（高清版）DB62∕T 4805-2023 家畜冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

家畜冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程2023-10-20實施2023-10-20實施本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由甘肅省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并監(jiān)督實施。本文件由甘肅省畜牧業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：慶陽市農(nóng)業(yè)科學研究院、正寧縣畜牧獸醫(yī)站。本文件主要起草人：施海娜、梁萬鵬、梁永虎、蘇濤龍、耿智廣、李世恩、劉雨田、朱正生、張金霞、徐振飛、宋敏、趙鳳妮、李菲菲。本文件由慶陽市農(nóng)業(yè)科學研究院負責解釋。I本文件規(guī)定了家畜冷凍精液生產(chǎn)的種公畜要求、精液采集、精液處理和存儲運輸?shù)确矫娴募夹g(shù)要求。本文件適用于牛、羊、馬、驢等家畜冷凍精液的生產(chǎn)，其它可參照執(zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T12343術(shù)語和定義牛冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范羊冷凍精液生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程馬和驢冷凍精液本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4種公畜要求4.1種公畜的要求：牛按照NY/T1234的規(guī)定執(zhí)行，山羊按照NY/T3186的規(guī)定執(zhí)行，馬和驢按照NY/T3796的規(guī)定執(zhí)行。4.2體型外貌和生產(chǎn)性能符合品種特性且具備特級、一級標準，無疫病。5采精準備5.1器械準備采精器械(采精外殼、內(nèi)膽、一次性過濾采精袋、不銹鋼保溫集精杯、集精管)、離心機、移液器 (量程1μL、20μL、5mL)、精液冷凍架、磁力攪拌器、水浴鍋、高壓滅菌鍋、干燥箱、冷藏冷凍箱、長柄鑷子、生物顯微鏡、恒溫電熱板、液氮罐、家畜用密度儀、精液質(zhì)量分析系統(tǒng)、立式平衡柜、灌裝打印一體機、程序冷凍儀、生物安全柜。5.2試劑耗材準備稀釋劑、蒸餾水、凡士林、生理鹽水、液氮、過濾采精袋、燒杯(100mL、200mL)、量筒(10mL、50mL)、量杯(100mL、200mL)、細管(0.25mL/劑、0.5mL/劑)、指型管、鑷子、剪刀、水銀溫度計、保溫瓶、無菌紗布、無菌紗布袋、載玻片、蓋玻片、濾紙、玻璃棒、噴壺、毛巾、標簽紙、記號筆、細繩。125.4.1種公畜采精前應(yīng)用誘導的方法使其具有5.4.2利用發(fā)情母畜或假臺畜對種公畜進行調(diào)教，使其建立條件反射。內(nèi)膽、集精杯、保溫套和一次性過濾采精袋。假陰道用75%的酒精棉球擦拭消毒，無消毒劑殘留后注人38.5℃~39.5℃左右溫水約500mL,假陰道內(nèi)膽壁溫度保持在38.5℃~39.5℃,充入氣體使假陰道內(nèi)膽壁6.1采精場所應(yīng)保持安靜、清潔衛(wèi)生，地面防滑，并有護欄等安全保護設(shè)施。6.2種公畜體表應(yīng)清潔衛(wèi)生，刷洗干凈外陰部位，如陰毛過長時應(yīng)適度修剪。包皮確需沖洗的，沖洗干凈30min后才可進行采精操作。6.3將采精用具有規(guī)則地擺放在操作臺上，盛裝潤滑劑的燒杯每次使用前用水煮沸消毒后置于37.5℃6.4采精前將假陰道從恒溫箱中取出，在假陰道內(nèi)膽前端三分之一處均勻涂抹少量潤滑劑(凡士林與液體石蠟1:1),牛、山羊假陰道后端套入乳膠三角漏斗并固定好，在漏斗的后端安裝上集精管，集精管可套裝有35℃溫水的平底塑料瓶并套上保溫套。馬、驢的假陰道后端安裝集精杯并套好保溫套。馬、驢的鮮精需用4層醫(yī)用紗布過濾，記錄采精量后將集精管置于37.5℃的水浴鍋中(牛、山羊不需此步驟)。正常精液色澤呈乳(灰)白色或淡黃色，有輕微的腥味。7.3.2鮮精活力(?！?.7、山羊≥0.65、馬≥0.6、驢≥0.65),冷凍后活力(?！?.4、山羊≥0.35、入2mL的離心墊，按1000rpm離心20min(不使用離心墊，則按600rpm～800rpm,離心10min),去掉上馬、驢參照附錄A進行稀釋量計算，牛、山羊按照原精液中，輕輕搖勻后將盛精液的燒杯放入37.5℃水浴鍋中水浴10min。將冷凍架放在泡沫箱內(nèi)，在箱內(nèi)倒入一定量的液氮，液氮面低于冷在-110℃~-130℃的溫度下熏蒸冷凍8min～10min,最后將精液細管全部浸入液氮中(應(yīng)符合附錄B的要求、適用于科研院所地方優(yōu)良品種保護、小型養(yǎng)殖企業(yè)良種快速擴繁)。8.1取一支細管凍精快速浸入37.5℃水浴鍋中并輕輕晃動，待溶解后立即取出，用吸水紙或紗布擦干8.2馬、驢、山羊凍精活力≥0.35為合格，牛凍精活力≥0.4為合格(鏡檢程序見7.3)。ZSN0520230601(譯為：早勝牛5號2023年06月01日生產(chǎn))。34時隨時查看罐內(nèi)液氮量并及時添加，確保凍精紗布袋始終浸入液氮液氮罐口密封牢固，嚴防液氮罐顛倒。搬運液氮罐時要輕拿輕放，避免液(資料性)不同活力精液稀釋量計算方法對于0.5mL細管，實際每支細管有0.4mL左右精液，要求每支細管的有效精子為0.50億個，則不同冷凍后精子活力的目標密度如表A.1所示。表A.1稀釋量計算凍后活力(0.50億/凍后活力)