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文檔簡介
2025屆吉林省東遼市高考適應(yīng)性考試生物試卷考生請注意:1.答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi),不得在試卷上作任何標(biāo)記。2.第一部分選擇題每小題選出答案后,需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi),第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.下列有關(guān)生物體遺傳物質(zhì)的敘述,正確的是()A.豌豆的遺傳物質(zhì)主要是DNAB.酵母菌的遺傳物質(zhì)主要分布在染色體上C.T2噬菌體的遺傳物質(zhì)含有硫元素D.HIV的遺傳物質(zhì)水解產(chǎn)生4種脫氧核苷酸2.研究發(fā)現(xiàn),HLAI類抗原(簡稱H蛋白)幾乎分布于人體全部正常細(xì)胞表面,是效應(yīng)T細(xì)胞識別“自己”的重要依據(jù),絕大多數(shù)癌細(xì)胞膜上丟失了此類蛋白,而特有腫瘤特異性抗原TSA(簡稱T蛋白)。絕大多數(shù)癌細(xì)胞表面有MHC分子(簡稱M蛋白),MHC分子在免疫應(yīng)答過程中參與T細(xì)胞對抗原信號的識別,MHC分子與腫瘤抗原結(jié)合才能被效應(yīng)T細(xì)胞所識別。下列敘述中正確的是()A.T蛋白和M蛋白使癌細(xì)胞彼此之間的黏著性顯著降低,易在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移B.與正常細(xì)胞相比,癌變細(xì)胞的分裂和分化能力增強(qiáng)C.效應(yīng)T細(xì)胞識別并清除癌細(xì)胞體現(xiàn)了免疫的防衛(wèi)功能D.提高H蛋白或降低M蛋白的表達(dá)水平有利于癌細(xì)胞逃脫免疫監(jiān)控3.下列過程不涉及負(fù)反饋調(diào)節(jié)的是()A.捕食者數(shù)量對被捕食者數(shù)量的影響B(tài).體內(nèi)甲狀腺激素含量維持相對穩(wěn)定C.胰島素分泌量對血糖濃度的影響D.落葉量對土壤動物豐富度的影響4.下列有關(guān)人體中激素的敘述,正確的是()A.進(jìn)食后胰島素水平升高,促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖,說明激素有調(diào)節(jié)作用B.饑餓時胰高血糖素水平升高,促進(jìn)糖原分解,說明激素有催化的作用C.運動時腎上腺素水平升高,使心率加快,說明激素是一類高能化合物D.青春期性激素水平升高,促進(jìn)機(jī)體發(fā)育,說明激素是細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組分5.某昆蟲病毒是種雙鏈DNA病毒,研究人員為探究該病毒的K基因?qū)基因遺傳信息傳遞過程的影響,以缺失K基因的病毒感染昆蟲細(xì)胞作為實驗組,以野生型病毒感染昆蟲細(xì)胞作為對照組進(jìn)行實驗。下列相關(guān)敘述正確的是()A.病毒利用昆山細(xì)胞提供的模板和原料進(jìn)行DNA復(fù)制B.病毒利用自身攜帶的核糖體在昆蟲細(xì)胞中合成蛋白質(zhì)C.若K基因抑制P基因的轉(zhuǎn)錄,則實驗組P基因的mRNA合成速率低于對照組D.若K基因促進(jìn)P基因的翻譯,則實驗組P基因所編碼的蛋白質(zhì)合成速率低于對照組6.下列實驗中,有關(guān)操作時間的長短對實驗現(xiàn)象或結(jié)果影響的敘述,正確的是()A.在“質(zhì)壁分離與復(fù)原”的實驗中,第二次與第三次觀察間隔時間的長短對實驗現(xiàn)象的影響相同B.在“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂”實驗中,解離時間的長和短對實驗現(xiàn)象的影響相同C.用標(biāo)志重捕法調(diào)查種群密度時,兩次捕獲間隔時間的長和短對調(diào)查結(jié)果的影響相D.“32P標(biāo)記的噬菌體侵染細(xì)菌”的實驗中,保溫時間過長和過短對上清液檢測放射性的結(jié)果影響趨勢相同二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)利用基因工程制作的乙肝—百白破四聯(lián)疫苗由乙肝病毒、百日咳桿菌、白喉桿菌以及破傷風(fēng)桿菌的4種抗原組成,該疫苗可以預(yù)防乙肝、百日咳、白喉、破傷風(fēng)等多種疾病。請分析并回答下列問題:(1)乙肝病毒表面抗原的基因較小,且核苷酸序列已知,因此可采用________法獲得該目的基因,然后通過PCR大量擴(kuò)增,這兩個過程依次在_________儀_________儀中進(jìn)行,(2)利用從百日咳桿菌細(xì)胞中提取的對應(yīng)_________,在逆轉(zhuǎn)錄酶等的作用下合成雙鏈cDNA片段。因為缺少_________等,獲得的cDNA片段要比百日咳桿菌中該基因的堿基數(shù)量少。(3)研究者將白喉桿菌類毒素第20位和第24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?,取得了更好的免疫效果,該生物技術(shù)為__________,其基本途徑是從___________出發(fā),通過對_____________的操作來實現(xiàn)。8.(10分)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞??蒲腥藛T利用胚眙干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療,其技術(shù)流程如圖(圖中數(shù)字序號表示的是相關(guān)過程)。請回答:(1)過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時期。(2)過程②利用的技術(shù)是____________________,當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時,可從其_________分離出ES細(xì)胞。(3)過程③中獲取的目的基因是____________________,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建_______________________,構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用______________技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。通測Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用__________________進(jìn)行雜交實驗。9.(10分)根據(jù)材料回答問題:材料一:科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒S蛋白(Spikeprotein,刺突蛋白)可與宿主細(xì)胞的病毒受體結(jié)合,是決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白。(1)以S蛋白作為______可制備單克隆抗體生產(chǎn)快速檢測新冠病毒的試劑盒。單克隆抗體制備過程中有兩次篩選,第一次篩選的目的是得到______________________的雜交瘤細(xì)胞,該雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行_____________________________________,經(jīng)過多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。材料二:新型冠狀病毒核酸檢測采用熒光定量PCR儀,通過檢測熒光信號的累積(以Ct值表示)來確定樣本中是否有病毒核酸。新冠病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,科學(xué)家先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄,再將得到的cDNA進(jìn)行多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增得到了大量DNA片段(如圖所示)。(2)在上述技術(shù)中,用到的酶有_______________________________(至少寫出兩種)。(3)科學(xué)家已測出新冠病毒的核酸序列,據(jù)圖分析,Ⅰ、Ⅱ過程需要根據(jù)病毒的核苷酸序列設(shè)計__________。過程Ⅱ中以cDNA為模板經(jīng)過_____________________三步循環(huán)擴(kuò)增得到多個DNA片段,第____次復(fù)制后就能獲得兩條鏈等長的DNA序列。(4)采集新冠肺炎疑似患者的咽部細(xì)胞樣本提取核酸進(jìn)行上述PCR過程,每一個擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號,擴(kuò)增出來的靶基因越多,觀察到的Ct值就越_____________。10.(10分)將外源基因整合到葉綠體基因組中并成功表達(dá),這就是葉綠體轉(zhuǎn)基因技術(shù),該技術(shù)能有效改良植物的品質(zhì)。請回答下列問題:(1)若要在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增外源基因,可采用PCR技術(shù),該技術(shù)利用了_______________的原理。(2)對大多數(shù)高等植物而言,與傳統(tǒng)的細(xì)胞核轉(zhuǎn)基因相比,葉綠體轉(zhuǎn)基因更穩(wěn)定,因其不會隨_____(填“花粉”或“卵細(xì)胞”)傳給后代,從而保持了_________(填“父本”或“母本”)的遺傳特性。(3)利用_______________處理植物體細(xì)胞可得到原生質(zhì)體,再通過_____________法將目的基因?qū)朐|(zhì)體,當(dāng)原生質(zhì)體再長出__________________時,便可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因幼苗。(4)一個完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括啟動子、_________________________________等,啟動子位于基因的首端,它是____________________,有它才能啟動基因轉(zhuǎn)錄。11.(15分)艾滋病藥物能治療新型冠狀病毒肺炎嗎?國家衛(wèi)健委新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)中提供了用于一般治療的抗病毒藥物,其中洛匹那韋/利托那韋是原本用于艾滋病治療的藥物。為什么治療艾滋病的藥物能治療新型冠狀病毒引起的肺炎?HIV病毒和新型冠狀病毒都具有包膜,包膜上有侵染宿主細(xì)胞所必需的蛋白質(zhì),其中,新型冠狀病毒包膜上的S蛋白能識別并結(jié)合呼吸道上皮細(xì)胞表面的受體血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2),HIV病毒包膜上的gp120在宿主細(xì)地T細(xì)胞表面的受體則是C04蛋白。HIV病毒和新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)均為RNA,但兩種病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后所經(jīng)歷的生化歷程不盡相同。HIV病毒侵入宿主細(xì)胞后經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄—整合—轉(zhuǎn)錄—翻譯—裝配的過程,最終出芽釋放。其中,翻譯時會先表達(dá)出一個多聚蛋白,該多聚蛋白在一種HIV蛋白酶的催化下被剪切成多個有功能的蛋白質(zhì)。而新型冠狀病毒侵入宿主細(xì)胞后,其RNA可以直接作為模板進(jìn)行翻譯,翻譯時產(chǎn)生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下進(jìn)行剪切以形成RNA復(fù)制酶等有功能的蛋白質(zhì)。隨后,新型冠狀病毒RNA在RNA復(fù)制酶的催化下進(jìn)行復(fù)制,與轉(zhuǎn)錄、翻譯所得的其他成分裝配后釋放。洛匹那韋/利托那韋的作用對象正是這種HIV蛋白酶。它們與HIV蛋白酶的活性中心結(jié)合進(jìn)而抑制其活性。冠狀病毒切割多聚蛋白的主要蛋白酶是3CLPro,研究者通過分子動力學(xué)模擬的方法發(fā)現(xiàn)洛匹那韋/利托那韋能與SARS病毒的3CLPro活性中心結(jié)合。而SARS病毒和新型冠狀病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性達(dá)96%。此前洛匹那韋/利托那韋在SARS治療中也表現(xiàn)出一定的有效性,但在新型冠狀病毒肺炎中使用洛匹那韋/利托那韋仍需謹(jǐn)慎樂觀,其療效和療效仍需更多的實驗研究和臨床數(shù)據(jù)支持。(1)根據(jù)HIV病毒和新型冠狀病毒的結(jié)構(gòu)可判斷它們都可以在吸附后通過____方式進(jìn)入宿主細(xì)胞,但兩種病毒侵染的宿主細(xì)胞不同,原因是________________。(2)盡管HIV病毒和新型冠狀病毒在進(jìn)入宿主細(xì)胞后的生化過程差異很大,但其中卻有一個共同之處,即___________________________。(3)洛匹那韋/利托那韋可能通過_________治療新型冠狀病毒肺炎,但治療艾滋病的藥物用于治療新型冠狀病毒肺炎具有局限性,體現(xiàn)在________。(4)治療艾滋病還有其他幾種藥物,如AZT和雷特格韋,它們作用的對象分別是HIV的逆轉(zhuǎn)錄酶和整合酶,請問AZT和雷特格韋能否用于治療新型冠狀病毒肺炎,理由是________。(5)根據(jù)文中信息,新型冠狀病毒治療藥物還有哪些其他可能的研發(fā)思路?請寫出一種____。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、B【解析】
A、豌豆的遺傳物質(zhì)只有DNA,A錯誤;B、酵母菌的遺傳物質(zhì)DNA主要分布在染色體上,B正確;C、T2噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA,不含S元素,C錯誤;D、HIV的遺傳物質(zhì)是RNA,水解后產(chǎn)生4種核糖核苷酸,D錯誤。故選B。2、D【解析】
根據(jù)題干信息分析,H蛋白是分布于幾乎人體全部正常細(xì)胞表面的蛋白質(zhì),是效應(yīng)T細(xì)胞識別自己的重要依據(jù),而癌細(xì)胞丟失了該類蛋白質(zhì),所以不能被效應(yīng)T細(xì)胞當(dāng)成自己而識別;癌細(xì)胞表面有腫瘤特異性抗原TSA(簡稱T蛋白),絕大多數(shù)癌細(xì)胞表面有MHC分子(簡稱M蛋白),MHC分子與腫瘤抗原結(jié)合才能被效應(yīng)T細(xì)胞所識別?!驹斀狻緼、癌細(xì)胞彼此之間的黏著性顯著降低,易在體內(nèi)分散和轉(zhuǎn)移,其原因是細(xì)胞膜上糖蛋白(粘連蛋白)減少,不是因為T蛋白和M蛋白的出現(xiàn),A錯誤;B、癌變細(xì)胞分裂能力增強(qiáng),能夠無限增值,但失去了分化能力,B錯誤;C、效應(yīng)T細(xì)胞識別并清除癌細(xì)胞體現(xiàn)了免疫的監(jiān)控和清除功能,C錯誤;D、提高H蛋白的表達(dá)水平,效應(yīng)T細(xì)胞會識別癌細(xì)胞為“自己”;降低M蛋白的表達(dá)水平,癌細(xì)胞不易被效應(yīng)T細(xì)胞所識別,因此二者都有利于癌細(xì)胞逃脫免疫監(jiān)控,D正確。故選D。3、D【解析】
在一個系統(tǒng)中,系統(tǒng)本身工作的效果,反過來作為信息調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的工作,這種調(diào)節(jié)方式叫做反饋調(diào)節(jié)。反饋調(diào)節(jié)是生命系統(tǒng)中非常普遍的調(diào)節(jié)機(jī)制,它對于機(jī)體維持穩(wěn)態(tài)具有重要的意義。反饋調(diào)節(jié)分為正反饋調(diào)節(jié)和負(fù)反饋調(diào)節(jié)?!驹斀狻緼、捕食者數(shù)量增加,被捕食者數(shù)量減少,又會使得捕食者減少,屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié),A錯誤;B、體內(nèi)甲狀腺激素含量升高,會反過來抑制下丘腦和垂體的分泌活動,從而使甲狀腺分泌甲狀腺激素減少,屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié),B錯誤;C、胰島素分泌量增加,會使得血糖濃度降低,使得胰島素分泌減少,屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié),C錯誤;D、落葉量增加,為土壤動物提供更多的有機(jī)物,土壤動物豐富度增加,但土壤豐富度不影響落葉量,D正確。故選D。4、A【解析】
1、激素作用的一般特征:微量高效;通過體液運輸;作用于靶器官、靶細(xì)胞。2、激素既不組成細(xì)胞結(jié)構(gòu),又不提供能量,也不起催化作用,而是隨體液達(dá)到靶細(xì)胞,使靶細(xì)胞原有的生理活動發(fā)生變化,是調(diào)節(jié)生命活動的信息分子。【詳解】A、進(jìn)食后血糖水平升高,胰島素分泌增加,促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖,使血糖降低,說明激素有調(diào)節(jié)作用,A正確;B、激素的作用為調(diào)節(jié),而不是催化的作用,B錯誤;C、激素只具有調(diào)節(jié)功能,不能提供能量,不屬于高能化合物,C錯誤;D、激素不能作為細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組分,D錯誤。故選A。5、D【解析】
病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),需依賴于宿主細(xì)胞生存?;蚴且欢斡泄δ艿暮怂幔诖蠖鄶?shù)生物中是一段DNA,在少數(shù)生物(RNA病毒)中是一段RNA?;虮磉_(dá)是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程,基因表達(dá)產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)?;虮磉_(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)錄過程由RNA聚合酶進(jìn)行,以DNA為模板,產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動,留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA(mRNA)為模板,指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的過程?!驹斀狻緼、病毒進(jìn)行DNA復(fù)制,模板是病毒的DNA,A錯誤;B、病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),沒有核糖體,B錯誤;C、若K基因抑制P基因的轉(zhuǎn)錄,則實驗組缺失K基因,P基因的mRNA合成速率高于對照組,C錯誤;D、若K基因促進(jìn)P基因的翻譯,則實驗組缺失K基因,P基因所編碼的蛋白質(zhì)合成速率低于對照組,D正確。故選D。6、D【解析】
用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌,上清液中有少量放射性的原因:a保溫時間過短,部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),經(jīng)離心后分布于上清液中,使上清液出現(xiàn)放射陡。b保溫時間過長,噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放子代,經(jīng)離心后分布于上清液中,也會使上清液的放射性含量升高?!驹斀狻緼、在“質(zhì)壁分離與復(fù)原”的實驗中,第二次與第三次觀察間隔時間的長短對實驗現(xiàn)象的影響不相同,間隔時間過長可能會導(dǎo)致細(xì)胞失水過多而死亡,A錯誤;B、在“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂”實驗中,解離時間的長短對實驗現(xiàn)象的影響不相同,解離時間太短則組織細(xì)胞沒有完全分離開,解離時間過長會導(dǎo)致根尖過于酥爛,B錯誤;C、用標(biāo)志重捕法調(diào)查種群密度時,兩次捕獲間隔時間的長短對調(diào)查結(jié)果的影響不相同,若間隔時間太短,被標(biāo)記的個體沒有與未被標(biāo)記的個體充分混合均勻,這會導(dǎo)致實驗結(jié)果誤差較大,C錯誤;D、由以上分析可知,在“32P標(biāo)記的噬菌體侵染細(xì)菌”的實驗中,保溫時間過長或過短時上清液檢測結(jié)果相同,都會導(dǎo)致上清液的放射性增強(qiáng),D正確。故選D。二、綜合題:本大題共4小題7、化學(xué)方法人工合成(人工化學(xué)合成)DNA合成PCR擴(kuò)增mRNA啟動子蛋白質(zhì)工程預(yù)期蛋白質(zhì)功能(相應(yīng)的)基因【解析】
1、PCR技術(shù):概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。原理:DNA復(fù)制。前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。2、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要?!驹斀狻浚?)化學(xué)方法人工合成目的基因適合于基因較小,且核苷酸序列已知的目的基因,人工合成目的基因、PCR擴(kuò)增目的基因分別在DNA合成儀、PCR擴(kuò)增儀中進(jìn)行。(2)要合成cDNA,需要提取相應(yīng)的mRNA作模板;cDNA缺少啟動子,要比百日咳桿菌中該基因的堿基數(shù)量少。(3)蛋白質(zhì)工程可以從根本上改造蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā),通過對相應(yīng)的基因的操作來實現(xiàn)?!军c睛】本題主要考查基因工程和蛋白質(zhì)工程,考查學(xué)生的理解能力。8、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(正常的)Rag2基因含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體(正常的)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息)DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】
題圖分析:圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過程圖解,其中①表示核移植過程,②表示早期胚胎培養(yǎng)過程,③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?!驹斀狻浚?)MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件,故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期,即過程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。(2)過程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胚胎的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤,故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時,可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。(3)根據(jù)題干信息可知,過程③中獲取的目的基因是(正常的)Rag2基因,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體,構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對序列或遺傳信息)設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法,為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用DNA分子雜交技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶,動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶,PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶(Taq酶)等。檢測Rag2基因的表達(dá)情況,可采用抗原一抗體雜交法,即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實驗?!军c睛】熟知圖中個步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵!掌握關(guān)于基因治療的各個環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識是解答本題的另一關(guān)鍵!9、抗原既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體克隆化培養(yǎng)和抗體檢測逆(反)轉(zhuǎn)錄酶(依賴于RNA的DNA聚合酶)、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq或耐高溫的TaqDNA聚合酶)、核酸酶引物變性、復(fù)性、延伸一強(qiáng)【解析】
單克隆抗體的制備:(1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原,然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞;(2)獲得雜交瘤細(xì)胞①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合;②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。(4)將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。(5)提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。PCR技術(shù):1、概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理:DNA復(fù)制。3、前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。5、過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈?!驹斀狻浚?)由于S蛋白是決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白,所以可以以S蛋白作為抗原制備單克隆抗體生產(chǎn)快速檢測新冠病毒的試劑盒,單克隆抗體制備過程中有兩次篩選,第一次篩選的目的是得到既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體的雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞還需要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。(2)從圖中看出有逆轉(zhuǎn)錄的過程所以有逆轉(zhuǎn)錄酶、同時進(jìn)行PCR技術(shù),所以有熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq或耐高溫的TaqDNA聚合酶)、和核酸酶。(3)PCR技術(shù)中需要根據(jù)病毒的核苷酸序列設(shè)計引物,PCR的過程是經(jīng)過變性、復(fù)性、延伸三步循環(huán)擴(kuò)增得到多個DNA片段,由于DNA分子進(jìn)行半保留復(fù)制,所以第一次復(fù)制后就能獲得兩條鏈等長的DNA序列。(4)由于Ct值表示熒光信號的累積,來確定樣本中是否有病毒核酸,因此擴(kuò)增出來的靶基因越多Ct值就越強(qiáng)?!军c睛】本題考查單克隆技術(shù)和PCR技術(shù),識記各個實驗操作的步驟是解題的關(guān)鍵,理解Ct值的含義進(jìn)行分析。10、DNA雙鏈復(fù)制花粉母本纖維素酶和果膠酶農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍)細(xì)胞壁目的基因、標(biāo)記基因、終止子RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:
1、目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。
3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
4、目的基因的檢測與鑒定:
(1)分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。
(2)個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)PCR技術(shù)依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制。
(2)對大多數(shù)高等植物而言,與傳統(tǒng)的細(xì)胞核轉(zhuǎn)基因相比,葉綠體轉(zhuǎn)基因更穩(wěn)定,葉綠體轉(zhuǎn)基因是屬于細(xì)胞質(zhì)遺傳,具有母系遺傳特點,而花粉中細(xì)胞質(zhì)較少,受精卵中細(xì)胞質(zhì)幾乎來之卵細(xì)胞的,因此葉綠體轉(zhuǎn)基因不會隨著花粉遺傳給后代。
(3)植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,根據(jù)酶的專一性,可以利用纖維素酶和果膠酶
處理植物體細(xì)胞可得到原生質(zhì)體,再通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(或基因槍)法將目的基因?qū)朐|(zhì)體,當(dāng)原生質(zhì)體再長出
細(xì)胞壁時,便可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因幼苗。
(4)一個完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子等,啟動子位于基因的首端,它是RNA聚合酶結(jié)合和識別的部位,有它才能啟動基因轉(zhuǎn)錄。【點睛】本題考查基因工程的有關(guān)知識,要求考生識
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