農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范 第4部分:小麥抗條銹病_第1頁
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文檔簡介

ICS65.020.01

B15

DB52

貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB52/T1501.4—2020

農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范

第4部分小麥抗條銹病

TechnicalSpecificationforEvaluationofCropResistancetoDiseases

Part4:WheatResistancetoYellowRust

2020-05-22發(fā)布2020-09-01實施

貴州省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB52/T1501.4—2020

農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范第4部分小麥抗條銹病

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥抗條銹病(PucciniastriiformisWest.f.sptritici.Eriks.etHenn.)的鑒定方法

和抗病性評價。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于貴州區(qū)域種植的普通小麥品種(系)和種質(zhì)資源對條銹病的抗病性鑒定和評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

NY/T1443.1小麥抗病蟲性評價技術(shù)規(guī)范第一部分:小麥抗條銹病評價技術(shù)規(guī)范

NY/T2953小麥區(qū)域試驗品種抗條銹病鑒定技術(shù)規(guī)程

NY/T3302小麥主要病蟲害全生育期綜合防治技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

小麥條銹病wheatstriperust

小麥條銹病是一種由條形柄銹菌小麥?;驼婢鸬牟『Γ姼戒汚中的A.1、A.2、A.3。

3.2

侵染型infectiontype

根據(jù)小麥過敏性壞死反應(yīng)有無和其強度劃分的病斑類型,用以表示小麥品種抗條銹病程度,按0、

0;、1、2、3、4六個類型記載。

3.3

嚴(yán)重度severity

反映病害嚴(yán)重程度,由輕到重劃分幾個級別表示。

3.4

慢銹性slowrust

在適于病害發(fā)生的環(huán)境條件下,小麥和病原物相互作用表現(xiàn)侵染型為3~4型的感病反應(yīng),但田間病

害發(fā)展速度相對較慢,終期病情指數(shù)低于25。

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3.5

苗期抗病性seedlingresistance

又稱全生育期抗病性,是一種單基因或主基因控制的抗病性,小麥品種受到條銹菌侵染后表現(xiàn)過敏

性壞死反應(yīng),在小麥苗期對條銹病表現(xiàn)免疫、近免疫、高抗和中抗的抗病性(侵染型IT≤2)。

3.6

成株期抗病性adultplantresistance

又稱非小種?;涂共⌒裕晌⑿Щ蚩刂?,小麥品種苗期表現(xiàn)感病(侵染型IT≥3),而在成株

期對條銹病表現(xiàn)免疫、近免疫、高抗和中抗的抗病性(侵染型IT≤2)。

4鑒定方法

4.1病圃設(shè)置

4.1.1病圃選址

苗期接種鑒定設(shè)置在人工控制適宜發(fā)病室內(nèi)條件下,田間成株期接種鑒定設(shè)置在小麥條銹病適發(fā)區(qū)

的病圃,自然誘發(fā)鑒定設(shè)置在小麥條銹病常發(fā)區(qū)病圃,病圃選擇在具備良好自然發(fā)病環(huán)境和可控灌溉條

件、地勢平坦、土壤肥沃的地塊。

4.1.2病圃配置

苗期接種室內(nèi)采用單盆(7cm×7cm)單份材料播種,田間病圃采用條播,等行距播種,每行均勻

播種可發(fā)芽的種子50~100粒,鑒定所用感病對照為當(dāng)?shù)馗胁∑贩N,誘發(fā)行品種采用高感品種,田間配

置見附錄B,3次重復(fù)。

4.2菌株擴繁

在小麥2葉期,利用拇指和食指輕壓小麥1葉摩擦3次,進(jìn)行葉表脫蠟處理,取出已鑒定、保存、活

化的菌株,見附錄C中的C.1、C.2、C.3。將菌株孢子粉置于載玻片上,滴1滴去離子水混勻,利用接種

針蘸取孢子接種小麥,接種后保濕和潛育發(fā)病條件同附錄C中的C.1,培養(yǎng)約15d~17d后收集混合菌株

夏孢子粉備用。

4.3人工接種鑒定

4.3.1接種時期

苗期接種在小麥2葉展平期;田間成株期接種在小麥拔節(jié)初期,選擇無雨、無高溫天氣的傍晚進(jìn)行。

4.3.2接種方法

4.3.2.1室內(nèi)苗期接種:使用0.05%的Tween20水溶液噴霧處理小麥葉片,待霧滴揮發(fā)后,將條銹菌

夏孢子與滑石粉按1:30的比例加入50mL試管中,用四層紗布封口,混勻后,將孢子粉均勻抖到小麥

葉片上進(jìn)行接種,參照附錄C中的C.1進(jìn)行保濕和潛育發(fā)病。

4.3.2.2田間成株期接種:擴繁小麥條銹菌菌株,在小麥拔節(jié)期初期采用“抖粉法”將菌株孢子粉接

種到誘發(fā)行植株葉片上,每隔50cm接種10株苗,用去離子水對麥苗進(jìn)行噴霧,后迅速覆蓋黑色塑料

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薄膜壓實,次日清晨揭去薄膜(若次日溫度低可覆蓋滿24h)。再次接種時,間隔3d~5d,并選擇誘

發(fā)行未接種植株進(jìn)行接種,所用條銹菌菌株與苗期接種一致。

4.3.3接種前后田間管理

雨后或灌溉后接種,接種后若遇干旱,應(yīng)及時進(jìn)行田間灌溉,不施用任何殺菌劑,蟲害防治參照

NY/T3302。

4.4田間自然誘發(fā)鑒定

自然誘發(fā)病圃,不接種條銹菌,不施用任何殺菌劑,蟲害防治參照NY/T3302。

4.5病情調(diào)查

4.5.1調(diào)查時間

室內(nèi)苗期接種鑒定于接種后20d調(diào)查病情。田間成株期接種鑒定于接種后25d~30d調(diào)查病情,田

間自然誘發(fā)鑒定于感病對照發(fā)病充分(嚴(yán)重度60%以上)時進(jìn)行調(diào)查病情。

4.5.2調(diào)查方法

苗期接種鑒定,調(diào)查病情時,逐葉調(diào)查記載侵染型;田間鑒定,調(diào)查病情時,隨機抽取小麥30株,

調(diào)查每株的旗葉和倒二葉,逐葉進(jìn)行調(diào)查記載侵染型、嚴(yán)重度,病斑侵染型和嚴(yán)重度的分級,見附錄D

中的表D.1和D.2,調(diào)查2次,間隔7d~10d。

4.5.3結(jié)果計算

通過嚴(yán)重度的分級,按式(1)計算病情指數(shù)(DI),其中普遍率(D)按式(2)計算,平均嚴(yán)重

度(S)按式(3)計算。

SDDI100....................................(1)

式中:

DI——病情指數(shù);

D——普遍率;

S——平均嚴(yán)重度。

Nd

D%100.....................................(2)

N

式中:

D——普遍率;

Nd——病葉數(shù);

N——調(diào)查總?cè)~片數(shù)。

N)ii(

S%100..................................(3)

N

式中:

N——調(diào)查總?cè)~片數(shù);

S——平均嚴(yán)重度

Ni——病情為i級的葉片數(shù);

i——嚴(yán)重度級別代表值(如小麥條銹病各級的百分?jǐn)?shù))。

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5抗病性評價

5.1鑒定有效性判別

當(dāng)病圃中的中感或高感對照品種發(fā)病嚴(yán)重度達(dá)到60%以上時,該批次抗條銹病鑒定視為有效。

5.2抗病性評價

5.2.1人工接種抗病性評價

依據(jù)鑒定材料苗期和田間成株期接種抗病性鑒定、田間自然誘發(fā)抗病性鑒定的發(fā)病程度(侵染型和

病情指數(shù)),確定其對條銹病的抗病性水平,每一鑒定材料調(diào)查記載侵染型,當(dāng)發(fā)現(xiàn)同一葉片上出現(xiàn)不

同侵染型時,主要侵染型記錄在前。根據(jù)侵染型級別和3次重復(fù)的平均病情指數(shù)進(jìn)行抗病性評價,見附

錄E中的表E.1,記載見附錄F中的表F.1。

5.2.2自然誘發(fā)抗病性評價

抗病性評價見附錄E中的表E.2,記載見附錄F中的表F.1。

5.2.3綜合抗病性評價

如果人工接種抗病性鑒定和自然誘發(fā)抗病性鑒定結(jié)果不一致,以抗病性弱的發(fā)病程度為準(zhǔn),調(diào)查2

次結(jié)果的以抗病性弱的發(fā)病程度為準(zhǔn)。若一個鑒定群體中出現(xiàn)明顯的抗、感類型差異,應(yīng)在調(diào)查結(jié)果注

明“抗病性分離”,其比例以“/”隔開??共⌒栽u價記載見表F.2。

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AA

附錄A

(資料性附錄)

小麥條銹病病原菌、癥狀和發(fā)生流行規(guī)律

A.1病原菌學(xué)名和形態(tài)描述

條形柄銹菌小麥?;蚉ucciniastriiformisWest.f.sp_tritici.Eriks.etHenn.屬于擔(dān)子菌(亞)

門(Basidiomycota)銹菌綱(Urediniomycetes)柄銹菌科(Puccinaceae)柄銹菌屬(Puccinia)。菌

絲絲狀,有分隔,生長在寄主細(xì)胞間,以吸器進(jìn)人小麥細(xì)胞間吸取營養(yǎng),并在病部前期產(chǎn)生鮮黃色夏孢

子堆,不利環(huán)境條件下產(chǎn)生黑色冬孢子堆。夏孢子單胞球形,鮮黃色,表面有細(xì)刺,大小

32μm~40μm×22μm~29μm,有發(fā)芽孔6個~12個。冬孢子為雙胞,黃色,棍棒形,頂部扁平或斜

切,分隔處略縊縮,大小36μm~68μm×12μm~20μm,柄短。該菌致病性有生理分化現(xiàn)象,條銹

菌生理小種很易發(fā)生變異。

A.2癥狀

小麥條銹病主要發(fā)生在葉片上,也危害葉鞘、莖稈和穗部。常引起小麥葉部產(chǎn)生鐵銹狀病斑癥狀,

小麥?zhǔn)芎螅~片表面長出褪綠斑,以后產(chǎn)生黃色粉皰,即病菌夏孢子堆,后期長出黑色皰斑,即病菌

冬孢子堆。夏孢子堆鮮黃色,窄長形至長橢圓形,成株期排列成條狀與葉脈平行,幼苗期不成行排列,

形成以侵染點為中心的多重輪狀。冬孢子堆狹長形,埋于表皮下,成條狀。

A.3發(fā)生流行規(guī)律

小麥條銹菌在小麥生長后期隨氣流吹到高寒地區(qū)的晚熟春麥和冬麥自生麥苗上越夏,秋季再隨氣流

傳播到平原冬麥區(qū),發(fā)病后以潛伏菌絲越冬或在冬季氣溫較高地區(qū)以不斷侵染繁殖方式越冬,早春再長

出孢子進(jìn)行再侵染。其生長適溫為9℃~16℃,其侵染應(yīng)植株上有水珠或水膜,3月份溫暖多雨、多霧

和結(jié)露天氣利于銹病發(fā)生流行。地勢低洼、土壤排水不良、氮肥施用過多、植株生長茂密等均利于病菌

侵入危害。

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BB

附錄B

(規(guī)范性附錄)

抗病性病圃田間配置

保護(hù)行100cm寬

誘發(fā)品種××××××××××××××××××××××××××××××××××××

材料123456789

*行********

行長*距********

100*33********

cm*cm********

*********

保護(hù)保護(hù)

誘發(fā)品種×××××××××××××××××××××

行行

材料101112131415161718

100100

*********

cm寬cm寬

*********

*********

*********

*********

誘發(fā)品種

×××××××××××××××××××××××××××××××××××××××××××××××

××××××××××××××××

保護(hù)行100cm寬

圖B.1病圃田間配置示意圖

注:注:每個小麥材料種1行,行長100cm,行距33cm,每隔20個材料播種1行感病對照(當(dāng)?shù)馗胁∑贩N),在材料

行兩端種植高感品種作為誘發(fā)行。病圃四周設(shè)置100cm寬的保護(hù)區(qū)。

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CC

附錄C

(規(guī)范性附錄)

小麥條銹菌生理小種鑒定、保存和活化

C.1生理小種鑒定

收集單孢子堆分離到的1個葉片上條銹菌夏孢子粉,經(jīng)過4℃干燥保存5d~10d后,加入2mL離心

管,后加入1.5mL電子氟化液制成孢子懸浮液,吸取5μL~10μL孢子懸浮液接種到每個鑒別寄主材料

單株已脫蠟處理的一葉葉面上,對接種葉片進(jìn)行噴去離子水霧滴至不成水滴留下為宜,立即置于密閉13

℃黑暗條件下36h保濕,后取出置放于晝溫16℃,夜溫13℃,光照強度10000Lux,光照時間16h條

件下潛育發(fā)病,進(jìn)行生理小種鑒定。鑒別寄主名稱和生理小種在鑒別寄主上抗/感病表現(xiàn)見NY/T2953。

C.2菌株保存

菌株的短期和長期保存,參照NY/T1443.1和NY/T2953。

C.3菌株活化

從-80℃冰箱中取出長期保存的已鑒定菌株(包含國內(nèi)當(dāng)前流行的菌株1~2個,本省的優(yōu)勢菌株2~

3個),在43℃溫水中水浴3.5min后立即取出,備用。

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DD

附錄D

(規(guī)范性附錄)

小麥條銹病侵染型、嚴(yán)重度分級

D.1侵染型分級

見表D.1。

表D.1小麥條銹病侵染型分級

侵染型癥狀特點

0葉片上不產(chǎn)生任何癥狀;

0;葉片上產(chǎn)生小型壞死斑,不產(chǎn)生夏孢子堆,有時全葉枯死;

1葉片上產(chǎn)生壞死斑,壞死斑上零星的散生很小的夏孢子堆;

2葉片顯著褪綠或壞死,夏孢子堆中等大小且較少,著生于強或弱的枯斑內(nèi);

3葉片連片褪綠,夏孢子堆大型且數(shù)量多;

4葉片不褪綠,或褪綠極輕,上面著生大量夏孢子堆。

D.2嚴(yán)重度分級

本技術(shù)規(guī)范中嚴(yán)重度特指小麥病葉上條銹菌夏孢子堆所占據(jù)的面積與葉片總面積的相對百分率,用

0、1%、5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%九個級別表示。

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EE

附錄E

(規(guī)范性附錄)

小麥條銹病抗病性評價

E.1人工接種抗病性評價

見表E.1。

表E.1小麥對條銹病的苗期抗病性和成株期抗病性評價

苗期成株期

綜合抗病性評價

侵染型(IT)抗病性評價侵染型(IT)病情指數(shù)抗病性評價

0免疫0—免疫免疫(I)

0;近免疫0~0;—免疫~近免疫近免疫(NIM)

1高抗0~1—免疫~高抗高抗(HR)

2中抗0~2—免疫~中抗中抗(MR)

3~4中感~高感0—免疫成株期免疫(AIM)

3~4中感~高感0;—近免疫成株期近免疫(ANIM)

3~4中感~高感1—高抗成株期高抗(AHR)

3~4中感~高感2—中抗成株期中抗(AMR)

3~4中感~高感3~4≤25慢銹性慢銹性(SR)

3~4中感~高感3>25中感中感(MS)

3~4中感~高感4>25高感高感(HS)

E.2小麥對條銹病的自然誘發(fā)抗病性評價

見表E.2。

表E.2小麥對條銹病的自然誘發(fā)抗病性評價

侵染型(IT)病情指數(shù)抗性評價

0—免疫(IM)

0;—近免疫(NIM)

1—高抗(HR)

2—中抗(MR)

3~4≤25慢銹(SR)

3>25中感(MS)

4>25高感(HS)

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FF

附錄F

(規(guī)范性附錄)

小麥條銹病抗病性鑒定調(diào)查記載、評價表

F.1小麥對條銹病的抗病性鑒定調(diào)查記載表

見表F.1。

表F.1小麥對條銹病的抗病性鑒定田間調(diào)查記載表

播種日期:鑒定地點:生理小種類型:

經(jīng)緯度:海拔:接種日期:

調(diào)查人:記錄人:調(diào)查日期:

鑒定總?cè)~嚴(yán)重度(%)

重復(fù)侵染型

編號片數(shù)151020406080100

I

1II

III

I

2II

III

I

3II

III

I

4II

III

I

5II

III

I

6II

III

……

10

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F.2小麥對條銹病的抗病性評價統(tǒng)計表

見表F.2。

表F.2小麥對條銹病的抗病性評價統(tǒng)計表

人工接種自然誘發(fā)

重復(fù)I重復(fù)II重復(fù)III

鑒鑒定鑒定綜合

綜合

序定病病病病病病抗

侵侵侵侵侵侵侵平均侵平均抗性

號品情情情情情情性評

染染染染染染染病情染病情級別

種指指指指指指價

型型型型型型型指數(shù)型指數(shù)

數(shù)數(shù)數(shù)

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