2024-2025學(xué)年高二生物下學(xué)期期中模擬卷（江蘇專用）（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試題PAGE2025學(xué)年高二生物下學(xué)期期中模擬卷（江蘇專用）（考試時(shí)間：75分鐘試卷滿分：100分）注意事項(xiàng)：1．本試卷分第Ⅰ卷（選擇題）和第Ⅱ卷（非選擇題）兩部分。答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2．回答第Ⅰ卷時(shí)，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑。如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標(biāo)號(hào)。寫在本試卷上無(wú)效。3．回答第Ⅱ卷時(shí)，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無(wú)效。4．測(cè)試范圍：選必三全部5．難度系數(shù)：0.76．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)符合題目要求。1．研究者用酸筍開發(fā)具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發(fā)酵液接種到含有CaCO3的固體培養(yǎng)基上，篩選出乳酸菌，然后將乳酸菌接種到含有膽固醇的培養(yǎng)液中，篩選出能夠降解膽固醇的乳酸菌。下列敘述正確的是（）A．酸筍發(fā)酵過(guò)程中需要定期排氣以確保發(fā)酵罐內(nèi)壓強(qiáng)穩(wěn)定B．與酸筍風(fēng)味形成相關(guān)的乳酸菌為厭氧型，所以不會(huì)分布在空氣中C．培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標(biāo)菌落D．膽固醇既可為乳酸菌的生長(zhǎng)提供氮源，也可參與動(dòng)物細(xì)胞膜的組成【答案】C〖祥解〗酸筍制作的原理是：乳酸菌在無(wú)氧條件下，將糖分解為乳酸?！驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌，發(fā)酵過(guò)程中不產(chǎn)生氣體，不需要定期排氣，A錯(cuò)誤；B、在自然界中，乳酸菌分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人和動(dòng)物的腸道內(nèi)都分布有乳酸菌，B錯(cuò)誤；C、乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸能與CaCO3發(fā)生反應(yīng)，使CaCO3分解成可溶性物質(zhì)乳酸鈣和CO2，導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)溶鈣圈，故溶鈣圈直徑與菌落直徑的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標(biāo)菌落，C正確；D、膽固醇屬于脂質(zhì)，含有C、H、O元素，主要為微生物的生長(zhǎng)提供碳源，膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的重要成分，D錯(cuò)誤。故選C。2．亞硝酸細(xì)菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養(yǎng)細(xì)菌，因其常常和其他細(xì)菌伴生在一起難以純化。下圖為從某污水廠污泥中分離、篩選和鑒定亞硝酸細(xì)菌的示意圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①接種9個(gè)平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應(yīng)的單菌落B．過(guò)程②挑取單個(gè)菌落接種到斜面上保存，并在試管底部做好標(biāo)記C．過(guò)程③進(jìn)行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面D．與富集培養(yǎng)基相比，篩選亞硝酸細(xì)菌的培養(yǎng)基中應(yīng)不含有機(jī)碳源【答案】B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)過(guò)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，這種接種方法稱為平板劃線法。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、過(guò)程①接種9個(gè)平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應(yīng)的單菌落，同一濃度下接種了3個(gè)平板的目的是排除偶然因素的影響，實(shí)現(xiàn)平行重復(fù)，A正確；B、過(guò)程②挑取單個(gè)菌落接種到斜面上保存，并在試管壁上做好標(biāo)記，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程③進(jìn)行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，進(jìn)而可以獲得單個(gè)菌落，C正確；D、亞硝酸細(xì)菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養(yǎng)細(xì)菌，因此，與富集培養(yǎng)基相比，篩選亞硝酸細(xì)菌的培養(yǎng)基中應(yīng)不含有機(jī)碳源，D正確。故選B。3．某釀酒廠以無(wú)核黃皮果為輔料研制出黃皮甜米酒，該酒具有消食、潤(rùn)肺和清熱解毒等功效。制作黃皮甜米酒的工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A．對(duì)糯米進(jìn)行蒸煮可利用高溫殺死雜菌，并有利于細(xì)胞破裂釋放糖類用于發(fā)酵B．甜酒曲中的根霉能產(chǎn)生糖化酶，將淀粉依次水解為蔗糖、葡萄糖C．酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，代謝物的生成在后發(fā)酵階段完成D．黃皮甜米酒口感好、酒精度低，適宜長(zhǎng)期大量飲用【答案】A〖祥解〗發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環(huán)境下儲(chǔ)存一段時(shí)間進(jìn)行后發(fā)酵?！驹斘觥緼、對(duì)糯米進(jìn)行蒸煮的主要目的是使淀粉顆粒吸水膨脹并糊化，便于淀粉酶的作用，同時(shí)也可利用高溫能殺死原料中的雜菌，并有利于細(xì)胞破裂釋放糖類用于發(fā)酵，A正確；B、甜酒曲中的根霉能產(chǎn)生糖化酶，將淀粉依次水解為麥芽糖、葡萄糖，B錯(cuò)誤；C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成，C錯(cuò)誤；D、黃皮甜米酒雖然口感好、酒精度低，但不適宜長(zhǎng)期大量飲用，D錯(cuò)誤。故選A。4．南通某學(xué)校生物研究小組以蝴蝶蘭為材料開展了植物組織培養(yǎng)試驗(yàn)，過(guò)程如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．取帶芽花梗作外植體，是因?yàn)檠靠僧a(chǎn)生生長(zhǎng)素而更易成活B．花梗插入培養(yǎng)基前要用無(wú)水酒精和次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理C．過(guò)程c、d和e使用的培養(yǎng)基中所含的物質(zhì)比例存在差異D．過(guò)程f“煉苗”目的在于提高組培苗對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)性【答案】B〖祥解〗組織培養(yǎng)的過(guò)程：（1）建立無(wú)菌體系，即外植體及培養(yǎng)基的消毒、接種，獲得愈傷組織或器官。（2）進(jìn)行增殖，不斷分化產(chǎn)生新的植株，或直接產(chǎn)生不定芽及胚狀體，也可以根據(jù)需要反復(fù)進(jìn)行繼代培養(yǎng)，以達(dá)到大量繁殖的目的。（3）將植株轉(zhuǎn)移進(jìn)行生根培養(yǎng)，可以轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，也可直接進(jìn)行扦插生根。（4）試管苗過(guò)渡，即試管苗出瓶后進(jìn)行一定時(shí)間對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)過(guò)程。激素比值的變化，對(duì)生根還是生芽是不同的。當(dāng)細(xì)胞分裂素大于生長(zhǎng)素時(shí)，促進(jìn)芽的分化；當(dāng)細(xì)胞分裂素小于生長(zhǎng)素時(shí)，促進(jìn)根的分化。【詳析】A、芽屬于幼嫩部位，能產(chǎn)生生長(zhǎng)素，因此取帶芽花梗作外植體更易成活，A正確；B、花梗插入培養(yǎng)基前要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和體積分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程c、d和e屬于脫分化、再分化和幼苗的生長(zhǎng)發(fā)育，使用的培養(yǎng)基中所含的物質(zhì)如激素比例存在差異，C正確；D、過(guò)程f“煉苗”是由于試管苗長(zhǎng)得弱小，光合能力弱，適應(yīng)性差，因此需要移栽到野外使其逐漸適應(yīng)室外環(huán)境，提高組培苗對(duì)外界環(huán)境條件的適應(yīng)性，D正確。故選B。5．為培育“高產(chǎn)耐鹽堿”的水稻植株，某研究小組利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程圖。已知耐鹽、高產(chǎn)性狀分別受細(xì)胞質(zhì)基因和細(xì)胞核基因控制，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．①過(guò)程可通過(guò)觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與顏色來(lái)判斷其融合情況B．②過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性，它是植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)C．失活處理后，原生質(zhì)體A2的細(xì)胞質(zhì)和原生質(zhì)體B2的細(xì)胞核失活D．去壁處理需用到纖維素酶和果膠酶混合酶液，酶液滲透壓可略高于細(xì)胞液【答案】C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：（1）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。（2）過(guò)程：①誘導(dǎo)融合的方法：物理法；化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑；②細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成；③植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。（3）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙?！驹斘觥緼、由于葉綠體有顏色且有特定結(jié)構(gòu)，①過(guò)程的細(xì)胞融合中可通過(guò)觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與顏色來(lái)判斷其融合情況，A正確；B、②過(guò)程是將雜種細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)得到再生植株的過(guò)程，植物的組織培養(yǎng)體現(xiàn)了植物細(xì)胞全能性，它是植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)之一，B正確；C、由于耐鹽、高產(chǎn)性狀分別受細(xì)胞質(zhì)基因和細(xì)胞核基因控制，在促使原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行失活處理，分別使原生質(zhì)體A2的細(xì)胞核失活和原生質(zhì)體B2的細(xì)胞質(zhì)失活，C錯(cuò)誤；D、用纖維素酶和果膠酶混合液酶解細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體時(shí)應(yīng)置于較高滲透壓溶液中（或等滲溶液）進(jìn)行，可防止原生質(zhì)體吸水脹破，D正確。故選C。6．下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．利用植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理可獲得有用的突變體B．經(jīng)脫分化和再分化過(guò)程形成的幼芽細(xì)胞喪失分裂分化能力C．利用莖尖、花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)可分別獲得脫毒苗和單倍體植株D．培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過(guò)程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成植株。植物組織培養(yǎng)技術(shù)有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、愈傷組織細(xì)胞處于分生狀態(tài)，易受外界環(huán)境因素影響，因此利用植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理可獲得有用的突變體，A正確；B、經(jīng)脫分化和再分化過(guò)程形成的幼芽細(xì)胞具有細(xì)胞全能性，在一定條件下可培育成植株個(gè)體，B錯(cuò)誤；C、莖尖部位的病毒較少，花粉是植物的雄配子，染色體數(shù)目減半，故利用莖尖、花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)可分別獲得脫毒苗和單倍體植株，C正確；D、決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，如培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向，D正確。故選B。7．我國(guó)科學(xué)家使用小分子化合物處理小鼠體細(xì)胞，成功獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），降低了通過(guò)導(dǎo)入原癌基因c-Myc等基因制備iPS細(xì)胞的潛在成瘤風(fēng)險(xiǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．iPS細(xì)胞的潛在成瘤風(fēng)險(xiǎn)來(lái)自于c-Myc基因抑制了細(xì)胞的分裂分化B．單基因遺傳病患者使用iPS細(xì)胞治療后，體內(nèi)仍可能攜帶致病基因C．人工制備的iPS細(xì)胞同時(shí)具備多方向分化的潛能和自我更新的能力D．使用非親緣iPS細(xì)胞不能解決干細(xì)胞移植中HLA造成的免疫排斥【答案】A〖祥解〗一、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）能夠通過(guò)分裂進(jìn)行自我更新，也能通過(guò)細(xì)胞分化形成多種不同類型的細(xì)胞。二、原癌基因表達(dá)的蛋白質(zhì)是細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和增殖所必需的，這類基因一旦突變或過(guò)量表達(dá)而導(dǎo)致相應(yīng)蛋白質(zhì)活性過(guò)強(qiáng)，就可能引起細(xì)胞癌變。相反，抑癌基因表達(dá)的蛋白質(zhì)能抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，或者促進(jìn)細(xì)胞凋亡，這類基因一旦突變而導(dǎo)致相應(yīng)蛋白質(zhì)活性減弱或失去活性，也可能引起細(xì)胞癌變?！驹斘觥緼、原癌基因表達(dá)的蛋白質(zhì)是細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和增殖所必需的，因此原癌基因c-Myc等基因會(huì)促進(jìn)細(xì)胞的分裂，A錯(cuò)誤；B、單基因遺傳病患者使用iPS細(xì)胞治療后，只是利用了iPS細(xì)胞分化出正常細(xì)胞來(lái)替代病變細(xì)胞，但體內(nèi)依舊攜帶致病基因，B正確；C、iPS細(xì)胞為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，能夠通過(guò)分裂進(jìn)行自我更新，也能通過(guò)細(xì)胞分化形成多種不同類型的細(xì)胞，因此同時(shí)具備多向分化潛能和自我更新能力，C正確；D、非親緣iPS細(xì)胞HLA不同，使用非親緣iPS細(xì)胞不能解決干細(xì)胞移植中HLA造成的免疫排斥，D正確。故選A。8．科研人員研發(fā)出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯(lián)物，以減少肺癌藥物對(duì)正常細(xì)胞的傷害，基本流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．注射的特定抗原是正常肺細(xì)胞和肺癌細(xì)胞共有的大分子B．與植物原生質(zhì)體融合相比，步驟①可用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合C．步驟③中體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)應(yīng)提供95％O2和5％CO2的氣體環(huán)境D．抗體—肺癌藥物偶聯(lián)物中的a能特異性結(jié)合并殺死腫瘤細(xì)胞【答案】B〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、題意顯示，科研人員研發(fā)出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯(lián)物，以減少肺癌藥物對(duì)正常細(xì)胞的傷害，據(jù)此可推測(cè)，該單抗制備過(guò)程中需要注射的特定抗原是肺癌細(xì)胞特有的大分子，A錯(cuò)誤；B、步驟①為B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，可用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融，是動(dòng)物細(xì)胞特有的方法，B正確；C.步驟③中體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)應(yīng)提供95％空氣和5％CO2的氣體環(huán)境，C錯(cuò)誤；D、抗體—肺癌藥物偶聯(lián)物中b代表肺癌藥物，a代表抗體，所以能殺傷腫瘤細(xì)胞的為b，D錯(cuò)誤。故選B。9．下列關(guān)于生物技術(shù)操作或應(yīng)用的敘述錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常擰松培養(yǎng)瓶瓶蓋，以避免雜菌污染并確保細(xì)胞所需的氣體供應(yīng)B．核移植時(shí)常通過(guò)顯微操作法去除卵母細(xì)胞的核，此操作需刺穿透明帶C．克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中均需獲取卵母細(xì)胞和進(jìn)行胚胎移植D．胚胎分割技術(shù)中的胚胎可以來(lái)源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率【答案】D〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)?！驹斘觥緼、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，這與培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體可以進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，保證細(xì)胞對(duì)氣體的需求，同時(shí)避免雜菌污染，A正確；B、核移植時(shí)常通過(guò)顯微操作法去除卵母細(xì)胞的核，顯微操作去核法是在刺破透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況下，去除卵母細(xì)胞核，B正確；C、克隆動(dòng)物和試管動(dòng)物培育過(guò)程中均需獲取卵母細(xì)胞和進(jìn)行胚胎移植，C正確；D、胚胎分割技術(shù)中的胚胎可以來(lái)源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D錯(cuò)誤。故選D。10．下圖為某二倍體哺乳動(dòng)物卵子及早期胚胎的形成過(guò)程示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．哺乳動(dòng)物卵細(xì)胞的發(fā)生是在雌性動(dòng)物的卵巢中開始的B．受精作用促進(jìn)次級(jí)卵母細(xì)胞完成減數(shù)第二次分裂C．當(dāng)卵細(xì)胞質(zhì)膜和透明帶之間出現(xiàn)兩個(gè)極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成D．精子接觸透明帶時(shí)，透明帶會(huì)發(fā)生生理反應(yīng)從而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗題圖分析：圖中細(xì)胞Ⅰ為卵原細(xì)胞，細(xì)胞Ⅱ?yàn)榻?jīng)過(guò)復(fù)制的初級(jí)卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅲ可表示次級(jí)卵母細(xì)胞，細(xì)胞Ⅳ是經(jīng)過(guò)受精作用形成的受精卵，受精卵進(jìn)行的是有絲分裂?！驹斘觥緼、哺乳動(dòng)物卵細(xì)胞的發(fā)生是在雌性動(dòng)物的卵巢中開始的，A正確；B、受精作用促進(jìn)次級(jí)卵母細(xì)胞排出第二極體完成減數(shù)第二次分裂，進(jìn)而形成了雌原核，為受精做準(zhǔn)備，B正確；C、受精完成的標(biāo)志是雌雄原核融合，當(dāng)卵細(xì)胞質(zhì)膜和透明帶之間出現(xiàn)兩個(gè)極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成，C正確；D、在精子接觸卵細(xì)胞膜時(shí)，會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)，能防止多個(gè)精子入卵，D錯(cuò)誤。故選D。11．胚胎工程技術(shù)的應(yīng)用為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶?；铙w采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術(shù)，該技術(shù)流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復(fù)序列，依據(jù)該重復(fù)序列設(shè)計(jì)引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．體外受精后，在透明帶和卵細(xì)胞膜間觀察到兩個(gè)極體說(shuō)明受精成功B．活體采卵前誘導(dǎo)母牛超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C．取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行SRY-PCR，應(yīng)選擇結(jié)果為陽(yáng)性的胚胎進(jìn)行移植D．受體母牛不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以移植前不需要進(jìn)行免疫檢查【答案】C〖祥解〗體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程?！驹斘觥緼、當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核時(shí)，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成了受精，A正確；B、活體采卵前誘導(dǎo)母牛超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素只能作用于性腺，所以只能作用于特定細(xì)胞，B正確；C、取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行SRY-PCR，結(jié)果為陽(yáng)性的胚胎說(shuō)明其含有Y染色體，為雄性，為多獲得可以生產(chǎn)牛奶的奶牛應(yīng)該選擇結(jié)果為陰性的胚胎進(jìn)行移植，C錯(cuò)誤；D、受體不會(huì)對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥，因此不需要進(jìn)行免疫檢查，D正確。故選C。12．為了降低免疫排斥反應(yīng)，研究者借助CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)移植的豬心臟進(jìn)行了基因編輯。CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA（sgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，sgRNA可引導(dǎo)Cas9蛋白到特定基因位點(diǎn)進(jìn)行切割、其機(jī)制如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵B．sgRNA通過(guò)與目標(biāo)DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)引導(dǎo)Cas9蛋白到位C．sgRNA會(huì)因錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)“脫靶”現(xiàn)象，一般sgRNA序列越短，脫靶率越低D．經(jīng)過(guò)改造的轉(zhuǎn)基因豬，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供體【答案】C〖祥解〗基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。②“分子縫合針”——DNA連接酶，E·coliDNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶能縫合黏性末端和平末端。③“分子運(yùn)輸車”——載體。移植的器官會(huì)被人的免疫系統(tǒng)視作抗原加以攻擊，使用免疫抑制劑可以減輕免疫排斥反應(yīng)?！驹斘觥緼、由于DNA和RNA之間可進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，因而sgRNA可以特異性識(shí)別目標(biāo)DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵進(jìn)而可以將目標(biāo)基因剪切下來(lái)，A正確；B、由于DNA和RNA之間可進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，因而sgRNA可以特異性識(shí)別目標(biāo)DNA分子，進(jìn)而引導(dǎo)Cas9蛋白到特定基因位點(diǎn)進(jìn)行切割，B正確；C、sgRNA序列越短，DNA分子上與其互補(bǔ)的特定序列會(huì)越多，錯(cuò)誤結(jié)合概率越高，C錯(cuò)誤；D、經(jīng)過(guò)改造的轉(zhuǎn)基因豬，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供體，D正確。故選C。13．如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞B．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的T－DNA整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上C．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用TaqDNA聚合酶從引物a、b的3＇端進(jìn)行子鏈合成D．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列【答案】A〖祥解〗將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上?；虮磉_(dá)載體常包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)?！驹斘觥緼、導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞，而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，B正確；C、引物的延伸方向?yàn)?'端，擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進(jìn)行子鏈合成，C正確；D、啟動(dòng)子是位于DNA上RNA聚合酶的結(jié)合部位，mRNA是由基因啟動(dòng)子后面的序列編碼而來(lái)的，若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列，D正確。故選A。14．γ-氨基丁酸在醫(yī)藥等領(lǐng)域有重要的應(yīng)用價(jià)值。利用L-谷氨酸脫羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脫羧是高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的重要途徑之一。研究人員采用如圖方法將釀酒酵母S的L-谷氨酸脫羧酶基因（gadB）導(dǎo)入生產(chǎn)菌株E．coliA，構(gòu)建了以L-谷氨酸鈉為底物高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的菌株E．coliB。下列敘述正確的是（）A．上圖表明，可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadBB．E．coliB發(fā)酵生產(chǎn)γ-氨基丁酸時(shí)，L-谷氨酸鈉的作用是供能C．E．coliA和E．coliB都能高效降解γ-氨基丁酸D．可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ構(gòu)建重組質(zhì)粒【答案】A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2+轉(zhuǎn)化法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：包括分子水平上的檢測(cè)和個(gè)體水平上的鑒定。【詳析】A、上圖表明，可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadB，A正確。B、題意顯示，用L-谷氨酸脫羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脫羧是高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的重要途徑之一，E．coliB中能表達(dá)L-谷氨酸脫羧酶（GadB），因此可用E．coliB發(fā)酵生產(chǎn)γ-氨基丁酸，該過(guò)程中L-谷氨酸鈉的作用不是供能，B錯(cuò)誤；C、E．coliA中沒(méi)有L-谷氨酸脫羧酶（GadB），因而不能降解L-谷氨酸，而E．coliB中含有該酶的基因，因而能高效降解L-谷氨酸，高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸，C錯(cuò)誤；D、圖中質(zhì)粒下方括號(hào)內(nèi)備注含多克隆位點(diǎn)，表明質(zhì)粒上含有多種限制酶的識(shí)別序列，但無(wú)法判斷能否用其他酶代替，D錯(cuò)誤。故選A。15．生殖性克隆和治療性克隆既有相同點(diǎn)，又有本質(zhì)的區(qū)別。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．前者面臨倫理問(wèn)題，后者也會(huì)面臨倫理問(wèn)題B．生殖性克隆與試管嬰兒都屬于無(wú)性生殖C．通過(guò)生殖性克隆，可以解決人體移植器官短缺問(wèn)題D．中國(guó)政府的態(tài)度是禁止治療性克隆不反對(duì)生殖性克隆【答案】A〖祥解〗一、“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療；二、“生殖性克隆”就是以產(chǎn)生新個(gè)體為目的克隆。即用生殖技術(shù)制造完整的克隆人。目的是產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立生存的個(gè)體。與此相對(duì)的是研究性克隆或醫(yī)學(xué)性克隆，指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細(xì)胞。不產(chǎn)生可獨(dú)立生存的個(gè)體?！驹斘觥緼、生殖性克隆和治療性克隆都涉及倫理問(wèn)題，我國(guó)政府不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，也同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問(wèn)題，A正確；B、生殖性克隆和治療性克隆兩種技術(shù)都涉及體細(xì)胞核移植技術(shù)，屬于無(wú)性繁殖；試管嬰兒是體外精卵結(jié)合屬于有性生殖，所以它們存在本質(zhì)上的區(qū)別，B錯(cuò)誤；C、生殖性克隆由于涉及到新個(gè)體的產(chǎn)生，面臨諸多倫理問(wèn)題，不能用于解決人體移植器官短缺問(wèn)題，C錯(cuò)誤；D、中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆，支持治療性克隆，D錯(cuò)誤。故選A。二、選擇題：本題共4小題，每小題3分，共12分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)是符合題目要求的。全部選對(duì)得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得0分。16．活性黑5是一種低毒性、難褪色的含氮染料。為從染料廢水堆積池中的污泥獲得分解活性黑5能力強(qiáng)的假單胞桿菌，具體操作流程如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．培養(yǎng)基Ⅰ中，除了活性黑5以外，還含有水、瓊脂、葡萄糖、抗生素B．將細(xì)菌從培養(yǎng)基Ⅰ轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基Ⅱ的目的是進(jìn)一步分離純化細(xì)菌C．高濃度的活性黑5是為了誘導(dǎo)假單胞桿菌發(fā)生基因突變D．據(jù)圖可知，馴化后的假單胞桿菌增強(qiáng)了BVU5基因的復(fù)制【答案】ACD〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊?lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基Ⅰ是選擇培養(yǎng)基，除了以活性黑5為唯一氮源外，還需添加的成分是葡萄糖（碳源）、水、瓊脂（凝固劑），抗生素起殺菌作用，不在該培養(yǎng)基中使用，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)基Ⅰ接種的是污泥稀釋液，培養(yǎng)基Ⅱ接種的則是培養(yǎng)基Ⅰ中初步篩選出來(lái)的菌株，因而將細(xì)菌從培養(yǎng)基Ⅰ轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基Ⅱ的目的是進(jìn)一步分離純化細(xì)菌，B正確；C、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菑娜玖蠌U水堆積池中的污泥獲得分解活性黑5能力強(qiáng)的假單胞桿菌，使用高濃度的活性黑5的目的是不斷篩選出分解黑5能力強(qiáng)的假單胞桿菌，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)圖1分析可知，馴化后的假單胞桿菌BVU5基因表達(dá)水平升高，即增強(qiáng)了BVU5基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，D錯(cuò)誤。故選ACD。17．駱駝蓬分布在干旱和半干旱地區(qū)，能防風(fēng)固沙。駱駝蓬合成的多種生物堿具有抗腫瘤作用?？蒲腥藛T利用駱駝蓬下胚軸進(jìn)行育苗和生物堿提取，過(guò)程如下圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．下胚軸切段需依次用酒精和次氯酸鈉進(jìn)行消毒處理B．除培養(yǎng)基中植物激素比例不同外，進(jìn)行過(guò)程①③的其他條件相同C．由無(wú)毒下胚軸經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的駱駝蓬無(wú)毒幼苗可抵抗病毒的侵染D．在①②③過(guò)程中利用PEG處理培養(yǎng)物，可以獲得染色體數(shù)加倍的駱駝蓬【答案】BCD〖祥解〗植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖、作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、為避免雜菌污染，對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理的操作為：將流水充分沖洗后的外植體（幼嫩的莖段）用酒精消毒30s，然后立即用無(wú)菌水清洗2～3次，再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2～3次，A正確；B、進(jìn)行①和③過(guò)程的外界培養(yǎng)條件不同，①過(guò)程不需要光照，③過(guò)程需要光照，B錯(cuò)誤；C、由無(wú)毒下胚軸經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的駱駝蓬無(wú)毒幼苗只是不帶病毒，并不是能抵抗病毒的侵染，C錯(cuò)誤；D、因植物細(xì)胞外面的細(xì)胞壁阻礙了細(xì)胞間的雜交，所以在①②③過(guò)程中利用PEG處理培養(yǎng)物，不能獲得染色體數(shù)加倍的駱駝蓬，D錯(cuò)誤。故選BCD。18．雜交瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)隨機(jī)丟失來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體。研究者將經(jīng)已免疫的B淋巴細(xì)胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，使其“染色體核型穩(wěn)定”。下圖表示制備抗A抗原單克隆抗體制備的部分過(guò)程，不考慮基因互作和其他變異。下列敘述正確的是（）注：EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能夠在選擇培養(yǎng)基X中存活，但對(duì)烏本苷敏感，骨髓瘤細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基X中不能存活，對(duì)烏本苷不敏感。①～⑤代表相關(guān)過(guò)程，a～g代表相關(guān)細(xì)胞。A．①向小鼠多次注射A抗原后從脾臟中獲得大量a細(xì)胞B．③用不含烏本苷的選擇培養(yǎng)基X篩選融合的雜交瘤細(xì)胞C．⑤過(guò)程中通過(guò)離心獲得的培養(yǎng)液中可獲得抗A抗原的單克隆抗體D．若未用EBV感染a細(xì)胞，通過(guò)研究g中細(xì)胞可對(duì)抗體基因初步定位【答案】ACD〖祥解〗單克隆抗體的制備：注射特定抗原、從小鼠的脾臟中獲得產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞、將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合、用特定選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞、再利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)獲得足夠多數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞、將該細(xì)胞在體外培養(yǎng)或者注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖、從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量單克隆抗體?！驹斘觥緼、①向小鼠多次注射A抗原獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的a細(xì)胞（相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞），A正確；B、分析題意，EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能夠在選擇培養(yǎng)基X中存活，但對(duì)烏本苷敏感，骨髓瘤細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基X中不能存活，對(duì)烏本苷不敏感，故③用含烏本苷的選擇培養(yǎng)基X篩選出雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、抗體屬于分泌蛋白，細(xì)胞會(huì)分泌到細(xì)胞外，故⑤過(guò)程中通過(guò)離心獲得的培養(yǎng)液中可獲得抗A抗原的單克隆抗體，C正確；D、雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)時(shí)，來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往會(huì)隨機(jī)丟失，從而導(dǎo)致得到的雜交瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，故若未用EBV感染a細(xì)胞，通過(guò)研究g中的細(xì)胞可對(duì)抗體基因初步定位，D正確。故選ACD。19．將從蘇云金桿菌中獲取的Bt基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞內(nèi)培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的過(guò)程中，需借助多種分子工具經(jīng)歷多個(gè)操作步驟。實(shí)驗(yàn)人員使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割質(zhì)粒。下圖表示常用的限制酶識(shí)別序列和切割位點(diǎn)以及質(zhì)粒上的限制酶切割位點(diǎn)。下列說(shuō)法正確的是（）A．應(yīng)選用限制酶MunⅠ和XbaⅠ切割Bt基因才能使之與切割后的質(zhì)粒相連B．啟動(dòng)子是RNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)，但不是轉(zhuǎn)錄成的起始位點(diǎn)序列C．從Bt基因擴(kuò)增到基因表達(dá)載體構(gòu)建完成共需要5種酶發(fā)揮催化作用D．可通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)棉花的染色體DNA中是否插入了Bt基因【答案】BD〖祥解〗限制酶識(shí)別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。題中根據(jù)不同限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，可對(duì)限制酶進(jìn)行選擇。【詳析】A、據(jù)圖，EcoRⅠ切割后的黏性末端和MunⅠ切割后的黏性末端是互補(bǔ)的，NheⅠ切割的黏性末端和SpeⅠ切割的黏性末端是互補(bǔ)的，所以應(yīng)選擇用EcoRⅠ和NheⅠ去切割質(zhì)粒，用MunⅠ和SpeⅠ切割目的基因，XbaⅠ會(huì)切斷目的基因，不能選擇，A錯(cuò)誤；B、啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。但啟動(dòng)子是非編碼區(qū)的DNA序列，該序列不會(huì)作為RNA的轉(zhuǎn)錄模板，轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)是位于啟動(dòng)子后面的序列，B正確；C、切割質(zhì)粒需要的酶是EcoRⅠ、NheⅠ，Bt基因擴(kuò)增需要DNA聚合酶，切割Bt基因需要的酶是MunⅠ、SpeⅠ，將Bt基因和質(zhì)粒連接需要DNA連接酶，共需要6種酶，C正確；D、檢測(cè)棉花的染色體DNA中是否插入了Bt基因，可提取棉花的染色體DNA，用Bt基因的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如能擴(kuò)增出Bt基因說(shuō)明插入成功，反之則失敗，D正確。故選BD。三、非選擇題：本題共5小題，共58分。20．土壤中的磷大多數(shù)以難溶性磷酸鹽（如Ca3（PO4）2）的形式存在，不利于植物吸收。科研人員嘗試從土壤中篩選將難溶性磷轉(zhuǎn)化成可溶性磷的高效解磷菌（可形成溶磷圈），主要流程如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）步驟②需充分震蕩20min，主要目的是，步驟③將土壤懸浮液稀釋了倍。（2）步驟④中的培養(yǎng)基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4·7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、瓊脂粉等。按照培養(yǎng)基成分的不同，該培養(yǎng)基為，其中氮源是。步驟④使用的接種工具為。（3）步驟⑤使用接種環(huán)挑取步驟④培養(yǎng)基中的菌落（選填圖中的字母），采用的方法在培養(yǎng)基表面接種，目的是。（4）將得到的高效解磷菌接入已滅菌的含難溶磷的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每天取樣測(cè)定溶磷量和pH變化情況，結(jié)果如圖2所示。①結(jié)果表明，高效解磷菌分解難溶磷的能力呈現(xiàn)的趨勢(shì)。②根據(jù)培養(yǎng)液的pH變化情況，推測(cè)高效解磷菌的溶磷原理為。（5）請(qǐng)預(yù)期該高效解磷菌在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面可能的應(yīng)用是（答出1點(diǎn)即可）?！敬鸢浮浚?）使土壤中的微生物充分釋放到水中1000（2）合成培養(yǎng)基（NH4）2SO4涂布器（3）a平板劃線獲得單菌落（4）先上升后下降溶磷菌可能通過(guò)產(chǎn)生酸性代謝物分解難溶磷（5）可將其制成微生物菌肥促進(jìn)植物對(duì)磷元素的吸收〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊?lái)源于動(dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。【詳析】（1）土壤中含有多種微生物和有機(jī)質(zhì)，步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無(wú)菌水中；由圖觀察可知，步驟③中的稀釋梯度分別為10、100、1000倍，步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的化學(xué)成分可以把培養(yǎng)基分成合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基等，題干中培養(yǎng)基成分完全清楚，該培養(yǎng)基為合成培養(yǎng)基，其中氮源是（NH4）2SO4，步驟④用涂布器涂布。（3）透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小，該比值越大，溶磷能力越強(qiáng)，故待菌落長(zhǎng)好后挑出溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較大的菌落；題圖可知，應(yīng)該挑選a菌落；步驟⑤是平板劃線操作，該操作的目的是獲得單個(gè)菌落。（4）①據(jù)圖可知，1~4d溶磷量隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增多，在4~8d溶磷量隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸減少，即目的菌分解難溶磷的能力先升高后降低②由圖可知，加入溶磷菌后培養(yǎng)基的pH迅速降低，溶磷量逐漸增多，之后隨著pH回升，溶磷量逐漸減少，據(jù)此推測(cè)溶磷菌可能通過(guò)產(chǎn)生酸性代謝物分解難溶磷。（5）土壤中的磷大部分以難被植物吸收利用的無(wú)效態(tài)存在，而溶磷菌可將難溶態(tài)磷分解為可被植物直接利用的可溶性磷，故可將其制成微生物菌肥促進(jìn)植物對(duì)磷元素的吸收。21．不對(duì)稱體細(xì)胞雜交是指利用射線破壞染色質(zhì)的供體細(xì)胞，與未經(jīng)射線照射的受體細(xì)胞融合，所得融合細(xì)胞含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)?？蒲腥藛T用大劑量的X射線處理擬南芥（2n=10）的原生質(zhì)體，然后誘導(dǎo)其與柴胡（2n=12）的原生質(zhì)體融合，最終獲得不對(duì)稱雜種植株?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）為獲得擬南芥和柴胡的原生質(zhì)體，可將流水沖洗后的外植體用消毒，然后立即用無(wú)菌水沖洗，一般再用氯化汞溶液處理5min后，立即用無(wú)菌水沖洗。消毒后的外植體用小刀切碎，放入含有酶的緩沖液中，以獲得原生質(zhì)體。（2）可采用二乙酸熒光素（FAD）法測(cè)定原生質(zhì)體活力，已知FAD本身無(wú)熒光，當(dāng)其進(jìn)入細(xì)胞后可被酯酶分解為無(wú)毒、具有熒光的物質(zhì)，該熒光物質(zhì)不能透過(guò)細(xì)胞膜，會(huì)留在細(xì)胞內(nèi)發(fā)出熒光。據(jù)此應(yīng)選擇的原生質(zhì)體用于融合。（3）獲得的原生質(zhì)體可使用等化學(xué)方法（寫出一種）誘導(dǎo)融合，融合完成的標(biāo)志是，在雜種細(xì)胞形成雜種植株的過(guò)程中，需要避光培養(yǎng)的是階段，誘導(dǎo)生根的過(guò)程中，細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比值（“=1”、“>1”、“<1”）（4）科研人員對(duì)獲得的部分植株細(xì)胞進(jìn)行染色體觀察、計(jì)數(shù)和DNA分子標(biāo)記鑒定，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表所示：后代植株類型染色體數(shù)目形態(tài)DNA分子標(biāo)記鑒定甲12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段乙12，與柴胡染色體相似無(wú)擬南芥DNA片段丙12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中類型一定不是雜種植株。科研人員推測(cè)雜種植株的染色體主要由柴胡親本來(lái)源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質(zhì)可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細(xì)胞中，而是以DNA片段的方式整合進(jìn)柴胡的基因組，作出以上推測(cè)的依據(jù)是?！敬鸢浮浚?）酒精/75%酒精/70%酒精纖維素酶和果膠酶（2）發(fā)出熒光（3）PEG/高Ca2+-高pH再生出細(xì)胞壁脫分化<1（4）乙甲、丙類型植株細(xì)胞的染色體與柴胡細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段〖祥解〗植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)：首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，在高爾基體的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、再分化生根生芽，最終發(fā)育成完整的植株?！驹斘觥浚?）外植體先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s，無(wú)菌水沖洗后，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液處理30min。消毒后的外植體用小刀切碎，加入含有纖維素酶和果膠酶的酶溶液，水浴加熱一段時(shí)間后，過(guò)濾、離心即可獲得原生質(zhì)體。（2）根據(jù)題干信息可知，綠色熒光的強(qiáng)度與原生質(zhì)體的活力呈正相關(guān)，因此應(yīng)選擇發(fā)熒光的原生質(zhì)體用于融合。（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法。原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是融合細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁。在雜種細(xì)胞形成雜種植株的過(guò)程中，需要避光培養(yǎng)的是再生出細(xì)胞壁脫分化階段，細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比值<1，誘導(dǎo)生根。（4）根據(jù)表格信息可知，植株后代乙無(wú)擬南芥DNA片段，說(shuō)明其不是雜種植株。甲、丙類型植株與柴胡細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段，說(shuō)明甲、丙植株屬于雜種植株，它們的染色體主要由柴胡親本來(lái)源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質(zhì)可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細(xì)胞中，而是以遺傳物質(zhì)重組的方式整合進(jìn)柴胡的基因組。22．牛支原體是嚴(yán)重危害牛養(yǎng)殖業(yè)的一種病原體，它能引起肺炎、關(guān)節(jié)炎等多種疾病。VspX蛋白是牛支原體表面的一種脂蛋白，在牛支原體感染宿主細(xì)胞時(shí)起黏附作用。科研人員制備抗VspX單克隆抗體，進(jìn)行相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）以VspX蛋白為抗原制備單克隆抗體，需用純化的VspX蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行多次免疫，其目的是刺激機(jī)體產(chǎn)生更多的，將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，在HAT培養(yǎng)基上，細(xì)胞不能生長(zhǎng)，從而篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。（2）雜交瘤細(xì)胞（填“能”或“不能”）產(chǎn)生專一抗體，所產(chǎn)生的抗體（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。（3）將上述篩選出的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)、稀釋后接種到96孔培養(yǎng)板中，每一個(gè)孔中盡量只接種個(gè)雜交瘤細(xì)胞以實(shí)現(xiàn)，然后通過(guò)ELISA法（又稱酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法）檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體，可與結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，最終從中獲取大量抗VspX抗體。（4）將抗VspX抗體與不同抗原進(jìn)行雜交，免疫印跡分析如圖所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，表明抗VspX抗體具有?！敬鸢浮浚?）分泌抗VspX抗體的B淋巴細(xì)胞同種細(xì)胞融合的細(xì)胞和未融合的（2）能不一定（3）1克隆化培養(yǎng)VspX蛋白小鼠腹水（4）抗VspX單克隆抗體不能與3、4結(jié)合特異性〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞；第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！驹斘觥浚?）依據(jù)題干信息，制備以VspX蛋白為抗原制備單克隆抗體，首先需要用純化的VspX蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行多次免疫，其目的是為了刺激機(jī)體產(chǎn)生更多的分泌抗VspX抗體的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞），然后利用細(xì)胞融合技術(shù)，將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，在HAT培養(yǎng)基上，淘汰掉同種細(xì)胞融合的細(xì)胞和未融合的B細(xì)胞和瘤細(xì)胞，從而篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。（2）一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，故雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生專一抗體，篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞有多種，不一定能產(chǎn)生抗VspX蛋白的抗體，故雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體不一定能抗VspX蛋白。（3）將篩選出的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)、稀釋后接種到96孔培養(yǎng)板中，每一個(gè)孔中盡量只接種1個(gè)雜交瘤細(xì)胞以實(shí)現(xiàn)克隆化培養(yǎng)，然后通過(guò)ELISA法檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體，可與VspX蛋白結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。然后將抗原-抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞注射小鼠腹腔內(nèi)增殖，最終從小鼠的腹水中獲取抗VspX抗體。（4）據(jù)圖可知，抗VspX抗體不能與3、4結(jié)合，也說(shuō)明了抗VspX抗體具有特異性。23．近年來(lái)，我國(guó)科研工作者在國(guó)際上首次利用體細(xì)胞成功創(chuàng)建克隆獼猴中中、華華和夢(mèng)夢(mèng)。體細(xì)胞克隆猴的誕生，是人類認(rèn)識(shí)克隆技術(shù)，研究細(xì)胞功能和治療性克隆的里程碑式研究結(jié)果。同時(shí)，也是人類干細(xì)胞研究方興未艾事業(yè)的一個(gè)開始?？寺∩鲜霁J猴的操作流程如圖1。與此同時(shí)，我國(guó)科研人員利用大鼠、小鼠兩個(gè)遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異源二倍體胚胎干細(xì)胞（AdESCs），操作流程如圖2。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）利用酶處理一只流產(chǎn)獼猴胎兒的皮膚，獲取分散的成纖維細(xì)胞，制備細(xì)胞懸液。然后放入氣體條件是的恒溫箱中培養(yǎng)。（2）請(qǐng)你推測(cè)圖1中注入的神秘濃度比的藥物的作用是，注入細(xì)胞的方法是。（3）通常情況下，卵母細(xì)胞要發(fā)育到減數(shù)第次分裂中期時(shí)才適合核移植，早期胚胎要發(fā)育到時(shí)才適合進(jìn)行胚胎移植。（4）我們大膽推測(cè)，通過(guò)體細(xì)胞克隆猴的研究，將來(lái)會(huì)找到讓高度分化的人體細(xì)胞逆向生成胚胎干細(xì)胞的方法，進(jìn)而誘導(dǎo)克隆出用于替換人體相應(yīng)病變的結(jié)構(gòu)。（5）圖2過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)和不用大鼠和小鼠直接交配制備異源二倍體胚胎干細(xì)胞的原因是二者之間存在。【答案】（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）95%空氣和5%的CO2（2）激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程顯微注射法（3）二/Ⅱ桑葚胚或囊胚（4）相應(yīng)器官（5）動(dòng)物細(xì)胞融合生殖隔離〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥浚?）用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理組織可分散成單個(gè)細(xì)胞，故利用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理一只流產(chǎn)獼猴胎兒的皮膚，獲取分散的成纖維細(xì)胞，制備細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)箱的氣體條件是95%空氣和5%的CO2。（2）結(jié)合圖可知，注入的神秘濃度比的藥物的作用是激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。圖1中的重組細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，將神秘濃度比的藥物注入細(xì)胞的方法是顯微注射法。（3）卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，細(xì)胞已經(jīng)成熟，具備受精能力，故卵母細(xì)胞要發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)才適合核移植，早期胚胎要發(fā)育到桑葚胚或囊胚時(shí)才適合進(jìn)行胚胎移植。（4）通過(guò)體細(xì)胞克隆猴的研究，我們將來(lái)會(huì)找到方法，讓高度分化的人體細(xì)胞逆向生成胚胎干細(xì)胞，并定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞克隆出相應(yīng)器官用于替換人體相應(yīng)病變結(jié)構(gòu)。（5）圖2過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合（孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞和孤雄單倍體胚胎