GB 9695.24-1990 肉與肉制品 膽固醇含量測(cè)定.pdf

中華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)肉與肉制品膽固醇含里測(cè)定G B 9 6 95 . 2 4 一 9 0Me a t a n d m e a t p r o d u c t s -Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f c h o l e s t e r o l1 主題內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了肉與肉制品中膽固醇含量的測(cè)定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于肉與肉制品中膽固醉含量的測(cè)定。2 引用標(biāo)準(zhǔn) G B 9 6 9 5 . 1 肉與肉 制品 游離脂肪含 量的測(cè)定3 原理 肉與肉制品中的脂類(lèi)經(jīng)皂化后， 膽固醉作為不皂化物被提取出 來(lái)， 并與一定量的內(nèi) 標(biāo)物混合后一起注入氣相色譜柱， 求出膽固醇與內(nèi) 標(biāo)物的峰面積比， 根據(jù)工作曲線計(jì)算膽固醉的重量， 以 求得肉與肉 制品中膽固醇含量.4 試劑 所用水均為蒸餾水或相當(dāng)純度的水。4 . 1 無(wú)水乙醚。4 . 2 抓仿( G B 6 8 2 ) ,4 . 3 1 m o l / L 氫氧化鉀( G B 2 3 0 6 ) / 乙醇( G B 6 7 8 ) 溶液。4 . 4 無(wú)水硫酸鈉。4 . 5 膽固醉: 1 . 0 m g / m l , 氯仿溶液。4 . 6 內(nèi)標(biāo)溶液:4 . 6 . 1 5 - a 膽幽烷/ 氯仿標(biāo)準(zhǔn)溶液: 1 . 0 m g / m L .4 . 6 . 2 菜油醇/ 氯仿標(biāo)準(zhǔn)溶液: 3 . 0 m g / m L .4 . 6 . 3 膽固醇與5 -膽街 烷混合液: 上述兩種標(biāo)準(zhǔn)液等體積混合。5 儀器和設(shè)備5 ， 1 實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。5 . 2 氣相色譜儀， 配有F I D檢測(cè)器。6 試樣 按照G B 9 6 9 5 . 1 得到的脂肪。7 . 1分析步驟 不皂化物的提取稱取1 . 0 0 g 脂肪， 置于1 0 m L 容量瓶中 用氯仿定容并搖勻。國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局1 9 9 0 一 1 1 一 1 5 批準(zhǔn)準(zhǔn)確量取該試液1 - - 5 m L , 置于2 5 m L 1 9 9 1 一 1 0 一 0 1 實(shí)施GB 9 6 95 . 2 4 一 9 0具塞試管中， 準(zhǔn)確加入0 . 5 1 m L內(nèi)標(biāo)物溶液( 4 . 6 . 1 ) ， 然后將氯仿蒸干。加入 1 m o l / L氫氧化鉀溶液5 m L , 裝上冷凝管， 在 8 5 9 5 水浴上緩緩皂化 1 h 。取下冷卻至室溫， 全部移入 5 0 m L 分液漏斗中， 用水1 0 m L 洗具塞試管， 洗液并入分液漏斗， 加乙醚 1 0 m L 輕輕振搖， 靜置分層后， 將水相放入原試管中，加乙醚 1 0 m L 振搖， 待分層后， 將乙醚移入分液漏斗內(nèi)。 再用1 0 m L 乙醚提取一次， 此時(shí)分液漏斗中共有3 0 m L 溶液。用水2 -3 m L 洗滌乙醚液， 分層后， 棄去水相， 用無(wú)水硫酸鈉 l o g 干燥后， 將乙醚層移入另一具塞試管中， 通氮?dú)獯蹈珊螅?加入乙 醇1 m L ,了 . 2 色譜條件7 . 2 . 1 色譜分離條件選擇: 對(duì)膽固醉峰要求其理論塔板數(shù)不少于1 6 0 0 ; 膽固醇與菜油醇二者峰分辨率不小于2 . 2 ; 膽固醇的保留時(shí)間在8 - 1 2 m i n 之間; 膽固醇峰強(qiáng)度為滿量程的0 . 2 5 -0 . 5 .7 . 2 . 2 2 %o v - 1 / c h r o m o s o r b W( 6 0 -8 0 目) 3 m m X 2 m ,7 . 2 . 3 柱溫: 2 6 0 C。7 . 2 . 4 進(jìn)樣口及檢測(cè)器溫度: 3 0 0 C o7 . 2 . 5 載氣( 高純氮) 流速: 6 0 m L / m i n ,7 . 3 工作曲線制作7 . 3 . 1 不同配比的膽固醇與5 - a 膽菌烷混合標(biāo)準(zhǔn)液:序號(hào)12345678膽固醉, m g0 . 5 50 . 8 81 . 1 00 . 5 50 . 8 81 . 1 01 . 1 0z . 2 05 -膽w烷, m g0 . 5 5C . 5 50 . 5 51 . 1 00 . 1 01 . 1 01 . 1 51 . 5 5 以表中所列舉的不同組合的膽固醉標(biāo)準(zhǔn)液和5 - a 膽w烷混合樣品置于具塞試管中. 將溶劑通氮?dú)獯蹈珊螅?加入1 m L 乙醇， 取1 -3 匹注人色譜柱中。 從所得到氣相色譜圖求出膽固醇和5 - a 膽w 烷各峰的面積比， 以峰面積比為縱坐標(biāo)， 質(zhì)量比為橫坐標(biāo)， 制作工作曲 線， 此線斜率的倒數(shù)為k 值。7 . 3 . 2 試樣的氣相色譜分析。8 分析結(jié)果的計(jì)算X 一 A ,/ A s殺 k x N S X fa t% X 1 0 0式中: X- 一 樣品中膽固醇含量, m g 八0 0 g ; 擊- 一 膽固醉的峰面積; A , - - 5 - a 膽w烷的峰面積; k - 一 由 工作曲 線求得的膽固醉和5 - a 膽W 烷的質(zhì)量比與峰面積比 的比 值; 環(huán) -. 脂類(lèi)試樣中添加的內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量, m g ; f a t %一 樣品中脂肪的含量; W- 一 脂肪質(zhì)量， 9 。 當(dāng)符合允許差的要求時(shí)， 取兩次測(cè)定的算術(shù)平均值作為結(jié)果， 精確至。 . 1 m g 八0 0 g e9 允許差 同一分析者同時(shí)或相繼兩次測(cè)定結(jié)果之差不得超