)菌裂解(死亡)5.(5分)(2019河北衡水金卷)本草綱目拾遺中記述:“豆腐又名菽乳,以豆腐腌過(guò)酒糟或醬制者,味咸甘心?!被卮鹣铝袉?wèn)題:(1)在腐乳制作過(guò)程中,起主要作用的微生物是_,該種微生物的細(xì)胞中,含有RNA的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有_。(2)“味咸”是由于在制作過(guò)程中加入了鹽,加鹽的目的除了調(diào)味以外,還有_和_的作用。(3)“甘心”是指在多種微生物的共同作用下,普通豆腐轉(zhuǎn)變成風(fēng)味獨(dú)特的腐乳。從豆腐到腐乳,豆腐中的成分會(huì)發(fā)生一定的變化,其中起主要作用的兩種酶是_。(4)有人發(fā)現(xiàn),三天內(nèi)腐乳發(fā)酵的效果越來(lái)越好,且隨發(fā)酵時(shí)間呈直線上升關(guān)系,則無(wú)法確定發(fā)酵的最佳時(shí)間,若要確定最佳發(fā)酵時(shí)間,還要做的是_。答案(1)毛霉細(xì)胞核、線粒體和核糖體(2)析出豆腐中的水分,使豆腐變硬抑制微生物的生長(zhǎng)(避免豆腐塊腐敗變質(zhì))(3)蛋白酶和脂肪酶(4)延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間,觀察發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所對(duì)應(yīng)的發(fā)酵時(shí)間即為最佳發(fā)酵時(shí)間6.(6分)(2019哈爾濱師大附中調(diào)研)隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高,葡萄酒作為一種具有降血脂、軟化血管、護(hù)心養(yǎng)顏等功效的飲品,日益受到人們的青睞,甚至有很多家庭自制葡萄酒飲用。在葡萄酒自然發(fā)酵的過(guò)程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌,而專業(yè)的葡萄酒釀造過(guò)程還涉及分離和純化酵母菌。請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí),回答下列問(wèn)題。(1)分離和純化酵母菌涉及微生物接種,該過(guò)程要求對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手都要進(jìn)行_處理;對(duì)相關(guān)器皿、工具、培養(yǎng)基等要進(jìn)行_處理。微生物接種最常用的方法為_(kāi)(答出兩點(diǎn))。(2)葡萄酒釀造實(shí)驗(yàn)流程為:挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒。沖洗過(guò)程往往先沖洗葡萄再去除枝梗,原因是_。其中的酒精發(fā)酵指的是酵母菌在無(wú)氧條件下進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的過(guò)程,該化學(xué)方程式為_(kāi)。(3)生活中人們發(fā)現(xiàn)酒會(huì)變酸,而且表面會(huì)出現(xiàn)一層“膜”,該膜是_在液面大量繁殖而形成的。其最適的生長(zhǎng)溫度為_(kāi),用化學(xué)方程式來(lái)解釋酒變酸的原因_。解析(1)為達(dá)到無(wú)菌操作,實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手都要用化學(xué)藥劑或者紫外線等消毒處理,而相關(guān)器皿、工具、培養(yǎng)基等要高壓蒸汽滅菌處理。接種最常用的方法就是課本所介紹的平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)如果先除枝硬,就很可能讓葡萄出現(xiàn)破損,汁液流出,沾染雜菌,影響品質(zhì)。(3)使酒變酸且在酒表面形成菌膜的微生物是醋酸菌,其最適生長(zhǎng)溫度為3035 。答案(1)消毒滅菌平板劃線法和稀釋涂布平板法(2)避免除去枝梗時(shí)葡萄出現(xiàn)破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)C6H12O62C2H5OH2CO2(3)醋酸菌3035 C2H5OHO2CH3COOHH2O7.(5分)(2019全國(guó)大聯(lián)考)2018年1月25日,克隆猴“中中”和“華華”在中國(guó)誕生,并且登上了國(guó)際權(quán)威學(xué)術(shù)期刊細(xì)胞封面。下圖表示克隆猴的基本過(guò)程,據(jù)圖回答:(1)該實(shí)驗(yàn)過(guò)程涉及多種動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù),其中包括核移植技術(shù)。哺乳動(dòng)物核移植技術(shù)可以分為體細(xì)胞核移植和_,前者的難度_(大于/小于)后者。(2)卵母細(xì)胞供體所提供的卵母細(xì)胞,一般要在體外培養(yǎng)到_期,再通過(guò)_去除卵母細(xì)胞中的核。(3)體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合后,經(jīng)激活開(kāi)始分裂得到克隆胚胎,再將胚胎移植入受體動(dòng)物體內(nèi),對(duì)受體動(dòng)物的要求為_(kāi)且_的其他雌性動(dòng)物。(4)若要提高胚胎的利用率,可以采取_的方法,如果此時(shí)胚胎處于囊胚期,則要注意的是_。解析(1)供核細(xì)胞分為體細(xì)胞和胚胎細(xì)胞,由于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易,而體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難。(2)在自然情況下,經(jīng)排卵后,卵母細(xì)胞在輸卵管中發(fā)育至減數(shù)第二次分裂中期,等待精子前來(lái)受精,此時(shí)的卵母細(xì)胞更成熟,且細(xì)胞核的位置靠近第一極體,可用顯微操作儀,用吸管一并吸出。(3)哺乳動(dòng)物發(fā)情排卵后,不管是否妊娠,在一段時(shí)間內(nèi),同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的,為供體的胚胎移入提供了相同的生理環(huán)境。(4)用分割針或分割刀片將早期胚胎切開(kāi),每一份都可發(fā)育成個(gè)體,從而提高了胚胎的利用率。對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。答案(1)胚胎細(xì)胞核移植大于(2)減數(shù)第二次分裂中顯微操作(3)同種相同生理狀態(tài)(4)胚胎分割要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均分8.(7分)(2019安徽知名示范性高中聯(lián)考)轉(zhuǎn)基因豬在異種器官移植、生物反應(yīng)器和疾病模型等方面有廣泛應(yīng)用。下圖為轉(zhuǎn)基因豬的培育過(guò)程,請(qǐng)分析回答:(1)體外培養(yǎng)豬胎兒成纖維細(xì)胞,需定期更換培養(yǎng)液,防止_對(duì)細(xì)胞自身造成傷害。當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁時(shí),可分瓶進(jìn)行_培養(yǎng),讓其繼續(xù)增殖。通常選用10代以內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行核移植,目的是保持細(xì)胞正常的_。(2)為便于檢測(cè)與篩選,用紅色熒光蛋白基因作為_(kāi)基因參與構(gòu)建基因表達(dá)載體,將其導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞中,篩選發(fā)紅色熒光的細(xì)胞與_期的去核卵母細(xì)胞融合,使供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,利用物理或化學(xué)方法激活重組細(xì)胞,使其完成_形成重組胚胎。采用機(jī)械方法進(jìn)行_使代孕豬產(chǎn)下同卵雙胎或多胎。(3)與成年動(dòng)物體細(xì)胞相比,用胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物的成功率較高,原因是_。解析(1)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)會(huì)逐漸被消耗,且離體的動(dòng)物細(xì)胞代謝產(chǎn)生的廢物會(huì)沉積在細(xì)胞培養(yǎng)液中,對(duì)細(xì)胞自身造成傷害,所以要定期更換培養(yǎng)液。原代培養(yǎng)時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁時(shí),要用胰蛋白酶等處理后分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。但細(xì)胞增殖代數(shù)過(guò)多,細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)變異,為了保持正常的二倍體核型,往往選擇10代以內(nèi)的細(xì)胞。(2)從題干信息來(lái)看,紅色熒光蛋白基因的表達(dá)產(chǎn)物可以用來(lái)篩選細(xì)胞,所以該基因起到了標(biāo)記基因的作用,動(dòng)物體細(xì)胞核移植往往要選處在減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞;得到的重組細(xì)胞要完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程才能形成重組胚胎,但往往還需要借助物理、化學(xué)等技術(shù)手段;將重組細(xì)胞培育至早期胚胎時(shí),若想獲得多個(gè)胚胎可以對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割,之后再移植,進(jìn)而獲得同卵雙胎或多胎。(3)胚胎細(xì)胞相對(duì)于成年動(dòng)物體細(xì)胞的分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易,所以用胚胎細(xì)胞克隆動(dòng)物的成功率較高。答案(1)細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累傳代二倍體核型(2)標(biāo)記M(或減)中細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程胚胎分割(3)胚胎細(xì)胞的分化程度低于成年動(dòng)物的體細(xì)胞,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易9.(10分)(2019河北唐山市質(zhì)檢)乳腺炎和口蹄疫分別是由細(xì)菌和病毒引起的危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的兩種嚴(yán)重疾病。研究者利用生物技術(shù)培育出轉(zhuǎn)乳鐵蛋白肽(抗細(xì)菌)基因和人干擾素(抗病毒)基因的雙轉(zhuǎn)基因奶牛新品種。下圖1為基因表達(dá)載體,圖2為培育流程。(1)培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有_(至少2項(xiàng))。(2)牛乳鐵蛋白肽基因能在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá),人干擾素基因則可在全身細(xì)胞表達(dá),這與構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)_的選擇有關(guān)。據(jù)圖可知,干擾素基因與_基因可同時(shí)轉(zhuǎn)錄,基因工程過(guò)程中主要的工具酶有_。(3)將基因?qū)肱L撼衫w維細(xì)胞前,需用_將其處理成單個(gè)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞無(wú)法直接發(fā)育成個(gè)體,需要去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo),以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核的_。(4)研究者利用_技術(shù)篩選出_(填“牛乳鐵蛋白肽”或“干擾素”)基因成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植。解析(1)從圖中分析,培育雙轉(zhuǎn)基因奶牛涉及的生物技術(shù)有基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),以及核移植和胚胎移植等。(2)基因在不同的細(xì)胞中選擇性表達(dá)與啟動(dòng)子有關(guān)。分析圖1,干擾素基因和新霉素抗性基因使用的啟動(dòng)子相同,因此二者可以同時(shí)轉(zhuǎn)錄?;蚬こ踢^(guò)程中主要的工具酶為限制酶和DNA連接酶。(3)用胰蛋白酶將動(dòng)物組織處理成單個(gè)細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。(4)人干擾素基因可在全身細(xì)胞中表達(dá),因此研究者利用抗原抗體雜交技術(shù)篩選出干擾素基因成功表達(dá)的胚胎進(jìn)行移植。答案(1)基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植(至少2項(xiàng))(2)啟動(dòng)子新霉素抗性限制酶、DNA連接酶(3)胰蛋白酶全能性(4)抗原抗體雜交干擾素10.(8分)(2019西安市調(diào)研)利用某高致病性病毒特異性的VP40抗原蛋白來(lái)制備單克隆抗體的流程圖如下,請(qǐng)回答:(1)過(guò)程利用質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體,質(zhì)粒的來(lái)源主要是_,質(zhì)粒能夠在受體細(xì)胞中_,是其作為運(yùn)載體的原因之一。(2)過(guò)程用Ca2處理大腸桿菌,使其處于_。在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素,能獲得含有目的基因的受體菌,原因是_。在分子水平上,可以利用_檢測(cè)VP40基因是否進(jìn)入大腸桿菌。(3)用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_。對(duì)雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行_培養(yǎng)和抗體檢測(cè),最終獲得單克隆抗體。解析(1)質(zhì)粒是細(xì)菌和酵母菌等生物中獨(dú)立于染色體(或擬核)以外的雙鏈環(huán)狀DNA分子,具有自主復(fù)制能力。質(zhì)粒能夠在受體細(xì)胞中自我復(fù)制并且穩(wěn)定存在,這是質(zhì)粒作為運(yùn)載體的原因之一。(2)采用Ca2處理大腸桿菌,可使其處于感受態(tài)(一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài))。因?yàn)橘|(zhì)粒上有四環(huán)素抗性基因,所以在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素,能篩選獲得含有目的基因的受體菌??刹捎肈NA分子雜交技術(shù)(基因探針)檢測(cè)VP40基因是否進(jìn)入大腸桿菌。(3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是能無(wú)限增殖且能產(chǎn)生專一的抗體。對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后,將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖,最終從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲得大量的單克隆抗體。答案(1)細(xì)菌、酵母菌等自我復(fù)制和穩(wěn)定存在(2)感受態(tài)質(zhì)粒上有四環(huán)素抗性基因(或“受體菌獲得抗四環(huán)素的特性”)VP40基因探針(3)在體外培養(yǎng)條件下能無(wú)限增殖且能產(chǎn)生單一的抗體克隆化11.(7分)(2019山西晉中調(diào)研)為增加菊花的花色類型,研究者從其他植物的cDNA文庫(kù)中提取出花色基因C(圖1),擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花細(xì)胞中。圖3從上到下依次表示EcoR、BamH和Sau3A三種限制酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)。請(qǐng)分析回答:(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因C的原理是_。(2)圖2所示質(zhì)粒被_切割獲得的產(chǎn)物可與圖1所示基因C連接,理由是_。(3)經(jīng)BamH處理后構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞后,基因C不能表達(dá),原因是質(zhì)粒酶切部位的兩端無(wú)_,導(dǎo)致基因C不能_。(4)在添加潮霉素的固體培養(yǎng)基上,_(填“能”或“不能”)篩選出含有插入基因C的重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌單菌落,原因是_。解析(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因c的原理是DNA雙鏈復(fù)制。(2)據(jù)圖3可知,由于BamH和Sau3A兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端,因此圖2所示質(zhì)粒被BamH和EcoR切割獲得的產(chǎn)物可與圖1所示基因C連接。(3)據(jù)圖可知,經(jīng)BamH處理后構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞后,基因C不能表達(dá),原因是質(zhì)粒酶切部位的兩端無(wú)啟動(dòng)子和終止子,導(dǎo)致基因C不能轉(zhuǎn)錄。(4)由于含質(zhì)粒的農(nóng)桿菌和含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌均含有潮霉素抗性基因,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng),所以在添加四環(huán)素的固體培養(yǎng)基上,不能篩選出含有插入基因C的重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌單菌落。答案(1)DNA雙鏈復(fù)制(2)BamH和EcoRBamH和Sau3A兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(3)啟動(dòng)子和終止子轉(zhuǎn)錄(4)不能含質(zhì)粒的農(nóng)桿菌和含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌均含有潮霉素抗性基因,在含潮霉素的培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)12.(8分)(2018江蘇無(wú)錫普通高中期末)重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發(fā)情,產(chǎn)仔率高等優(yōu)點(diǎn),可以作為乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)藥物。下圖是利用轉(zhuǎn)基因兔生產(chǎn)重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答。(1)構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶_切割質(zhì)粒和目的基因,為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用_酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。(2)對(duì)母兔注射_使其超速排卵,并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中最有效的導(dǎo)入技術(shù)是_。(3)將受精卵置于37 的_的氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后移植到代孕兔的輸卵管中,代孕兔需經(jīng)_處理。(4)子代兔需要經(jīng)過(guò)篩選過(guò)程才能獲得生產(chǎn)人纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器,原因有_、_。解析(1)分析圖示可知:構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體時(shí),目的基因(rhPA基因)插入到了質(zhì)粒上的Xho酶切位點(diǎn)的下方,說(shuō)明是用限制酶Xho切割質(zhì)粒和目的基因的。依據(jù)乳腺特異性表達(dá)載體的組成可知:為獲得乳腺特異性表達(dá)載體,使重組質(zhì)粒線性化,需用Sal和Not酶進(jìn)行切割。(2)對(duì)母兔注射促性腺激素使其超數(shù)排卵,并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中,常采用的最有效的導(dǎo)入技術(shù)是顯微注射技術(shù)。(3)將受精卵置于37 的95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后,移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的代孕兔的子宮中,以使該受精卵繼續(xù)發(fā)育為子代。(4)由于只有部分子代兔導(dǎo)入了人纖溶酶原激活劑基因,而且公兔不能表達(dá)人纖溶酶原激活劑,所以子代兔需要經(jīng)過(guò)篩選過(guò)程才能獲得生產(chǎn)人纖溶酶原激活劑的乳腺生物反應(yīng)器。答案(1)XhoSal和Not(2)促性腺激素顯微注射技術(shù)(3)95%空氣和5%CO2同期發(fā)情 (4)只有部分子代兔導(dǎo)入了人纖溶酶原激活劑基因 公兔不能表達(dá)人纖溶酶原激活劑13.(8分)(2018四川南充高級(jí)中學(xué)檢測(cè))白菜、甘藍(lán)均為二倍體,體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為20、18。“白菜甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來(lái)的蔬菜新品種,它具有生長(zhǎng)期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。如圖是“白菜甘藍(lán)”的雜交過(guò)程示意圖,回答下列問(wèn)題:(1)為了得到原生質(zhì)體需先用_和_來(lái)處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞。(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有多種,常用的物理方法有_,融合完成的標(biāo)志是_。由雜種細(xì)胞得到白菜甘藍(lán)還需要經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù),其中需要避光培養(yǎng)的步驟是_。(3)如圖通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”體細(xì)胞染色體數(shù)為_(kāi);通常情況下,白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的,原因是_。若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話,得到的后代應(yīng)含_條染色體。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是_。解析(1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,根據(jù)酶的專一性原理,可采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法包括:物理方法(離心、振動(dòng)、電激)和化學(xué)方法(聚乙二醇);融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁;將雜種細(xì)胞培育成雜種植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),包括脫分化和再分化兩個(gè)階段,其中脫分化過(guò)程要避光,再分化過(guò)程需光。(3)如圖通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜甘藍(lán)”體細(xì)胞染色體數(shù)為201838;通常情況下,由于白菜和甘藍(lán)之間存在生殖隔離,因此白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的;若對(duì)白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話,得到的后代的體細(xì)胞染色體數(shù)應(yīng)為19。(4)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)最大的優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,培育作物新品種。答案(1)纖維素酶果膠酶(2)離心、振動(dòng)、電激再生出新的細(xì)胞壁脫分化(3)38存在生殖隔離19(4)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,培育作物新品種14.(8分)(2018山東煙臺(tái)一模)如圖表示利用小鼠胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)做的研究,分析回答下列問(wèn)題。(1)a過(guò)程表示基因工程,則其核心步驟是_。該過(guò)程所使用的工具酶有_。(2)b過(guò)程可增加ES細(xì)胞的數(shù)量,若想從早期胚胎中獲得更多的ES細(xì)胞,可將早期胚胎培養(yǎng)至_(時(shí))期。d過(guò)程移入的胚胎能夠存活,是因?yàn)榇凶訉m不會(huì)對(duì)其發(fā)生_。同時(shí)能與受體子宮建立正常的_聯(lián)系。用肝癌細(xì)胞作抗原刺激B淋巴細(xì)胞,再將此淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物_,該產(chǎn)物與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”,從而定向殺死小鼠體內(nèi)的肝癌細(xì)胞。(3)上述研究過(guò)程中使用的技術(shù)有_(至少3個(gè))。若要培養(yǎng)試管動(dòng)物,除以上技術(shù)外,還需要運(yùn)用_技術(shù)。解析(1)圖中a表示將致癌基因?qū)胄∈蟮呐咛ジ杉?xì)胞(基因工程),b表示胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng),c表示利用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎,d表示胚胎移植技術(shù),最終獲得轉(zhuǎn)基因小鼠?;蚬こ痰暮诵牟襟E為基因表達(dá)載體的構(gòu)建,該過(guò)程所使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶。(2)通過(guò)胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng),可以獲得更多的ES細(xì)胞,其采用的技術(shù)屬于細(xì)胞工

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