細(xì)胞制品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則征求意見稿

第 1 頁/共 28 頁12 細(xì)胞制品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則3 (征求意見稿)45 、前言6 近年來，隨著干細(xì)胞治療、免疫細(xì)胞治療和基因編輯等7 理論技術(shù)和臨床醫(yī)療探索研究的發(fā)展和日益完善，細(xì)胞治療8 擬作為藥品的研發(fā)已成為熱點，為一些重大及難治性疾病提9 供了新的思路和治療方法。為規(guī)范和指導(dǎo)這類產(chǎn)品的開發(fā)與10 研究，撰寫本指導(dǎo)原則。由于細(xì)胞治療類產(chǎn)品技術(shù)發(fā)展迅速11 且產(chǎn)品特異性較強(qiáng)，本指導(dǎo)原則定位于一般性的基本原則，12 當(dāng)個別條款或要求不適用時，應(yīng)具體情況具體分析。13 、范 圍14 細(xì)胞制品是指來源于符合倫理學(xué)要求的細(xì)胞，按照藥品15 的管理規(guī)范，經(jīng)過體外適宜的培養(yǎng)和操作而制成的活細(xì)胞產(chǎn)16 品。本指導(dǎo)原則適用產(chǎn)品的特征應(yīng)符合藥品管理辦法中對17 藥品的定義，并符合以下一些要求：1.來源于人的自體或是異18 體活細(xì)胞，但不包括生殖細(xì)胞及其相關(guān)干細(xì)胞；2.可能與輔助19 材料結(jié)合或經(jīng)過體外誘導(dǎo)分化或進(jìn)行基因改造操作的人源細(xì)20 胞。 21 三、風(fēng)險控制與一般要求22 細(xì)胞制劑所帶來的風(fēng)險很大程度上取決于細(xì)胞的來源、23 類型、性質(zhì)、生產(chǎn)工藝、非細(xì)胞成分和具體治療用途等。不同第 2 頁/共 28 頁24 的細(xì)胞制劑及其制備過程可能會給患者、醫(yī)務(wù)人員或一般人25 群帶來不同程度的風(fēng)險。因此，為控制細(xì)胞制劑及其制備過26 程中的風(fēng)險，應(yīng)本著具體情況具體分析的原則制定風(fēng)險控制27 方案。在細(xì)胞制劑研發(fā)初期，可根據(jù)現(xiàn)有的對該類型產(chǎn)品的28 認(rèn)識及其預(yù)期用途進(jìn)行初步風(fēng)險分析。申請人應(yīng)在整個產(chǎn)品29 生命周期內(nèi)不斷地收集和更新數(shù)據(jù)，進(jìn)一步明確風(fēng)險。30 在評估產(chǎn)品的整體風(fēng)險時，應(yīng)考慮下列因素對產(chǎn)品風(fēng)險31 的影響：細(xì)胞的來源；細(xì)胞操作程度；細(xì)胞的增殖、分化和遷移32 的能力以及活性持續(xù)時間；激活免疫應(yīng)答的能力；使用方式以33 及對受者的預(yù)處理；暴露、培養(yǎng)的時間及細(xì)胞壽命；細(xì)胞和生34 物活性分子或結(jié)構(gòu)材料組成的組合產(chǎn)品；類似產(chǎn)品的經(jīng)驗或35 相關(guān)臨床數(shù)據(jù)的可用性。36 在產(chǎn)品的整體研發(fā)中，應(yīng)不斷綜合各種風(fēng)險因素進(jìn)行分37 析評估，特別是應(yīng)將綜合風(fēng)險分析結(jié)果用于：確定與產(chǎn)品的質(zhì)38 量和安全性相關(guān)的風(fēng)險因素；確定在非臨床和臨床開發(fā)中所39 需數(shù)據(jù)的范圍和重點；確定風(fēng)險最小化措施的過程等。40 細(xì)胞制品中的細(xì)胞來源和獲取過程應(yīng)當(dāng)符合倫理。對于41 制備過程中不合格及臨床試驗剩余的細(xì)胞制品或捐贈物，必42 須進(jìn)行合法、妥善并符合倫理的處理。43 細(xì)胞制品的生產(chǎn)者應(yīng)建立“知情與保密” 管理體系，一方44 面讓供者充分了解細(xì)胞的研究用途和使用情況，另一方面讓45 供者的個人信息得到充分的保護(hù)。第 3 頁/共 28 頁46 細(xì)胞制品的生產(chǎn)者應(yīng)建立產(chǎn)品可追溯的管理體系，以確47 保產(chǎn)品從供者到受試者使用過程中的可追溯性。48 考慮到細(xì)胞制劑的多樣性，因此，鼓勵申請人在項目開發(fā)49 過程中按照藥物研發(fā)與技術(shù)審評溝通交流管理辦法等相關(guān)50 規(guī)定加強(qiáng)與藥品審評中心的溝通交流。51 四、藥學(xué)研究52 （一）一般原則53 細(xì)胞制品的研究與生產(chǎn)應(yīng)符合生物制品的一般要求，生54 產(chǎn)全過程必須符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)定（GMP）的要求并55 嚴(yán)格執(zhí)行，由于涉及活細(xì)胞的操作處置，應(yīng)特別關(guān)注人員、環(huán)56 境、設(shè)備等與之相適應(yīng)的要求。生產(chǎn)工藝過程應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格的57 工藝驗證并建立清晰的關(guān)鍵控制點，應(yīng)建立全過程控制體系，58 生產(chǎn)全過程要求無菌操作，并應(yīng)嚴(yán)格控制生產(chǎn)用原材料和生59 產(chǎn)操作過程中可能引入的外源性污染或交叉污染。應(yīng)建立生60 產(chǎn)隔離系統(tǒng)，保證不同批次產(chǎn)品或不同產(chǎn)品在培養(yǎng)箱、接種61 箱和凍存室內(nèi)等重要環(huán)節(jié)與其他產(chǎn)品隔離開來。制定嚴(yán)格的62 批隔離、生產(chǎn)線清場和操作規(guī)范，嚴(yán)格防止受試者特異性制63 品批次間的混淆。64 細(xì)胞來源的供者應(yīng)符合倫理和國家相關(guān)的法律法規(guī)的要65 求，并根據(jù)產(chǎn)品自身的特點綜合評估供者用于產(chǎn)品生產(chǎn)的合66 理性。一般情況下，采集前應(yīng)對供者進(jìn)行篩查，包括健康狀況67 的全面檢查（如一般信息、既往病史和家族性遺傳病等）、病第 4 頁/共 28 頁68 原微生物的感染篩查和在危險疫區(qū)停留情況的調(diào)查等。69 本原則主要是基于目前的認(rèn)知，對于不同細(xì)胞制品的研70 制生產(chǎn)提出的安全、有效、質(zhì)量可控的一般原則。由于細(xì)胞制71 品種類多、差異大、進(jìn)展快，其風(fēng)險程度不同、性質(zhì)復(fù)雜多變、72 技術(shù)更新迅速，對于不同類型產(chǎn)品，可基于風(fēng)險特征和專項73 控制措施，制訂適合其產(chǎn)品的特有技術(shù)要求。74 （二）生產(chǎn)用材料75 1. 生產(chǎn)用細(xì)胞76 生產(chǎn)用細(xì)胞的獲取、運(yùn)輸、分選、檢驗或保存等操作應(yīng)經(jīng)77 過研究和驗證。生產(chǎn)用細(xì)胞的培養(yǎng)情況、代次、生長特性、保78 存狀態(tài)、保存條件以及檢驗情況等應(yīng)在研究和驗證的基礎(chǔ)上79 予以明確并制定規(guī)范。80 對于可以培養(yǎng)、擴(kuò)增或傳代的細(xì)胞，應(yīng)建立細(xì)胞庫進(jìn)行保81 存。細(xì)胞庫的層級可根據(jù)細(xì)胞自身特性、生產(chǎn)情況和臨床應(yīng)82 用情況綜合考慮。對于不適合建立細(xì)胞庫原代細(xì)胞等，可選83 擇合適的階段對生產(chǎn)用細(xì)胞進(jìn)行檢驗。84 生產(chǎn)用細(xì)胞的檢驗應(yīng)滿足安全性、質(zhì)量可控性或有效性的85 基本要求。應(yīng)關(guān)注終末收獲期細(xì)胞的檢定情況，對研究生產(chǎn)86 用細(xì)胞傳代過程中的穩(wěn)定性、評估傳代相關(guān)的安全性風(fēng)險，87 并明確生產(chǎn)用細(xì)胞的限傳代次。88 2. 其他生產(chǎn)用材料89 應(yīng)建立良好、規(guī)范的生產(chǎn)用材料質(zhì)量管理體系，包括使第 5 頁/共 28 頁90 用風(fēng)險評估、對供應(yīng)商的審計和制定質(zhì)量放行檢測機(jī)制等工91 作程序。應(yīng)明確生產(chǎn)用材料的來源、組成、用途、用量和質(zhì)量92 控制情況。選擇生產(chǎn)用材料時應(yīng)考慮其使用的必要性、安全93 性和對細(xì)胞可能產(chǎn)生的非預(yù)期影響，應(yīng)開展安全性風(fēng)險評估，94 必要時對其殘留量進(jìn)行放行檢測。應(yīng)盡量采用已經(jīng)獲得批準(zhǔn)95 用于人體的或符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)用材料。應(yīng)避免使用對細(xì)96 胞活性或分化程度/狀態(tài)產(chǎn)生非預(yù)期影響、導(dǎo)致細(xì)胞突變，或97 存在致敏可能性（如- 內(nèi)酰胺類抗生素等）的生產(chǎn)用材料。98 細(xì)胞培養(yǎng)過程中，不得使用同種異體人血清或血漿，嚴(yán)禁99 使用疫病流行區(qū)來源的動物血清，應(yīng)嚴(yán)格控制感染性病原微100 生物引入的風(fēng)險。細(xì)胞培養(yǎng)過程中所用的培養(yǎng)基或生長因子、101 細(xì)胞因子和抗體等物質(zhì)的來源應(yīng)清楚，使用情況應(yīng)明確，質(zhì)102 量應(yīng)經(jīng)過驗證，其組成成分應(yīng)具有一定的純度標(biāo)準(zhǔn)并符合無103 細(xì)菌、真菌、分枝桿菌、支原體、致病微生物及低內(nèi)毒素的質(zhì)104 量標(biāo)準(zhǔn)，殘留物質(zhì)應(yīng)對使用者無不良影響（如免疫原性）。105 生產(chǎn)用材料外源因子的檢測應(yīng)滿足輸血操作規(guī)范的要求106 以及技術(shù)發(fā)展對新型外源因子的認(rèn)知。自體使用產(chǎn)品應(yīng)嚴(yán)格107 防止可能存在的外源因子傳播的風(fēng)險。108 對于需要經(jīng)過基因修飾的產(chǎn)品，應(yīng)明確基因修飾過程中采109 用的生產(chǎn)材料的來源、檢測和質(zhì)量控制情況，具體要求可參110 見人基因治療研究和制劑質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則和其他相111 關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)文件。第 6 頁/共 28 頁112 應(yīng)對輔料的使用、用量和質(zhì)量情況加以研究和驗證，證明113 其使用的必要性、安全性和合理性。宜優(yōu)選經(jīng)批準(zhǔn)可用于人114 體的輔料，否則需要開展全面的研究與評估。對于新型的輔115 料應(yīng)開展適當(dāng)?shù)呐R床前安全性研究。116 （三）制備工藝與過程控制117 制備工藝指從供者獲得目的細(xì)胞到細(xì)胞成品輸入到受者118 體內(nèi)的一系列體外操作的過程。研究者應(yīng)進(jìn)行工藝的研究與119 驗證，證明工藝的穩(wěn)健性和可行性，生產(chǎn)工藝中應(yīng)避免細(xì)胞120 發(fā)生非預(yù)期的或異常的轉(zhuǎn)化，并應(yīng)能滿足去除相關(guān)雜質(zhì)的要121 求；需建立規(guī)范的工藝操作步驟、工藝控制參數(shù)、內(nèi)控指標(biāo)和122 廢棄標(biāo)準(zhǔn)，對生產(chǎn)的全過程進(jìn)行監(jiān)控。研究者應(yīng)不斷優(yōu)化制123 備工藝，縮減物理、化學(xué)或生物學(xué)作用對細(xì)胞的特性產(chǎn)生非124 預(yù)期的影響，以及減少雜質(zhì)的引入，如蛋白酶、核酸酶、選擇125 性的抑制劑等。宜采用連續(xù)的制備工藝，如生產(chǎn)過程中有短126 暫的停頓，應(yīng)對細(xì)胞的保持條件和時長進(jìn)行驗證。127 應(yīng)對生產(chǎn)工藝全過程進(jìn)行監(jiān)控，包括生產(chǎn)工藝參數(shù)的監(jiān)測、128 過程控制指標(biāo)的達(dá)成和廢棄指標(biāo)的制定等。申請人應(yīng)在對整129 體工藝的理解和對生產(chǎn)產(chǎn)品的累積經(jīng)驗的基礎(chǔ)上，制定過程130 控制過程中關(guān)鍵的、敏感的步驟或限定參數(shù)，以避免工藝發(fā)131 生偏移。同時，還應(yīng)該對中間體進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，例如，細(xì)胞在132 體外需要進(jìn)行基因修飾或誘導(dǎo)分化，需要關(guān)注并研究和驗證133 基因物質(zhì)設(shè)計的合理性和安全性、基因物質(zhì)的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、基第 7 頁/共 28 頁134 因進(jìn)入細(xì)胞后的整合情況、細(xì)胞的分化情況、細(xì)胞生長特性135 （如惡性轉(zhuǎn)化等）、細(xì)胞的表型和基因型、目的基因的遺傳穩(wěn)136 定性情況，以及轉(zhuǎn)導(dǎo)用基因物質(zhì)或誘導(dǎo)物質(zhì)的殘留情況等方137 面，并開展安全性評估。138 關(guān)于劑型和制品處方，應(yīng)根據(jù)臨床用藥要求和產(chǎn)品自身139 的穩(wěn)定性情況而定。有些細(xì)胞制品在給藥前需經(jīng)過制品成分140 物理狀態(tài)的轉(zhuǎn)變、容器的轉(zhuǎn)變、過濾與清洗、與其他結(jié)構(gòu)材料141 的聯(lián)合，以及調(diào)整給藥劑量等操作步驟，這些工藝步驟的確142 定也應(yīng)該經(jīng)過驗證與研究，并進(jìn)行嚴(yán)格的執(zhí)行與操作。143 （四）質(zhì)量研究與質(zhì)量控制144 1. 質(zhì)量研究145 細(xì)胞制品的質(zhì)量研究應(yīng)選擇有代表性的生產(chǎn)批次，146 應(yīng)選擇合適的生產(chǎn)階段樣品（如初始分離的細(xì)胞、中間體或成147 品）進(jìn)行研究，以說明生產(chǎn)中樣品與終產(chǎn)品的質(zhì)量情況。質(zhì)量148 研究應(yīng)涵蓋細(xì)胞特性分析、功能性分析、純度分析和安全性149 等方面，并且根據(jù)制品的自身特性可再增加其他相關(guān)的研究150 項目。151 細(xì)胞特性研究包括細(xì)胞鑒定（基因型、表型）、分化潛能152 研究、表面標(biāo)志物的表達(dá)、生化活性、對外源性刺激的應(yīng)答和153 表達(dá)產(chǎn)物的定性與定量的研究等方面。異體來源的細(xì)胞成分，154 可采用遺傳多態(tài)性的鑒定方法。對于預(yù)期產(chǎn)品為多種不同類第 8 頁/共 28 頁155 型或不同基因型/表型細(xì)胞所組成的混合物時，應(yīng)對細(xì)胞的混156 合特性進(jìn)行鑒定研究和定量質(zhì)控。157 功能性分析，應(yīng)針對細(xì)胞的性質(zhì)、特點和預(yù)期用途等，建158 立功能性研究的方法，并用于研究與分析。研究中應(yīng)考慮到159 產(chǎn)品的作用機(jī)制（細(xì)胞直接作用、細(xì)胞分泌因子作用或是其他）160 ，結(jié)合臨床應(yīng)用的適應(yīng)癥或其他可替代的指標(biāo)建立合理、有161 效的效價檢測的方法。162 細(xì)胞純度方面，應(yīng)檢測活細(xì)胞百分含量、亞細(xì)胞類別百分163 含量（如不同分化階段細(xì)胞群體），如果進(jìn)行了基因修飾或分164 化誘導(dǎo)，則應(yīng)檢測功能性細(xì)胞的百分含量。對于其他無關(guān)的165 細(xì)胞群體應(yīng)進(jìn)行定性和定量的研究與質(zhì)量控制。166 安全性相關(guān)的研究，應(yīng)根據(jù)細(xì)胞來源和制備工藝過程的特167 點考慮，可選擇針對外源性因子、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的可能性、致168 瘤性和促瘤性、相關(guān)雜質(zhì)、病毒載體回復(fù)突變等方面開展研169 究。相關(guān)雜質(zhì)研究中應(yīng)包括工藝中引入的雜質(zhì)（如血清、蛋白170 酶、分化誘導(dǎo)試劑、病毒載體等）和產(chǎn)品相關(guān)的雜質(zhì)（如細(xì)胞171 非預(yù)期表達(dá)的產(chǎn)物、死細(xì)胞殘余和其他可能的生物降解產(chǎn)物172 等）。173 2.質(zhì)量控制174 應(yīng)建立細(xì)胞制品放行檢驗機(jī)制。檢定項目應(yīng)當(dāng)建立在產(chǎn)175 品質(zhì)量研究以及對生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)過程充分理解的基礎(chǔ)之上，176 同時兼顧產(chǎn)品的特性和當(dāng)下的科學(xué)認(rèn)知與共識。一般應(yīng)包括第 9 頁/共 28 頁177 鑒別、效價、純度、雜質(zhì)、活細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞存活率和一般檢測178 （如無菌、支原體、內(nèi)毒素、外觀、pH、滲透壓、顆粒物控制）等。179 驗收標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)以臨床前研究批次、臨床研究批次和驗證180 批次中檢測獲得的數(shù)據(jù)，以及其他相關(guān)數(shù)據(jù)（如經(jīng)驗、文獻(xiàn)報181 道和穩(wěn)定性研究等）確定。182 細(xì)胞制品放行時，如不能完成所有的檢驗，可考慮加強(qiáng)工183 藝過程中的樣品檢驗，將過程控制與放行檢驗相結(jié)合，通過184 過程控制簡化放行檢驗，以上操作應(yīng)經(jīng)過研究與驗證，并附185 有相應(yīng)的操作規(guī)范。應(yīng)在產(chǎn)品使用前完成全部放行檢驗，當(dāng)186 有些放行檢驗結(jié)果可能后置時，應(yīng)對可能出現(xiàn)的意外檢測結(jié)187 果制定處置方案，必要時，留樣備查。188 一些細(xì)胞制品在給藥前還需經(jīng)過一系列操作步驟，在完189 成操作后建議對最終產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量核準(zhǔn)，如細(xì)胞形態(tài)、活細(xì)190 胞數(shù)、細(xì)胞存活率、顏色、濁度、顆粒物和可見異物等，以及191 操作步驟的復(fù)核和標(biāo)簽核對等。192 放行檢驗用方法應(yīng)經(jīng)過研究與驗證，特別是對于建立的新193 方法應(yīng)進(jìn)行全面的驗證，對于藥典中收錄的方法應(yīng)進(jìn)行適用194 性的驗證。對于效期短和樣本量小的制品，可采用快速、微量195 的新型檢測方法。研究者應(yīng)對新型檢驗方法與傳統(tǒng)檢測方法196 進(jìn)行比較和評估，必要時，應(yīng)采用兩種檢驗方法進(jìn)行相互驗197 證。198 （五）穩(wěn)定性研究第 10 頁/ 共 28 頁199 細(xì)胞制品的生產(chǎn)應(yīng)采用連續(xù)的工藝，對于生產(chǎn)過程中200 需要保存的樣品和產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行穩(wěn)定性研究，以支持其存儲條201 件與有效期。細(xì)胞制品的穩(wěn)定性研究可參照一般生物制品的202 穩(wěn)定性研究要求，并根據(jù)產(chǎn)品自身的特點、臨床用藥的需求，203 以及保存、包裝和運(yùn)輸?shù)那闆r設(shè)計合理的研究方案。其中，需204 要特別關(guān)注細(xì)胞制品的運(yùn)輸穩(wěn)定性研究和使用過程中的穩(wěn)定205 性研究等，應(yīng)開展研究證明在擬定的存儲條件下，細(xì)胞制品206 的質(zhì)量不會受到運(yùn)輸、使用中或其他外界條件的影響。應(yīng)根207 據(jù)產(chǎn)品自身的特點和存儲條件等方面，合理的設(shè)計穩(wěn)定性考208 察的項目和檢測指標(biāo)，例如，冷凍儲存的樣品或產(chǎn)品一般應(yīng)209 開展反復(fù)凍融的研究。考察項目中建議涵蓋細(xì)胞效