2018年藥物分析項目18在用.ppt

,第十八章 藥物制劑分析概論 Chapter18 The analysis of finished pharmaceutical product 劉雨農,1,1,2,3,4,藥物制劑的類型及其分析特點,片劑分析,注射劑分析,復方制劑分析,5,第一節(jié)藥物制劑類型及其分析特點,一、藥物制劑類型 二、藥物制劑的分析特點 三、藥物制劑的穩(wěn)定性和相容性試驗 四、藥物制劑的過程分析,原料藥經過一定的生產工藝制成適合于應用的形式,稱為藥物制劑(或劑型)。,一、藥物制劑的類型,二、藥物制劑的特點,（一）藥物制劑性狀分析的特點：僅包括感觀。 （二）藥物制劑鑒別的特點：弱化原料藥已鑒別項目 （三）藥物制劑檢查的特點：包括雜質、劑型、安全性 （四）藥物制劑含量測定的特點：需預處理排除輔料干擾,1.藥物的穩(wěn)定性：指有效期內在一定的溫度、濕度、光照等條件下，藥物保持其物理、化學、微生物學、藥理學及毒理學特性的能力。變化越小越穩(wěn)定。 2.藥物的穩(wěn)定性試驗 （1）影響因素試驗：了解影響因素，降解途徑及產物 （2）加速試驗：超常貯藏條件下考察 （3）長期試驗：接近實際貯藏條件下考察,三、藥物制劑的穩(wěn)定性和相容性試驗,3.藥物的相容性：指組成藥物的各部分之間相互兼容，不發(fā)生物理、化學、微生物學相互作用的能力。 參照影響因素試驗考察藥物與藥物、藥物與包材相容性,1.離線分析法：在生產過程中抽樣，在實驗室分析； 2.在線分析法：直接在生產環(huán)節(jié)自動采樣分析，實時監(jiān)控；,四、藥物制劑的過程分析,第二節(jié) 片劑分析,一、性狀分析：應符合ChP2015四部“制劑通則”片劑項下規(guī)定。 二、鑒別試驗：應排除輔料干擾 三、劑型檢查：常規(guī)檢查重量差異和崩解時限 四、含量測定：需預處理排除輔料干擾后進行 五、輔料及包材的分析：按ChP2015四部通則進行,片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑。,第二節(jié) 片劑分析,一、性狀 外觀完整光潔，色澤均勻 符合正文各品種項下的性狀描述 二、鑒別試驗 采用過濾、離心、提取等操作排除輔料干擾，再依據藥物性質，參考相應原料藥的鑒別方法，選24種不同原理的分析方法，組成鑒別試驗。,三、劑型檢查,常規(guī)檢查：重量差異和崩解時限 當主藥與片劑輔料難以混合均勻時，應以含量均勻度檢查替代重量差異檢查 當片劑中的主藥水溶性差時，應以溶出度測定替代崩解時限檢查,（一）重量差異與含量均勻度 重量差異和含量均勻度統(tǒng)稱為劑量單位均勻度（uniformity of dosage units)，系指多個劑量單位中所含藥物量的均勻程度。 ChP2010規(guī)定：標示量不大于25mg或主藥含量不大于25%（g/g）的片劑應檢查含量均勻度。 凡規(guī)定檢查含量均勻度的片劑，不再檢查重量差異。,1. 重量差異檢查法,判斷 超出限度片 2片 超出限度1倍片1片,規(guī)定,糖衣片在包衣前檢查 薄膜衣片在包衣后檢查,取樣品10片（個），按規(guī)定方法分別測定每片（個）以標示量為100的相對含量X，計算X、A、S,A + 1.8 S =？,2. 含量均勻度檢查法,（1）A + 1.80 S15.0,符合規(guī)定,不符合規(guī)定,（2）A + S15.0,（3）A + 1.80 S15.0，且 A+ S15.0,判斷標準,符合規(guī)定,（若改變限度，則改變15.0）,（二）崩解時限與溶出度 崩解時限（disintegration）系指口服固體制劑應在規(guī)定時間內，于規(guī)定條件下全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的囊殼外，全部通過篩網。如有少量不能通過篩網，應已軟化或輕質上漂且無硬心。 溶出度（dissolution）系指在規(guī)定條件下藥物從片劑等制劑中溶出的速率和程度。 凡規(guī)定檢查溶出度的制劑，不再檢查崩解時限。,儀器：升降式崩解儀.（藥典附錄XA) 主要結構為能升降的金屬支架與下端鑲有篩網的吊藍,并附有擋板。,1. 崩解時限檢查,規(guī)定 素片 15（37） 薄膜衣片30（37） 糖衣片 60（37） 泡騰片 5 （1525） 腸溶衣片=120（鹽酸溶液） 60（pH6.8）,2. 溶出度測定方法 取6片（個）分別置溶出度儀的6 個轉籃（或燒杯）中，370.5恒溫 下，在規(guī)定的溶液里按規(guī)定的轉速操 作，在規(guī)定時間內測定藥物的溶出量。,Ch.P. 轉籃法、漿法、小杯法,溶出度儀,轉籃法,漿法,1000ml,小杯法,250ml,適用于含量較低的片劑溶出度,3. 片劑釋放度的測定,釋放度 藥物從緩釋制劑、控釋制劑、腸溶制劑及透皮貼劑等在規(guī)定條件下釋放的速率和程度。,注意 凡檢查釋放度的制劑，不再進行崩解時限的檢查,釋放度測定方法 第一法 用于緩釋、控釋制劑 至少三個時間點取樣 第二法 用于腸溶制劑 酸中釋放量、緩沖液釋放量 第三法 用于透皮貼劑 漿法,第一法至少在三個時間點取樣，并須及時補充與所取溶出液體積相同的溶出介質。 第一取樣時間點為0.52小時，作為判斷制劑突釋的依據； 第二取樣時間點為累積釋放量為50%的時間，表征制劑的釋藥特性； 最后取樣時間點為累積釋放量為75%以上的時間，該點可表征制劑釋藥的完全程度。,預處理,干擾：氧化還原滴定；排除：預處理或除去改用其他測定法,四、含量測定 （一）糖類的干擾和排除,排除 1. 改用氧化電位稍低的氧化劑,排除 2. 改用非氧化還原測定方法,酸堿滴定法 非水滴定法 沉淀滴定法 光譜法 色譜法,（二）硬脂酸鎂的干擾和排除 硬脂酸鎂和棕櫚酸鎂,1. 干擾：配位滴定法；排除：加掩蔽劑，或提取后測定,9.7 pH 12,pH9 Mg2+不與EDTA反應 pH12 Mg2+ Mg(OH)2,排除（1）改變pH,（2）掩蔽法,2. 干擾,硬脂酸根離子在g.HAc中堿性,亦消耗HClO4滴定液,非水堿量法,（2）提取法,提取,USP,Ch.P.,g.HAc,CHCl3,（3）改用其他方法,二羥丙茶堿 非水堿量法,二羥丙茶堿片 UV法,第三節(jié) 注射劑分析,一、性狀分析：應符合正文各品種項下的性狀描述 二、鑒別試驗：輔料不干擾時參考相應原料藥的鑒別方法 三、劑型檢查及安全性檢查：按照ChP2015四部“制劑通則”注射劑項下規(guī)定項目檢查裝量、滲透壓摩爾濃度、可見異物、不溶性微粒、細菌內毒素或熱原；按照ChP2015四部“指導原則”進行安全性檢查。 四、含量測定：直接測定或排除溶劑、輔料干擾后測定 五、輔料及包材的分析：實施嚴格控制,一、性狀分析： 溶液型注射液應澄明；混懸型若有可見沉淀，振搖時應容易分散均勻；乳狀液型應穩(wěn)定，不得有相分離現象。 符合正文各品種項下的性狀描述 二、鑒別試驗 輔料不干擾，依據藥物性質，參考相應原料藥的鑒別方法，選24種不同原理的分析方法，組成鑒別試驗。,三、劑型檢查及安全性檢查： 按照ChP2015四部“制劑通則”注射劑項下規(guī)定項目檢查裝量：不得少于標示量 滲透壓摩爾濃度：每千克溶劑中溶質的毫滲透壓摩爾為單位。 采用測量溶液的冰點下降來間接測定。 、 可見異物：不得有可見異物 不溶性微粒：應用光阻法或顯微計數法控制大小及數量 細菌內毒素或熱原：應符合規(guī)定 按照ChP2015四部“指導原則”進行安全性檢查。,燈檢法在規(guī)定條件下目視可以觀察到的不溶性物質，其粒度或長度通常大于50m，在帶有遮光板的日光燈（光照度可在 10004000lx調節(jié)）下用肉眼檢視可見異物 。,光散射法,（四） 不溶性微粒 適用范圍 溶液型靜脈用注射液 注射用無菌粉末 注射用濃溶液 測定方法 光阻法 顯微計數法,照不溶性微粒檢查法檢查,不溶性微粒檢查方法：光阻法 （1）狹小檢測區(qū)域 （2）微粒阻擋入射光 （3）信號強度變化 （4）信號頻度變化,不溶性微粒檢查方法：顯微計數法 （1）抽濾、洗滌 （2）干燥 （3）顯微測量（100）,（五）無菌：照無菌檢查法檢查應符合規(guī)定。,（五） 無菌檢查 方法 直接接種法 薄膜過濾法（孔徑0.45mm）,兩種方法均由陽性對照、陰性對照和供試品檢查三部分組成。,無菌檢查方法：（1）直接接種法 好氧菌、厭氧菌：硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基 真菌：改良馬丁培養(yǎng)基 接種后培養(yǎng)14天 陽性對照 陰性對照,（2）薄膜過濾法,薄膜過濾法,方法驗證：檢驗量的供試品在檢驗條件下無抑菌作用,（六） 細菌內毒素或熱原 細菌內毒素 照細菌內毒素檢查法 檢查 熱原照熱原檢查法檢查,1. 細菌內毒素 細菌細胞壁的組分，由脂多糖組成。 當細菌死亡或自溶后便會釋放出內毒素。因此，細菌內毒素廣泛存在于自然界中。如自來水中內毒素的含量為1100 EU/ml。 熱原主要來源于細菌內毒素 熱原檢查和細菌內毒素檢查擇一即可。,細菌內毒素檢查原理：鱟試劑與細菌內毒素的凝集反應。 1956年美國人Bang發(fā)現美洲鱟血液遇革蘭氏陰性菌時會產生凝膠。其后Levin和Bang研究發(fā)現微量革蘭氏陰性菌內毒素也可以引起凝膠反應，從而創(chuàng)立了鱟試劑檢測法。,鱟試劑是從鱟的藍色血液中提取變形細胞溶解物，經低溫冷凍干燥而成的生物試劑。目前國際上銷售的鱟試劑有兩種，一種稱美洲鱟試劑；另一種稱東方鱟鱟試劑兩者有相同的功效。,在美國，鱟試驗被稱作為“細菌內毒素試驗”收載于1980年20版美國藥典。隨后英、德、意、日以及中國相繼在藥典中收載了這一檢查法。此后鱟試驗逐漸替代家兔熱原試驗，但部分藥品由于自身特殊性無法通過稀釋法消除干擾，因此鱟試驗還無法完全取代家兔熱原試驗。,細菌內毒素 檢查方法：（1）凝膠法 樣品管 陽性對照管 陰性對照管 樣品陽性對照管,細菌內毒素 檢查方法：（2）光度測定法 濁度法：終點濁度法、動態(tài)濁度法 顯色基質法：凝固酶催化底物,2. 熱原檢查法,（1）3只家兔 （2）測定正常體溫 （3）耳靜脈注射 （4）每隔30min測定體溫，6次 （5）最高體溫-正常體溫,2. 熱原檢查法,結果判斷 （1）體溫升高均低于0.6，且體溫升高總和低于1.4。 （2）復試（另取5只），其中體溫升高超過0.6的不超過一只，8只家兔體溫升高總和不超過3.5。,四、含量測定 （一）溶劑水的干擾及其排除 （二）溶劑油的干擾及其排除 （三）抗氧劑的干擾及其排除,（一）溶劑水的干擾及其排除 干擾非水溶液滴定法 排除方法：堿性藥物通過堿化、有機溶劑提取游離藥物；揮干有機溶劑后再測定。,注射用植物油：麻油、茶油、核桃油。 排除的方法： 1. 有機溶劑稀釋法： 對某些含量較高，而測定方法中規(guī)定取樣量較少的注射劑，可經有機溶劑稀釋以使油溶液對測定的影響減至最小。 2. 萃取法：可選擇適當的溶劑，將藥物提出后再進行測定。 3. 柱色譜法,（二）溶劑油的干擾及其排除,常用抗氧劑 Na2SO3 、 NaHSO3 、 Na2S2O3 Na2S2O5,干擾 氧化還原滴定,（三）抗氧劑的干擾及其排除,排除方法 加掩蔽劑 丙酮或甲醛 加酸或加熱使抗氧劑分解 加弱氧化劑氧化,1. 加掩蔽劑 丙酮或甲醛,排除方法,。,2. 加酸或加熱使抗氧劑分解,NaCl + H2SO3,NaCl + H2SO3 +S,先將抗氧劑氧化,3. 加弱氧化劑,五、輔料及包材的分析：實施嚴格控制（p448） （一）輔料的分析： （二）包材的分析：,第四節(jié) 復方制劑分析,一、復方制劑分析的特點： 含兩種或兩種以上有效成分的制劑。 1.高通量分析法：多組分同時分析。常采用HPLC。計算分光光度法。 2.適當分離后，再分析。,二、復方制劑分析示例 復方磺胺甲噁唑片的分析ChP2015（p449）HPLC ChP2010（p451）雙波長分光光度法。,磺胺甲噁唑（SMZ）,甲氧芐啶（TMP）,。,ChP2000采用雙波長紫外-可見分光光度法 混合組分光譜法測定的三種情況,雙波長分光光度法原理,測定波長 A測A樣1 +A干1,參比波長 A參A樣2 +A干2,選擇 A干1A干2,AA測-A參(A樣1+A干1)-(A樣2+A干2) A樣1-A樣2,*干擾組分在此兩個波長處吸收度相等 *被測組分在此兩波長處的A足夠大,1.TMP 2.SMZ 3.SMZ+TMP,SMZ A對 = A257 - A304,TMP A對 = A239 - A295,SMZ A樣 = A257 - A304,TMP A樣 = A239 - A295,例1采用紫外分光光度法測定片劑含量。 取片劑10片，精密稱重，為3.5622g,研細。取上述片粉適量，精密稱重為0.0433g，置250ml量瓶中，加規(guī)定溶劑使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml.置100ml量瓶中加規(guī)定溶劑稀釋至刻度，搖勻，在257nm波長處測定溶液的吸光度為0.485.已知藥物的吸收系數為715，片劑標示量為每片