山西省運(yùn)城市臨猗縣臨晉中學(xué)2025年高二生物第二學(xué)期期末達(dá)標(biāo)測試試題含解析

山西省運(yùn)城市臨猗縣臨晉中學(xué)2025年高二生物第二學(xué)期期末達(dá)標(biāo)測試試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下圖所示的滲透裝置，放在適宜的條件下，隨著時(shí)間推移，相關(guān)指標(biāo)的變化情況錯(cuò)誤的是（）A． B．C． D．2．下圖1、2為光學(xué)顯微鏡物鏡，3、4為目鏡。欲使視野中觀察到的細(xì)胞最多，其正確的組合是A．1、3 B．1、4 C．2、4 D．2、33．圖甲為一個(gè)精原細(xì)胞中兩對(duì)等位基因和染色體的關(guān)系示意圖，圖乙為減數(shù)分裂產(chǎn)生的四種配子示意圖（不考慮基因突變）。下列有關(guān)分析正確的是A．若未發(fā)生交叉互換，則該精原細(xì)胞只產(chǎn)生①②兩個(gè)精子B．若發(fā)生交叉互換，則該精原細(xì)胞只產(chǎn)生③④兩種精子C．若發(fā)生交叉互換，則該精原細(xì)胞產(chǎn)生①②③④四種精子D．若發(fā)生交叉互換,則該生物體產(chǎn)生的精子中，③④類型的個(gè)數(shù)等于①②類型的個(gè)數(shù)4．下列有關(guān)生物體內(nèi)水的敘述，不正確的是A．越冬植物體內(nèi)自由水與結(jié)合水的比值下降B．細(xì)胞衰老的過程中自由水含量降低C．水分子的跨膜運(yùn)輸方向是高濃度溶液到低濃度溶液D．水是細(xì)胞中含量最多的化合物5．核孔并不是一個(gè)簡單的孔洞，而是一個(gè)復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，稱為核孔復(fù)合體，主要由蛋白質(zhì)構(gòu)成。下圖表示物質(zhì)通過核孔復(fù)合體的輸入和輸出過程。有關(guān)說法正確的是()A．不同類型的細(xì)胞中核孔數(shù)量都相同B．離子和小分子物質(zhì)都不能通過核孔C．大分子物質(zhì)進(jìn)出核孔不需要載體蛋白協(xié)助D．蛋白質(zhì)、核酸都能通過核孔進(jìn)出細(xì)胞核6．下圖表示某地域中以濕度和溫度為變量，描繪出的兩個(gè)種群能存活和增殖的范圍。下列有關(guān)敘述正確的是()A．甲種群與乙種群之間存在的只是競爭關(guān)系B．甲種群在該地域的分布包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)C．濕度和溫度相互作用是種群數(shù)量變化的決定因素D．在高溫、高濕的條件下，乙種群具有更大的生存優(yōu)勢二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）蟲草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用，研究人員培育了能合成SOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌?；卮鹣铝袉栴}：注:HindⅢ和ApaLⅠ是兩種限制酶,箭頭表示酶的切割位置。（1）將圖中的重組DNA分子用HinⅢ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到____種DNA片段。圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中,據(jù)圖分析，可用______（填限制酶的種類）切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用_________酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此，圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為________供鑒定和選擇，為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基______(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為______。為了確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄,可用標(biāo)記的__________作探針進(jìn)行分子雜交檢測，分子雜交的原理是___________________。（4）利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的SOD時(shí),需根據(jù)所設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測其_____________序列,最終確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列并經(jīng)____________獲得所需的基因。8．（10分）請(qǐng)回答利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物的相關(guān)問題:（1）培育轉(zhuǎn)基因植物過程的核心步驟是___________,其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中____,并且可以通過復(fù)制遺傳給下一代,同時(shí)使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用。

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可利用DNA連接酶連接被限制酶切開的_____鍵?；虮磉_(dá)載體的組成部分包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、____、復(fù)制原點(diǎn)等。

（3）組成基因表達(dá)載體的單體是____?；虮磉_(dá)載體中的啟動(dòng)子是___識(shí)別和結(jié)合的部位,這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動(dòng)目的基因通過-----___________________(填過程)合成mRNA。

（4）用兩種限制酶XbaⅠ和SacⅠ(兩種酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,獲得含目的基因的片段。若利用該片段構(gòu)建基因表達(dá)載體,應(yīng)選用的Ti質(zhì)粒是如圖中的____。9．（10分）下圖是4種生物的基本結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)根據(jù)圖回答下面的問題。（1）既有核糖體，也有染色體的是__________，____________。（填字母)；（2）A、B在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上最根本的區(qū)別是前者_(dá)__________；C、D結(jié)構(gòu)最根本的區(qū)別是后者_(dá)_______；A、B細(xì)胞質(zhì)中都具有的結(jié)構(gòu)是_____________。（3）A、B、C三種細(xì)胞構(gòu)成的生物都通過_________。(填物質(zhì))來控制新陳代謝和遺傳。（4）B細(xì)胞的結(jié)構(gòu)4是_____________，結(jié)構(gòu)11是______________。（5）根尖分生區(qū)細(xì)胞與B細(xì)胞相比沒有__________，___________。（填細(xì)胞器）10．（10分）某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。回答下列問題：（1）據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是_________。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證_______________，也是為了保證__________________。（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了________和_________過程。（3）為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_____________移入牛的____________中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。（4）為了檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的____________（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。11．（15分）利用單克隆抗體技術(shù)可以制得抗人肝癌的單克隆抗體，但產(chǎn)生此抗體的雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中凋亡現(xiàn)象嚴(yán)重，通過基因工程可提高此雜交瘤細(xì)胞的抗凋亡能力。相關(guān)步驟如下圖，請(qǐng)回答問題：（1）對(duì)人肝癌細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，為了防止培養(yǎng)過程中的污染，可在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加適量______，為了及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，需要定期___________。（2）向小鼠注入人肝癌細(xì)胞懸液，需要反復(fù)多次操作，其目的是____________。（3）將小鼠骨髓瘤細(xì)胞和淋巴細(xì)胞進(jìn)行融合時(shí)除了用滅活的病毒、電激等，還可以使用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是__________。（4）用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要合成引物。設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是_______________。（5）過程①和②的目的都是進(jìn)行篩選，過程①是要篩選出____________的雜交瘤細(xì)胞B，過程②是要篩選出_______的雜交瘤細(xì)胞C。（6）與普通抗癌藥物相比，用抗人肝癌單克隆抗體與相應(yīng)抗癌藥物結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”治療肝癌的主要優(yōu)點(diǎn)是__________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

滲透作用：水分子（或其他溶劑分子）透過半透膜，從低濃度溶液向高濃度溶液的擴(kuò)散叫做滲透作用。滲透作用發(fā)生的條件：一是有一層半透膜，二是這層半透膜兩側(cè)的溶液具有濃度差。滲透壓指溶質(zhì)微粒對(duì)水的吸引力，滲透壓大小取決于單位體積溶液中溶質(zhì)微粒的數(shù)目，溶質(zhì)微粒越多，滲透壓越高。題圖分析：燒杯中盛有蒸餾水，倒置漏斗內(nèi)有蔗糖溶液，且有膀胱膜，滿足了滲透作用的條件，在一段時(shí)間內(nèi)燒杯中的水就會(huì)向漏斗中滲透，使得漏斗的液面上升，上升到一定高度，就達(dá)到了動(dòng)態(tài)平衡?！驹斀狻緼、隨著時(shí)間的推移，水分子進(jìn)入蔗糖溶液，蔗糖溶液濃度逐漸降低，液面高度差趨向于穩(wěn)定，A正確；B、隨著水分進(jìn)入蔗糖溶液，蔗糖溶液濃度逐漸降低，滲透壓也逐漸降低，當(dāng)液面靜止時(shí)，蔗糖溶液的濃度不再變化，滲透壓也維持穩(wěn)定，但不為0，B錯(cuò)誤；C、隨著水分進(jìn)入蔗糖溶液，蔗糖溶液濃度逐漸降低，當(dāng)液面靜止時(shí)，蔗糖溶液的濃度不再變化，但不為0，C正確；D、隨著水分進(jìn)入蔗糖溶液，蔗糖溶液濃度逐漸降低，滲透壓也逐漸降低，液面上升速率逐漸降低，最終不再上升，D正確；因此選B。深刻理解滲透作用的原理，并能在曲線圖中準(zhǔn)確判斷其變化是解題的關(guān)鍵。2、B【解析】圖中1、2表示顯微鏡物鏡，物鏡越長，放大倍數(shù)越大；而3、4表示目鏡，目鏡與物鏡相反，目鏡越短，放大倍數(shù)越大。由于題中要求在一個(gè)視野中看到的細(xì)胞最多，因此應(yīng)選用低倍組合，即1、4，故B項(xiàng)正確，A、C、D項(xiàng)錯(cuò)誤。解答本題的關(guān)鍵是審清題意，并且準(zhǔn)確辨別物鏡和目鏡中的高倍鏡。本題出錯(cuò)的主要原因是沒弄明白顯微鏡的目鏡、物鏡的放大倍數(shù)以及工作原理3、C【解析】

考查減數(shù)分裂過程中染色體、基因的行為規(guī)律。一對(duì)同源染色體遵循分離定律；一對(duì)染色體復(fù)制后形成的四個(gè)子染色體分配到四個(gè)子細(xì)胞中。【詳解】同源染色體交叉互換后，一個(gè)染色體上一條染色單體上基因若是AB,另一條上是Ab，那么另一條染色體的一個(gè)染色單體上基因上ab，另一條染色單體上上aB，一個(gè)精原細(xì)胞分裂完成后形成AB、Ab、aB、ab四個(gè)精子，所以C正確、AB錯(cuò)誤。由于一個(gè)個(gè)體中能發(fā)生交叉互換的精原細(xì)胞只是少數(shù)，所以產(chǎn)生的精子中，③④類型的個(gè)數(shù)少于①②類型，D錯(cuò)誤。故選C。兩個(gè)要點(diǎn)：交叉互換的細(xì)胞占少數(shù)；交叉互換導(dǎo)致基因重組，一個(gè)精原細(xì)胞產(chǎn)生四種類型的精子，自由組合也導(dǎo)致基因重組，但一個(gè)精原細(xì)胞只產(chǎn)生兩種類型的精子。4、C【解析】

生物體的一切生命活動(dòng)離不開水，水是活細(xì)胞中含量最多的化合物，細(xì)胞內(nèi)水的存在形式是自由水和結(jié)合水，自由水與結(jié)合水的比值越大，細(xì)胞代謝活動(dòng)越旺盛，抗逆性越差，反之亦然?！驹斀狻緼、自由水與結(jié)合水的比值與細(xì)胞代謝強(qiáng)度呈正相關(guān)，越冬植物代謝弱，自由水與結(jié)合水的比值下降，A正確；B、細(xì)胞衰老時(shí)，自由水含量降低，B正確；C、水分子跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞绞菨B透作用，從低濃度溶液向高濃度溶液運(yùn)輸，C錯(cuò)誤；D、水是細(xì)胞中含量最多的化合物，D正確。故選C。5、C【解析】

核孔可實(shí)現(xiàn)核質(zhì)之間頻繁的物質(zhì)交換和信息交流，核孔的數(shù)目、分布和密度與細(xì)胞代謝活性有關(guān)，核質(zhì)與細(xì)胞質(zhì)之間物質(zhì)交換旺盛的細(xì)胞核孔數(shù)目多，通過核孔的運(yùn)輸具有選擇性，核孔在調(diào)節(jié)細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的物質(zhì)交換中有一定的作用?！驹斀狻緼：代謝越旺盛的細(xì)胞中核孔數(shù)量越多；A錯(cuò)誤。

B：部分離子和小分子也能通過核孔；B錯(cuò)誤。

C：大分子物質(zhì)進(jìn)出核孔不需要載體蛋白的攜帶，C正確。

D：DNA不能通過核孔進(jìn)出細(xì)胞核，D錯(cuò)誤。本題主要考查學(xué)生對(duì)知識(shí)的理解和記憶能力，通過核孔的運(yùn)輸具有選擇性是解題的關(guān)鍵。6、D【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：甲種群能存活和增殖的適宜范圍是低溫和低濕度，乙種群能存活和增殖的適宜范圍是高溫和高濕度，它們適宜的生存的環(huán)境不相同?！驹斀狻緼、由題無法確定甲乙兩種群的關(guān)系，A錯(cuò)誤；B、只有群落才具有垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)之說，種群沒有這些特征，B錯(cuò)誤；C、決定種群數(shù)量變化的決定因素是出生率、死亡率、遷入和遷出，C錯(cuò)誤；D、在高溫、高濕的條件下，對(duì)甲種群不適宜，對(duì)乙種群適宜，所以乙種群具有更大的生存優(yōu)勢，D正確．故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、3ApaLⅠDNA連接標(biāo)記基因不需要轉(zhuǎn)化SOD基因堿基互補(bǔ)配對(duì)氨基酸基因修飾【解析】

分析題圖可知，圖中基因表達(dá)載體中的目的基因是外源PSSOD基因，氨芐青霉素抗性基因是標(biāo)記基因；該基因表達(dá)載體中存在HindIII的一個(gè)酶切位點(diǎn)，存在ApaLI的兩個(gè)酶切位點(diǎn)，因此用兩種酶同時(shí)切割環(huán)狀質(zhì)粒，會(huì)得到3種不同的DNA片段?！驹斀狻浚?）根據(jù)以上分析已知，圖中的重組DNA分子中存在HindIII的一個(gè)酶切位點(diǎn)，存在ApaLI的兩個(gè)酶切位點(diǎn)，因此用兩種酶同時(shí)切割環(huán)狀質(zhì)粒，會(huì)得到3種不同的DNA片段。根據(jù)題意分析，圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因，不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中，因此可以利用ApaLⅠ切除該抗性基因的部分片段使其失效，再用DNA連接酶使表達(dá)載體重新連接起來。（2）根據(jù)題意分析，已知作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因，必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活，因此圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為標(biāo)記基因，供鑒定和選擇；由于導(dǎo)入的表達(dá)載體的酵母菌中含有URA3基因，而普通酵母菌中不含有URA3基因，因此為了篩選出成功導(dǎo)人表達(dá)載體的酵母菌，所使用的培養(yǎng)基不需要添加尿嘧啶。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。為了確定受體細(xì)胞中SOD基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的RNA，可用標(biāo)記的SOD基因作探針進(jìn)行分子雜交檢測，其原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)。（4）利用蛋白質(zhì)工程獲得活性更高的PSSOD時(shí)，需根據(jù)所設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測其氨基酸序列，最終確定相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列并經(jīng)基因修飾獲得所需的基因。解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記限制酶的作用特點(diǎn)和結(jié)果、標(biāo)記基因的功能，掌握蛋白質(zhì)工程的一般過程和方法，再結(jié)合題干信息準(zhǔn)確解答。8、構(gòu)建基因表達(dá)載體穩(wěn)定存在磷酸二酯標(biāo)記基因脫氧核苷酸RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄甲【解析】

（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以通過復(fù)制遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用。（2）DNA連接酶連接限制酶打開的磷酸二酯鍵，基因表達(dá)載體的組成部分包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等。（3）組成基因表達(dá)載體的單體是脫氧核苷酸。基因表達(dá)載體中的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動(dòng)目的基因通過轉(zhuǎn)錄合成mRNA。（4）用兩種限制酶XbaⅠ和SacⅠ（兩種酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，獲得含目的基因的片段。要確保質(zhì)粒上也有這兩種酶的切點(diǎn)，選甲。確定限制酶的種類（1）根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點(diǎn)確定限制酶的種類①應(yīng)選擇切點(diǎn)位于目的基因兩端的限制酶，如圖甲可選擇PstⅠ。②不能選擇切點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部的限制酶，如圖甲不能選擇SmaⅠ。③為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，如圖甲也可選擇用PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶（但要確保質(zhì)粒上也有這兩種酶的切點(diǎn)）。（2）根據(jù)質(zhì)粒的特點(diǎn)確定限制酶的種類①所選限制酶要與切割目的基因的限制酶相一致，以確保具有相同的黏性末端。②質(zhì)粒作為載體必須具備標(biāo)記基因等，所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結(jié)構(gòu)，如圖乙中限制酶SmaⅠ會(huì)破壞標(biāo)記基因；如果所選酶的切點(diǎn)不止一個(gè)，則切割重組后可能會(huì)丟失某些片段，若丟失的片段含復(fù)制起點(diǎn)區(qū)，則切割重組后的片段進(jìn)入受體細(xì)胞后不能自主復(fù)制。9、BC無以核膜為界限的細(xì)胞核無細(xì)胞結(jié)構(gòu)核糖體DNA葉綠體線粒體液泡葉綠體【解析】

分析A圖：圖A是細(xì)菌模式圖，其中結(jié)構(gòu)①～⑤依次為細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、擬核、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、核糖體。分析B圖：圖示是植物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖，結(jié)構(gòu)1～14依次表示細(xì)胞膜、細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、葉綠體、高爾基體、核仁、染色質(zhì)、核膜、核液、核孔、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、液泡。分析C圖：C為動(dòng)物細(xì)胞模式圖。分析D圖：D沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，為病毒結(jié)構(gòu)模式圖。【詳解】（1）只有真核細(xì)胞含有染色體，因此既有核糖體，也有染色體的是B、C。（2）A為原核細(xì)胞，B為真核細(xì)胞，兩者在細(xì)胞結(jié)構(gòu)最根本的區(qū)別是前者無以核膜為界限的細(xì)胞核；C為動(dòng)物細(xì)胞，D為病毒，兩者結(jié)構(gòu)最根本的區(qū)別是后者無細(xì)胞結(jié)構(gòu)；A為原核細(xì)胞，B為真核細(xì)胞，兩者細(xì)胞質(zhì)中共有的結(jié)構(gòu)是核糖體；（3）A、B、C三種細(xì)胞構(gòu)成的生物都通過DNA來控制新陳代謝和遺傳；（4）B細(xì)胞的結(jié)構(gòu)4是葉綠體，結(jié)構(gòu)11是線粒體；（5）根尖分生區(qū)細(xì)胞沒有葉綠體和大液泡。熟悉常見生物（比如細(xì)菌、藍(lán)藻、動(dòng)物細(xì)胞、植物細(xì)胞、病毒）的結(jié)構(gòu)模式圖，了解各部分結(jié)構(gòu)名稱及主要作用，是解決本題的關(guān)鍵。10、E1和E4甲的完整甲與載體正確連接轉(zhuǎn)錄翻譯細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞核DNA【解析】【分析】本題以圖文結(jié)合的形式綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程、核移植等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解核移植技術(shù)的過程、基因工程的基本操作程序，特別是明確PCR技術(shù)的原理和過程、基因表達(dá)載體的組成及其作用、限制酶的作用等相關(guān)知識(shí)并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題圖中提取有效信息進(jìn)行相關(guān)問題的解答?！驹斀狻浚?）要保證目的基因在受體細(xì)胞中能夠正確表達(dá)，目的基因的首端應(yīng)有啟動(dòng)子，尾端應(yīng)有終止子。甲是將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5ˊ末端而獲得的L1-GFP融合基因，據(jù)此結(jié)合題意并分析圖示可知：該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，如果用E2或E3，則目的基因不完整，而使用E1和E4這兩種限制酶進(jìn)行酶切保證了甲的完整，而且也保證了甲與載體正確連接，因此，使用的兩種限制酶，是E1和E4。（2）構(gòu)建的真核表達(dá)載體P1中含有GFP基因，而GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物“某種熒光蛋白（GFP）”在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達(dá)。基因的表達(dá)過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。（3）若要獲得含有甲的牛，可采用核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，并將該重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)成重組胚胎，再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。（4）PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。若利用PCR方法檢測甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，則應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板?！军c(diǎn)睛】本題的難點(diǎn)在于對(duì)（1）的解答。解題的關(guān)鍵是：以題意“獲得L1-GFP融合基因（簡稱為甲）”的過程為