DB32/T 4395-2022小麥土傳病毒病病原檢測技術(shù)規(guī)程

ICS65020

CCSB1.6

江蘇省地方標準

DB32/T4395—2022

小麥土傳病毒病病原檢測技術(shù)規(guī)程

Codeofpracticefordetectionofpathogenofsoil-bornewheatviraldiseases

2022-11-14發(fā)布2022-12-14實施

江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

中國標準出版社出版

DB32/T4395—2022

前言

本文件按照標準化工作導(dǎo)則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任

。。

本文件由江蘇省作物標準化技術(shù)委員會提出并歸口

。

本文件起草單位江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院寧波大學(xué)江蘇省植物保護植物檢疫站

:、、。

本文件主要起草人周彤羊健杜琳琳朱鳳周益軍

:、、、、。

Ⅰ

DB32/T4395—2022

小麥土傳病毒病病原檢測技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了小麥黃花葉病毒和中國小麥花葉病毒檢測原理設(shè)備和試劑間接酶聯(lián)免疫吸附劑測

、、

定斑點酶聯(lián)免疫吸附劑測定及測定方法

、RT-PCR。

本文件適用于小麥黃花葉病毒和中國小麥花葉病毒的檢測

。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

21

.

小麥黃花葉病wheatyellowmosaicdisease

小麥的一種土傳病毒病自然界中由禾谷多黏菌Polmxaraminis在土壤中傳播病原為小麥

,(yyg),

黃花葉病毒

(wheatyellowmosaicvirus)。

22

.

中國小麥花葉病Chinesewheatmosaicdisease

小麥的一種土傳病毒病自然界中由禾谷多黏菌Polmxaraminis在土壤中傳播病原為中國

,(yyg),

小麥花葉病毒

(chinesewheatmosaicvirus)。

3縮略語

中國小麥花葉病毒

CWMV:(ChineseWheatMosaicVirus)

斑點酶聯(lián)免疫吸附劑測定

Dot-ELISA:(DotEnzyme-linkedImmunosorbentAssay)

酶聯(lián)免疫吸附劑測定

ELISA:(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay)

間接間接酶聯(lián)免疫吸附劑測定

ELISA:(IndirectEnzyme-linkedImmunosorbentAssay)

聚合酶鏈式反應(yīng)

PCR:(PolymeraseChainReaction)

逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式擴增反應(yīng)

RT-PCR:-(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)

小麥黃花葉病毒

WYMV:(WheatYellowMosaicVirus)

4原理

4.1間接ELISA原理

將酶分子與抗體共價結(jié)合得到同時具有免疫活性和酶的生物活性的酶標抗體檢測時將已知的

,。,

抗體吸附在固相載體表面若受檢樣本中含有相應(yīng)的抗原則會與固相載體上的抗體發(fā)生特異性結(jié)合從

,,

而隨之固定在固相載體上然后洗滌除去未結(jié)合及多余的其他蛋白再加入酶標抗體使其與吸附在固

,,,

相載體上的抗原特異性結(jié)合最后加入酶反應(yīng)底物底物被酶催化出現(xiàn)顏色反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物因此

,,。,

可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)顏色反應(yīng)的深淺與受檢樣品中抗原的量呈正比