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2025年撫順市重點(diǎn)中學(xué)高三二診模擬考試生物試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)碼填寫(xiě)清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時(shí)請(qǐng)按要求用筆。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效;在草稿紙、試卷上答題無(wú)效。4.作圖可先使用鉛筆畫(huà)出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.身體新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基是導(dǎo)致皮膚衰老的“元兇”。自由基會(huì)破壞膠原蛋白,使皮膚得不到足夠的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng),從而造成皮膚組織活力下降、失去彈性、產(chǎn)生皺紋,出現(xiàn)皮膚老化、膚色暗沉等現(xiàn)象。某些抗氧化劑能清除代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基,可以延緩細(xì)胞衰老。下列有關(guān)敘述正確的是()A.細(xì)胞內(nèi)自由基的產(chǎn)生均與外界不良環(huán)境的影響有關(guān)B.自由基攻擊磷脂并產(chǎn)生自由基的過(guò)程存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)C.細(xì)胞衰老過(guò)程中酪氨酸酶活性降低可能與自由基有關(guān)D.DNA的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,自由基不會(huì)導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變2.植物具有“周期共鳴”的特點(diǎn),即植物內(nèi)在的生物節(jié)律與外界晝夜的時(shí)間變化(正常晝夜周期為24h)相互匹配。科研人員檢測(cè)了某野生型植物在T20(光照和黑暗各10h)、T24(光照和黑暗各12h)和T28(光照和黑暗各14h)條件下葉片的葉綠素含量,結(jié)果如圖所示??蒲腥藛T又使用化學(xué)誘變劑處理該種野生型植物,誘導(dǎo)其發(fā)生基因突變,篩選得到周期節(jié)律改變的純合突變體Z(周期節(jié)律比野生型短)和T(周期節(jié)律比野生型長(zhǎng))。為了探究植物生物鐘周期與環(huán)境晝夜周期之間匹配程度是否通過(guò)影響葉綠素含量來(lái)影響光合作用,應(yīng)設(shè)置的實(shí)驗(yàn)組數(shù)是()A.3 B.4 C.5 D.63.RNA在生物的遺傳和變異中發(fā)揮重要的作用。下列與RNA相關(guān)的敘述正確的是()A.有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物遺傳物質(zhì)主要是DNA,少數(shù)是RNAB.mRNA可以沿著多個(gè)核糖體移動(dòng)從而迅速合成大量蛋白質(zhì)C.tRNA上的反密碼子共有64種D.有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物參與翻譯過(guò)程的多種RNA均由DNA控制合成4.下列與細(xì)胞相關(guān)的敘述錯(cuò)誤的是()A.草履蟲(chóng)的單個(gè)細(xì)胞就能完成各種生命活動(dòng)B.蛙的紅細(xì)胞分裂過(guò)程與中心體和紡錘體形成有關(guān)C.動(dòng)物細(xì)胞之間能發(fā)生融合與細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)D.活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP,但有些不能進(jìn)行有絲分裂5.迷迭香是雌雄同株植物,其花色由一對(duì)基因R、r控制,藍(lán)色對(duì)白色為完全顯性。在不考慮突變和致死情況下,以Rr的植株作親本來(lái)選育藍(lán)色純合植株RR,在F2中RR植株所占比例最大的方法是()A.連續(xù)自交2次,每代的子代中不除去rr的個(gè)體B.連續(xù)自交2次,每代的子代中人工除去rr個(gè)體C.連續(xù)自由交配2次,每代的子代中不除去rr的個(gè)體D.連續(xù)自由交配2次,每代的子代中人工除去rr個(gè)體6.生物科學(xué)是一門(mén)實(shí)驗(yàn)科學(xué),下列有關(guān)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是()A.番茄汁和胡蘿卜汁是檢測(cè)還原糖是否存在的良好材料B.取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細(xì)胞中的葉綠體多而大C.制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí),需在潔凈載玻片中央滴一滴生理鹽水D.由于菠菜葉肉細(xì)胞的原生質(zhì)層呈現(xiàn)綠色,所以可以用它作材料觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)熒光原位雜交可用熒光標(biāo)記的特異DNA片段為探針,與染色體上對(duì)應(yīng)的DNA片段結(jié)合,從而將特定的基因在染色體上定位,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)DNA熒光探針的準(zhǔn)備過(guò)程如圖1所示,DNA酶Ⅰ隨機(jī)切開(kāi)了核苷酸之間的________鍵從而產(chǎn)生切口,隨后在DNA聚合酶作用下,以熒光標(biāo)記的_____為原料,合成熒光標(biāo)記的DNA探針。(2)圖2表示探針與待測(cè)基因結(jié)合的原理,先將探針與染色體共同煮沸,使DNA雙鏈中__________鍵斷裂,形成單鏈,隨后在降溫復(fù)性過(guò)程中,探針的堿基按照_______原則,與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子,圖中兩條姐妹染色單體中最多可有_______條熒光標(biāo)記的DNA片段。8.(10分)土壤中富含多種微生物,其中的鏈霉菌為真菌,能合成某些抗生素?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)與細(xì)菌相比,鏈霉菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上最顯著的特征是________。(2)制備培養(yǎng)鏈霉菌的培養(yǎng)基時(shí),在稱(chēng)量、溶化后,滅菌之前還需要________。對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌通常采用的方法是________。篩選并純化鏈霉菌時(shí),將含有鏈霉菌的菌液接種在固體培養(yǎng)基上的常用方法為_(kāi)_______。在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)觀察到菌落,菌落的含義是________。(3)鏈霉菌的氣生菌絲能產(chǎn)生多個(gè)孢子。臨時(shí)保存該菌種時(shí),可將鏈霉菌接種到________上,長(zhǎng)期保存孢子可采用________法。(4)把菌種接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基上,持續(xù)振蕩培養(yǎng)鏈霉菌比靜置培養(yǎng)時(shí)的抗生素產(chǎn)量高,其原因是________。9.(10分)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞??蒲腥藛T利用胚眙干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療,其技術(shù)流程如圖(圖中數(shù)字序號(hào)表示的是相關(guān)過(guò)程)。請(qǐng)回答:(1)過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時(shí)期。(2)過(guò)程②利用的技術(shù)是____________________,當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其_________分離出ES細(xì)胞。(3)過(guò)程③中獲取的目的基因是____________________,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建_______________________,構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用______________技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。通測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用__________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。10.(10分)前不久,某生物公司的百白破疫苗檢驗(yàn)不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價(jià)疫苗和簡(jiǎn)化計(jì)劃免疫程序,科學(xué)家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四聯(lián)疫苗,經(jīng)各項(xiàng)檢測(cè)均通過(guò)rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉?xiàng)U菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類(lèi)毒素。請(qǐng)分析回答:(1)為獲取百日咳桿菌類(lèi)毒素的基因,可從百日咳桿菌的細(xì)胞中提取對(duì)應(yīng)mRNA,在______的作用下合成雙鏈cDNA片段,獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列_____(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小,且序列已知,獲得目的基因可采用________,然后通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增____________,此技術(shù)的前提是已知一段____________的核苷酸序列以便合成。(3)把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí),科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為載體,寫(xiě)出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由_________________________________________________。(寫(xiě)出2點(diǎn))(4)研究發(fā)現(xiàn),如果將白喉?xiàng)U菌類(lèi)毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?,免疫效果更好,?qǐng)寫(xiě)出此種技術(shù)的基本流程_____________。(5)實(shí)驗(yàn)證明,一定時(shí)間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好,其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的_____細(xì)胞數(shù)量增多,當(dāng)同種抗原再次侵入人體時(shí)二次免疫的特點(diǎn)是_____。11.(15分)池塘養(yǎng)殖普遍存在由于餌料、魚(yú)類(lèi)排泄物、換水不及時(shí)等引起的水體污染現(xiàn)象,研究者設(shè)計(jì)了一種循環(huán)水池塘養(yǎng)殖系統(tǒng)(如下圖)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)與自然池塘相比,人工養(yǎng)殖池塘生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)力穩(wěn)定性______。人工養(yǎng)殖池塘水體的N、P含量容易升高,會(huì)引起水體的富營(yíng)養(yǎng)化;藻類(lèi)等浮游生物大量繁殖、加之死亡后被微生物分解,引起水體的溶氧量下降,造成魚(yú)類(lèi)等死亡,進(jìn)一步破壞了生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài),這種調(diào)節(jié)方式稱(chēng)為_(kāi)_________。(2)與傳統(tǒng)養(yǎng)殖池塘相比,該養(yǎng)殖系統(tǒng)增加的生態(tài)工程設(shè)施有________??梢酝ㄟ^(guò)在這些設(shè)施內(nèi)栽植水生植物、放養(yǎng)濾食動(dòng)物等措施,起到對(duì)水體的_________,有效減少水體中的N、P等含量。(3)該養(yǎng)殖系統(tǒng)設(shè)計(jì)為前一池塘上層水流人后一池塘底部,實(shí)現(xiàn)水層交換,其目的有________________________、____________________________。(4)該養(yǎng)殖系統(tǒng)中串聯(lián)的池塘不宜過(guò)多,因?yàn)開(kāi)____________________________________。(5)保持池塘水體中適當(dāng)?shù)腘、P含量是必要的,該養(yǎng)殖系統(tǒng)可以通過(guò)________、________進(jìn)行調(diào)控。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、C【解析】
細(xì)胞衰老的自由基學(xué)說(shuō)是美國(guó)科學(xué)家Harman1955年提出的,核心內(nèi)容有三條:
(1)衰老是由自由基對(duì)細(xì)胞成分的有害進(jìn)攻造成的,細(xì)胞進(jìn)行各種氧化反應(yīng)容易產(chǎn)生自由基,輻射以及有害物質(zhì)入侵也會(huì)刺激細(xì)胞產(chǎn)生自由基。
(2)自由基攻擊磷脂分子時(shí),又能產(chǎn)生自由基,從而攻擊別的分子,引發(fā)雪崩式反應(yīng);
(3)自由基還會(huì)攻擊DNA,可能引起基因突變,也可攻擊蛋白質(zhì),使蛋白質(zhì)活性下降,致使細(xì)胞衰老?!驹斀狻緼、細(xì)胞進(jìn)行氧化反應(yīng)也會(huì)產(chǎn)生自由基,A錯(cuò)誤;B、自由基攻擊磷脂并產(chǎn)生自由基的過(guò)程存在正反饋調(diào)節(jié),B錯(cuò)誤;C、自由基會(huì)攻擊蛋白質(zhì),故細(xì)胞衰老過(guò)程中酪氨酸酶活性降低可能與自由基有關(guān),C正確;D、自由基會(huì)攻擊DNA從而導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,D錯(cuò)誤。故選C。2、D【解析】
結(jié)合題意以及實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行分析可知,本實(shí)驗(yàn)的自變量是突變生物的種類(lèi)和周期處理的,因變量是各組處理的不同突變類(lèi)型的葉綠素含量。然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的對(duì)照原則、單一變量原則和等量原則進(jìn)行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)?!驹斀狻刻骄恐参锷镧娭芷谂c環(huán)境晝夜周期之間匹配程度是否通過(guò)影響葉綠素含量而影響光合作用,除設(shè)置題中的對(duì)照實(shí)驗(yàn)外,還需要設(shè)置突變體Z(周期節(jié)律比野生型短)和T(周期節(jié)律比野生型長(zhǎng))分別在T20(光照和黑暗各10h)、T24(光照和黑暗各12h)和T28(光照和黑暗各14h)條件下的實(shí)驗(yàn),測(cè)定葉片的葉綠素含量,并進(jìn)行比較,故需要設(shè)置6組實(shí)驗(yàn),即D正確。故選D。。3、D【解析】
翻譯的模板是mRNA,原料是氨基酸,產(chǎn)物是多肽,場(chǎng)所是核糖體?!驹斀狻緼、有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物遺傳物質(zhì)是DNA,A錯(cuò)誤;B、多個(gè)核糖體沿著一條mRNA移動(dòng),迅速合成大量的蛋白質(zhì),B錯(cuò)誤;C、tRNA上的反密碼子共有61種,C錯(cuò)誤;D、有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物參與翻譯過(guò)程的多種RNA(mRNA、tRNA、rRNA)均由DNA控制合成,D正確。故選D?!军c(diǎn)睛】密碼子有64種,反密碼子有61種,tRNA有61種。4、B【解析】
1、細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,生命活動(dòng)離不開(kāi)細(xì)胞,單細(xì)胞生物單個(gè)細(xì)胞就能完成各種生命活動(dòng),多細(xì)胞生物依賴(lài)各種分化的細(xì)胞密切合作,共同完成一系列復(fù)雜的生命活動(dòng)。2、有關(guān)細(xì)胞膜的知識(shí):(1)細(xì)胞膜主要成分為磷脂和蛋白質(zhì),含有少量的糖類(lèi);膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的成分之一。(2)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):具有流動(dòng)性(膜的結(jié)構(gòu)成分不是靜止的,而是動(dòng)態(tài)的)。(3)細(xì)胞膜的功能特點(diǎn):具有選擇透過(guò)性(可以讓水分子自由通過(guò),細(xì)胞要選擇吸收的離子和小分子也可以通過(guò),而其他的離子、小分子和大分子則不能通過(guò))。(4)細(xì)胞膜的功能:①將細(xì)胞與外界環(huán)境分開(kāi);②控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞;③進(jìn)行細(xì)胞間的物質(zhì)交流。3、真核生物的細(xì)胞分裂方式:有絲分裂、減數(shù)分裂和無(wú)絲分裂。原核生物以二分裂方式進(jìn)行分裂?!驹斀狻緼、草履蟲(chóng)屬于單細(xì)胞生物,靠單個(gè)細(xì)胞就能完成各項(xiàng)生命活動(dòng),A正確;B、蛙的紅細(xì)胞進(jìn)行的是無(wú)絲分裂,沒(méi)有紡錘體和染色體的出現(xiàn),B錯(cuò)誤;C、動(dòng)物細(xì)胞之間融合與細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)——流動(dòng)性有關(guān),C正確;D、活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP,但不都能進(jìn)行有絲分裂,如原核細(xì)胞只能進(jìn)行二分裂,D正確。故選B。5、B【解析】
以一對(duì)相對(duì)性狀的雜合子(Rr)為親本連續(xù)自交,其后代表現(xiàn)為:Fn雜合子顯性純合子隱性純合子比例以一對(duì)相對(duì)性狀的雜合子(Rr)為親本連續(xù)自交,并在每一代除去隱形個(gè)體,其后代表現(xiàn)為:Fn雜合子顯性純合子比例以一對(duì)相對(duì)性狀的雜合子(Rr)為親本連續(xù)自由交配,產(chǎn)生的配子比例為R:r=1:1,故其后代表現(xiàn)為:Fn雜合子顯性純合子隱性純合子比例【詳解】A、以Rr的植株作親本來(lái)選育藍(lán)色純合植株RR,連續(xù)自交2次,后代中RR植株所占比例為,A錯(cuò)誤;B、以Rr的植株作親本來(lái)選育藍(lán)色純合植株RR,連續(xù)自交2次,每代的子代中人工除去rr個(gè)體,則F1比例為RR:Rr=1:2,F(xiàn)2中RR植株所占比例為,B正確;C、連續(xù)自由交配2次,每代的子代中不除去rr的個(gè)體,F(xiàn)2中RR植株所占比例為,C錯(cuò)誤;D、連續(xù)自由交配2次,每代的子代中人工除去rr個(gè)體,則F1比例為RR:Rr=1:2,產(chǎn)生的配子比例為R:r=2:1,F(xiàn)2中RR植株所占比例為,D錯(cuò)誤。故選B?!军c(diǎn)睛】注意區(qū)分“自交”和“自由交配”廣義的自交是指具有相同基因型的兩個(gè)個(gè)體進(jìn)行交配。自由交配也叫隨機(jī)交配,是指種群內(nèi)具有生殖能力的雌雄個(gè)體之間可以隨機(jī)交配,不受基因型的限制,屬于雜交的一種。6、D【解析】
1、斐林試劑可用于鑒定還原糖,在水浴加熱的條件下,溶液的顏色變化為磚紅色(沉淀)。2、葉綠體主要分布于綠色植物的葉肉細(xì)胞,呈綠色,扁平的橢球形或球形,散布于細(xì)胞質(zhì)中,可用高倍顯微鏡觀察其形態(tài)和分布。3、健那綠染液能專(zhuān)一性地使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。通過(guò)染色,可在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布?!驹斀狻緼、番茄汁呈紅色,胡蘿卜汁呈橙色,會(huì)影響還原糖的檢測(cè)中磚紅色沉淀的觀察,因此不適宜做還原糖的檢測(cè),A錯(cuò)誤;B、取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細(xì)胞中的葉綠體少而大,B錯(cuò)誤;C、制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察線粒體時(shí),必需先在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液,C錯(cuò)誤;D、由于菠菜葉肉細(xì)胞的原生質(zhì)層呈現(xiàn)綠色,所以可以用它作材料觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象,D正確。故選D。二、綜合題:本大題共4小題7、磷酸二酯(4種)脫氧核苷酸氫堿基互補(bǔ)配對(duì)4【解析】
基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作為探針,原理是DNA分子雜交;DNA分子是一個(gè)獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu),是由兩條平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤(pán)旋而成,外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架,內(nèi)側(cè)是堿基對(duì)(A-T;C-G)通過(guò)氫鍵連接?!驹斀狻浚?)根據(jù)題意和圖示分析可知:DNA酶Ⅰ隨機(jī)切開(kāi)了核苷酸之間的磷酸二酯鍵從而產(chǎn)生切口;在DNA聚合酶Ⅰ作用下,以熒光標(biāo)記的四種脫氧核苷酸為原料,合成熒光標(biāo)記的DNA探針;(2)DNA分子是雙鏈結(jié)構(gòu),通過(guò)氫鍵連接;將探針與染色體共同煮沸,使DNA雙鏈中氫鍵斷裂,形成單鏈,隨后在降溫復(fù)性過(guò)程中,探針的堿基與染色體上的特定基因序列按照A-T、C-G的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,形成較穩(wěn)定的雜交分子;圖中兩條姐妹染色單體中含有2個(gè)DNA分子共有4條鏈,所以最多可有4條熒光標(biāo)記的DNA片段。【點(diǎn)睛】本題結(jié)合圖解,考查DNA的復(fù)制、基因工程等知識(shí),要求考生識(shí)識(shí)記基因工程的原理及操作步驟,了解基因工程的相關(guān)應(yīng)用,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。8、具有核膜包被的細(xì)胞核調(diào)節(jié)pH高壓蒸汽滅菌法稀釋涂布平板法和平板劃線法由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體固體斜面培養(yǎng)基甘油管藏振蕩培養(yǎng)提高了培養(yǎng)液中的溶氧量,同時(shí)有利于菌體與培養(yǎng)液充分接觸,促進(jìn)了菌體的生長(zhǎng)與代謝【解析】
鏈霉菌為真菌,屬于真核生物。微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的成分一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽。培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng),可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。常用滅菌方法有:灼燒滅菌,將接種工具如接種環(huán)、接種針滅菌;干熱滅菌:如玻璃器皿、金屬用具等需保持干燥的物品。高壓蒸汽滅菌:如培養(yǎng)基的滅菌?!驹斀狻浚?)細(xì)菌是原核生物,鏈霉菌是真核生物,與細(xì)菌相比,鏈霉菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上最顯著的特征是具有核膜包被的細(xì)胞核。(2)制備培養(yǎng)鏈霉菌的培養(yǎng)基的步驟:計(jì)算→稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板;對(duì)培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌;將含有鏈霉菌的菌液接種在固體培養(yǎng)基上的常用方法為稀釋涂布平板法和平板劃線法。菌落指由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。(3)臨時(shí)保存鏈霉菌菌種時(shí),可將鏈霉菌接種到固體斜面培養(yǎng)基上,長(zhǎng)期保存孢子時(shí)可采用甘油管藏的方法。(4)培養(yǎng)鏈霉菌時(shí),持續(xù)振蕩培養(yǎng),能提高培養(yǎng)液的溶氧量,有利于菌體與培養(yǎng)液的充分接觸,促進(jìn)菌體的生長(zhǎng)與代謝,因此持續(xù)振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)時(shí)的抗生素產(chǎn)量高?!军c(diǎn)睛】答題關(guān)鍵在于掌握微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí),形成系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)。9、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(正常的)Rag2基因含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體(正常的)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對(duì)序列或遺傳信息)DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】
題圖分析:圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過(guò)程圖解,其中①表示核移植過(guò)程,②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程,③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療。【詳解】(1)MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件,故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期,即過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。(2)過(guò)程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán),故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。(3)根據(jù)題干信息可知,過(guò)程③中獲取的目的基因是(正常的)Rag2基因,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體,構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對(duì)序列或遺傳信息)設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法,為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用DNA分子雜交技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶,PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶(Taq酶)等。檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,可采用抗原一抗體雜交法,即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)?!军c(diǎn)睛】熟知圖中個(gè)步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵!掌握關(guān)于基因治療的各個(gè)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的另一關(guān)鍵!10、逆轉(zhuǎn)錄酶不同人工合成法目的基因引物能自主復(fù)制、有多個(gè)限制酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列記憶反應(yīng)快,反應(yīng)強(qiáng)烈,產(chǎn)生抗體多【解析】
1、基因工程技術(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)
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