核酸檢測(cè)方法試題及答案

核酸檢測(cè)方法試題及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.目前臨床最常用的核酸檢測(cè)技術(shù)是（）A.核酸分子雜交B.基因測(cè)序C.聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）D.生物芯片技術(shù)2.PCR反應(yīng)體系中不包括以下哪種成分（）A.引物B.模板DNAC.Taq酶D.限制性內(nèi)切酶3.熒光定量PCR技術(shù)中，用于檢測(cè)熒光信號(hào)的儀器是（）A.酶標(biāo)儀B.熒光定量PCR儀C.離心機(jī)D.電泳儀4.核酸提取過(guò)程中，常用的裂解液成分不包括（）A.蛋白酶KB.SDSC.乙醇D.Tris-HCl5.核酸的基本組成單位是（）A.氨基酸B.脂肪酸C.核苷酸D.磷酸6.下列哪種樣本不適合用于核酸檢測(cè)（）A.血液B.痰液C.尿液D.頭發(fā)7.核酸檢測(cè)時(shí)，樣本采集后若不能及時(shí)檢測(cè)，一般保存于（）A.4℃B.-20℃C.-80℃D.室溫8.逆轉(zhuǎn)錄PCR是將（）逆轉(zhuǎn)錄為cDNA后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增。A.rRNAB.tRNAC.mRNAD.DNA9.核酸分子雜交的原理是（）A.堿基互補(bǔ)配對(duì)B.抗原抗體結(jié)合C.酶底物反應(yīng)D.分子間引力10.以下哪種核酸檢測(cè)技術(shù)可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因（）A.普通PCRB.熒光定量PCRC.數(shù)字PCRD.基因芯片技術(shù)答案：1.C2.D3.B4.C5.C6.D7.B8.C9.A10.D二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.核酸檢測(cè)前，樣本采集需要注意（）A.采集部位準(zhǔn)確B.樣本量足夠C.避免污染D.使用合適的采集工具2.核酸提取方法包括（）A.酚氯仿抽提法B.硅膠膜吸附法C.磁珠法D.離子交換法3.PCR反應(yīng)的基本步驟包括（）A.變性B.退火C.延伸D.連接4.熒光定量PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)有（）A.靈敏度高B.特異性強(qiáng)C.能定量分析D.操作簡(jiǎn)單5.核酸分子雜交可用于（）A.基因診斷B.基因定位C.檢測(cè)基因表達(dá)水平D.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析6.影響核酸檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有（）A.樣本質(zhì)量B.檢測(cè)試劑質(zhì)量C.儀器設(shè)備性能D.操作人員技術(shù)水平7.數(shù)字PCR與熒光定量PCR的區(qū)別在于（）A.數(shù)字PCR能進(jìn)行絕對(duì)定量B.數(shù)字PCR無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)曲線C.熒光定量PCR靈敏度更高D.數(shù)字PCR操作更復(fù)雜8.核酸檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用包括（）A.病原體檢測(cè)B.遺傳病診斷C.腫瘤診斷與治療監(jiān)測(cè)D.器官移植配型9.基因芯片技術(shù)的特點(diǎn)有（）A.高通量B.快速C.準(zhǔn)確D.成本低10.核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需要具備的條件有（）A.合理的分區(qū)B.良好的通風(fēng)C.合格的儀器設(shè)備D.嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系答案：1.ABCD2.ABC3.ABC4.ABC5.ABC6.ABCD7.AB8.ABCD9.ABC10.ABCD三、判斷題（每題2分，共20分）1.所有的核酸檢測(cè)都需要提取核酸。（）2.PCR反應(yīng)中，引物的長(zhǎng)度越長(zhǎng)越好。（）3.熒光定量PCR只能用于定量分析，不能進(jìn)行定性檢測(cè)。（）4.核酸提取過(guò)程中，乙醇的作用是沉淀核酸。（）5.核酸分子雜交必須在液相中進(jìn)行。（）6.數(shù)字PCR可以檢測(cè)低豐度核酸。（）7.基因芯片技術(shù)可以檢測(cè)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。（）8.樣本采集后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)不會(huì)影響核酸檢測(cè)結(jié)果。（）9.核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室只要有儀器設(shè)備就可以開(kāi)展檢測(cè)工作。（）10.逆轉(zhuǎn)錄PCR常用于病毒核酸檢測(cè)。（）答案：1.√2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.×9.×10.√四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述PCR技術(shù)的原理。答案：以目的DNA為模板，在引物、dNTP、Taq酶等作用下，經(jīng)過(guò)高溫變性使雙鏈DNA解開(kāi)，低溫退火讓引物與模板結(jié)合，中溫延伸由Taq酶催化合成新的DNA鏈，經(jīng)多次循環(huán)擴(kuò)增出大量目的DNA。2.核酸提取的關(guān)鍵要點(diǎn)有哪些？答案：確保樣本新鮮合格，選擇合適提取方法；有效裂解細(xì)胞釋放核酸，去除雜質(zhì)和抑制劑；注意操作環(huán)境避免核酸降解；保證核酸濃度和純度滿足后續(xù)檢測(cè)要求。3.熒光定量PCR技術(shù)如何實(shí)現(xiàn)定量分析？答案：利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR進(jìn)程，通過(guò)與已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)比，依據(jù)熒光閾值和循環(huán)數(shù)關(guān)系，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而對(duì)未知樣本核酸進(jìn)行定量。4.簡(jiǎn)述核酸分子雜交的基本流程。答案：先制備核酸探針并標(biāo)記，將待測(cè)核酸樣品固定，然后使探針與樣品核酸在合適條件下雜交，洗去未雜交探針，最后通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記信號(hào)來(lái)判斷雜交情況。五、討論題（每題5分，共20分）1.核酸檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性的原因有哪些？如何避免？答案：假陽(yáng)性可能因樣本交叉污染、試劑問(wèn)題等；假陰性可能是樣本采集不當(dāng)、核酸降解等。避免措施包括規(guī)范樣本采集保存，定期校準(zhǔn)儀器、使用合格試劑，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，設(shè)立多種對(duì)照等。2.對(duì)比傳統(tǒng)核酸檢測(cè)技術(shù)和新興核酸檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)。答案：傳統(tǒng)技術(shù)如普通PCR操作簡(jiǎn)單、成本低，但靈敏度和通量有限。新興技術(shù)如數(shù)字PCR定量精準(zhǔn)、能檢測(cè)低豐度核酸，但儀器昂貴；基因芯片高通量快速，可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)，不過(guò)成本高、技術(shù)復(fù)雜。3.在核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中，質(zhì)量控制的重要性體現(xiàn)在哪些方面？答案：保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，減少誤差和錯(cuò)誤結(jié)果。規(guī)范操作流程，確保不同人員檢測(cè)結(jié)果一致性。保障儀器設(shè)備正常運(yùn)行、試劑有效性。提高實(shí)驗(yàn)室整體水平，增強(qiáng)結(jié)果可信度，為臨床診斷和治療