第1章發(fā)酵工程章末總復(fù)習(xí)課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

第一章發(fā)酵工程

章末總復(fù)習(xí)FermentationEngineeringChapter-EndReview本節(jié)聚焦：

1.運(yùn)用結(jié)構(gòu)功能觀認(rèn)識乳酸菌、酵母菌和醋酸菌的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和

代謝特點(diǎn)。

2.運(yùn)用發(fā)酵原理，設(shè)計并完成利用天然菌種制作泡菜、

果酒和果醋的實(shí)驗(yàn)探究并對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和評價。

3.概述培養(yǎng)基的成分和配制方法。

4.區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法。

5.概述微生物純培養(yǎng)的基本操作要求。

6.闡明微生物選擇培養(yǎng)的原理。

7.概述測定微生物數(shù)量的方法。

8.進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)。

學(xué)習(xí)目標(biāo)目錄01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)04發(fā)酵工程及其應(yīng)用05鏈接高考真題傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用PART0101傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.發(fā)酵工程的概念：傳統(tǒng)發(fā)酵是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。2.發(fā)酵概念：指人們利用微生物，在適宜條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。3.發(fā)酵原理：不同的微生物具有產(chǎn)生不同代謝產(chǎn)物的能力，因此利用它們既可以生產(chǎn)出人們所需要的多種產(chǎn)物。01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用4.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的概念：直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保留下來的面團(tuán)、鹵汁等發(fā)酵物中微生物進(jìn)行發(fā)酵，制作食品的技術(shù)。5.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的特點(diǎn)：以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，通常是家庭式或作坊式的。產(chǎn)品容易受雜菌污染，生產(chǎn)效率較低。01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用6.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的實(shí)例：

腐乳制作果酒制作果醋制作菌種類型酵母、曲霉和毛霉等，起主要作用的是毛霉酵母菌醋酸菌代謝特點(diǎn)異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型發(fā)酵溫度25～30℃18～30℃30～35℃氣體初期有氧,后期無氧前期需氧，后期無氧需要充足的氧氣發(fā)酵原理無氧條件下：(1)O2、糖源充足：(2)糖源不足：C6H12O62C2H5OH（酒精）+2CO2+能量酶C6H12O6+2O22CH3COOH（乙酸）+2H2O+2CO2+能量酶C6H12O6+O2CH3COOH（乙酸）+H2O+能量酶蛋白質(zhì)

小分子肽和氨基酸微生物脂肪

脂肪酸和甘油微生物01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用腐乳與豆腐相比，所含有機(jī)物的種類和能量有哪些變化？為什么？腐乳中有機(jī)物的種類增加了，所含的能量卻減少了。因?yàn)槎垢械牡鞍踪|(zhì)被分解成了小分子的肽和氨基酸。腐乳為什么“聞著臭，吃著香”？豆腐中的蛋白質(zhì)在微生物產(chǎn)生的蛋白酶的作用下可以形成H2S等，所以“聞著臭”；產(chǎn)生的肽和氨基酸，例如谷氨酸，是生產(chǎn)味精和雞精的重要原料之一，所以“吃著香”。腐乳制作過程中加鹽和加酒的目的分別是什么？加鹽的目的：析出豆腐中的水分、抑制不需要的微生物生長加酒的目的：抑制微生物生長，并使腐乳具有獨(dú)特香味；

鹵湯中酒的含量應(yīng)控制在12%左右，過高會延長腐乳成熟的時間，過低不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用制作泡菜時，泡菜壇只能裝八成滿的原因:1)在泡菜發(fā)酵初期，由蔬菜表面帶入的大腸桿菌、酵母菌等較為活躍，會產(chǎn)生較多的CO?,如果泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。2)泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全淹沒菜料，從而導(dǎo)致壇內(nèi)菜料變質(zhì)腐爛。3)泡菜壇留有一定的空間，也更方便拿取泡菜。制作果酒時，瓶中要留有大約1/3空間的原因：讓酵母菌先進(jìn)行有氧呼吸耗盡O2(酵母菌增殖),再進(jìn)行酒精發(fā)酵,同時防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2使發(fā)酵液溢出制作果酒時，每隔一段時間擰松瓶蓋的目的是什么？及時排出發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2,防止發(fā)酵瓶爆裂7.果酒、果醋制作中發(fā)酵裝置圖中各結(jié)構(gòu)的作用裝置圖結(jié)構(gòu)作用

充氣口①醋酸發(fā)酵時連接充氣泵，輸入無菌空氣；②制果酒時關(guān)閉充氣口排氣口用來排出CO2長而彎曲的膠管防止空氣中微生物的污染出料口便于取料，及時監(jiān)測發(fā)酵進(jìn)行的情況8.結(jié)果分析與評價項(xiàng)目酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵氣味和味道酒味酸味氣泡和泡沫有無(缺少糖源)發(fā)酵液顏色顏色加深變成深紅色(以紫葡萄作原料)渾濁，液面形成白色菌膜檢驗(yàn)和檢測通過酸性重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精通過pH試紙檢測發(fā)酵前后發(fā)酵液的pH變化拓展：泡菜腌制過程中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽含量的變化種類時期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期少(有O2，乳酸菌活動受抑制)少增加(硝酸鹽還原菌的作用)發(fā)酵中期最多(乳酸抑制其他菌活動)積累、增多、pH下降下降(硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解)發(fā)酵后期減少(乳酸繼續(xù)積累，pH繼續(xù)下降，抑制其活動)繼續(xù)增多，pH繼續(xù)下降下降至相對穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)含量變化曲線注：亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進(jìn)硝酸鹽還原形成的。微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)PART021.微生物的概念：

微生物是難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱，包括細(xì)菌、真菌、病毒及一些原生生物等。（1）無細(xì)胞結(jié)構(gòu)（病毒）：SARS病毒、新冠病毒等RNA病毒；噬菌體等DNA病毒。（2）原核細(xì)胞：藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、乳酸菌、醋酸菌等細(xì)菌；鏈霉菌等放線菌。（3）真核細(xì)胞：①真菌：酵母菌、霉菌、毛霉等；

②原生生物：草履蟲、變形蟲、衣藻等。2.研究和應(yīng)用微生物的前提（發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)）

（1）防止雜菌污染；（2）獲得純凈的微生物培養(yǎng)物。3.實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的要求

（1）為人們需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件—培養(yǎng)基

（2）確保其它微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來—無菌技術(shù)02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)4.培養(yǎng)基的概念：

人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的、營養(yǎng)基質(zhì)。5.培養(yǎng)基的作用：

用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。6.培養(yǎng)基的分類：（按照物理性質(zhì)分類）

①液體培養(yǎng)基：不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。

擴(kuò)大培養(yǎng)、工業(yè)生產(chǎn)

②固體培養(yǎng)基：呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。

獲取單菌落、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)注意：凝固劑（如瓊脂），不能被微生物利用，只起到凝固作用。微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落。7.培養(yǎng)基的分類：（按照目的用途分類）

①選擇培養(yǎng)基：微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其

它種類微生物生長的培養(yǎng)基

②鑒定培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種指示劑，用以鑒別某種微生物。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)8.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成（1）各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)營養(yǎng)物質(zhì)來源功能碳源無機(jī)碳源碳酸根、碳酸氫根等含碳無機(jī)物①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝物;②有機(jī)碳既是碳源又是能源有機(jī)碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等氮源無機(jī)氮源銨鹽、硝酸鹽等合成蛋白質(zhì)、核酸及

含氮的代謝物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等水①溶劑;②參與微生物代謝無機(jī)鹽無機(jī)物①細(xì)胞內(nèi)的組成成分;②維持滲透壓（2）培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。①培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加________。②培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至_______性。③培養(yǎng)細(xì)菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至______________性。④培養(yǎng)厭氧微生物時，則需要提供________的條件。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)酸維生素中性或弱堿無氧并非所有培養(yǎng)基中都有有機(jī)碳源和有機(jī)氮源,如培養(yǎng)自養(yǎng)型生物的培養(yǎng)基中可不含有機(jī)碳源,其可利用大氣中的CO2;培養(yǎng)自生固氮微生物的培養(yǎng)基中可不含有機(jī)氮源,其可利用大氣中的N2。9.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。

無菌技術(shù)應(yīng)圍繞著如何避免雜菌污染展開。主要包括消毒和滅菌。（1）消毒：①概念：使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。②適用對象：對操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。（2）滅菌：①概念：使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。②適用對象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)10.常見的消毒和滅菌的方法02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)類型操作方法適用范圍消毒使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物煮沸消毒100℃煮沸5~6min家庭餐具等生活用品巴氏消毒63~65℃消毒30min或72~76℃處理15s或80~85℃處理10~15s不耐高溫的液體,如牛奶化學(xué)藥物用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等生物活體、水源等紫外線紫外線照射30min接種室、接種箱、超凈工作臺10.常見的消毒和滅菌的方法02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)類型操作方法適用范圍滅菌使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和

孢子灼燒滅菌酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒接種工具(涂布器、接種環(huán)、接種針)、其他金屬工具或接種過程中的試管口、瓶口等干熱滅菌將滅菌物品放入干熱滅箱,在160~170℃的熱空氣中維持1~2h耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金屬用具等濕熱滅菌高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100kPa、121℃下維持15~30min培養(yǎng)基等,生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室常用02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

芽孢孢子概念有些細(xì)菌在一定的條件下,細(xì)胞里面形成的一個橢圓形的休眠體(不是繁殖體)細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞特點(diǎn)對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力,環(huán)境適宜時又可萌發(fā)成細(xì)菌能直接長成新個體知識拓展

(1)芽孢和孢子(2)生物消毒法:利用生物或其代謝物除去環(huán)境中的部分微生物的方法。如有的微生物能夠寄生于多種細(xì)菌體內(nèi),使細(xì)菌裂解,因此可以用它們來凈化污水、污泥。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)11．相關(guān)概念(1)培養(yǎng)物：在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。(2)純培養(yǎng)物：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體。(3)純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程。12．微生物純培養(yǎng)步驟：微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。13.菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部繁殖形成的肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，是鑒定菌種的重要依據(jù)。特征:大小、形狀、光澤、顏色、透明度等。14.酵母菌的純培養(yǎng)原理：（1）分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落（菌落屬于種群）。（2）采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散到固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.制備培養(yǎng)基（1）配制培養(yǎng)基：

馬鈴薯-瓊脂固體培養(yǎng)基（2）滅菌：培養(yǎng)基------高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)皿------干熱滅菌（3）倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃，在酒精燈火焰附近倒平板14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.制備培養(yǎng)基（3）倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃，在酒精燈火焰附近倒平板①

拔出錐形瓶的棉塞。②將瓶口迅速通過該火焰。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。③用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基（10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上蓋子。④等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置。不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。倒平板的注意事項(xiàng)：（1）培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右時才能倒平板，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。（2）整個操作在酒精燈火焰旁附近進(jìn)行，避免周圍環(huán)境中微生物的污染。（3）平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（4）倒平板時不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)微生物，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。（5）將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h～24h，觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)2.接種和分離酵母菌平板劃線法：

通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)平板劃線的具體操作：14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)平板劃線的具體操作：灼燒接種環(huán)的目的：第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培

養(yǎng)物。第二次及以后劃線前：殺死上次劃線時殘留菌種，保

證每次劃線菌種來自上次劃線末端。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)劃線操作結(jié)束時：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。第二次及以后的劃線時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？將聚集的菌種逐步稀釋，以便獲得單菌落。線條末端酵母菌的數(shù)目比起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使酵母菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到單菌落。02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)為什么不能將最后一次的劃線與第一次的劃線相連？菌種經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，分離得到單菌落。第一次劃線酵母菌數(shù)量多，最后一次劃線酵母菌數(shù)量少，首尾相連，不容易得到單個菌落。14.酵母菌的純培養(yǎng)方法步驟：02微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)3.培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入28℃左右（培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異）的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48h。未接種的平板作為對照組，若有其上菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染或者滅菌不徹底。如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等原因引起的。微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)PART031.選擇培養(yǎng)基（1）概念：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。（2）類型：①依據(jù)營養(yǎng)需求：不添加碳源——自養(yǎng)微生物（硝化細(xì)菌）

不添加氮源——固氮微生物（圓褐固氮菌）

以石油為唯一碳源——能分解石油的微生物

以尿素為唯一氮源——能分解尿素的微生物②加入某種化學(xué)物質(zhì)：

加入青霉素（抑制細(xì)菌和放線菌的生長）——分離酵母菌、霉菌等真菌③利用特殊環(huán)境：

置于無氧環(huán)境——厭氧型（乳酸菌）和兼性厭氧型微生物（酵母菌）

置于高鹽環(huán)境——金黃色葡萄球菌

置于高溫環(huán)境——耐高溫微生物03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)由于土壤中細(xì)菌數(shù)量的龐大，要想得到能分解尿素細(xì)菌的純培養(yǎng)物，必須要對土樣進(jìn)行充分稀碎，然后再將菌液涂布到制備好的選擇培養(yǎng)基上，也就是要采取稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法：1．取樣鏟取土樣，將樣品裝入紙袋中。2.梯度稀釋將10g土樣加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋。90ml無菌水9ml無菌水03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)①取0.1mL菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。3.涂布平板（接種）②將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。③將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進(jìn)行涂布。④用涂布器將菌液均勻地涂布在選擇培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使涂布均勻。稀釋涂布平板法：4.培養(yǎng)和觀察待涂布的菌液被選擇培養(yǎng)基吸收后，將平板倒置，放入30～37℃培養(yǎng)1～2d。

平板劃線法和稀釋涂布平板法的比較：03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)1.稀釋涂布平板法——間接計數(shù)法①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落,來源于樣品稀

釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含

有多少活菌。②計數(shù)原則：一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板計數(shù)；在同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個平板進(jìn)行重復(fù)計數(shù)，

然后求出平均值。適當(dāng)?shù)南♂尪取⑼坎际欠窬鶆蚴浅晒y(tǒng)計菌落數(shù)目

的關(guān)鍵。③計算公式：03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)1.稀釋涂布平板法——間接計數(shù)法④結(jié)果分析：統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少；

原因：當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。

03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)②結(jié)果分析統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，不能區(qū)分死菌與活菌。統(tǒng)計結(jié)果比實(shí)際結(jié)果偏大個體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察。2.顯微計數(shù)法①原理：利用特定的細(xì)菌計數(shù)板或血細(xì)胞計數(shù)板在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算

一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。。03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)（1）原理：絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。常見的分解尿素的微生物：芽孢桿菌、小球菌、棒狀桿菌等細(xì)菌，某些真菌和放線菌也能分解尿素。（2）操作步驟：①土壤取樣：酸堿度接近中性的潮濕土壤，鏟去表層土（一般3cm左右）。細(xì)菌絕大部分分布在距地表3～8cm的土壤層。以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間適于計數(shù)的平板。在初次實(shí)驗(yàn)中，可以選擇一個比較寬的范圍，將1×103～1×107倍稀釋的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)，以保證能從中選擇出菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。②制備培養(yǎng)基③樣品稀釋與取樣涂布03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)（2）操作步驟：④微生物的培養(yǎng)與觀察培養(yǎng)條件：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細(xì)菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)1～2d。觀察：每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果。防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。一般來說，在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，如形狀、大小和顏色等。（鑒別指示劑）得到的菌落一定是分解尿素的細(xì)菌嗎？不一定，還需要進(jìn)一步的鑒定03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)（4）進(jìn)一步探究——分解尿素細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定①原理：細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，因此可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化（利用酸堿指示劑）來判斷是否發(fā)生了該化學(xué)反應(yīng)，進(jìn)而判斷該菌是否為尿素分解細(xì)菌。②原理：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，說明該細(xì)菌就是能夠分解尿素的細(xì)菌?？梢杂^察菌落周圍是否出現(xiàn)紅色環(huán)帶，紅色環(huán)帶直徑與菌落直徑比值越大，說明分解能力越強(qiáng)。03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)鑒定培養(yǎng)基：

在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品(不影響微生物正常生長)，使微生物的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中的特定指示劑或化學(xué)藥品發(fā)生反應(yīng)。從而達(dá)到鑒定的作用。拓展應(yīng)用：纖維素分解菌的鑒定（1）篩選纖維素分解菌的方法剛果紅染色法。該方法可以通過顏色反應(yīng)直接篩選。（2）原理：剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。微生物的篩選與鑒別方法

(1)單菌落挑取法:利用平板劃線法或稀釋涂布平板法將菌液接種到固體培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)后直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。(2)鑒別培養(yǎng)法:利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征,然后篩選目的微生物。(3)選擇培養(yǎng)法:利用選擇培養(yǎng)基等對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng),直接獲得目的微生物。1.微生物的篩選方法

營養(yǎng)缺陷型特殊碳、氮源型添加某種化學(xué)物質(zhì)型改變培養(yǎng)條件型原理利用營養(yǎng)(碳

源、氮源)缺陷

的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)利用微生物對某

種營養(yǎng)物質(zhì)的特

殊需求,使該營

養(yǎng)物質(zhì)成為某類

營養(yǎng)物質(zhì)的唯一

供給者在完全培養(yǎng)基中

加入某種化學(xué)物

質(zhì),加入的化學(xué)

物質(zhì)抑制部分微

生物生長或利于

部分微生物生長利用培養(yǎng)條件進(jìn)行選擇培養(yǎng)條件不加有

機(jī)碳源

的培養(yǎng)

基不加氮

源的培

養(yǎng)基石油作

為唯一

碳源的

培養(yǎng)基尿素作

為唯一

氮源的

培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素加入高濃度的食鹽高溫環(huán)境培養(yǎng)低pH環(huán)境培

養(yǎng)無氧環(huán)

境培養(yǎng)實(shí)例分離自

養(yǎng)型微

生物分離自

生固氮

菌分離能

消除石

油污染

的微生

物分離能

分解尿

素的微

生物分離酵母菌、霉菌等,同時抑制細(xì)菌、放線菌的生長分離金黃色葡萄球菌等分離耐高溫的

微生物分離耐

酸的微

生物分離厭

氧微生

物和兼

性厭氧

微生物微生物的篩選與鑒別方法2.微生物的鑒別方法菌落特征鑒別法根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小和顏色等特征進(jìn)行鑒別指示劑鑒別法如以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種微生物后,菌落周圍變紅,說明該種微生物能夠分解尿素染色鑒別法如利用剛果紅染色法,在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅,根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來鑒別能分解纖維素的微生物典例選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或某些微生物對一些物理、化學(xué)因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。為選擇出酵母菌和硝化細(xì)菌,應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為

(

)A.伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基B.含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基C.含氨的無機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基D.含青霉素的培養(yǎng)基、伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基B解析

伊紅—亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基是專一鑒別大腸桿菌的培養(yǎng)基;硝化細(xì)菌對青霉素敏感,不能用含青霉素的培養(yǎng)基篩選硝化細(xì)菌,A、D錯誤。細(xì)菌等對青霉素敏感,酵母菌對青霉素不敏感,可以用含青霉素的培養(yǎng)基篩選酵母菌;硝化細(xì)菌是自養(yǎng)生物,可以將氨氧化為硝酸釋放的能量將水和CO2合成有機(jī)物,故可以用含氨的無機(jī)培養(yǎng)基篩選硝化細(xì)菌;酵母菌是異養(yǎng)生物,不能用含氨的無機(jī)培養(yǎng)基篩選酵母菌,B正確,C錯誤。發(fā)酵工程及其應(yīng)用PART041．發(fā)酵工程概念：

發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，規(guī)?；a(chǎn)人類所需產(chǎn)品的綜合性生物工

程。04發(fā)酵工程及其應(yīng)用2.發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：04發(fā)酵工程及其應(yīng)用發(fā)酵工程的菌種選擇(1)能在低成本的培養(yǎng)基上生長,且能大量高效地合成產(chǎn)物。(2)發(fā)酵條件如溫度、pH、溶解氧等易控制。(3)遺傳性能穩(wěn)定等。3.特點(diǎn)(1)生產(chǎn)條件溫和。(2)原料來源豐富且價格低廉。(3)產(chǎn)物專一。(4)廢棄物對環(huán)境的污染小和容易處理等。04發(fā)酵工程及其應(yīng)用控制溶解氧調(diào)節(jié)罐壓①增加溶氧量②使微生物與發(fā)酵液充分接觸，混合均勻4.發(fā)酵工程的應(yīng)用：04發(fā)酵工程及其應(yīng)用應(yīng)用內(nèi)容在食品工業(yè)上的應(yīng)用生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品醬油、酒類等生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑通過黑曲霉的發(fā)酵制得檸檬酸;由谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸,谷氨酸經(jīng)過處理制

成味精等生產(chǎn)酶制劑α-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠

酶、氨基肽酶和脂肪酶等04發(fā)酵工程及其應(yīng)用應(yīng)用內(nèi)容在食品工業(yè)上的應(yīng)用生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品醬油、酒類等生產(chǎn)各種各樣的食品添加劑通過黑曲霉的發(fā)酵制得檸檬酸;由谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸,谷氨酸經(jīng)過處理制

成味精等生產(chǎn)酶制劑α-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠

酶、氨基肽酶和脂肪酶等4.發(fā)酵工程的應(yīng)用：04發(fā)酵工程及其應(yīng)用4.發(fā)酵工程的應(yīng)用：應(yīng)用內(nèi)容在其他方面的應(yīng)用利用纖維廢料發(fā)酵生產(chǎn)酒精、乙烯等通過電催化結(jié)合發(fā)酵的方式,用CO2合成葡萄糖和脂肪酸嗜熱菌、嗜鹽菌可以用來生產(chǎn)洗滌劑,嗜低溫菌有助于提高熱敏性產(chǎn)品的產(chǎn)量04發(fā)酵工程及其應(yīng)用啤酒的工業(yè)發(fā)酵流程1.發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段(1)主發(fā)酵:完成酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成等。(2)后發(fā)酵:在低溫、密閉的環(huán)境下進(jìn)行,以形成澄清、成熟的啤酒。2.在啤酒的發(fā)酵生產(chǎn)過程中,菌種的選育、對原材料的處理、發(fā)酵條件的控制、產(chǎn)品的消毒等,都有助于提高啤酒的產(chǎn)量和品質(zhì)。3.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的產(chǎn)物一般是成分復(fù)雜的混合物,一般不進(jìn)行分離和提純。鏈接高考真題PART051．(2024·湖北卷)制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核生物，常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是(

)A．食用醋的酸味主要來源于乙酸B．醋酸菌不適宜在無氧條件下生存C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)D解析：乙酸是由醋酸菌產(chǎn)生的，是食用醋的酸味主要來源，A正確；醋酸菌是好氧細(xì)菌，不適宜在無氧的條件下生存，B正確；在氧氣充足但缺少糖源時，醋酸菌可以將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，因此醋酸菌體內(nèi)含有催化乙醇氧化成乙酸的酶，C正確；醋酸菌為原核生物，沒有核膜包被的細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，因此沒有線粒體，D錯誤。2．(2024·湖南卷)微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是(

)A．①②⑤⑥

B．③④⑥⑦C．①②⑦⑧

D．①③④⑤D解析：由圖可知，②中撥出棉塞后應(yīng)握住棉塞上部；⑥中劃線時不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全拿開，應(yīng)在火焰附近將培養(yǎng)皿打開一條縫隙；⑦中劃線時應(yīng)用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，并且第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧中平板應(yīng)倒置培養(yǎng)。①③④⑤正確，故選D。3．(2024·重慶卷)養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉(zhuǎn)化為尿素進(jìn)而產(chǎn)生NH3，影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進(jìn)行實(shí)驗(yàn)獲得目的菌株，正確的是(

)A．①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落B．②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)C．③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙D．糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少C解析：平板劃線法無需稀釋，A錯誤；由圖可知，②篩選不能在尿素唯一氮源培養(yǎng)基上生長，而能在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌株用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，B錯誤；所篩選出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不產(chǎn)生脲酶或分泌脲酶抑制劑，所以③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙，C正確；由圖可知，甲不產(chǎn)生脲酶而乙可以產(chǎn)生脲酶，且乙同時分泌脲酶抑制劑，糞便中可能還含有其他能產(chǎn)生脲酶的菌株使甲能夠產(chǎn)生NH3，所以糞便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的減少，D錯誤。4．(2023·遼寧卷)細(xì)菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細(xì)菌形成的。利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細(xì)菌氣溶膠的濃度(菌落數(shù)/m3)。下列敘述錯誤的是(

)A．采樣前需對空氣微生物采樣器進(jìn)行無菌處理B．細(xì)菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時需將平板倒置C．同一稀釋度下至少對3個平板計數(shù)并取平均值D．稀釋涂布平板法檢測的細(xì)菌氣溶膠濃度比實(shí)際值高D解析：為防止雜菌感染，接種前需要對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、微生物采樣器進(jìn)行滅菌，對實(shí)驗(yàn)操作者的雙手進(jìn)行消毒，A正確；純化培養(yǎng)時，為防止污染培養(yǎng)基和水分蒸發(fā)，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，B正確；微生物計數(shù)時在同一稀釋度下，應(yīng)至少需要對3個菌落數(shù)目在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，C正確；使用稀釋涂布平板法對微生物計數(shù)，數(shù)值往往偏小，原因是兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上只能觀察到一個菌落，D錯誤。5．(2024·江西卷)井岡霉素是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種(JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長)發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于JGs發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是(

)A.JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因?yàn)樗心軌蚓幋a井岡霉素的基因B．JGs接入發(fā)酵罐前需要擴(kuò)大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量C．提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量D．稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細(xì)胞數(shù)量的變化D解析：基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，而井岡霉素是JGs發(fā)酵生產(chǎn)的一種氨基寡糖類抗生素，A錯誤；JGs接入發(fā)酵罐前需要擴(kuò)大培養(yǎng)，該過程會影響JGs的數(shù)量，進(jìn)而影響井岡霉素的產(chǎn)量，B錯誤；在一定范圍內(nèi)提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量，但若濃度過大，可能會降低井岡霉素的產(chǎn)量，C錯誤；JGs是一種放線菌，菌體呈絲狀生長，形成的菌落難以區(qū)分，因此稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細(xì)胞數(shù)量的變化，D正確。7.(2023·山東高考T12)以下是以泡菜壇為容器制作泡菜時的4個處理:①沸鹽水冷卻后再倒入壇中;②鹽水需要浸沒全部菜料③蓋好壇蓋后,向壇蓋邊沿的水槽中注滿水;④檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法正確的是（

）A.①主要是為了防止菜料表面的醋酸桿菌被殺死B.②的主要目的是用鹽水殺死菜料表面的雜菌C.③是為了使氣體只能從泡菜壇排出而不能進(jìn)入D.④可檢測到完整發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量逐漸降低C三、體驗(yàn)高考真題1．(2024·湖北卷)制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核生物，常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是(

)A．食用醋的酸味主要來源于乙酸B．醋酸菌不適宜在無氧條件下生存C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)D解析：乙酸是由醋酸菌產(chǎn)生的，是食用醋的酸味主要來源，A正確；醋酸菌是好氧細(xì)菌，不適宜在無氧的條件下生存，B正確；在氧氣充足但缺少糖源時，醋酸菌可以將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜幔虼舜姿峋w內(nèi)含有催化乙醇氧化成乙酸的酶，C正確；醋酸菌為原核生物，沒有核膜包被的細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，因此沒有線粒體，D錯誤。2．(2024·湖南卷)微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是(

)A．①②⑤⑥

B．③④⑥⑦C．①②⑦⑧

D．①③④⑤D解析：由圖可知，②中撥出棉塞后應(yīng)握住棉塞上部；⑥中劃線時不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全拿開，應(yīng)在火焰附近將培養(yǎng)皿打開一條縫隙；⑦中劃線時應(yīng)用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，并且第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧中平板應(yīng)倒置培養(yǎng)。①③④⑤正確，故選D。3．(2024·重慶卷)養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉(zhuǎn)化為尿素進(jìn)而產(chǎn)生NH3，影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進(jìn)行實(shí)驗(yàn)獲得目的菌株，正確的是(

)A．①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落B．②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)C．③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙D．糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少C解析：平板劃線法無需稀釋，A錯誤；由圖可知，②篩選不能在尿素唯一氮源培養(yǎng)基上生長，而能在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌株用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，B錯誤；所篩選出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不產(chǎn)生脲酶或分泌脲酶抑制劑，所以③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙，C正確；由圖可知，甲不產(chǎn)生脲酶而乙可以產(chǎn)生脲酶，且乙同時分泌脲酶抑制劑，糞便中可能還含有其他能產(chǎn)生脲酶的菌株使甲能夠產(chǎn)生NH3，所以糞便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的減少，D錯誤。4．(2023·遼寧卷)細(xì)菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細(xì)菌形成的。利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細(xì)菌氣溶膠的濃度(菌落數(shù)/m3)。下列敘述錯誤的是(

)A．采樣前需對空氣微生物采樣器進(jìn)行無菌處理B．細(xì)菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時需將平板倒置C．同一稀釋度下至少對3個平板計數(shù)并取平均值D．稀釋涂布平板法檢測的細(xì)菌氣溶膠濃度比實(shí)際值高D解析：為防止雜菌感染，接種前需要對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、微生物采樣器進(jìn)行滅菌，對實(shí)驗(yàn)操作者的雙手進(jìn)行消毒，A正確；純化培養(yǎng)時，為防止污染培養(yǎng)基和水分蒸發(fā)，培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，B正確；微生物計數(shù)時在同一稀釋度下，應(yīng)至少需要對3個菌落數(shù)目在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，C正確；使用稀釋涂布平板法對微生物計數(shù)，數(shù)值往往偏小，原因是兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上只能觀察到一個菌落，D錯誤。5．(2024·江西卷)井岡霉素是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種(JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長)發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于JGs發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是(

)A.JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因?yàn)樗心軌蚓幋a井岡霉素的基因B．JGs接入發(fā)酵罐前需要擴(kuò)大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量C．提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量D．稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細(xì)胞數(shù)量的變化D解析：基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，而井岡霉素是JGs發(fā)酵生產(chǎn)的一種氨基寡糖類抗生素，A錯誤；JGs接入發(fā)酵罐前需要擴(kuò)大培養(yǎng)，該過程會影響JGs的數(shù)量，進(jìn)而影響井岡霉素的產(chǎn)量，B錯誤；在一定范圍內(nèi)提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量，但若濃度過大，可能會降低井岡霉素的產(chǎn)量，C錯誤；JGs是一種放線菌，菌體呈絲狀生長，形成的菌落難以區(qū)分，因此稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細(xì)胞數(shù)量的變化，D正確。6.(2022·湖北新高考T4)滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是()A.動、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B.微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌D解析：6.DA.動、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯誤;B.動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保證無菌環(huán)境,而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯誤;C.一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,C錯誤;D.可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,D正確。故選D7.(2023·山東高考T15)平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是()

A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B.平板涂布時涂布器使用前必須進(jìn)行消毒C.接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出

合成脲酶的微生物D解析：7.DA.不含氮源的平板可用于固氮菌的培養(yǎng)，A錯誤;B.平板涂布時涂布器使用前必須浸在酒精中,然后在火焰上灼燒五滅菌,這種操作屬于滅菌,不屬于消毒,B錯誤;C.使用后的培養(yǎng)基即使未長出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理,不能直接丟棄,以免污染環(huán)境,C錯誤;D.脲酶可以催化尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上,能合成脲酶的微生物可以分解尿素獲得氮源而進(jìn)行生長繁殖,但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而無法生長,因此以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物,D正確。故選D8.(2024·吉林卷)某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯抗萎病,其篩選流程及性檢測如圖。下列操作正確的是（

）A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi),從感病植株上采集樣品B.將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗,收集沖洗液進(jìn)行無菌檢測C.將無菌檢測合格