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文檔簡介
2024北京重點校高二(下)期末生物匯編
動物細胞工程
一、單選題
1.(2024北京海淀高二下期末)植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù)的共性是()
A.均出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象
B.融合細胞的染色體組數(shù)均增加
C.均需用胰蛋白酶處理
D,均可用滅活的病毒誘導細胞融合
2.(2024北京石景山高二下期末)單克隆抗體在疾病診斷和治療中發(fā)揮重要作用。下列敘述正確的是
()
A.將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,形成的細胞均為雜交瘤細胞
B.單克隆抗體是不同于天然抗體的人工合成生物分子
C.將細胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合,可特異性識別腫瘤抗原并殺傷腫瘤細胞
D.將某滅活病原體作為疫苗接種人體后,能產(chǎn)生針對抗原的單克隆抗體
3.(2024北京石景山高二下期末)向鼠的成纖維細胞中導入Oct3/4等4種基因,用多能性標志物Fbxl5
篩選轉(zhuǎn)化后的細胞,可獲得誘導多能干細胞(iPS細胞),該細胞具有與胚胎干細胞(ES細胞)相似的特
性。下列說法正確的是()
A.iPS細胞具有組織特異性,只能分化為特定的細胞
B.可用顯微注射法直接將4種基因注入成纖維細胞
C.iPS細胞的培養(yǎng)與一般的動物細胞培養(yǎng)不同,不會發(fā)生接觸抑制
D.由iPS細胞產(chǎn)生的特定細胞可用于新藥測試,避免了倫理問題
4.(2024北京延慶高二下期末)新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)表面的S蛋白由S1和S2兩個亞基組成。
科研人員制備獲得了鼠抗S蛋白特異性單克隆抗體,為分析該單克隆抗體的特異性,將SARS-CoV-2的S
蛋白進行電泳得到圖A,用該單克隆抗體進行抗原-抗體雜交并顯色得到圖B。下列表述母送的是()
AB
MSMS
245245
180180
S1S1
135135—
100100—
75
S2S2
63
48
35
M:蛋白分子量標準
S:SARS-CoV-2s蛋白
A.該單克隆抗體特異性的識別S蛋白的S2亞基
B.制備單克隆抗體的過程體現(xiàn)了動物細胞膜具有流動性
C.免疫后小鼠體內(nèi)的漿細胞只產(chǎn)生一種抗S蛋白抗體
D.制備單克隆抗體的過程可用滅活病毒誘導動物細胞融合
5.(2024北京延慶高二下期末)試管牛技術(shù)和核移植技術(shù)已應用于培育良種牛。下列相關(guān)敘述脩誤的是
()
A.試管牛技術(shù)和核移植技術(shù)均可實現(xiàn)良種牛的大量克隆
B.試管牛技術(shù)和核移植技術(shù)培育良種牛均需進行胚胎移植
C.進行胚胎移植可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力
D.需要注射促性腺激素促進供卵牛超數(shù)排卵
6.(2024北京朝陽高二下期末)我國科研工作者運用生物打印技術(shù)將肌腱干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞以分
層方式分布在支架中,制備了下圖所示的可用于肌腱與骨組織界面再生的多細胞支架。相關(guān)敘述正確的是
()
骨
A.同一個體的肌腱細胞與骨細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能差異是基因選擇性缺失的結(jié)果
B.肌腱干細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞能自我更新和分化為成年動物體內(nèi)的任何一種細胞
C.體外培養(yǎng)兩種干細胞均需要無菌無毒、36.5℃左右、pH7.2?7.4和適宜滲透壓條件
D.利用多細胞支架治療肌腱斷裂可保證異體來源的細胞移植不引起免疫排斥
7.(2024北京大興高二下期末)人造皮膚的構(gòu)建、動物分泌蛋白的規(guī)?;a(chǎn)等,都離不開動物細胞培
養(yǎng)。下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述錯誤的是()
A.動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境需要。2,也需要一定濃度的CC>2
B.動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎,培養(yǎng)時需保證無菌、無毒的環(huán)境
C.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清
D.動物細胞培養(yǎng)的原理是動物細胞的全能性
8.(2024北京大興高二下期末)下列實驗操作程序不正確的是()
A.蔬菜加工+泡菜鹽水一加調(diào)料、裝壇增發(fā)酵>泡菜
B.動物組織制備細胞懸液-原代培養(yǎng)T傳代培養(yǎng)
C.挑選葡萄、沖洗、榨汁無氧發(fā)醉>果酒有氧發(fā)驟>果醋
D.離體組織消毒、接種脫分化>愈傷組織再分化>試管苗
9.(2024北京大興高二下期末)我國科學家利用基因編輯技術(shù),獲得一只生物節(jié)律核心基因敲除的舜猴。
取其成纖維細胞與去核的卵母細胞融合,將發(fā)育形成的早期胚胎植入代孕雌猴,獲得5只克隆猴,用于研
究節(jié)律機制。以下敘述錯誤的是()
A.克隆猴基因組成差異小,作為實驗動物便于研究
B.可用滅活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合
C.克隆猴的遺傳物質(zhì)全部來自狒猴的成纖維細胞
D.克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細胞的細胞核具有全能性
10.(2024北京東城高二下期末)為緩解飼養(yǎng)動物帶來的環(huán)境、經(jīng)濟壓力,與傳統(tǒng)肉類感官特性相似的“細
胞培養(yǎng)肉”引發(fā)人們關(guān)注。其生產(chǎn)流程如下圖,以下敘述不正確的是()
營養(yǎng)因子、
D分化培養(yǎng)甚
生長支架
細胞培養(yǎng)肉
常見肉用干細胞體外
禽畜小規(guī)模培養(yǎng)擴大生產(chǎn)脂肪細胞
A.技術(shù)應用了干細胞能分化成其他類型細胞的原理
B.體外培養(yǎng)干細胞時需置于CO2培養(yǎng)箱以促進細胞呼吸
C.生物反應器擴大生產(chǎn)時培養(yǎng)基需加入動物血清等物質(zhì)
D.細胞培養(yǎng)肉進入市場銷售前還需進行安全性評估
11.(2024北京東城高二下期末)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)都是細胞工程的基礎性技術(shù),兩種技
術(shù)都()
A.能實現(xiàn)大量獲得細胞產(chǎn)物
B.以細胞的全能性為技術(shù)原理
C.需要使用液體培養(yǎng)基
D.使用酶將組織分散為細胞
12.(2024北京西城高二下期末)動物細胞培養(yǎng)分為貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。科學家嘗試馴化貼壁依賴性細
胞一犬腎臟細胞(MDCK),使其能懸浮培養(yǎng),結(jié)果如圖所示。下列說法錯誤的是()
60■—^
5590
50
傳80
警1:2
45
圈70
40
由3560
時
3050
、(
125
040
52030
->15
m.20
,L10
)一5
0-10
A11tli11111Q
246810121416182022
時間/天
A.貼壁細胞在生長增殖時會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B.細胞活率反映馴化過程中MDCK的適應程度
C.MDCK先適應懸浮培養(yǎng)環(huán)境再開始大量增殖
D.懸浮培養(yǎng)不需進行傳代,適合規(guī)?;囵B(yǎng)
13.(2024北京西城高二下期末)骨骼干細胞(SSC)具有自我更新能力和分化潛能,在骨骼發(fā)育中起重
要作用。2024年我國科學家鑒定出首個位于長骨干斷端的骨骼干細胞群。下列說法錯誤的是()
A.SSC屬于成體干細胞
B.SSC具有無限增殖能力
C.培養(yǎng)SSC需要提供02和CO2
D.SSC可應用于骨骼的再生和修復
14.(2024北京延慶高二下期末)研究者將M病毒膜蛋白注射小鼠,分離小鼠脾細胞并將其與S細胞融
合,通過篩選獲得單個穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞。下列相關(guān)敘述正確的是()
A.用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)M病毒,通過離心可獲得膜蛋白作為抗原
B.可用M病毒膜蛋白多次免疫小鼠,以獲得更多的漿細胞
C.S細胞應具備產(chǎn)生抗體和無限增殖的能力
D.體外培養(yǎng)單個雜交瘤細胞獲得大量抗體體現(xiàn)了細胞的全能性
15.(2024北京延慶高二下期末)微載體動物細胞培養(yǎng)是以懸浮在培養(yǎng)液中的微珠作為細胞貼附的載體,
在輕度攪拌下進行動物細胞培養(yǎng)。下列相關(guān)敘述第氓的是()
A.輕度攪拌有利于細胞的氧氣供應
B.培養(yǎng)液中需添加糖、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)
C.該技術(shù)能提高單位體積培養(yǎng)液的細胞產(chǎn)率
D.該技術(shù)不能應用于病毒疫苗的生產(chǎn)過程中
二、非選擇題
16.(2024北京海淀高二下期末)黃曲霉毒素(AFB)是黃曲霉(一種真菌)產(chǎn)生的具有極強致癌力的代
謝產(chǎn)物。為準確檢測食品中殘留的AFB,科研人員開展下列研究。
(1)科研人員利用小鼠制備抗AFB的單克隆抗體(AFB單抗),過程如圖1。雜交瘤細胞需進行步驟H
和III檢測,經(jīng)過多次篩選。
AFB多次免疫
>多種淋巴細胞
的小鼠一浴耕雜交瘤細胞經(jīng)n和貝獲得陽性的
骨髓瘤細胞雜交瘤細胞
圖1
(2)食品中的有害殘留毒素還可能有黃綠青霉素(CIT)、伏馬菌素(FB)。若想確認上述流程獲得的AFB
單抗具有極強的特異性,應補充的檢測和結(jié)果是。
(3)科研人員擬將抗AFB單抗固定在一種新材料上,制備為“檢測探針”。己知材料M穩(wěn)定性、發(fā)光性能等
方面有明顯優(yōu)勢,但它很難與抗體結(jié)合;物質(zhì)P可以提高材料M對抗體的親和力。制備檢測探針的流程
如圖2,探針發(fā)光性能與物質(zhì)P的濃度關(guān)系如圖3。
21一
單抗探針
圖20.60.81.01.2
物質(zhì)P的濃度(mg/mL)
圖3
依據(jù)圖3結(jié)果,科研人員選擇物質(zhì)P的濃度為0.8mg/mL作為生產(chǎn)檢測探針的條件,原因是在該濃度下,
探針發(fā)光性能與更高濃度時,而該濃度可節(jié)省成本。
(4)科研人員制備定量檢測AFB的免疫試紙,如圖4。測定樣品前,先配制一系列不同濃度的AFB標準溶
液,分別與等量“MP-抗AFB單抗探針”混合均勻,滴至加樣處。
+AFB
Y抗AFB單抗的抗體
科研人員測定了T線、C線的發(fā)光值,從而繪制出特定范圍AFB濃度的線性標準曲線(選填字
母),作為后續(xù)檢測食品中是否含有AFB的參照曲線。
標準曲線A標準曲線B標準曲線C標準曲線D
224
1
0
°(-)0OO,Q
(10C<2/1
分七白%名
AFB濃度(ng/mL)AFB濃度(ng/mL)AFB濃度(ng/mL)AFB濃度(ng/mL)
注:標準曲線A和B中,因C線發(fā)光值不變,故僅需測定T線。
17.(2024北京豐臺高二下期末)雙特異性抗體是含有2種特異性抗原結(jié)合位點的人工抗體。PSMA是癌
細胞的一種表面抗原。T細胞有效激活依賴于T細胞的表面受體CD28在癌細胞與T細胞結(jié)合部位的聚
集??蒲腥藛T嘗試構(gòu)建雙特異性抗體PSMAXCD28(簡稱“PC雙抗”)來治療癌癥,制備過程如圖1,PC
雙抗的結(jié)構(gòu)及作用機理如圖2。
圖1圖2
(1)制備PC雙抗的過程中,用到的動物細胞工程技術(shù)主要有—(答出2點)。
(2)制備PC雙抗時,應先將_(物質(zhì)X)分別注射到小鼠體內(nèi)再分離出B淋巴細胞。將B淋巴細胞分別與
小鼠的骨髓瘤細胞融合,常用的誘導融合方法有之后篩選得到兩種雜交瘤細胞,再誘導兩種細胞融
合,成功融合的雜交瘤細胞表達兩種L鏈和兩種H鏈。據(jù)圖2分析,雜交瘤細胞AXB會產(chǎn)生多種抗體,
原因是因此還需通過篩選才能獲得PC雙抗。
(3)科研人員將某種癌細胞和T細胞共同培養(yǎng),加入不同抗體后檢測T細胞活化水平,結(jié)果如圖3,結(jié)果說
明進一步分析發(fā)現(xiàn),這種癌細胞大量表達PD-L1,識別結(jié)合T細胞表面的PD-1受體,從而_T細胞
活化。為了有更好的治療效果,請利用已有的PC雙抗提出一種新的治療手段
抗體濃度log,0[M]
注:IL-2濃度與T細胞活化水平呈正相關(guān)
圖3
18.(2024北京昌平高二下期末)手足口病由多種腸道病毒感染引起,主要表現(xiàn)為手、足和口腔黏膜等處
皰疹,柯薩奇病毒A組2型(CV-A2)是引發(fā)該病的主要病原體之一、制備抗CV-A2的單克隆抗體,對檢
測和治療手足口病具有重要意義。
(1)將純化的CV-A2抗原間隔多次注射給小鼠,一段時間后,取免疫小鼠的脾細胞與體外培養(yǎng)的—細
胞,利用—誘導融合后,選擇培養(yǎng)得到雜交瘤細胞。再經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,初次篩選獲得13株
雜交瘤細胞。
(2)科研人員對上述13株雜交瘤細胞再進一步篩選,通過抗CV-A2單抗特異性分析結(jié)果可知(圖1),應選
擇第一株雜交瘤細胞進行大規(guī)模培養(yǎng)獲取大量的單克隆抗體,理由是—=
3〕
OCV-A2
/E
t2I■其他腸道病毒
v
)
?
米1I
M
0I*,llhJI%111或r*r*,皿i
12345678910111213
編號
注:吸光度大小反映與抗原結(jié)合的單抗含量高低
圖1
(3)科研人員使用高、中、低3個濃度的CV-A2抗原稀釋液,對不同溫度下放置3d的抗CV-A2單抗進行檢
測,圖2結(jié)果表明單抗穩(wěn)定性良好。判斷依據(jù)是:在37℃和4℃的條件下放置3d后,各稀釋液濃度下的
檢測值。
a
l
u
/
s
u
)
/
?
其
空
注:檢測值表示與單抗結(jié)合的抗原含量
圖2
(4)制備的抗CV-A2單抗在檢測和治療手足口病方面的具體應用是—(寫出1條即可)。
19.(2024北京石景山高二下期末)學習以下材料,回答(1)~(4)題。
H3K9me3修飾——克隆胚胎的“路障”與“路標”
體細胞核移植(SCNT)技術(shù)已在動物保護、育種及疾病研究和治療等方面展現(xiàn)出廣泛的應用前景。但是
嚴重的胚胎發(fā)育缺陷和極低的出生率卻阻礙了SCNT的進一步發(fā)展。
由于受精胚胎的核基因組與供體細胞基本相同,所以供體細胞核的表觀遺傳狀態(tài)成為導致克隆胚胎發(fā)育異
常的主要影響因素。H3K9me3作為真核細胞內(nèi)最重要的抑制性組蛋白修飾(如下圖所示),對于抑制基因
組內(nèi)廣泛存在的重復序列和維持基因組穩(wěn)定性是至關(guān)重要的。研究者比較了小鼠體細胞克隆胚胎與自然受
精的胚胎,發(fā)現(xiàn)相比于自然受精的胚胎,克隆胚胎的部分基因組區(qū)域仍存在較高水平的H3K9me3,說明受
體細胞無法充分抹除供體細胞基因組攜帶的高水平的H3K9me3,最終會導致這些區(qū)域內(nèi)基因的異常轉(zhuǎn)錄抑
制。
向核移植細胞中注射表達組蛋白去甲基化酶Kdm4b的mRNA,可以有效降低供體基因組的H3K9me3修
飾水平,激活克隆胚胎基因組的轉(zhuǎn)錄,顯著改善克隆胚胎著床前的發(fā)育缺陷。這種策略已成功提高了
SCNT在多個物種中的克隆效率,也促使了克隆猴“中中”和“華華”的誕生。
此外,研究人員還發(fā)現(xiàn)在胚胎著床前的發(fā)育過程中,在特定基因組區(qū)域上建立新的H3K9me3模式對維持
克隆胚胎的正常發(fā)育同樣是非常重要的。在未來的工作中,闡明早期胚胎中H3K9me3修飾模式的建立機
制,以及克隆胚胎中新生H3K9me3異常的原因,將有助于發(fā)展出更高效的體細胞克隆技術(shù)。
(1)H3K9me3組蛋白修飾是一種表觀修飾現(xiàn)象,這種修飾并未改變,但基因表達和表型發(fā)生變化。除
此之外,常見的表觀遺傳修飾還有—o
(2)Z基因、D基因和M基因是重要的全能性標記基因。據(jù)文中信息推測,這類基因在自然受精胚胎細胞
階段的表達量—克隆胚胎此階段的表達量。
⑶下圖表示克隆猴“中中”和“華華”的培育流程。對應文中“供體”的是圖中的—o處理①用的是滅活仙臺
病毒,起到—的作用。據(jù)文中信息判斷,處理②的操作是—o
處理②
(4)請根據(jù)文中信息,解釋題目中指出H3K9me3修飾既是克隆胚胎的“路障”又是“路標”的含義一。(選
一項回答即可)
20.(2024北京大興高二下期末)學習以下材料,回答(1)~(4)題。
不斷發(fā)展的單克隆抗體技術(shù)
1975年,生物學家創(chuàng)造了利用雜交瘤細胞制備單克隆抗體的技術(shù)。自1986年全球首個鼠源單抗藥物上市
以來,單抗藥物治療方向不斷發(fā)展,覆蓋腫瘤、心血管疾病、自身免疫病、神經(jīng)性疾病和抗感染等各個領
域。
最早期的單克隆抗體均為鼠源單抗,在理論研究及實踐應用中發(fā)揮了重要作用。然而,鼠源單抗作為異源
蛋白,在人體內(nèi)活性低,穩(wěn)定性差;且容易讓人產(chǎn)生免疫反應一人抗鼠抗體反應(HAMA)而被清除。第
二代人鼠嵌合單抗是從雜交瘤細胞分離出鼠源抗體可變區(qū)基因,與人源抗體恒定區(qū)基因連接,插入適當表
達載體,轉(zhuǎn)染宿主細胞表達產(chǎn)生的。如下圖.人源基因序列編碼的氨基酸序列占整個抗體的大部分,降低了
單抗的HAMA反應。最新一代單抗是全人源單克隆抗體,氨基酸序列均由人源基因編碼,進入人體內(nèi)后
發(fā)生超敏或排斥反應的可能性最低。目前制備全人源單克隆抗體的技術(shù)包括轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)、抗體庫技術(shù)以
及單個B細胞技術(shù)等。
轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)是將優(yōu)化的人源抗體合成基因?qū)氲奖旧聿荒芎铣煽贵w的免疫缺陷鼠的基因組中,在對轉(zhuǎn)基
因鼠進行特定抗原免疫后,后續(xù)流程與傳統(tǒng)單抗制備方法一致,產(chǎn)生的抗體均由插入的人源抗體基因序列
編碼,也保證了單抗的抗原特異性和結(jié)合親和力。
噬菌體展示技術(shù)是抗體庫技術(shù)中的一種,將所選抗體庫中抗體的可變區(qū)基因,與噬菌體殼蛋白基因構(gòu)成融
合基因,隨著子代噬菌體重組,相關(guān)氨基酸序列會顯示在噬菌體表面,從而篩選出抗體庫中與特定抗原結(jié)
合親和力高的抗體基因。
單個B細胞技術(shù)可從患者或接種疫苗人群的外周血中,根據(jù)抗原和細胞表面標記物篩選出單個B細胞,
再利用逆轉(zhuǎn)錄PCR等技術(shù)直接獲得抗體合成基因。單個B細胞技術(shù)的優(yōu)點是只需少量細胞就可以快速高
效地篩選出潛在的單克隆抗體,在新發(fā)、突發(fā)傳染病等緊急事件中,可以快速獲得針對病原微生物的高親
和力抗體。
(1)上述技術(shù)中,除噬菌體展示技術(shù)外,大多需要在______箱中進行動物細胞培養(yǎng)。當培養(yǎng)瓶中貼壁生長的
細胞出現(xiàn)現(xiàn)象時,用酶處理后進行傳代培養(yǎng)。
(2)傳統(tǒng)方法通過雜交瘤細胞制備單抗時,需向小鼠注射,再從小鼠脾臟中取已免疫的B細胞,與
骨髓瘤細胞混合后,誘導細胞融合。對經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和,多次篩選后
才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
(3)文中提到的新技術(shù)中,不需要利用動物細胞融合技術(shù)的有;需要使用基因工程技術(shù)的
有o
A.人鼠嵌合單抗技術(shù)B.轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)C.噬菌體展示技術(shù)D.單個B細胞技術(shù)
(4)下面是利用單個B細胞技術(shù),針對某新型病原體表面的抗原X,制備單克隆抗體的技術(shù)路徑,請結(jié)合
材料補充”上的內(nèi)容。
采集康復者外周血一篩選能夠結(jié)合X的B細胞一提取_一根據(jù)抗體基因通用序列設計引
物進行PCR-獲得______基因一-導入受體細胞一獲得抗x的單克隆抗體。
21.(2024北京東城高二下期末)人類腺病毒55型(HAdV55)是我國流行的主要呼吸道病原體之一。目
前尚無特異性治療方法。為解決這一問題,我國科學家通過不同方法制備抗HAdV55單克隆抗體。
(1)通過細胞工程技術(shù)制備單克隆抗體,從接種—的小鼠中獲取脾臟細胞,采用—處理誘導與骨髓瘤細
胞融合,篩選出相應的—細胞,大量培養(yǎng)獲得單克隆抗體。為研究抗體的特異性,用抗體與感染不同類
型腺病毒的細胞提取物進行雜交檢測,結(jié)果如圖1。分析實驗結(jié)果可知—o
感染病毒類型
抗體檢測
雜交帶
GADPH
(細胞呼吸相關(guān)酶)
圖1
(2)如圖2,HAdV55通過其表面蛋白與細胞表面受體結(jié)合,進入細胞形成囊泡,最終被溶酶體水解。然而
某些病毒可以逃離囊泡,釋放進入細胞質(zhì)并最終到達細胞核進行復制。
IO51細胞質(zhì)中e抗體A
會抗體B
干抗體C
a無關(guān)抗體
Oh2h12h24hOh2h12h24h
病毒感染時間病毒感染時間
圖3
據(jù)圖2,抗HAdV55抗體的作用機制分為兩種:機制一是阻斷—;機制二是阻斷病毒逃離囊泡,釋放至
細胞質(zhì)和細胞核。科研人員通過基因工程制備出3種抗HAdV55單克隆抗體A、B和C。為探明幾種抗
體的作用和作用機制,用抗體處理細胞,在病毒感染后的不同時間點測量囊泡或細胞質(zhì)中的病毒含量,實
驗結(jié)果如圖3。請據(jù)此判斷能通過機制一發(fā)揮作用的單克隆抗體是—,并說明理由—o
22.(2024北京西城高二下期末)臨床常采用化療方法治療癌癥?;熕幬锿ㄟ^影響DNA合成、損傷
DNA等方式殺傷腫瘤細胞,長期使用易導致腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性。科研人員以消化道惡性腫瘤——結(jié)直腸
癌(CRC)組織為材料,期望通過分析耐藥機制找到新的治療靶點。
對照持續(xù)施加5-FU
50-
/灰40-
俎
叼30-
X
d
q20-
.
K10-
。1口L一,
化療藥物--——一
LGR4抗體-+———
分組甲乙丙丁
圖2
(1)從CRC病人體內(nèi)取出腫瘤組織,用—酶處理得到單個細胞進行體外培養(yǎng)。細胞分離和培養(yǎng)均需在一環(huán)
境下進行。
(2)通過多次給CRC細胞施加化療藥物5-FU,得到耐藥性癌細胞(DR),檢測發(fā)現(xiàn)DR中LGR4蛋白表達
量顯著高于CRC細胞。為探究LGR4的作用,研究者用LGR4正常表達和低表達的CRC細胞進行相關(guān)實
驗,檢測DNA損傷程度,結(jié)果如圖1。實驗結(jié)果表明LGR4參與耐藥性的形成,判斷的依據(jù)是
(3)LGR4是細胞膜上的受體蛋白,被激活后可調(diào)控細胞增殖、分化相關(guān)信號通路。研究者嘗試制備LGR4
抗體作為治療耐藥性的藥物。
①向小鼠體內(nèi)注射—對其進行免疫,之后取—細胞與骨髓瘤細胞進行融合,通過系列篩選獲得雜交瘤細
胞,生產(chǎn)高親和力的抗體。
②在化療的基礎上,將上述抗體應用于DR的抗藥性治療,請在圖2中補全實驗分組的處理并圖示預期結(jié)
果—(用“+”或“,表示添加或不添加)。
(4)進一步研究表明,LGR4被激活后會促進S基因的轉(zhuǎn)錄,S基因表達產(chǎn)物是細胞死亡的抑制因子。綜合
上述結(jié)果和信息,分析施加LGR4抗體緩解耐藥性的分子機制
參考答案
1.B
【分析】植物體細胞雜交技術(shù)是先用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞的細胞壁,獲得原生質(zhì)體,然后誘導
兩個原生質(zhì)體融合,形成雜種細胞,再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),將雜種細胞培育成雜種植株。
【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)貼壁生長現(xiàn)象,而植物體細胞雜交技術(shù)過程中不會出現(xiàn)貼壁生長
現(xiàn)象,A錯誤;
B、植物體細胞雜交技術(shù)與動物細胞融合技術(shù)得到的融合細胞的染色體組數(shù)均增加,B正確;
C、植物體細胞雜交技術(shù)過程中不需要用胰蛋白酶處理,C錯誤;
D、植物體細胞雜交技術(shù)過程中不能用滅活的病毒誘導細胞融合,D錯誤。
故選B?
2.C
【分析】1、單克隆抗體是指由單個B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成的雜交瘤細胞,進行進行有絲分裂增
殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。2、單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強、靈敏度
高,并可能大量制備。3、單克隆抗體的作用:①作為診斷試劑:(最廣泛的用途)具有準確、高效、簡
易、快速的優(yōu)點;②用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥等。
【詳解】A、將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,形成的細胞不都為雜交瘤細胞,還可能有未融合的B淋
巴細胞、未融合的骨髓瘤細胞以及B淋巴細胞自身融合的細胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞,只有B淋
巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成的細胞才是雜交瘤細胞,A錯誤;
B、單克隆抗體不是人工合成的生物分子,而是通過細胞融合技術(shù)產(chǎn)生的,其化學本質(zhì)與天然抗體相同,B
錯誤;
C、將細胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合,可特異性識別腫瘤抗原并殺傷腫瘤細胞。因為單克隆抗體能特
異性地識別腫瘤細胞表面的抗原,將細胞毒素類藥物帶到腫瘤細胞所在位置,從而精準地殺傷腫瘤細胞,
C正確;
D、將某滅活病原體作為疫苗接種人體后,能產(chǎn)生針對抗原的多種抗體,而不是單克隆抗體。單克隆抗體
是通過特定的技術(shù)手段制備的,疫苗接種引起的免疫反應產(chǎn)生的是多克隆抗體,D錯誤。
故選C。
3.D
【分析】胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細胞核大,核仁明顯;在功能上,具
有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。
【詳解】A、iPS細胞具有與胚胎干細胞(ES)相似的特性,可以分化為多種細胞,A錯誤;
B、向鼠成纖維細胞中導入Oct3/4等四種基因,需要利用基因工程技術(shù)構(gòu)建基因表達載體后,才能導入受
體細胞,B錯誤;
C、iPS細胞的培養(yǎng)過程中會發(fā)生接觸抑制,C錯誤;
D、由iPS細胞產(chǎn)生的特定細胞可用于新藥測試,避免了倫理問題,因為是取自于自身的細胞,D正確。
故選D。
4.C
【分析】單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾中獲取已經(jīng)免疫
的B淋巴細胞;誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,再通過克隆化培
養(yǎng)和抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)雜交瘤細胞,
最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、由電泳結(jié)果可知,圖A有S1和S2兩個條帶,圖B只有S2一個條帶,且條帶比圖A寬,說
明該單克隆抗體特異性地識別SARS-CoV-2中S蛋白的S2亞基,A正確;
B、制備單克隆抗體的過程中,將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,細胞融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有一定的
流動性,B正確;
C、免疫后的小鼠體內(nèi)的漿細胞可能有多種,每一種漿細胞只產(chǎn)生一種特異性抗體,C錯誤;
D、制備單克隆抗體的過程中,可用滅活的病毒誘導動物細胞融合,獲得雜交瘤細胞,D正確。
故選C。
5.A
【分析】試管動物和克隆動物的比較
試管動物克隆動物
生殖方式有性生殖無性生殖
技術(shù)手段體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植
遺傳物質(zhì)來自兩個個體主要來自核供體
遺傳規(guī)律遵循不遵循
【詳解】A、試管動物技術(shù)是通過人工操作使卵子和精子在體外成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚
胎,再經(jīng)胚胎移植導入雌性受體的子宮,分娩產(chǎn)生后代的技術(shù)。核移植技術(shù)是將供體動物的體細胞核移入
去核卵母細胞中,使這個重組細胞發(fā)育形成早期胚胎,經(jīng)胚胎移植導入雌性受體的子宮,得到的新個體即
為克隆動物。由此可知試管牛技術(shù)是有性生殖,不可實現(xiàn)良種牛的大量繁殖,A錯誤;
B、試管牛技術(shù)和核移植技術(shù)培育良種牛的過程中都需要將早期胚胎經(jīng)過移植導入雌性受體的子宮,B正
確;
C、胚胎移植時,供體只是產(chǎn)生具有優(yōu)良特性的胚胎,妊娠是由雌性受體完成的,大大縮短了供體的繁殖
周期,故進行胚胎移植可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,C正確;
D、促性腺激素能作用于卵巢,促使卵巢產(chǎn)生更多卵細胞,因此對供體母牛注射促性腺激素后可促使其超
數(shù)排卵,D正確。
故選A。
6.C
【分析】動物細胞培養(yǎng):指從動物細胞中取出相關(guān)的組織,將它們分散成單個細胞,然后在適宜的條件
下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。動物細胞培養(yǎng)的條件:①營養(yǎng):一般用液體培養(yǎng)基,要添加血清,以
補充動物細胞所需的未知營養(yǎng)物質(zhì);②無菌無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液定期更換以清除代謝物,防止代謝物積累
對細胞自身造成危害;③溫度、PH和滲透壓:溫度為36.5±0.5℃、PH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境:95%空氣
和5%C02O
【詳解】A、同一個體的肌腱細胞與骨細胞的遺傳物質(zhì)相同,但形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能存在差異,這是基因選
擇性表達的結(jié)果,A錯誤;
B、肌腱干細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞具有組織特異性,只能分化成特定的細胞或組織,不能分化為成年動
物體內(nèi)的任何一種細胞,B錯誤;
C、體外培養(yǎng)兩種干細胞均需要提供適宜的條件,如無菌、無毒的環(huán)境;營養(yǎng)物質(zhì);適宜的溫度、pH和滲
透壓:溫度為36.5±0.5℃、PH為7.2~7.4;適宜的氣體環(huán)境等,C正確;
D、肌腱與骨組織界面再生的多細胞支架所利用的肌腱干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞可來源于病人本身,將
它用于病人體內(nèi),理論上可以避免發(fā)生免疫排斥反應,而不能保證異體來源的細胞移植不引起免疫排斥,
D錯誤。
故選C。
7.D
【分析】動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件
下,讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。一般來說,動物細胞培養(yǎng)需要滿足的條件有:營養(yǎng);無菌、無毒的環(huán)
境;適宜的溫度、pH和滲透壓;氣體環(huán)境(通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將它們置于含有95%空氣和
5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng))。
【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)時,一般要在含95%空氣和5%CC)2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),A正確;
B、動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎,培養(yǎng)時需保證無菌、無毒的環(huán)境,以防止雜菌污染,B正確;
C、培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清,C正確;
D、動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖(有絲分裂),D錯誤。
故選D。
8.B
【分析】果酒和果醋制作過程中的相關(guān)實驗操作:
(1)材料的選擇與處理:選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄進行沖洗,除去枝梗。
(2)滅菌:①榨汁機要清洗干凈,并晾干。②發(fā)酵裝置要清洗干凈,并用70%的酒精消毒。
(3)榨汁:將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機榨取葡萄汁。
(4)發(fā)酵:①將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶,要留要大約三分之一的空間,并封閉充氣口。②制葡萄酒的過程
中,將溫度嚴格控制在18℃?25℃,時間控制在10?12d左右,可通過出料口對發(fā)酵的情況進行。及時的
監(jiān)測。③制葡萄醋的過程中,將溫度嚴格控制在30℃?35℃,時間控制在前7?8d左右,并注意適時通過
充氣口充氣。
【詳解】A、泡菜的制作的原理是乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,A正確;
B、動物細胞培養(yǎng)過程中,制備細胞懸液需要利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細胞分散開,B錯誤;
C、果酒果醋制作過程中,先酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生果酒,再醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生果醋,c正確;
D、植物組織培養(yǎng)的流程是:離體細胞消毒、接種,然后脫分化形成愈傷組織,再分化形成試管苗,D正
確。
故選B。
9.C
【分析】動物體細胞核移植依據(jù)的原理是細胞的全能性。動物細胞的全能性隨著動物細胞分化程度的提高
而逐漸受到抑制,全能性表達很難,但是動物的細胞核內(nèi)仍含有該種動物的全部遺傳基因,具有發(fā)育成完
整個體的潛能,即動物的細胞核仍具有全能性。
【詳解】A、由于克隆猴基因組成差異小,用克隆猴作為實驗動物,有利于使實驗中的無關(guān)變量的控制,
有利于增強實驗的可信度,A正確;
B、細胞融合的過程需要人工誘導,如聚乙二醇(PEG)融合法、滅活病毒誘導法、電融合法等,可用滅
活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合,B正確;
C、克隆猴的遺傳物質(zhì)主要來自掰猴的成纖維細胞的細胞核,少部分來自去核的卵母細胞,C錯誤;
D、動物細胞核含有該物種的全套遺傳信息,克隆猴的獲得體現(xiàn)了動物體細胞的細胞核具有全能性,D正
確。
故選C。
10.B
【分析】動物細胞培養(yǎng)的條件:①營養(yǎng):一般用液體培養(yǎng)基,要添加血清,以補充動物細胞所需的未知營
養(yǎng)物質(zhì);②無菌無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液定期更換以清除代謝物,防止代謝物積累對細胞自身造成危害;③溫
度、PH和滲透壓:溫度為36.5±0.5℃、PH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境:95%空氣和5%CCh。
【詳解】A、分析題圖可知,干細胞分化成了肌肉細胞和脂肪細胞,說明技術(shù)應用了干細胞能分化成其他
類型細胞的原理,A正確;
B、體外培養(yǎng)干細胞時需置于含95%空氣和5%CC>2的培養(yǎng)箱中,其中是細胞代謝所必需的,CO2的主
要作用是維持培養(yǎng)液的pH,B錯誤;
C、生物反應器擴大生產(chǎn)時培養(yǎng)基需加入動物血清等物質(zhì),以滿足動物細胞對未知營養(yǎng)物質(zhì)的需求,C正
確;
D、細胞培養(yǎng)肉進入市場銷售前還需進行安全性評估,符合相應標準才能上市,D正確。
故選Bo
11.A
【分析】1、植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適
宜的培養(yǎng)條件,誘導其形成完整植株的技術(shù),其原理為植物細胞的全能性。植物組織培養(yǎng)中細胞表現(xiàn)出全
能性的條件為:離體、嚴格的無菌條件、適宜的培養(yǎng)條件及適宜濃度和比例的激素。
2、動物細胞培養(yǎng):指從動物細胞中取出相關(guān)的組織,將它們分散成單個細胞,然后在適宜的條件下,讓
這些細胞生長和增殖的技術(shù)。
【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)的可獲得大量的細胞或細胞產(chǎn)物,生產(chǎn)實踐中可將外植體脫分化獲得愈傷組
織,再經(jīng)過細胞分裂可獲得大量細胞進而獲得大量細胞產(chǎn)物,即動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)都能實
現(xiàn)大量獲得細胞產(chǎn)物,A正確;
B、動物細胞培養(yǎng)過程中沒有發(fā)育成完整個體,也沒有分化成其他各種細胞,沒有體現(xiàn)細胞的全能性,B
錯誤;
C、植物組織培養(yǎng)技術(shù)使用固體培養(yǎng)基,動物細胞培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基,C錯誤;
D、植物組織培養(yǎng)技術(shù)不需要用酶將組織分散成細胞,動物細胞培養(yǎng)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將組織
分散為細胞,D錯誤。
故選Ao
12.D
【分析】動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基
中,讓這些細胞生長和增殖。過程:取動物組織塊-剪碎組織-用胰蛋白酶處理分散成單個細胞一制成細
胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞,
制成細胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】A、貼壁細胞隨著細胞的生長和增殖會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,從而停止生長和分裂,A正確;
B、該實驗的目的將貼壁依賴性的MDCK馴化為能懸浮培養(yǎng)的細胞,細胞活率為因變量,反映馴化過程中
MDCK的適應程度,B正確;
C、由題圖可知,隨著馴化時間的延長,細胞活率先下降后增加,說明MDCK先適應懸浮培養(yǎng)環(huán)境再開始
大量增殖,C正確;
D、培養(yǎng)過程中由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗及代謝廢物的積累,不利于細胞增殖,故懸浮培養(yǎng)也需進行傳代,D
錯誤。
故選D。
13.B
【分析】成體干細胞是成體組織或器官內(nèi)的干細胞,包括骨髓中的造血干細胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細胞
和睪丸中的精原干細胞等。一般認為,成體干細胞具有組織特異性,只能分化成特定的細胞或組織,不具
有發(fā)育成完整個體的能力。造血干細胞是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多應用也最為成熟的一類成體干細胞,主要存
在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中。
【詳解】A、成體干細胞是成體組織或器官內(nèi)的干細胞,骨骼干細胞(SSC)具有自我更新能力和分化潛
能,在骨骼發(fā)育中起重要作用,故SSC屬于成體干細胞,A正確;
B、SSC屬于成體干細胞,可以分裂分化,但不具有無限增殖的能力,B錯誤;
C、培養(yǎng)SSC需要提供02和C02,。2是細胞代謝所必需的,C02的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,C正
確;
D、有著自我更新能力及分化潛能的干細胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復等密切相關(guān),SSC具有自
我更新能力和分化潛能可應用于骨骼的再生和修復,D正確。
故選B。
14.B
【分析】單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免
疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩
選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培
養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、M病毒必須寄生在活細胞中才能完成生命活動,故不能用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)M病毒,A錯
誤;
B、可用M病毒膜蛋白(抗原)多次免疫小鼠,以獲得更多的能產(chǎn)生特異性抗體的漿細胞,B正確;
C、S細胞不是雜交瘤細胞,具有無限繁殖的特點,不具有產(chǎn)生抗體的特點,C錯誤;
D、體外培養(yǎng)單個雜交瘤細胞由于沒有發(fā)育完整有機體或分化為任何細胞,因此不能體現(xiàn)細胞的全能性,
D錯誤。
故選B。
15.D
【解析】動物細胞培養(yǎng)條件:
(1)無菌無毒環(huán)境:無菌-對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理;在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生
素;無毒-定期更換培養(yǎng)液,防止細胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。
(2)營養(yǎng)成分:所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元
素等,還需加入血清、血漿等天然成分。
(3)溫度和pH值:哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2?7.4。
(4)氣體環(huán)境:通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進
行培養(yǎng)。02是細胞代謝所必需的,CCh主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
【詳解】A、輕度攪拌可以增加培養(yǎng)液的溶氧量,有利于細胞的氧氣供應,A正確;
B、動物細胞培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需添加糖、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì),B正確;
C、以懸浮在培養(yǎng)液中的微珠作為細胞貼附的載體,能提高單位體積培養(yǎng)液的細胞產(chǎn)率,C正確;
D、該技術(shù)培養(yǎng)的動物細胞可作為病毒的宿主細胞,可應用于病毒疫苗的生產(chǎn)過程中,D錯誤。
故選D。
16.(1)克隆化培養(yǎng)抗體(陽性)
(2)AFB單抗與黃綠青霉素(或“CIT")、伏馬菌素(或“FB”)進行抗原-抗體雜交,結(jié)果為不能雜交(或“陰
性”“無雜交帶”)
(3)差異較小(或“相近”)
(4)D
【分析】由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體,稱為單克隆抗體。通常采
用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B
細胞和具有增殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞
群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。
(1)小問詳解:基因的表達包含轉(zhuǎn)錄和翻譯,F(xiàn)BI進入細胞后能與tRNA結(jié)合形成復合物,抑制tRNA與某
些氨基酸結(jié)合,從而抑制基因表達的翻譯過程。堿基對的增添、缺失、替換被稱為基因突變。(2)小問詳
解:①根據(jù)題意可知,參與合成完全抗原的物質(zhì)應該為大分子物質(zhì),即ab為大分子物質(zhì)滿足條件,cde
為小分子物質(zhì),不滿足條件。②融合形成雜交細胞的目的是為了獲得相應的抗體,故最終應該選擇能夠產(chǎn)
生抗AFB1抗體的雜交瘤細胞。③由于AFB1與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性,抗AFB1抗體能與其他
黃曲霉素發(fā)生一定反應,但較AFB1的反應弱。根據(jù)交叉反應的結(jié)果可看出,3Gl的特異性最強,故應選
擇3Gl抗體的雜交瘤細胞培養(yǎng)以獲得大量的該抗體用于檢測。(3)小問詳解:可從種植玉米的土壤中分離
并純化以香豆素為唯一碳源的微生物用于分解香豆素。具體方案為:將種植玉米的土壤樣品液接種到以香
豆素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上,選擇透明圈直徑大的菌落(或透明圈直徑與菌落直徑比值大的菌落)進
一步擴大培養(yǎng),用培養(yǎng)后的菌液處理已污染的玉米樣品。
【詳解】(1)如圖1為利用小鼠制備抗AFB的單克隆抗體(AFB單抗)的過程,其中步驟I為為細胞融
合和篩選得到雜交瘤細,需進一步通過步驟II克隆化培養(yǎng)和步驟III抗體陽性檢測,最后經(jīng)過多次篩選得到
能產(chǎn)生AFB單抗的雜交瘤細胞。
(2)若想確認上述流程獲得的AFB單抗具有極強的特異性,可以讓AFB單抗與食品中的其它有害殘留毒
素如黃綠青霉素(CIT)、伏馬菌素(FB)進行抗原-抗體雜交,結(jié)果為陰性,則可確認AFB單抗具有極強
的特異性。
(3)圖3結(jié)果表明,在物質(zhì)P濃度為0.8mg/mL時,探針發(fā)光性能與更高濃度時差異很小,因此科研時可
選擇該濃度(0.8mg/mL)作為生產(chǎn)檢測探針的條件,可節(jié)省成本。
(4)根據(jù)科研人員制備免疫試紙和檢測AFB的原理:用不同濃度的AFB標準溶液分別與等量“MP-抗
AFB單抗探針”混合,可推知,隨著AFB濃度增加,與之結(jié)合的探針增加,
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