（高清版）DB53∕T 1364-2025 草果無(wú)性苗繁育技術(shù)規(guī)程

草果無(wú)性苗繁育技術(shù)規(guī)程2025-08-09實(shí)施2025-08-09實(shí)施I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容有可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。本文件由云南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(YNTC07)歸口。本文件起草單位：云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所、中國(guó)熱帶作物科學(xué)院熱帶作物品種資源所、怒江昂可達(dá)生物科技開(kāi)發(fā)有限公司、云南植蟲(chóng)藥生物科技有限公司、貢山縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局農(nóng)業(yè)綜合發(fā)展服務(wù)中心、福貢縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、貢山縣獨(dú)龍江鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心、福貢縣石月亮鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心、福貢縣馬吉鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心、楚雄技師學(xué)院。本文件主要起草人：張金渝、楊美權(quán)、許宗亮、起明菊、曾祥飛、楊天梅、楊維澤、左應(yīng)梅、王麗、石瑤、于福來(lái)、陳秀花、張春華、葉春、余四友、李新華、郭喬儀、余向清、李后江。1將叢生植株從母株上分割下來(lái)進(jìn)行獨(dú)立新植4組培繁育具有洗滌室、培養(yǎng)瓶晾干室、試劑室(稱量室),培養(yǎng)基配制室、高壓滅菌室、培養(yǎng)基儲(chǔ)存室、更衣具備滅菌設(shè)備、培養(yǎng)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)設(shè)備、辦公設(shè)備和2以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加瓊脂4.5g/L～5.0g/L,蔗糖25g/L～30g/L,調(diào)節(jié)pH值為5.8~6.0。激素的具體用量和比例應(yīng)根據(jù)不同培養(yǎng)基類(lèi)型、品種特性及其在培養(yǎng)中的表MS+6-BA(2.00mg/L～4.00mg/L)+NAA(0.05mg/LMS+6-BA(6.00mg/L～8.00mg/L)+NAA(0.01mg/L～0.03mg/L)。分裝并密封好的培養(yǎng)基放入121℃下高壓滅菌20min,自然冷卻至壓力表指針降至0時(shí)，開(kāi)鍋取出4.4.1.1選取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的草果植株，以1年生植株幼嫩莖段為外植體。4.4.1.2將采集好的外植體置于常流水下沖淋1h后，用0.1%中性或弱堿性洗滌液10min,再用細(xì)小流水沖淋1h～2h。4.4.2.1外植體置于已消毒的超凈工作臺(tái)上，用無(wú)菌的吸水紙吸去水分。4.4.2.2用75%酒精消毒20s,無(wú)菌水刷洗2次~3次，再用8%過(guò)氧化氫搖動(dòng)消毒8min,無(wú)菌水沖洗4次～5次。4.4.2.3最后用0.1%升汞+2滴～3滴吐溫試劑搖動(dòng)消毒10min,再用無(wú)菌水沖洗5次~7次，于操作培養(yǎng)溫度為25℃±2℃,在光照強(qiáng)度為20001x～30001x,光照時(shí)長(zhǎng)為10h/d下光暗交替培養(yǎng)。80d,培養(yǎng)基達(dá)不到營(yíng)養(yǎng)條件時(shí)應(yīng)進(jìn)行轉(zhuǎn)接。34.6.3繼代培養(yǎng)將叢生芽切成具1芽～2芽的小團(tuán)塊，按生長(zhǎng)極性接種于繼代增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)時(shí)間為35d～45d。4.6.4生根培養(yǎng)切去基部多余團(tuán)塊，并將叢生芽切成單芽，按生長(zhǎng)極性接種于生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)時(shí)間為25d～30接種完畢立即蓋好瓶蓋并做好標(biāo)記，注明材料名稱、接種日期、接種人等事項(xiàng)。4.8出瓶苗要求苗高5cm以上，葉片肥厚鮮綠，具3條以上健壯根，即可出瓶煉苗。4.9煉苗按3:1的比例將過(guò)篩(孔徑)的生紅上和腐殖土混勻配成基質(zhì)，移栽前1d整理好苗床并澆透水備用。4.9.2.1出瓶前7d~14d,將培養(yǎng)瓶移至具遮陰率達(dá)60%～80%的溫室中接受散射陽(yáng)光的照射。4.9.2.2出瓶時(shí)，用清水將附在根系上的培養(yǎng)基清洗干凈。4.9.2.3然后放進(jìn)稀釋800倍1000倍的多菌靈或百菌清溶液中1min～2min,再?gòu)乃幰褐袚瞥鰜?lái)，晾干表面水分。4.9.3苗床準(zhǔn)備按3:1的比例將過(guò)篩(孔徑)的生紅土和腐殖土混勻配成基質(zhì)，墑寬1.2m~1.5m,移栽前1d整理好苗床并澆透水備用。4.9.4定植按株行距5cm×10cm定植在整理好的苗床上稍壓實(shí)。4.9.5馴化苗管理4.9.5.1定植后立即噴施一遍800倍～1000倍的多菌靈或百菌清等水溶液消毒。4.9.5.2搭建小拱棚保持80%土壤濕度30d～40d。4.9.5.3定植20d~25d后視苗情狀況噴施葉面肥，待小苗新葉展開(kāi)后按常規(guī)管理。4.9.6病蟲(chóng)害防控4.9.6.1苗期主要病害為疫病、葉瘟病和葉斑病。4.9.6.2在溫度≥30℃揭膜通風(fēng)，用枯草芽孢桿菌、咪鮮胺等藥劑防控。4.9.6.3蟲(chóng)害主要為蛞蝓，零星發(fā)生時(shí)可用撒生石灰、草木灰防治，或用四聚乙醛等藥劑防控。4.10.1出圃前一個(gè)月停止施肥，減少澆水次數(shù)。若幼苗長(zhǎng)勢(shì)過(guò)旺，則在出圃前一個(gè)月內(nèi)逐步減少遮陽(yáng)4率達(dá)40%～50%。4.10.2選擇健壯、根系發(fā)達(dá)、無(wú)病蟲(chóng)害，且苗高40cm～50cm的植株出圃，出圃時(shí)保持根系完整。5.1.1選擇種植6年～10年，生長(zhǎng)健壯、分蘗多、根系發(fā)達(dá)、無(wú)病蟲(chóng)害的植株作母株。5.1.2分株苗至少附帶2個(gè)嫩芽。5.1.3將帶芽根莖挖起，留30cm～50cm的地上部分莖，將多余部分莖及花芽打去。將分株苗的根莖用500倍液～600倍液的甲霜惡霉靈或百菌清浸泡消毒30min,取出放置在蔭涼的地面上放置2d～3d,待切