DB22-T1696-2012-飼料中阿福特羅的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法-吉林省

ICS65.120B46DB22備案號(hào)：35987-2013吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T1696—2012飼料中阿福特羅的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法DeterminationofArformoterolinfeeds——LC-MS/MSmethod吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB22/T1696—2012前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院、吉林大學(xué)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李媛媛、劉斌、關(guān)樹文、張爽、劉靜秋、李瀅倩、王穎、王慶峰、劉桂華、石金娥、李寧、毛燕、郎樂、包懿、李丹。IDB22/T1696—2012飼料中阿福特羅的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中阿福特羅的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料中阿福特羅的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)限為10μg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T14699.1飼料采樣3原理試樣用鹽酸-甲醇混合溶液溶解提取、醋酸鉛沉淀蛋白后用固相萃取小柱凈化，洗脫液經(jīng)氮?dú)獯蹈珊笥眉姿岚啡芤喝芙?，供液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜檢測(cè)，外標(biāo)法定量。4.7阿福特羅（C23H30N2O10,CAS號(hào):73573-87-2）：純度≥98%。4.8鹽酸溶液[c(HCl)=0.1mol/L]：吸取8.3mL鹽酸(4.1)置于1000mL容量瓶中，用水稀釋后，定容至刻度。4.9鹽酸甲醇溶液：取80mL鹽酸溶液(4.8)，加入20mL甲醇(4.5)混勻。4.10飽和醋酸鉛溶液：在50mL水中加入一定量的醋酸鉛(4.3)，超聲5min，直至固體不再溶解。4.11甲酸水溶液(0.2%)：取1mL甲酸(4.6)，加水定容至500mL。4.12氨甲醇水溶液(5%)：取5mL氨水(4.2)與95mL甲醇(4.5)混合。4.13甲酸銨溶液(c=10mmol/L)：稱取0.063g甲酸銨至100mL容量瓶，加水定容。4.14阿福特羅標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1mg/mL)：稱取0.1g（精確至0.1mg）阿福特羅(4.7)，至100mL容量瓶，甲醇(4.5)定容。2℃～8℃冷藏保存。保質(zhì)期一周。1DB22/T1696—20124.15阿福特羅標(biāo)準(zhǔn)工作液(1μg/mL)：吸取0.1mL阿福特羅標(biāo)準(zhǔn)貯備液(4.14)，用甲酸水溶液(4.11)定容至100mL。2℃～8℃冷藏保存。保質(zhì)期一周。4.16固相萃取小柱：混合型陽(yáng)離子交換柱（60mg,3mL）。4.17濾膜:0.22μm。5儀器5.1液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧電離源。5.2氮?dú)獯蹈蓛x。5.3離心機(jī)，轉(zhuǎn)速大于7000r/min。5.4分析天平：感量0.1mg。5.5粉碎機(jī)。5.6旋渦振蕩器。5.7固相萃取裝置。6試樣制備按照GB/T14699.1采樣，將實(shí)驗(yàn)樣品粉碎，充分混合均勻后待用。稱取試樣2g(精確至0.01g)于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入19mL鹽酸甲醇溶液(4.9)和1mL飽和醋酸鉛溶液(4.10)，充分振蕩20min，然后于7000r/min離心10min，上清液備用。固相萃取小柱先用3mL甲醇、3mL水活化。取上清液5mL過柱，用2mL水和2mL甲醇淋洗，空氣抽干2min，用5mL氨甲醇水溶液(4.12)洗脫，收集洗脫液，氮吹干，用1mL甲酸胺溶液(4.13)溶解，過濾膜，待測(cè)。2DB22/T1696—2012時(shí)間A%B%min01.526580803030653520207070352.533.58.2質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：電離方式：電噴霧電離，正離子；b)電噴霧電壓：4kV；a)c)掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM），母離子m/z345.2，定量離子m/z149.1，定性離子m/z327.5；d)裂解電壓：115V。8.3定性測(cè)定按照上述條件測(cè)定試樣和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，如果試樣中的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致（變化范圍在±2.5%之內(nèi)）；試樣中目標(biāo)化合物的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對(duì)豐度一致，相對(duì)豐度偏差不超過表2的規(guī)定，則可以判斷試樣中存在阿福特羅。表2定性離子相對(duì)豐度的最大允許偏差＞50%±20%8.4定量測(cè)定本方法采用外標(biāo)法單離子定量測(cè)定，定量離子m/z345.2/149.1，待測(cè)樣液中阿福特羅的相應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。在上述色譜條件下，阿福特羅標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖參見附錄A中圖A.1。按上述步驟，對(duì)同一樣品進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。.....................................(1)式中：3DB22/T1696—2012Ｘ—試樣中阿福特羅的含量，單位為微克每千克（μg/kg）；c—由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得試液中阿福特羅的濃度，單位為微克每升（μg/L）；V—試樣定容體積，單位為毫升（mL）；n—稀釋倍數(shù)；m—試樣取樣質(zhì)量，單位為克（g）。10精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不超過算術(shù)平均值10%。在再現(xiàn)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不超過算術(shù)平均值10%。4DB22/T1696—2