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DB41河南省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布I 1 1 1 2 3 3 4本標準主要起草人:范國強、翟曉巧、趙振利、鄧敏捷、董1泡桐叢枝病植原體保存體系建立規(guī)范NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術規(guī)程2人工合成的對植物的生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學物質(zhì),與植物激素具有相似生理和生物學效將培養(yǎng)材料在一定的誘導培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),培養(yǎng)材料分把不定芽轉(zhuǎn)移到生根誘導培養(yǎng)基中誘導生根,形),第二對引物的功能是特異性的擴增位于首輪PCR產(chǎn)物內(nèi)的一段DNA片斷,巢式PCR的擴增具有4泡桐叢枝病植原體培養(yǎng)4.1泡桐叢枝病無菌苗培養(yǎng)取患有叢枝病泡桐的當年生幼嫩叢枝,用質(zhì)量分數(shù)為0.1%的Hg培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照強度130μmoL·m-2·s-1,光照時間16h·d-1。40d可獲得2~3對葉片的4.3根誘導-1。按照4.1規(guī)定的培養(yǎng)條件下生根培養(yǎng)。培養(yǎng)2035泡桐叢枝病苗植原體鑒定泡桐基因組DNA的提取采用離心柱型植物基因組DNA提取試劑盒,提取步驟參照植物基因提取說明書,并將提取泡桐基因組DNA溶于100μLT泡桐叢枝病植原體的鑒定采用巢式PCR檢測。PCR擴),),-1);擴增程序為94℃預變性3min;再94℃變性1min,52℃退火1.5min,72℃延伸2min,共30),),),),μmol·L-1其他成分同第一輪,反應程序如下:94℃預變性3min;再94℃變性1min;52℃擴增25次循環(huán);最后72℃再延伸10min;4℃保存。待第二輪PCR程序結(jié)束后,取第二輪擴增產(chǎn)當初代培養(yǎng)苗的芽生長至3cm時,從莖基部剪
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