2025年牛欄山一中高三（最后沖刺）生物試卷含解析

2025年牛欄山一中高三（最后沖刺）生物試卷注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．研究者連續(xù)培養(yǎng)乳腺癌細胞，取樣測定擁有不同DNA含量的細胞數(shù)目，結(jié)果如右圖所示。長春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細胞分裂。若向乳腺癌細胞的培養(yǎng)液中長時間持續(xù)添加長春花堿，用相同方法測定每個細胞DNA含量與細胞數(shù)目，結(jié)果最可能是下圖中的（）A． B． C． D．2．下列有關(guān)核酸的敘述正確的是（）A．發(fā)菜的遺傳物質(zhì)有DNA和RNA兩種B．人體細胞內(nèi)的DNA和轉(zhuǎn)運RNA中均含有堿基對C．洋蔥根尖細胞的葉綠體和線粒體中均含有少量DNAD．RNA合成時，RNA聚合酶與基因的起始密碼子相結(jié)合3．對于生物的激素調(diào)節(jié)及其應(yīng)用方面的有關(guān)說法正確的是（）A．刮干熱風(fēng)會影響小麥在開花期傳粉，噴灑一定濃度的生長素能避免減產(chǎn)B．胰島素分泌不足的成年人排尿量會相應(yīng)增加，逐漸消瘦，體重減少C．切除動物的垂體后，血液中促甲狀腺激素釋放激素和甲狀腺激素會均減少D．激素間協(xié)同和拮抗對動物正常生命活動是有利的，如生長素與甲狀腺激素的協(xié)同4．下列關(guān)于細胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述，正確的是（）A．在有絲分裂間期的細胞中，線粒體和核糖體均可產(chǎn)生水B．線粒體外膜上具有運輸葡萄糖分子和氧氣分子的載體C．果蠅體細胞和低等植物細胞所含的高爾基體，在細胞分裂末期都參與多糖的合成D．蛋白質(zhì)和DNA分子的多樣性都與它們的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)5．有關(guān)真核細胞的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄這兩種過程的敘述，錯誤的是A．兩種過程都可在細胞核中發(fā)生 B．兩種過程都有酶參與反應(yīng)C．兩種過程都以脫氧核糖核苷酸為原料 D．兩種過程都以DNA為模板6．下表是對某單基因遺傳病進行調(diào)查后整理出的數(shù)據(jù)。下列敘述正確的是（）雙親調(diào)查的家庭數(shù)子女子女總數(shù)父親母親兒子女兒正?；疾≌；疾〉谝唤M正常正常9526013第二組正?；疾?01405第三組患病正常321025第四組患病患病603047合計227710630A．研究課題是調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率B．可基本判定此病為伴X隱性遺傳病C．第1組母親的基因型均為雜合子D．利用表中數(shù)據(jù)可計算出該遺傳病在人群中的發(fā)病率約為43%二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）為研究供氮水平對某植物幼苗光合作用的影響，某研究小組采用水培方法，每天定時澆灌含不同氮素濃度的培養(yǎng)液，適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，分別測定各組植物幼苗葉片的相關(guān)指標，結(jié)果如圖所示。請回答下列問題：注：羧化酶能催化CO2的固定；氣孔導(dǎo)度指的是氣孔張開的程度。（1）該植物幼苗葉片葉綠體中色素的分離方法是_____，葉片通常呈現(xiàn)綠色的原因是_______。（2）該實驗的因變量有_________，當(dāng)培養(yǎng)液中氮素濃度在4mmol/L條件下，該植物幼苗的葉肉細胞中，葉綠體在光反應(yīng)階段產(chǎn)生的O2去路有_________________________。（3）根據(jù)實驗結(jié)果推測，當(dāng)培養(yǎng)液中氮素濃度大于8mmol/L以后，該植物幼苗葉肉細胞間CO2濃度會變大，原因是____________________________。8．（10分）乙烯具有促進果實成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達，從而使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達載體的結(jié)構(gòu)示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的____________（器官）中表達。（2）從番茄成熟果實中提取___________為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，用限制酶____________對上述兩個基因進行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質(zhì)標記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進行檢測，理由是____________。9．（10分）女婁菜（2N＝46）為XY型性別決定植物，其高莖與矮莖受基因E、e控制，葉片的顏色綠色與金黃色受基因F、f控制。某研究小組用一對表現(xiàn)型均為綠色高莖的雌雄植株進行雜交實驗，在特定的實驗環(huán)境下培養(yǎng)子代，統(tǒng)計子代的表現(xiàn)型及比例如表：項目綠色高莖綠色矮莖金黃色高莖金黃色矮莖雄30103010雌502000請據(jù)表回答下列問題：（1）據(jù)表可知，基因E、e和F、f遵循____________定律，判斷依據(jù)是____________。（2）F1的雌雄綠色女婁菜中高莖與矮莖的性狀表現(xiàn)比例不同，根據(jù)實驗數(shù)據(jù)推測，可能的原因是特定的實驗環(huán)境導(dǎo)致基因型為_____________________的個體不能正常發(fā)育存活。為了獲得更明確的結(jié)論，請你設(shè)計最簡便的實驗進行探究（實驗中有各種表現(xiàn)型的純合子、雜合子可供選擇）。①實驗思路：用____________（寫表現(xiàn)型）植株進行雜交，將子代在特定的實驗環(huán)境中培養(yǎng)。②預(yù)測結(jié)果與結(jié)論：若子代中有雌植株，則基因型為____________的個體不能正常發(fā)育存活；若子代中無雌植株，則基因型為____________的個體不能正常發(fā)育存活。10．（10分）為增加油葵種子中的含油量，科學(xué)家嘗試將花生中的酶A基因?qū)胗涂毎?，獲得轉(zhuǎn)基因油葵新品種。（1）為獲取目的基因，可從花生細胞中提取_________，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。以此cDNA為模板通過PCR技術(shù)擴增目的基因。（2）構(gòu)建重組DNA分子（如圖所示）最好選用_________限制酶，目的是可避免_________。（3）普通大腸桿菌細胞中沒有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，將構(gòu)建的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌中,將獲得的農(nóng)桿菌接種在含_________的固體平板上培養(yǎng)得到含重組質(zhì)粒的單菌落，再利用培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（4）剪取油葵的葉片放入浸染液中一段時間后，經(jīng)過篩選獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞。最后經(jīng)過__________________培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株。此種技術(shù)的原理是_________。（5）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該酶A的20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍。通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造，所需步驟有_________。a．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計b．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析c．蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定向改造d．酶A基因的定向改造e．將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞f．將定向改造的酶A導(dǎo)入受體細胞（6）經(jīng)過種植轉(zhuǎn)基因油葵發(fā)現(xiàn)，雖然轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丟失，其原因是_________。11．（15分）真核生物基因中通常含有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒有，原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機制。下圖表示從基因文庫提取胰島素基因的過程?；卮鹣铝袉栴}：（1）從基因結(jié)構(gòu)分析，與基因組文庫中的基因相比，cDNA文庫中獲得的目的基因少了________等結(jié)構(gòu)（至少寫兩個）?；蛭膸熘衏DNA文庫與基因組文庫相比，前者較小，原因是______。（2）將獲得的胰島素基因?qū)胧荏w菌內(nèi)，并在受體菌內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，在基因工程中稱為______。（3）過程⑤需將纖維素膜上的細菌裂解，釋放出__________，再用32P標記的__________作為探針進行雜交。依據(jù)雜交結(jié)果，應(yīng)選取培養(yǎng)基上____（填字母）菌落繼續(xù)培養(yǎng)，才能獲得含有胰島素基因的受體菌。（4）經(jīng)過目的基因的檢測和表達，從大腸桿菌中獲得的“胰島素”未能達到期待的生物活性，導(dǎo)致這種差異的原因可能是__________。（5）與從基因組文庫獲取目的基因相比，圖示方法獲得的目的基因在受體菌中更容易表達，原因是_____。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】根據(jù)題干信息分析，長春花堿阻礙紡錘體微管的形成，從而阻斷細胞分裂。根據(jù)有絲分裂過程可知，紡錘體微管形成于前期，所以若向乳腺癌細胞的培養(yǎng)液中長時間持續(xù)添加長春花堿，則最終所以細胞將處于有絲分裂前期，即所有細胞中DNA的相對值都是2，故選D。2、B【解析】

1、除少數(shù)病毒外，生物的遺傳物質(zhì)是DNA。2、發(fā)菜為原核生物?！驹斀狻緼、發(fā)菜的遺傳物質(zhì)是DNA，A錯誤；B、人體細胞內(nèi)的DNA分子中堿基成對存在，轉(zhuǎn)運RNA中含有部分堿基對，B正確；C、洋蔥根尖細胞中無葉綠體，C錯誤；D、轉(zhuǎn)錄時RNA聚合酶與基因的某一部位相結(jié)合，起始密碼子位于mRNA上，D錯誤。故選B。【點睛】本題考查DNA和RNA在生物體內(nèi)的存在部位、結(jié)構(gòu)以及RNA的合成，考查對基礎(chǔ)知識的理解和歸納。3、B【解析】

生長素的功能應(yīng)用；促進果實發(fā)育；防止落花落果；甲狀腺激素的調(diào)節(jié)過程：下丘腦→促甲狀腺激素釋放激素→垂體→促甲狀腺激素→甲狀腺→甲狀腺激素，同時甲狀腺激素還能對下丘腦和垂體進行負反饋調(diào)節(jié)?！驹斀狻緼、生長素能促進子房發(fā)育成果實，而小麥收獲的是種子，因此小麥傳粉受影響后，噴灑一定濃度的生長素不能避免小麥減產(chǎn)，A錯誤；B、缺少胰島素，血糖含量高，大量的葡萄糖隨尿液排出，尿量增加；由于糖氧化功能發(fā)生障礙，體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)的分解加強，導(dǎo)致機體消瘦，體重減輕，B正確；C、垂體能分泌生長激素和促甲狀腺激素，其中促甲狀腺激素能促進甲狀腺分泌甲狀腺激素，所以切除動物的垂體后，動物血液中的促甲狀腺激素和甲狀腺激素都會減少，而甲狀腺激素對下丘腦分泌促甲狀腺激素釋放激素存在負反饋調(diào)節(jié)，當(dāng)甲狀腺激素減少時，下丘腦分泌的促甲狀腺激素釋放激素會增加，C錯誤；D、生長素屬于植物激素，D錯誤。故選B。【點睛】本題考查生物激素調(diào)節(jié)及其應(yīng)用方面的有關(guān)知識，意在考查考生能運用所學(xué)知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。4、A【解析】

葡萄糖分子不能進入線粒體；DNA分子的多樣性與它的堿基對的排列順序密切相關(guān)。以此相關(guān)知識做出判斷?！驹斀狻緼.在有絲分裂間期的細胞中，線粒體可以進行有氧呼吸產(chǎn)生水，核糖體內(nèi)氨基酸脫水縮合。A正確。B.線粒體外膜上不具有運輸葡萄糖分子的載體，因為葡萄糖分子不進入線粒體。B錯誤。C.果蠅體細胞是動物細胞，其含有的高爾基體，在細胞分裂末期沒有參與多糖的合成。C錯誤。D.蛋白質(zhì)的多樣性與它的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，DNA分子的多樣性與它的堿基對的排列順序密切相關(guān)。D錯誤。故選A。【點睛】本題注意區(qū)分高爾基體在植物細胞和動物細胞中的作用。5、C【解析】

本題考查復(fù)制轉(zhuǎn)錄的知識，DNA主要分布在細胞核?！驹斀狻緼.DNA主要分布在細胞核，DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄主要發(fā)生在細胞核，A正確；B.DNA復(fù)制需要解旋酶和DNA聚合酶，DNA轉(zhuǎn)錄需要RNA聚合酶，B正確；C.DNA復(fù)制以脫氧核糖核苷酸為原料，轉(zhuǎn)錄以核糖核苷酸為原料，C錯誤；D.DNA復(fù)制以DNA兩條鏈為模板，轉(zhuǎn)錄以DNA其中一條鏈為模板，D正確；答案選C.6、B【解析】

分析題表可知，父母正常的家庭中有患病的子女，故該遺傳病為隱性遺傳??；再根據(jù)父親正常，母親患病的家庭中，兒子全部患病，女兒均未患病，可判斷該遺傳病為伴X隱性遺傳病?！驹斀狻緼、題中所示的調(diào)查的群體數(shù)不夠大也不具有普遍性，所以不適合調(diào)查人群中遺傳病的發(fā)病率，A錯誤；B、根據(jù)第一組父母均正常的家庭中有兒子患病可知該遺傳病為隱性基因控制，再根據(jù)四組中后代的正?；蚧疾⌒誀罹c性別有關(guān)，母親患病兒子一定患病，父親正常女兒均為正?？苫九卸ㄔ摬榘閄隱性遺傳病，B正確；C、第一組中共9個家庭，無法確定每個家庭母親的基因型是否均為雜合子，C錯誤；D、題中所示的調(diào)查的群體數(shù)不夠大也不具有普遍性，根據(jù)表中數(shù)據(jù)計算出的遺傳病人群發(fā)病的數(shù)據(jù)不可靠，D錯誤；故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、紙層析法葉綠素對綠光吸收最少，綠光被反射出來凈光合速率、葉綠素含量、氣孔導(dǎo)度、羧化酶含量等進入線粒體和釋放到外界環(huán)境氣孔導(dǎo)度不變，但羧化酶含量減少，CO2消耗速率降低【解析】

分析圖中的曲線可知，隨著培養(yǎng)液中氮素濃度的增加，葉綠素含量不斷增多，氣孔導(dǎo)度先增加后不變，羧化酶含量先增加后減少，凈光合速率先增加后降低?！驹斀狻浚?）葉綠體中色素的分離方法是紙層析法，葉綠素對綠光吸收最少，綠光被反射出來，故葉片通常呈現(xiàn)綠色。（2）由圖可知，本實驗的自變量為不同氮素濃度的培養(yǎng)液，因變量為凈光合速率、葉綠素含量、氣孔導(dǎo)度、羧化酶含量等，當(dāng)培養(yǎng)液中氮素濃度在4mmol/L條件下，該植物幼苗凈光合速率大于0，故葉綠體在光反應(yīng)階段產(chǎn)生的O2的去路有進入線粒體用于細胞呼吸和釋放到外界環(huán)境。（3）根據(jù)實驗結(jié)果推測，培養(yǎng)液中氮素濃度大于8mmol/L以后，幼苗的氣孔導(dǎo)度基本不變，但羧化酶含量明顯降低，CO2的消耗速率降低，故細胞間隙中CO2濃度會增大?！军c睛】本題著重考查了光合作用過程中的物質(zhì)變化和能量變化等方面的知識，意在考查考生能識記并理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成一定知識網(wǎng)絡(luò)的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力。8、果實RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解析】

分析題意和題圖：番茄細胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2所示的基因表達載體的組成包括復(fù)制原點、啟動子、終止子、標記基因和目的基因，目的基因插入點在啟動子和終止子之間?！驹斀狻浚?）乙烯具有促進果實成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的果實中表達。（2）從番茄成熟果實中提取RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，要將兩個基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個基因進行酶切，再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因，這樣融合基因上有三個限制酶切點：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實細胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的，因此為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，因為番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交，所以不能用放射性物質(zhì)標記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進行檢測?！军c睛】解答本題的關(guān)鍵是：1.讀取題干信息，結(jié)合題圖1，弄清反義基因是如何形成的。2.反義mRNA和靶mRNA實質(zhì)上是分別由靶基因的兩條鏈為模板轉(zhuǎn)錄而來。3.結(jié)合題圖和題意分析融合基因為何是反向插入在啟動子2A11的下游。9、（分離和）自由組合E、e位于常染色體上，F(xiàn)、f位于X染色體上（或兩對基因位于兩對同源染色體上或兩對基因位于非同源染色體上）EEXFXF或EEXFXf純合的金黃色高莖雌株和純合的綠色高莖雄株EEXFXFEEXFXf【解析】

由表可知，子代雄性個體高莖比矮莖為3∶1，雌性高莖比矮莖為5∶2，也接近3∶1，沒有性別差異，說明控制高莖和矮莖的基因位于常染色體上，且高莖為顯性性狀。子代雄性中綠色比金黃色為1∶1，雌性均為綠色，存在明顯性別差異，說明控制葉片顏色的基因位于X染色體上，且綠色對金黃色為顯性?！驹斀狻浚?）據(jù)表可知，控制高莖和矮莖的基因位于常染色體上，控制葉片顏色的基因位于X染色體上，兩對基因位于非同源染色體上，因此基因E、e和F、f遵循自由組合定律，（2）由于子代雌性高莖比矮莖為5∶2，F(xiàn)1的雌雄綠色女婁菜中高莖與矮莖的性狀表現(xiàn)比例不同，可能是因為特定的實驗環(huán)境導(dǎo)致基因型為EEXFXF或EEXFXf的個體不能正常發(fā)育存活。設(shè)計實驗：用純合的金黃色高莖雌株（EEXfXf）和純合的綠色高莖雄株（EEXFY）進行雜交，將子代在特定的實驗環(huán)境中培養(yǎng)。若子代中有雌植株（EEXFXf），則基因型為EEXFXF的個體不能正常發(fā)育存活；若子代中無雌植株，則基因型為EEXFXf的個體不能正常發(fā)育存活?！军c睛】本題主要考查自由組合定律，答題關(guān)鍵在于分析表格數(shù)據(jù)，判斷遺傳方式。難點在于設(shè)計實驗確定致死個體的基因型。10、mRNABamHⅠ和PstⅠ質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接氨芐青霉素植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物細胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因沒有表達（或丟失等）【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）逆轉(zhuǎn)錄過程需要從供體細胞內(nèi)提取出的mRNA為模板，以脫氧核苷酸為原料合成cDNA。（2）構(gòu)建重組DNA分子時選用的限制酶要不破壞目的基因，所以不能用EcoRI，同時盡量防止質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接，所以最好選用兩種限制酶，即BamHⅠ和PstⅠ。（3）根據(jù)限制酶的切割位點，由于使用BamHⅠ和PstⅠ會破壞抗四環(huán)素標記基因，但抗氨芐青霉素的標記基因是完整的所以只能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的單菌落。（4）得到轉(zhuǎn)基因細胞后，要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植株，需要用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)才能實現(xiàn)，其依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。（5）蛋白質(zhì)工程的步驟是：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析→蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計→酶A基因的定向改造→將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞→獲得所需蛋白質(zhì)。（6）轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升，但抗灰霉菌的能力丟失，原因可能是抗灰霉菌基因未表達或丟失?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、啟動子、終止子、內(nèi)含子cDNA文庫是通過某種生物發(fā)育的某個時期mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的，在這個時期并不是每個基因都進行轉(zhuǎn)錄，而基因組文庫包含該生物所有的基因轉(zhuǎn)化DNA目的基因（或胰島素基因）a受體菌中基因表達獲得的蛋白質(zhì)未加工（或大腸桿菌中沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細胞器，無法對核糖體合成的肽鏈進行有效的折疊、加工）cDNA中不含有內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄出的RNA不需要經(jīng)過加工，可直接作為合成蛋白質(zhì)的模板【解析】

1.基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)?/p>