標(biāo)準(zhǔn)解讀

《DB32/T 3925-2020 白斑綜合征病毒(WSSV)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》是江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn),旨在為白斑綜合征病毒(WSSV)的檢測(cè)提供一種快速、準(zhǔn)確且簡(jiǎn)便的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了使用LAMP技術(shù)進(jìn)行WSSV檢測(cè)的操作流程和技術(shù)要求,適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中蝦類疾病的診斷及預(yù)防控制工作。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),首先需要準(zhǔn)備樣本,包括但不限于對(duì)蝦的組織液或血液。接著,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)按照特定比例配置LAMP反應(yīng)混合物,這通常包含Bst DNA聚合酶、特異性引物集、dNTPs以及緩沖液等成分。其中,設(shè)計(jì)合理的引物對(duì)于確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。標(biāo)準(zhǔn)還明確了反應(yīng)條件,比如溫度和時(shí)間的選擇,以保證最佳的擴(kuò)增效率。

此外,《DB32/T 3925-2020》強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,通過設(shè)置陽性對(duì)照與陰性對(duì)照來驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的有效性,并建議定期校準(zhǔn)儀器設(shè)備以減少誤差來源。同時(shí),也提到了關(guān)于數(shù)據(jù)記錄、報(bào)告編寫等方面的要求,確保整個(gè)檢測(cè)過程可追溯、透明化。

最后,該文件還提供了如何判斷LAMP反應(yīng)結(jié)果的具體方法,通常是通過觀察顏色變化或者利用熒光染料在紫外燈下查看是否有目標(biāo)DNA片段被成功擴(kuò)增。正確執(zhí)行這些步驟有助于提高WSSV早期發(fā)現(xiàn)率,從而采取及時(shí)有效的防控措施,保護(hù)養(yǎng)殖業(yè)免受重大經(jīng)濟(jì)損失。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2020-12-15 頒布
  • 2021-01-15 實(shí)施
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DB32/T 3925-2020白斑綜合征病毒(WSSV)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)技術(shù)規(guī)范_第1頁(yè)
DB32/T 3925-2020白斑綜合征病毒(WSSV)環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)技術(shù)規(guī)范_第2頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS65150

CCSB.52

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T3925—2020

白斑綜合征病毒W(wǎng)SSV環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增

()

LAMP檢測(cè)技術(shù)規(guī)范

()

Technicalsecificationofdetectinwhite-sotsndromevirusWSSVb

pgpy()y

loo-mediatedisothermalamlificationLAMP

pp()

2020-12-15發(fā)布2021-01-15實(shí)施

江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB32/T3925—2020

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件由蘇州大學(xué)提出并歸口

。

本文件起草單位蘇州大學(xué)江蘇省水生動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

:、。

本文件主要起草人薛仁宇貢成良陳輝曹廣力魏育紅方蘋胡小龍朱敏劉波

:、、、、、、、、。

DB32/T3925—2020

白斑綜合征病毒W(wǎng)SSV環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增

()

LAMP檢測(cè)技術(shù)規(guī)范

()

1范圍

本文件規(guī)定了用技術(shù)檢測(cè)白斑綜合征病毒的方法

LAMP。

本文件適用于環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增對(duì)蝦蟹白斑綜合征病毒的鑒定及其檢疫

(LAMP)、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

水生動(dòng)物產(chǎn)地檢疫采樣技術(shù)規(guī)范

SC/T7103—2008

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增Loop-mediatedisothermalamplificationLAMP

;

一種新的等溫核酸擴(kuò)增方法其特點(diǎn)是針對(duì)靶基因的個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)種特異性引物利用一種鏈置

,64,

換聚合酶在等溫條件下保溫所完成的核酸擴(kuò)增反應(yīng)

DNA30min~60min,。

4試劑和材料

41水

.

應(yīng)符合中一級(jí)水的要求

GB/T6682。

42模板制備緩沖液

.

緩沖液中含體積百分?jǐn)?shù)

20mmol/LTris-HCl,10mmol/LKCl,0.1%TritonX-100,10mmol/L

保存試劑及其配制按照附錄

(NH4)2SO4,2mmol/LMgSO4,-20℃。A。

43BstDNA聚合酶

.

保存不能在反復(fù)凍融或經(jīng)歷溫度劇烈變化情況后使用

8U/μL,-20℃,。

44dNTPs混合物

.

含各的混合物保存不宜在反復(fù)凍

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