玉米穗腐病抗原鑒定及評價技術(shù)規(guī)程

3本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)行玉米穗腐病抗源鑒定及評價技術(shù)的接種體制備、抗病性鑒定圃、接種、病情調(diào)查、抗病性評價和田間檔案?？圭犳咚敫¤b定技術(shù)方法和抗性評價標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)適用于栽培玉米(ZeaMaysL.)自交系和雜交種對玉米鐮孢穗腐病的田間抗性鑒定和評價。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB4401.1-2008糧食作物種子第1部分：禾谷類NY/T1248.8-2016玉米抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第8部分：鐮孢穗腐病DB23/T017-2008玉米生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義3.1花絲通道注射接種silkchannelinjectioninoculation利用注射器在果穗花絲通道側(cè)邊將鐮孢菌分生孢子懸浮液注射到果穗中而進(jìn)行玉米抗鐮孢穗腐病鑒定的技術(shù)。3.2玉米鐮孢穗腐病Fusariumearrotofmaize玉米鐮孢穗腐病，是由禾谷鐮孢、串株鐮孢等多種鐮孢菌侵染所引起的、發(fā)生在玉米的病害。玉米果穗及子粒均可受此病危害。3.3抗玉米穗腐病鑒定IdentificationofresistanceFusariumearrotofmaize通過人工接種玉米鐮孢穗腐病菌，以確定玉米對鐮孢穗腐病的抗感反應(yīng)類型。3.4接種體inoculum用于接種以引起病害的病原物或病原物的一部分。4接種體制備4PDA平板培養(yǎng)基：取200g去皮馬鈴薯塊，切成小塊，加入800ml～1000mL的水煮沸30min,用雙層紗布過濾后，用蒸餾水補足1000mL,加入20g葡萄糖，少量多次加入共18g瓊脂粉，并不斷攪拌，分裝至錐形瓶內(nèi)，然后將其放置于溫?zé)釡缇髦?21℃滅菌20min,PDB液體培養(yǎng)基：取200g去皮馬鈴薯塊，切成小塊，加入800ml～1000mL的水煮沸30min,用雙層紗布過濾后，用蒸餾水補足1000mL,加入20g葡萄糖，分裝至錐形瓶內(nèi)，然后將其放置于溫?zé)釡缇髦?21℃滅菌20min后備用。取發(fā)生穗腐病的玉米籽粒，置于75%的酒精中浸泡2s～3s,取出后置于質(zhì)量體積比為1.5%的次氯酸鈉中浸泡2min～3min,再經(jīng)無菌水換洗3次，曬干后用滅菌剪刀從中間剪開后將其中一塊轉(zhuǎn)移至PDA平板培養(yǎng)基中，置于25℃~27℃環(huán)境中，黑暗培養(yǎng)3d后挑取病原從試管中挑取目標(biāo)菌株，接種到PDA平板培養(yǎng)基上，目標(biāo)病原菌長7d后，將布滿菌的PDA平板切成小塊，轉(zhuǎn)接至PDB液體培養(yǎng)基中，25℃自然光條件下?lián)u床振蕩(120rpm)培養(yǎng)7d,用滅菌雙層紗布過濾掉菌絲和雜質(zhì)，制成分生孢子懸浮液，然鑒定材料采取隨機排列，每隔50行鑒定材料設(shè)置1組已知抗病、感病對照材料，對照選用玉米自交系X178(抗)、B73(感)。鑒定期。播種時期符合DB23/T017-2008標(biāo)準(zhǔn)。出苗后每穴保留1株健康的植株。種子符合GB5利用可定量的連續(xù)注射器，在果穗花絲通道側(cè)邊插入至通道中空部位，每穗注射接種2調(diào)查時采收接種的雌穗，去除苞葉后逐穗調(diào)查并對雌穗被病菌侵染的面積進(jìn)行分級記67附錄A(規(guī)范性)玉米鐮孢穗腐病調(diào)查及評價分級標(biāo)準(zhǔn)A.1玉米穗腐病鑒定田間病情指數(shù)分級表A.1表A.1玉米穗腐病鑒定田間病情指數(shù)分級13579A.2玉米對穗腐病抗性的評價標(biāo)準(zhǔn)表A.2表A.2玉米對穗腐病抗性的評價標(biāo)準(zhǔn)平均病情級別高抗Highlyresistant(HR)抗Resistant(R)中抗Moderatelyresistant(MR)感Susceptible(S)高感Highlysusceptible(HS)A.3玉米抗鐮孢穗腐病鑒定結(jié)果記載表A.3表A.3玉米抗鐮孢穗腐病鑒定結(jié)果記載表鑒定地點：